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文檔簡介
黑龍江省綏化市高三第五次模擬考試新高考生物試卷請考生注意:1.請用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應位置上,請用0.5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應的答題區(qū)內。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2.答題前,認真閱讀答題紙上的《注意事項》,按規(guī)定答題。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.下列關于生態(tài)系統(tǒng)自我調節(jié)能力的敘述中,正確的是A.生態(tài)系統(tǒng)內各營養(yǎng)級生物的種類越多,自我調節(jié)能力越弱B.向生態(tài)系統(tǒng)大量引入外來物種,可增加該系統(tǒng)的穩(wěn)定性C.負反饋調節(jié)在生態(tài)系統(tǒng)中最常見,使生態(tài)系統(tǒng)保持穩(wěn)定D.正反饋的結果是加速最初所發(fā)生的變化,使生態(tài)系統(tǒng)保持穩(wěn)定2.材料的選取與處理以及檢測試劑的選用是實驗成功的關鍵性因素。下列敘述中正確的是()A.用黑藻葉片進行探究植物細胞的吸水和失水的實驗時,葉綠體會干擾實驗現象的觀察B.在探究淀粉酶對淀粉和蔗糖的水解作用的實驗中,可選用碘液對實驗結果進行檢測C.在檢測生物組織中的還原糖和檢測生物組織中的蛋白質的實驗中,均要使用CuSO4溶液且作用相同D.在探究酵母細胞呼吸方式的實驗中,可根據溴麝香草酚藍水溶液變黃的時間長短,來檢測CO2的產生情況3.下列有關果酒果醋制作的說法中正確的是()A.在接種酵母菌的新鮮葡萄汁中始終通入無菌空氣制作果酒B.發(fā)酵過程中所有材料都需要進行嚴格的滅菌處理,以免雜菌污染C.將果酒流經發(fā)酵瓶制成果醋,則發(fā)酵瓶中CO2的產生量是幾乎為零D.在用果汁制果酒的過程中,發(fā)酵瓶溶液中pH的變化是先減小后增大4.圖甲表示某動物細胞中一對同源染色體,圖乙表示該卵原細胞形成的卵細胞中的一條染色體,若只考慮圖中字母所表示的基因,下列相關敘述中正確的是()A.該卵原細胞形成的第一極體的基因型為aeDB.復制形成的兩個A基因發(fā)生分離的時期為有絲分裂后期和減數第一次分裂后期C.形成乙的次級卵母細胞中不存在同源染色體,但可能存在等位基因D.甲形成乙的過程中發(fā)生了基因重組和染色體結構變異5.下列關于高等動物和人體生命活動調節(jié)的敘述,錯誤的是()A.甲亢病人體內,促甲狀腺激素釋放激素的含量低于正常值B.神經細胞處于靜息電位時,細胞外K+濃度高于細胞內K+濃度C.注射血漿白蛋白可促進組織液的吸收以減輕病人水腫癥狀D.B淋巴細胞在分化成漿細胞的過程中,細胞內的高爾基體增多6.下列關于生物變異的說法正確是A.基因突變的方向是由生物生存的環(huán)境決定的B.突變基因控制合成的蛋白質中的氨基酸排列順序不一定發(fā)生改變C.一般情況下,根尖細胞能發(fā)生的變異類型有基因重組、基因突變、染色體變異D.觀察細胞有絲分裂中期染色體形態(tài)可判斷基因突變發(fā)生的位置二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)“滔滔”是我國第一例轉入人體白蛋白基因的轉基因試管牛,人們利用該轉基因奶牛的乳汁能生產人類血清白蛋白。(1)試管動物實際上是體外受精與胚胎移植兩項技術的綜合運用。體外受精前需要把奶牛的精子放入__________中,進行__________處理。防止多精入卵的生理反應包括透明帶反應和__________。胚胎工程的終端環(huán)節(jié)是胚胎移植。移植后的胚胎能在受體子宮內存活的生理基礎是____________________。(2)基因工程的核心步驟是__________,一般利用顯微注射技術導入牛的受精卵中,當受精卵分裂到囊胚期時,需要取囊胚的滋養(yǎng)層細胞進行__________鑒定,以確保發(fā)育成熟的牛能分泌乳汁并獲取人類血清白蛋白。(3)為了提高胚胎的利用率,同時獲取更多的人類血清白蛋白,在胚胎移植前可進行__________,操作時應注意將內細胞團均等分割,有利于__________。8.(10分)研究人員將綿羊的啟動子和牛的生長激素基因融合,獲得融合基因OMT-CGH(其中O、C分別表示綿羊和牛,MT表示啟動子,GH表示生長激素基因),并將其轉移至某種牛的體內,從而培育出能快速生長的轉基因牛。請回答下列問題:(1)在生長激素基因與啟動子融合的過程中,需要用到的工具酶有____________。(2)目前,將OMT-CGH基因導入受體細胞的方法有____________和精子載體法等,其中后者的做法是向去精漿的精液中加入適量OMT-CGH基因,精子主動吸收外源基因后,再與成熟卵子進行體外受精,獲得受精卵。由此可見,與前者相比,該方法對受精卵內細胞核的影響____________(填大或?。碛墒莀_______________________________________________。(3)早期胚胎在培養(yǎng)時除了必需的營養(yǎng)物質外,還需要的氣體環(huán)境是____________,在培養(yǎng)過程中,應及時更換培養(yǎng)液,目的是________________________________________________。(4)常采用PCR技術檢測早期胚胎是否含有OMT-CGH基因,該技術使用的前提是要根據____________(填OMT、CGH或OMT-CGH)的基因序列設計合成引物。9.(10分)Rag2基因缺失小鼠不能產生成熟的淋巴細胞??蒲腥藛T利用胚眙干細胞(ES細胞)對Rag2基因缺失小鼠進行基因治療,其技術流程如圖(圖中數字序號表示的是相關過程)。請回答:(1)過程①將進行培養(yǎng)的上皮細胞注入去核的卵母細胞中,接受細胞核的卵母細胞應處于__________________時期。(2)過程②利用的技術是____________________,當重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時,可從其_________分離出ES細胞。(3)過程③中獲取的目的基因是____________________,若要將目的基因導入受體細胞,需要構建_______________________,構建之前可以根據_______________________設計引物,利用PCR技術對目的基因進行擴增。為了檢測ES細胞的DNA上是否插入了干擾素基因,可采用______________技術。(4)按此方法和圖示技術流程,完成Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的酶有___________和耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)等。通測Rag2基因的表達情況,可提取治療后小鼠骨髓細胞的蛋白質,用__________________進行雜交實驗。10.(10分)2019年底爆發(fā)的新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)是由SARS-CoV-2病毒引起的,能否快速、準確地檢測出病原體成為疾病防控的關鍵。請回答:(1)下圖表示SARS-CoV-2病毒檢測的部分流程。科學家以病毒的RNA為模板通過①____________過程合成cDNA,再對cDNA進行PCR擴增,這項技術稱為RT-PCR。(2)進行RT-PCR需要加入的酶是____________和___________。要從cDNA中擴增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核殼蛋白基因N關鍵在于要加入__________、dNTP及所需的酶一起構成反應體系。(3)RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過測定熒光強度來檢測產物濃度,原理如下:Taqman熒光探針為一段與_____________互補的核苷酸單鏈,兩端分別連接一個熒光基團R和一個淬滅基團Q。探針結構完整時,R發(fā)射的熒光被Q吸收;而PCR擴增時結合在模板鏈上的探針被切斷,使R和Q分離,R基團發(fā)射的熒光不被淬滅,這樣通過對熒光信號強弱的監(jiān)測就可實現對產物的檢測。熒光信號達到設定的閾值時,經歷的循環(huán)數越少,說明含有病毒的概率越____________。(4)一次核酸檢測歷時需16小時,為快速檢測可采用抗原-抗體雜交技術,這一技術的關鍵是要生產出能與新冠病毒結合的特異性抗體.請寫出生產這種抗體的思路:__________________。11.(15分)果蠅的灰體/黑檀體、長翅/殘翅為兩對相對性狀。某小組用一對灰體長翅果蠅雜交,雜交子代中灰體長翅:灰體殘翅:黑檀體長翅:黑檀體殘翅=9:3:3:1。回答下列問題:(1)雜交子代中灰體長翅:灰體殘翅:黑檀體長翅:黑檀體殘翅=9:3:3:1,出現上述結果的條件是:灰體和黑檀體受一對等位基因控制,灰體對黑檀體為顯性,遵循分離定律;__________________;__________(注:受精時雌雄配子相結合機會相等,各受精卵都能正常生長發(fā)育且存活力相同,各對等位基因不存在基因間的相互作用。)(2)果蠅通??砂l(fā)生兩種類型的基因重組,一種類型的基因重組可導致出現上述雜交結果。試寫出另一種類型的基因重組的名稱及發(fā)生時期。_____________________。(3)若已知控制長翅/殘翅性狀的基因位于常染色體上,用上述雜交子代中殘翅果蠅與自然捕獲的多只長翅果蠅進行雜交,請預測雜交結果:__________________________。(4)科學家研究發(fā)現,果蠅品種甲(純系)的顯性抗病基因R位于Ⅰ號染色體上,品種乙(純系)的顯性抗病基因Q也位于Ⅰ號染色體上,且品種甲和品種乙都只有一種顯性抗病基因。為了探究R與Q是不是相同基因,科研人員做了以下實驗:將品種甲與品種乙雜交得到F1,F1均為抗病,F1自由交配,F2出現感病個體。根據該實驗結果,得到的實驗結論是______。推測F2出現感病個體的原因是______________。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、C【解析】
生態(tài)系統(tǒng)具有一定的自我調節(jié)能力,而這種能力受生態(tài)系統(tǒng)中生物的種類和數量所限制,生態(tài)系統(tǒng)中的組成成分越多,營養(yǎng)結構就越復雜,生態(tài)系統(tǒng)的自動調節(jié)能力就越強,其抵抗力穩(wěn)定性就越強,相反的其恢復力穩(wěn)定性就越弱?!驹斀狻緼、生態(tài)系統(tǒng)內各營養(yǎng)級生物的種類越多,自我調節(jié)能力越強,A錯誤;B、外來物種的引入不一定能提高生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)態(tài),如部分外來物種會破壞當地的生態(tài)系統(tǒng),B錯誤。C、生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的維持是依賴負反饋作用,C正確;D、正反饋的結果加速最初發(fā)生的變化,常使生態(tài)系統(tǒng)遠離穩(wěn)態(tài),D錯誤。故選C?!军c睛】本題考查生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的相關知識,理解正反饋和負反饋的含義和帶來的結果。2、D【解析】
本題考查高中生物課本上的基礎實驗,包括探究植物細胞的吸水和失水實驗、探究淀粉酶對淀粉和蔗糖的水解作用的實驗、檢測生物組織中的還原糖和蛋白質的實驗、探究酵母細胞的呼吸方式實驗,回憶這些實驗的選材、處理、試劑的選擇、實驗結果與結論等,據此答題?!驹斀狻緼、在運用黑藻葉片探究植物細胞的吸水和失水的實驗中,葉綠體的存在使原生質層呈現綠色,可以通過綠色部分(即原生質層)的變化觀察質壁分離或質壁分離復原現象,因此葉綠體的存在有利于實驗現象的觀察,A錯誤;B、在探究淀粉酶對淀粉和蔗糖的水解作用的實驗中,蔗糖不管是否發(fā)生水解都不能使碘液變藍,因此不可選用碘液對實驗結果進行檢測,而應該選用斐林試劑進行檢測,B錯誤;C、在檢測生物組織中的還原糖和檢測生物組織中的蛋白質的實驗中,均要使用CuSO4溶液,但作用不相同,前者CuSO4與NaOH反應生成Cu(OH)2,Cu(OH)2可與還原糖發(fā)生氧化還原反應,生成磚紅色沉淀,而后者Cu2+在堿性條件下與蛋白質結合形成紫紅色絡合物,C錯誤;D、在探究酵母菌細胞呼吸方式的實驗中,有氧條件下酵母菌產生CO2的速率較快,溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃所需時間短,無氧條件下產生CO2的速率較慢,溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃所需時間長,因此可根據溴麝香草酚藍水溶液變黃的時間長短,來檢測CO2的產生情況,D正確。故選D。3、C【解析】
1、參與果酒制作的微生物是酵母菌,其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理:(1)在有氧條件下,反應式如下:C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量;(2)在無氧條件下,反應式如下:C6H12O62C2H5OH+2CO2+少量能量。2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌,其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型.果醋制作的原理:當氧氣、糖源都充足時,醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸;當缺少糖源時,醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?,再將乙醛變?yōu)榇姿帷!驹斀狻緼、在接種酵母菌的新鮮葡萄汁中需要利用酵母菌的無氧呼吸產生酒精來制作果酒,A錯誤;B、酵母菌發(fā)酵過程中產生的酸性和缺氧的環(huán)境不利于其他微生物的生長,因此不需要將所有的材料進行嚴格的滅菌處理,B錯誤;C、果醋生產是利用(醋化)醋桿菌的需氧發(fā)酵,將酒精氧化為乙酸,此過程中無CO2生成,C正確;D、在用果汁制果酒的過程中,酵母菌除了產生酒精,還會產生二氧化碳,二氧化碳會與水反應生成弱酸,因此發(fā)酵瓶溶液中pH減小,D錯誤。故選C。4、C【解析】
據圖甲可知,兩條染色體為同源染色體,其上有三對等位基因;圖乙為卵細胞中的一條染色體,圖中的D基因變成了d基因,根據染色體的形態(tài),可判斷變異是由于非姐妹染色單體間發(fā)生交叉互換造成的?!驹斀狻緼、由于發(fā)生了交叉互換,所以該卵原細胞形成的第一極體的基因型(基因組成)為Ddeeaa,A錯誤;B、復制形成的兩個A基因發(fā)生分離的時期為有絲分裂后期和減數第二次分裂后期,B錯誤;C、圖乙中的卵細胞在形成過程中發(fā)生了交叉互換,故經減數第一次分裂后形成的乙的次級卵母細胞中不存在同源染色體,但可能存在等位基因,C正確;
D、甲形成乙的過程中只發(fā)生了基因重組(交叉互換),D錯誤。故選C。【點睛】本題考查了生物變異的類型和原因,解答此題需把握題干中兩條染色體顏色的不同,并掌握基因的關系,進而分析作答。5、B【解析】
1、甲狀腺功能亢進癥簡稱“甲亢”,是由于甲狀腺合成釋放過多的甲狀腺激素,造成機體代謝亢進和交感神經興奮,引起心悸、出汗、進食增多和體重減少的病癥。2、鉀離子主要維持細胞內液滲透壓,鈉離子主要維持細胞外液滲透壓。【詳解】A、甲亢病人體內甲狀腺激素含量高于正常人,通過負反饋調節(jié)可抑制體內促甲狀腺激素釋放激素和促甲狀腺激素的分泌,所以甲亢病人體內,促甲狀腺激素釋放激素的含量低于正常值,A正確;B、鉀離子主要維持細胞內液滲透壓,神經細胞處于靜息電位時,細胞外K+濃度低于細胞內K+濃度,B錯誤;C、注射血漿白蛋白會提高血漿滲透壓,促進組織液的吸收以減輕病人水腫癥狀,C正確;D、B淋巴細胞在分化成漿細胞的過程中,細胞內的高爾基體增多,以利于抗體的加工和分泌,D正確。故選B。【點睛】本題綜合考查內環(huán)境的理化性質、神經調節(jié)、激素調節(jié)等知識,要求考生掌握內環(huán)境的理化性質,識記神經調節(jié)、體溫調節(jié)的具體過程,再結合所學的知識準確判斷各選項,屬于考綱識記層次的考查。6、B【解析】
可遺傳變異包括基因突變、基因重組和染色體變異,染色體變異包括染色體結構改變和染色體數目改變,染色體結構改變包括染色體片段的缺失、重復、易位和倒位;染色體變異改變基因的位置、數目和排列順序,對生物性狀的影響較大,用光學顯微鏡可以觀察;基因突變能產生新基因,不改變基因的數目、排列順序。【詳解】基因突變的方向具有不定向性,不由環(huán)境決定的,但可以受環(huán)境影響,A錯誤;由于密碼子的簡并性,突變基因翻譯出的蛋白質中的氨基酸排列順序不一定發(fā)生改變,B正確;一般情況下,根尖細胞是體細胞,能發(fā)生的變異類型有基因突變、染色體變異,不會發(fā)生基因重組,基因重組發(fā)生在配子的形成過程中,C錯誤;基因突變屬于分子水平上點的突變,無法通過顯微鏡觀察,D錯誤;故選B。二、綜合題:本大題共4小題7、獲能液(或一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液)獲能卵黃膜封閉作用受體對移入子宮的外來胚胎(基本上)不發(fā)生免疫排斥反應基因表達載體的構建性別鑒定胚胎分割分割后胚胎的恢復和進一步的發(fā)育【解析】
1.試管動物技術是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后,再經移植后產生后代的技術,可見試管嬰兒技術主要包括體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術。2.胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎,或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內,使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術,這是胚胎工程的最后一道工序,胚胎分割時,應選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚,對囊胚階段的胚胎進行分割時要注意將內細胞團均等分割,否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發(fā)育。【詳解】(1)體外受精前,需要對精子進行獲能處理,具體做法是把奶牛的精子放入獲能液(或一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液)中培養(yǎng),進行獲能處理。透明帶反應和卵黃膜封閉作用是防止多精入卵的兩道屏障。胚胎移植是胚胎工程的最后一道工序,受體對移入子宮的外來胚胎(基本上)不發(fā)生免疫排斥反應,這是移植后的胚胎能在受體子宮內存活的生理基礎。(2)基因表達載體的構建是基因工程的核心步驟,一般利用顯微注射技術將目的基因表達載體導入牛的受精卵中,當受精卵分裂到囊胚期時,取囊胚的滋養(yǎng)層細胞進行性別鑒定鑒定,確保發(fā)育成熟的牛能分泌乳汁并獲取人類血清白蛋白。(3)為了提高胚胎的利用率,同時獲取更多的人類血清白蛋白,可以采用胚胎分割移植技術,具體做法是在胚胎移植前可進行胚胎分割,為保證分割后胚胎的恢復和進一步的發(fā)育,應注意將內細胞團進行均等分割,從而達到提高胚胎利用率的目的?!军c睛】熟知試管動物激素的操作流程是解答本題的關鍵!基因工程的操作要點也是本題考查的內容,關注各項操作細節(jié)是解答這類題目的關鍵!8、DNA連接酶(或限制性核酸內切酶、DNA連接酶)顯微注射法小目的基因由精子細胞核攜帶通過受精作用進入細胞核,避免顯微注射對細胞核等結構造成損傷95%的空氣和5%的CO2防止代謝產物的積累對細胞自身造成危害OMT-CGH【解析】
基因工程是在分子水平上對基因進行操作的復雜技術,是將外源基因通過體外重組后導入受體細胞內,使這個基因能在受體細胞內復制、轉錄、翻譯表達的操作?;蚬こ趟牟襟E包括:目的基因的獲取、基因表達載體的構建、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與表達。【詳解】(1)在生長激素基因與啟動子融合的過程中,需要用到的工具酶是DNA連接酶。(2)目前,將OMT-CGH基因導入牛體內的方法有顯微注射法和精子載體法等;精子載體法對受精卵內細胞核的影響更??;精子載體法不需要借助人工顯微操作,直接向去精漿的精液中加入適量OMT-CGH基因,精子主動吸收外源目的基因后,再與成熟卵子進行體外受精,獲得受精卵,此方法能避免顯微注射對細胞核等結構造成損傷;(3)早期胚胎在培養(yǎng)時除了必需的營養(yǎng)物質外,還需要95%的空氣和5%的CO2的氣體環(huán)境;為防止代謝產物對細胞造成危害,需要定期更換培養(yǎng)液;(4)PCR技術可確定早期胚胎是否含有OMT-CGH基因,該技術使用的前提是要根據OMT-CGH的基因序列設計合成引物。【點睛】本題以轉基因牛為情境,重點考查基因工程的工具酶、基因工程的操作程序及動物早期胚胎培養(yǎng)的條件等知識。要求學生理解基因工程中動物細胞培養(yǎng)的相關細節(jié)和操作目的,再結合題干信息回答問題。9、MⅡ中早期胚胎培養(yǎng)內細胞團(正常的)Rag2基因含(正常的)Rag2基因的基因表達載體(正常的)Rag2基因的脫氧核苷酸序列(或堿基對序列或遺傳信息)DNA分子雜交限制性核酸內切酶、DNA連接酶和胰蛋白酶抗Rag2蛋白的抗體【解析】
題圖分析:圖示是利用胚胎干細胞(ES細胞)對Rag2基因缺失小鼠進行基因治療的過程圖解,其中①表示核移植過程,②表示早期胚胎培養(yǎng)過程,③表示采用基因工程技術將目的基因導入受體細胞。然后將改造后的受體細胞經過培養(yǎng)之后回輸到基因缺陷小鼠體內獲得治療?!驹斀狻浚?)MII中期的卵母細胞含有細胞核全能性表達的物質和環(huán)境條件,故接受細胞核的卵母細胞應處于MII中期,即過程①將進行培養(yǎng)的上皮細胞注入去核的處于MII中期的卵母細胞中。(2)過程②利用的技術是早期胚胎培養(yǎng),內細胞團將來發(fā)育成胚胎的各種組織,滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤,故當重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時,可從其內細胞團分離出具有全能性的ES細胞。(3)根據題干信息可知,過程③中獲取的目的基因是(正常的)Rag2基因,若要將目的基因導入受體細胞,需要構建含(正常的)Rag2基因的基因表達載體,構建之前可以根據Rag2基因的脫氧核苷酸序列(或堿基對序列或遺傳信息)設計引物,利用PCR技術對目的基因進行擴增。將目的基因導入ES細胞最有效的方法是顯微注射法,為了檢測ES細胞的DNA上是否插入了干擾素基因,可采用DNA分子雜交技術。(4)按此方法和圖示技術流程,完成Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的技術包括基因工程、PCR技術、動物細胞培養(yǎng)技術,其中基因工程涉及的酶有限制性核酸內切酶、DNA連接酶,動物細胞培養(yǎng)技術涉及的酶有胰蛋白酶,PCR技術涉及的酶有耐高溫DNA聚合酶(Taq酶)等。檢測Rag2基因的表達情況,可采用抗原一抗體雜交法,即提取治療后小鼠骨髓細胞的蛋白質,用抗Rag2蛋白的抗體進行雜交實驗?!军c睛】熟知圖中個步驟的含義以及操作流程是解答本題的關鍵!掌握關于基因治療的各個環(huán)節(jié)的基礎知識是解答本題的另一關鍵!10、逆轉錄(或:反轉錄)逆轉錄酶Taq酶(ORF1ab和核殼蛋自基因N)的特異性引物目的基因大①向小鼠體內注射新冠病毒的抗原蛋白(或滅活的新冠病毒):②提取免疫小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,經多次篩選獲得能產生特異性抗體的雜交瘤細胞;③將雜交瘤細胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內增殖,從培養(yǎng)液或小鼠腹水中就提取大量的單克隆抗體【解析】
1.將標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后,完成高溫變性、低溫復性、適溫延伸的熱循環(huán),并遵守聚合酶鏈式反應規(guī)律,與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷,熒光素游離于反應體系中,在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光,隨著循環(huán)次數的增加,被擴增的目的基因片段呈指數規(guī)律增長,通過實時檢測與之對應的隨擴增而變化熒光信號強度,求得Ct值,同時利用數個已知模板濃度的標準品作對照,即可得出待測標本目的基因的拷貝數。2.單克隆抗體是由單一B細胞克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原的抗體。通常采用單克隆抗體技術來制備,單克隆抗體技術是在細胞融合技術的基礎上,將具有分泌特異性抗體能力的效應B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為雜交瘤細胞,雜交瘤細胞既能產生抗體,又能無限增殖。用具備這種特性的單個雜交瘤細胞培養(yǎng)成細胞群,可制備針對一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體。【詳解】(1)以RNA為模板合成DNA的過程為逆轉錄或反轉錄,故題圖中以病毒的RNA為模板合成cDNA的過程為①逆轉錄,再對cDNA進行PCR擴增,這項技術稱為RT-PCR。(2)RT-PCR是擴增DNA的過程,因為加入的模板是RNA,故需要加入的酶是逆轉錄酶和Taq酶。要從cDNA中擴增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核殼蛋白基因N關鍵在于要加入(ORF1ab和核殼蛋自基因N)的特異性引物、dNTP及所需的酶一起構成反應體系,從而實現了相關基因的擴增。(3)RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過測定熒光強度來檢測產物濃度,原理如下:Taqman熒光探針為一段與目的基因互補的核苷酸單鏈,兩端分別連接一個熒光基團R和一個淬滅基團Q。探針結構完整時,R發(fā)射的熒光被Q吸收;而PCR擴增時結合在模板鏈上的探針被切斷,使R和Q分離,R基團發(fā)射的熒光不被淬滅,這樣通過對熒光信號強弱的監(jiān)測就可實現對產物的檢測。若熒光信號達到設定的閾值時,經歷的循環(huán)數越少,說明擴增次數少,說明更多的熒光探針與目的基因進行了堿基互補配對,可推測獲得的核酸產物中含有病毒的概率越大。(4)若采用抗原-抗體雜交技術進行病毒檢測,需要制備能與新冠病毒結合的特異性抗體,單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高且能夠大量制備的優(yōu)勢,故設計的思路是設法獲得能產生該特異性抗體的雜交瘤細胞,步驟如下:①向小鼠體內注射新冠病毒的抗原蛋白(或滅活的新冠病毒),目的是要獲得能能產生特異性抗體的效應B細胞;②提取免疫小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,經多次篩選獲得能產生特異性抗體的雜交瘤細胞;③將雜交瘤細胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內增殖,從培養(yǎng)液或小鼠腹水中可以提取大量的單克隆
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