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限時練171.絲瓜果肉中鄰苯二酚等酚類物質在多酚氧化酶(PPO)的催化下形成褐色物質,褐色物質在410nm可見光下有較高的吸光值(OD值),且褐色物質越多,OD值越高。已知PPO的最適pH為5.5??茖W家用絲瓜果肉的PPO粗提液、鄰苯二酚、必需的儀器等探究溫度對PPO活性的影響,結果如圖。下列說法錯誤的是(A)A.PPO在35℃和40℃時降低的活化能相同B.測定PPO的最適溫度需要在30~40℃范圍內設置溫度梯度C.應使用pH為5.5的緩沖液分別配制PPO粗提液和鄰苯二酚溶液D.絲瓜果肉PPO粗提液可以在低溫和pH為5.5的條件下保存解析:PPO在溫度為35℃和40℃時酶活性不同,因此,降低的活化能也不同;由于35℃時OD值最高,所以應在30~40℃間設置溫度梯度以更精確測定PPO的最適溫度;由題可知,多酚氧化酶(PPO)的最適pH為5.5,pH為無關變量,在實驗時,應該保持酶在最適pH下反應,因此應使用pH為5.5的緩沖液配制PPO粗提液和鄰苯二酚溶液;酶在高溫下會失活,要保證多酚氧化酶(PPO)的結構不受破壞,需要在低溫下和pH為5.5的條件下保存。2.水稻細胞中的M基因編碼的一種毒性蛋白,對雌配子沒有影響,但會導致同株水稻一定比例的不含該基因的花粉死亡,通過這種方式來改變后代分離比,使M基因有更多的機會遺傳下去?,F(xiàn)讓基因型為Mm的水稻自交,F1中三種基因型個體的比例為MM∶Mm∶mm=3∶4∶1,F1隨機授粉獲得F2。下列有關分析錯誤的是(A)A.F1產生的雌配子與雄配子的比例為3∶1B.由F1的結果推測,親本水稻產生的含m基因的花粉存活的概率為1/3C.該水稻種群的M基因頻率會隨著雜交代數(shù)的增加而增大D.雜交F2中三種基因型的比例為MM∶Mm∶mm=15∶14∶3解析:F1產生的雌配子遠少于雄配子;基因型為Mm的水稻自交,子代中mm=1/8,雌配子正常,說明雌配子中含m基因的概率為1/2,花粉中含m基因的概率為1/4,因此雄配子中M∶m=3∶1,親本水稻產生的含m基因的花粉存活的概率為1/3;由題干可知,M基因編碼的一種毒性蛋白,對雌配子沒有影響,同株水稻一定比例的不含該基因的花粉死亡會改變后代分離比,使M基因有更多的機會遺傳下去;F1中三種基因型個體的比例為MM∶Mm∶mm=3∶4∶1,F1隨機授粉,用配子法計算,基因型MM、Mm、mm都作為母本,則產生的雌配子5/8M、3/8m,基因型MM、Mm、mm都作為父本,Mm產生的含m基因的花粉存活的概率為1/3,則產生的雄配子3/4M、1/4m,雜交子二代中三種基因型的比例為MM∶Mm∶mm=15∶14∶3。3.免疫訓練是指原發(fā)感染或疫苗接種可誘導宿主的固有免疫細胞(參與非特異性免疫的細胞)產生對二次感染的增強抗性,且可為異源感染提供交叉保護。下列說法正確的是(C)A.免疫訓練對特異性免疫沒有影響B(tài).免疫訓練依賴記憶B細胞和記憶T細胞的參與C.注射卡介苗可能會提高機體對流感病毒的免疫能力D.免疫訓練表明非特異性免疫可以轉變?yōu)樘禺愋悦庖呓馕?由題意可知,吞噬細胞能參與免疫訓練,吞噬細胞既參與非特異性免疫,又參與特異性免疫,所以免疫訓練對特異性免疫也有影響;免疫訓練主要增強非特異性免疫,而記憶細胞參與的是特異性免疫;免疫訓練可為異源感染提供交叉保護,所以注射卡介苗可能會提高機體對流感病毒的免疫能力;由題干信息無法得出“免疫訓練表明非特異性免疫可以轉變?yōu)樘禺愋悦庖摺钡慕Y論。4.科學家對一個結構相對簡單的天然湖泊的能量流動進行了一年的定量分析,能量流動過程如圖所示。下列敘述正確的是(A)A.一年中生產者的凋落物有一部分可能屬于未利用的能量B.一年中第二營養(yǎng)級的同化量大部分被自身呼吸作用消耗C.圖中12.6J/(cm2·a)的能量都屬于第三營養(yǎng)級的能量D.因多數(shù)能量未利用,所以無法體現(xiàn)能量流動逐級遞減的特點解析:一年中生產者的凋落物有一部分沒有被利用,可能屬于未利用的能量;一年中第二營養(yǎng)級(植食性動物)的同化量的去向中,未被利用的能量最多;圖中肉食性動物可能包括多個營養(yǎng)級,所以12.6J/(cm2·a)的能量不一定都屬于第三營養(yǎng)級的能量;雖然大多數(shù)能量均未利用,但每一個營養(yǎng)級可利用的能量中總有一部分通過呼吸作用散失,總有一部分流向分解者,剩下的才可能流向下一個營養(yǎng)級(最高營養(yǎng)級除外),故能量逐級遞減。5.環(huán)狀定點誘變技術通過設計特定引物進行PCR,來實現(xiàn)目標載體的單堿基突變,從而生產出滿足需求的質粒載體。質粒pUC18中含有限制酶Eam1105Ⅰ(識別序列為5′GACGGGGAGTC3′)和EcoRⅠ的識別序列。為使質粒pUC18不能被限制酶Eam1105Ⅰ識別,但依然具有氨芐青霉素抗性,現(xiàn)對質粒pUC18第1695個堿基(圖方框中的堿基)進行誘變,設計了具有誘變位點的引物P1和不具有誘變位點的引物P2。具體操作流程如圖所示。(1)為使誘變后的質粒不能被限制酶Eam1105Ⅰ識別,但依然具有氨芐青霉素抗性,選擇質粒突變位點時應注意
。
(2)進行上述PCR反應,緩沖液中需提供pUC18質粒,P1、P2兩種引物以及,同時通過控制溫度使DNA復制在體外反復進行。至少經過個循環(huán),會出現(xiàn)雙鏈均被誘變的線性質粒。擴增得到的線性質粒需在酶的作用下才能連接成環(huán)狀質粒。
(3)提取連接產物(環(huán)化后的質粒),經過EcoRⅠ,Eam1105Ⅰ雙酶切,然后進行電泳,可根據(jù)結果判斷質粒pUC18的第1695個堿基誘變是否成功,判斷的理由是
。
解析:(1)為使誘變后的質粒不能被限制酶Eam1105Ⅰ識別,但依然具有氨芐青霉素抗性,也就是說需要破壞質粒上限制酶Eam1105Ⅰ的識別序列,同時不影響氨芐青霉素抗性基因的正常表達,因此在選擇質粒突變位點時應注意誘變的位點位于限制酶Eam1105Ⅰ識別序列中,誘變后編碼的氨基酸不變或不影響氨芐青霉素抗性基因的正常表達。(2)PCR是一項在生物體外復制特定的DNA片段的核酸合成技術,利用的原理是DNA復制,需要條件有模板DNA(pUC18質粒)、四種脫氧核苷酸、一對引物(P1、P2兩種引物)、TaqDNA聚合酶,同時通過控制溫度使DNA復制在體外反復進行。DNA的復制方式為半保留復制,經過第一次復制,會出現(xiàn)一條鏈被誘變的線性質粒,經過第二次復制,會出現(xiàn)雙鏈均被誘變的線性質粒,因此至少經過2個循環(huán),會出現(xiàn)雙鏈均被誘變的線性質粒。擴增得到的線性質粒為平末端,需要經過T4DNA連接酶的作用才能連接成環(huán)狀質粒。(3)質粒pUC18的第1695個堿基誘變成功,則限制酶Eam1105Ⅰ的識別位點被破壞,經過EcoRⅠ、Eam1105Ⅰ雙酶切,然后進行電泳,電泳圖譜中只有1條條帶;質粒pUC18的第1695個堿基未誘變成功,則限制酶Eam1105Ⅰ的識別位點沒有被破壞,經過EcoR
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