細(xì)胞臨床治療技術(shù)李彥柏

細(xì)胞臨床治療技術(shù)及產(chǎn)業(yè)化（技術(shù)部分）KevinLI(李永忠)博士2023-項(xiàng)目技術(shù)摘要項(xiàng)目專注于推廣和應(yīng)用在美國NeoStem公司技術(shù)基礎(chǔ)上自主創(chuàng)新的現(xiàn)代自體干細(xì)胞和T細(xì)胞臨床治療疑難疾病的新技術(shù)以最終應(yīng)用于相關(guān)臨床治療。美國NeoStem公司是全世界著名的干細(xì)胞研發(fā)機(jī)構(gòu)，第一個(gè)以干細(xì)胞技術(shù)為主業(yè)在美國創(chuàng)業(yè)板上市的干細(xì)胞生物技術(shù)公司，2023年起共投資上千萬美元在中國北京、天津、青島、濟(jì)南等地建立實(shí)驗(yàn)室或者合作項(xiàng)目進(jìn)行干細(xì)胞技術(shù)的臨床研究，本項(xiàng)目創(chuàng)辦人KEVINLI（李永忠）博士被派到中國任首席科學(xué)家。李博士根據(jù)中國臨床的具體情況，發(fā)明了符合中國的自體骨髓細(xì)胞臨床治療各種骨傷疾病技術(shù)，并通過近4年的臨床研究，得到了預(yù)期的臨床效果。本項(xiàng)目的關(guān)鍵技術(shù)目前涉及“AMOT”和“AMST”以及“DC-CIK生物細(xì)胞免疫抗癌”技術(shù)。1、AMOT技術(shù)重要用于臨床治療股骨頭壞死、各種骨性關(guān)節(jié)炎、骨不連和半月板損傷等骨傷疾病。該技術(shù)是李永忠博士集現(xiàn)代細(xì)胞治療技術(shù)，在美國NeoStem技術(shù)基礎(chǔ)上，結(jié)合中國臨床治療實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)而開發(fā)的技術(shù)，在中國已經(jīng)研究實(shí)行了4年，進(jìn)行了200多例患者參與的臨床實(shí)驗(yàn)，解決了目前臨床無法或難以解決的問題。相關(guān)技術(shù)還獲得了2023年山東省科技進(jìn)步三等獎。和國內(nèi)類似技術(shù)比較，具有無倫理問題，技術(shù)成熟，安全性可靠，療效顯著等特性。AMOT同類技術(shù)在美國進(jìn)行了七年2023例以上的臨床實(shí)驗(yàn)研究，取得了抱負(fù)的治療效果。2、AMST技術(shù)從美國授權(quán)引進(jìn)，是美國國防部的立項(xiàng)資助的科研題目。對于治療糖尿病足、燒傷、以及其它難以愈合的皮膚外傷，具有療效好、見效快、疤痕小、操作簡便、無免疫排異等諸多優(yōu)勢，是AMOT技術(shù)進(jìn)一步發(fā)展應(yīng)用到皮膚損傷疾病治療技術(shù)。2023年該項(xiàng)目獲得美國陸軍總部70萬美金的資助。該技術(shù)同樣取材于MSCs，使用自體培養(yǎng)基減少了免疫排斥的風(fēng)險(xiǎn)，在細(xì)胞制備和治療方法的專利操作技術(shù)下通過嚴(yán)格的質(zhì)量控制可以實(shí)現(xiàn)良好的安全保障。結(jié)合纖維蛋白密封劑或噴霧，使該技術(shù)治療操作簡便，特別針對慢性皮膚潰瘍和久治不愈的皮膚創(chuàng)傷有十分滿意的療效。3、“DC-CIK生物細(xì)胞免疫抗癌技術(shù)”原理的發(fā)明者2023年獲得了諾貝爾獎。該技術(shù)是用“人體自身的免疫細(xì)胞殺死腫瘤細(xì)胞”的原理來治療腫瘤，同時(shí)可以大大增強(qiáng)人體的免疫功能，克制腫瘤細(xì)胞生長。適合早、中、晚各個(gè)時(shí)期，對初期術(shù)后聯(lián)合DC-CIK治療不僅能有效清除術(shù)后殘余腫瘤細(xì)胞，還能提高機(jī)體免疫力，防止轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)。對于中、晚期腫瘤患者，不僅可以減毒增效，精確殺滅腫瘤細(xì)胞，控制腫瘤增長，還能為患者減輕疼痛，使患者免受放、化療的痛苦及毒副作用。4、自體干細(xì)胞存儲項(xiàng)目（自體干細(xì)胞庫）成人間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）是目前干細(xì)胞治療技術(shù)中應(yīng)用最多的一類干細(xì)胞，對提高成人多種慢性病的治療效果提供了廣闊的應(yīng)用前景。目前國內(nèi)干細(xì)胞存儲業(yè)務(wù)大多數(shù)是針對新生兒臍帶干細(xì)胞的儲存，本項(xiàng)目的干細(xì)胞存儲庫將采用來自美國的安全高效干細(xì)胞存儲系統(tǒng)，結(jié)合先進(jìn)的檢測技術(shù)和保存系統(tǒng)，著重收集成體間充質(zhì)干細(xì)胞，成為國內(nèi)目前為數(shù)甚少的專門針對成體干細(xì)胞收集和儲存的服務(wù)提供鏈。通過自體干細(xì)胞庫，為我們?nèi)珖暮献麽t(yī)院網(wǎng)絡(luò)提供自體干細(xì)胞儲存服務(wù)。同時(shí)通過建立廣泛的研究合作，推動與再生醫(yī)學(xué)相關(guān)技術(shù)的學(xué)術(shù)研究，干細(xì)胞存儲領(lǐng)域的技術(shù)換代和產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)，以及技術(shù)的臨床開發(fā)和應(yīng)用，并開展干細(xì)胞新技術(shù)的研發(fā)與銷售。項(xiàng)目背景與重要意義21世紀(jì)被稱為生命科學(xué)和生物技術(shù)的時(shí)代，干細(xì)胞技術(shù)的蓬勃發(fā)展已成為這個(gè)時(shí)代的顯著標(biāo)志。干細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)和技術(shù)的發(fā)展為人類疾病的治療和生存質(zhì)量的改善及延長壽命提供了獨(dú)特的視角、方法和手段。干細(xì)胞在生命科學(xué)的廣泛領(lǐng)域中正在發(fā)揮巨大的主力軍作用。其應(yīng)用技術(shù)和產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，對全人類的進(jìn)步和幸福具有極其重要的意義。近幾年來，干細(xì)胞技術(shù)和產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅猛，醫(yī)療應(yīng)用領(lǐng)域擴(kuò)展不久，相對成熟的干細(xì)胞技術(shù)迅速被醫(yī)療機(jī)構(gòu)關(guān)注和接受。僅以骨傷科應(yīng)用為例,WHO的登記表白，全世界大約有3.5億人患有各種骨關(guān)節(jié)疾病，亞洲地區(qū)平均每10人中就有一人患病。WHO預(yù)計(jì)到2025年，全球?qū)⒂?億人患有骨性關(guān)節(jié)炎，僅次于心血管有關(guān)的疾病。我國人群中膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的患病率達(dá)9.56%，達(dá)1.5億。40歲以后隨著年齡的增長患病率明顯增高，55歲以上者達(dá)60%，60歲以上者達(dá)78.5%。我國每年新增股骨頭壞死病例15-20萬人，累計(jì)有500到750萬患者需要治療。本項(xiàng)目中技術(shù)之一是運(yùn)用自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行臨床骨傷疾病的治療。本項(xiàng)目的另一個(gè)重要技術(shù)是運(yùn)用CD-CIK細(xì)胞免疫治療腫瘤疾病。癌癥是嚴(yán)重威脅人類生命的重大疾病，已成為人類死亡的重要因素。2023年全球死于癌癥人數(shù)超過七百多萬，預(yù)計(jì)2023年這個(gè)數(shù)字將超過千萬。2023-2023年中國第三次全死因調(diào)查顯示，我國城鄉(xiāng)居民癌癥死亡率為135.88/10萬，與其他國家相比，處在較高水平，并且仍呈連續(xù)增長趨勢。目前腫瘤生物治療已成為公認(rèn)的腫瘤治療第四大模式。運(yùn)用最前沿的高科技手段，有效激活身體對抗腫瘤的特異性免疫機(jī)制并制備出足量的免疫細(xì)胞，從癌癥發(fā)病的主線因素入手，有效地殺滅體內(nèi)的癌細(xì)胞，防止癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散，提高癌癥患者的生存時(shí)間，已經(jīng)成為科學(xué)家治療癌癥的方向。此外，預(yù)計(jì)到2050年，我國老年人口總數(shù)將超過4億，老齡化水平將從現(xiàn)在的12.6%增長到30%以上。老齡化后缺少器官移植來源，并且隨著再生醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，自身的健康意識有所提高，對細(xì)胞治療及自體細(xì)胞存儲的認(rèn)知也會更加提高，隨著這一人群進(jìn)入老齡化，再生醫(yī)學(xué)的市場規(guī)模將相應(yīng)成倍擴(kuò)增。為了自己的健康和長壽，儲存自己年輕時(shí)候的細(xì)胞將成為唯一經(jīng)濟(jì)、安全的長遠(yuǎn)計(jì)劃。從國際發(fā)展現(xiàn)狀看，美國是當(dāng)前干細(xì)胞研究發(fā)展最為活躍和前沿的國家，已經(jīng)進(jìn)行了2100個(gè)干細(xì)胞治療的臨床實(shí)驗(yàn)，1500個(gè)干細(xì)胞移植,涉及OsirisTherapeutics的成體干細(xì)胞產(chǎn)品Prochymal。但是美國目前也只有兩種整形外科干細(xì)胞產(chǎn)品上市，一是ACESurgicalSupply的Osteocel和ORTHOFIX的Trinity。然而有數(shù)據(jù)顯示其市場潛力巨大，日前美國加州杰龍生物醫(yī)藥公司(Geron)、制藥業(yè)巨頭輝瑞公司(Pfizer)等已宣布會加大干細(xì)胞產(chǎn)品投入，加快產(chǎn)品市場化。而其他歐美國家如英國，干細(xì)胞市場發(fā)展雖然不及美國，但在全球來講也屬發(fā)展前列的國家。日本、韓國等亞洲發(fā)達(dá)國家在干細(xì)胞產(chǎn)品市場化方面也在不斷加大研究投入力度，希望在干細(xì)胞市場占得先機(jī)。日本早在2023年5月，啟動的“千年世紀(jì)工程”中把以干細(xì)胞工程為核心技術(shù)的再生醫(yī)療作為四大重點(diǎn)之一。并且在第一年度的投資金額即達(dá)108億日元，之后不斷加大研發(fā)、應(yīng)用投入，迄今為止日本在干細(xì)胞領(lǐng)域也取得了不錯(cuò)成績。而韓國也加緊在干細(xì)胞領(lǐng)域的爭奪，根據(jù)最新報(bào)道，韓國政府為實(shí)現(xiàn)2023年前成為干細(xì)胞領(lǐng)域世界五強(qiáng)之一的目的，決定將全年干細(xì)胞研究與開發(fā)（R&D）投資費(fèi)用增至當(dāng)前3倍的1200億韓元?？傮w來講，中國干細(xì)胞發(fā)展研究態(tài)勢比較樂觀，中國把干細(xì)胞和細(xì)胞治療研究列入了國家863和973計(jì)劃。目前國內(nèi)多家專業(yè)化的干細(xì)胞公司相繼成立。涉及協(xié)和干細(xì)胞基因工程有限公司、北京科宇聯(lián)合干細(xì)胞生物技術(shù)有限公司、賽業(yè)（廣州）生物科技有限公司和杭州百通生物技術(shù)有限公司等專門從事干細(xì)胞產(chǎn)品的開發(fā)和銷售。2023年11月，深圳北科生物科技有限公司與日本橫濱Biomaster公司就其技術(shù)投資達(dá)成協(xié)議。世界最先進(jìn)的干細(xì)胞公司美國NeoStem于2023年也開始進(jìn)入中國，對自體骨髓間充質(zhì)細(xì)胞治療骨傷疾病技術(shù)進(jìn)行獨(dú)立的臨床研發(fā)。然而在干細(xì)胞治療市場方面雖然國內(nèi)已有不少單位初步嘗試使用干細(xì)胞治療，并有部分病例取得非常良好的效果，但由于市場尚未成熟，也未得到國家的正式審批，同時(shí)缺少產(chǎn)業(yè)化的產(chǎn)品。因此，大規(guī)模市場化，暫時(shí)還較困難。同時(shí)由于前幾年中國干細(xì)胞領(lǐng)域缺少相應(yīng)的政策規(guī)定，使得國內(nèi)灰色地帶的“干細(xì)胞治療”市場得到一定的發(fā)展機(jī)會，截至2023年2月，總計(jì)進(jìn)行了5087例治療。隨著國家《醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理辦法》在2023年的出臺，國內(nèi)干細(xì)胞治療市場會越來越規(guī)范，產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程會進(jìn)一步加快。國家在此項(xiàng)規(guī)定中，將自體干細(xì)胞治療和免疫細(xì)胞治療技術(shù)劃定為第三類臨床技術(shù)進(jìn)行研發(fā)，并且成為國家的863和973的科技研究項(xiàng)目。2023底，國務(wù)院在《生物產(chǎn)業(yè)發(fā)展”十二五“規(guī)劃》中將細(xì)胞治療技術(shù)作為大力發(fā)展和產(chǎn)業(yè)化的技術(shù)之一，其發(fā)展目的為到2023年在全球產(chǎn)業(yè)競爭格局中占據(jù)有利位置，到2023年，生物產(chǎn)業(yè)發(fā)展成為國民經(jīng)濟(jì)的支柱產(chǎn)業(yè)。科技部也在《國家中長期科學(xué)和技術(shù)發(fā)展規(guī)劃綱要》中將干細(xì)胞研究列為6個(gè)國家重大科學(xué)研究計(jì)劃“十二五”專項(xiàng)規(guī)劃之一，為這一行業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。項(xiàng)目的技術(shù)背景和研究特點(diǎn)自體骨髓細(xì)胞治療骨傷和皮膚損傷技術(shù)作為干細(xì)胞家族的重要成員，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）的研究歷來受到重視，也是目前臨床研究中運(yùn)用最多、了解最深的成體干細(xì)胞（見圖）。間充質(zhì)干細(xì)胞是中胚層來源的具有多向分化能力的干細(xì)胞，重要存在于全身結(jié)締組織和器官間質(zhì)中，以骨髓組織中含量最為豐富。在適當(dāng)條件下不僅可以分化為同源于中胚層的間質(zhì)組織細(xì)胞，還可以突破胚層界線，分化為非中胚層組織如脂肪細(xì)胞、骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、心肌細(xì)胞、成肌細(xì)胞、肌腱細(xì)胞等。從MSC的定義和特點(diǎn)可看出它是組織工程抱負(fù)的種子細(xì)胞，運(yùn)用它進(jìn)行組織工程學(xué)研究有如下優(yōu)勢：①取材方便并對機(jī)體無害，MSC在骨髓組織中數(shù)量較多、容易獲得、易于培養(yǎng)、有較高的生長率；②由于間充質(zhì)干細(xì)胞取自自體，屬同種移植，無免疫排斥反映；③由間充質(zhì)干細(xì)胞分化的組織類型廣泛，理論上講它能分化為所有間充質(zhì)組織類型：將它分化為骨、軟骨或肌肉、肌鍵在創(chuàng)傷性疾病中具有應(yīng)用價(jià)值；將它分化為真皮組織則在燒傷中有不可限量的應(yīng)用前景。④增殖旺盛，體外倍增時(shí)間在30小時(shí)左右，⑤不涉及社會倫理和法律方面的問題。目前國外開展自體骨髓干細(xì)胞治療骨病的報(bào)道涉及美國、法國、德國、日本、韓國和意大利。國內(nèi)開展類似研究項(xiàng)目重要以深圳北科和協(xié)和干細(xì)胞為主，所涉及到的重要醫(yī)院達(dá)數(shù)十家以上，有洛陽正骨醫(yī)院、上海市關(guān)節(jié)外科醫(yī)學(xué)中心（上海第二醫(yī)科大學(xué)附屬第九人民醫(yī)院骨科）、廣東省人民醫(yī)院——骨科、武警總醫(yī)院、空軍總醫(yī)院干細(xì)胞治療中心、濟(jì)南軍區(qū)總醫(yī)院、沈陽463醫(yī)院等大型醫(yī)院。其研究多以異體干細(xì)胞、臍帶血或者臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞為主。治療的相關(guān)骨病涉及到初期股骨頭缺血性壞死、股骨頭壞死、骨折后骨不連，尚有結(jié)合大塊骨腫瘤的切除、嚴(yán)重創(chuàng)傷后的骨缺損、缺血性骨壞死疾病、脊柱融合手術(shù)的骨移植、人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后骨溶解的治療方法。據(jù)報(bào)道這些治療方法都具有一定的療效，但在國內(nèi)尚無系統(tǒng)的安全性、療效性評估，特別是異體干細(xì)胞的運(yùn)用大大增長了技術(shù)的潛在危險(xiǎn)和遺傳疾病的傳染等。此外，骨傷疾病往往是由于損傷嚴(yán)重或者慢性血液循環(huán)受阻導(dǎo)致的，因而臨床治療技術(shù)需要兼顧組織的再生修復(fù)，也要保證再生修復(fù)者--間充質(zhì)細(xì)胞的再生修復(fù)所需要的條件，更要重視引起損傷的基本因素--血液循環(huán)的受阻。本技術(shù)就是運(yùn)用自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和aPRPs，并結(jié)合臨床外科技術(shù)，開發(fā)了AMOT治療技術(shù)。通過數(shù)年臨床治療和數(shù)以千計(jì)的患者的評估和研究，證明該技術(shù)具有安全性可靠、療效顯著、無副作用和操作簡樸等特點(diǎn)。DC-CIK細(xì)胞免疫治療腫瘤技術(shù)經(jīng)腫瘤抗原等初始抗原刺激后，未致敏的T細(xì)胞需由專門的抗原遞呈細(xì)胞（antigenpresentingcells,APC）向其遞呈相關(guān)抗原才干活化并發(fā)揮功能。樹突狀細(xì)胞（dendriticcell,DC）、B淋巴細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞是專職APC，分布于機(jī)體的所有組織和器官。這些細(xì)胞表達(dá)MHCI和MHCII因子，具有強(qiáng)大的遞呈抗原的能力。由于DC是唯一能向未致敏T細(xì)胞遞呈抗原的細(xì)胞，故DC是抗原遞呈功能最強(qiáng)的APC。此外，DC經(jīng)抗原致敏后可以分泌大量細(xì)胞因子如IL-12等，這類細(xì)胞因子在刺激T細(xì)胞活化及抗腫瘤過程中起著重要作用。DC的這些特性使其在觸發(fā)特異性免疫應(yīng)答中起關(guān)鍵作用，并使DC有也許應(yīng)用于腫瘤和其它疾病免疫治療技術(shù)的發(fā)展和改善。細(xì)胞因子活化的殺傷細(xì)胞（Cytokine-activatedKillerCells,CIK）是指經(jīng)抗CD3抗體、INF和IL-2聯(lián)合作用后產(chǎn)生的一類對惡性腫瘤細(xì)胞具有高度殺傷能力的T淋巴細(xì)胞，其重要特性是同時(shí)表達(dá)T細(xì)胞抗原（如CD3和CD8）以及NK細(xì)胞受體（如CD56），此類細(xì)胞對腫瘤的殺傷作用重要取決于CIK細(xì)胞高度表達(dá)穿孔素（Perforin）。體外實(shí)驗(yàn)證明，在效靶比例為100：1時(shí)，CIK對多種肺癌細(xì)胞的殺傷能力達(dá)成100％。研究表白，DC與CIK細(xì)胞之間具有協(xié)同效應(yīng)，如DC細(xì)胞分泌的IL-12可以增強(qiáng)CIK細(xì)胞對腫瘤的殺傷作用，而CIK細(xì)胞分泌的IFN可以促使DC更有效地遞呈抗原。在正常人外周血中，DC和CIK細(xì)胞含量很低，分別占外周血單核細(xì)胞及CD3+T細(xì)胞總量的1－5％，并且肺癌患者上述二類細(xì)胞含量顯著低于正常人。因此，在體外大量培養(yǎng)DC和CIK細(xì)胞并回輸給肺癌患者可以糾正體內(nèi)的免疫缺陷狀況，從而顯著提高了機(jī)體的抗癌能力。自體干細(xì)胞存儲項(xiàng)目隨著干細(xì)胞技術(shù)的不斷發(fā)展，發(fā)達(dá)國家都先后建起了不同性質(zhì)的干細(xì)胞庫，涉及胚胎干細(xì)胞庫、成體干細(xì)胞庫。我國的干細(xì)胞研究與發(fā)達(dá)國家尚有一些差距，但在成體干細(xì)胞臨床應(yīng)用研究上差距不大。國營和私企的干細(xì)胞庫相繼誕生，但多數(shù)以臍帶或者臍帶血干細(xì)胞為主?，F(xiàn)在，運(yùn)用最先進(jìn)的科學(xué)分離技術(shù)，即使是70歲的老人也可以進(jìn)行干細(xì)胞存儲。人體的免疫系統(tǒng)在20歲左右時(shí)達(dá)成高峰，到了40歲時(shí)，其活性就只剩下20歲的一半，到了70歲時(shí)只及20歲時(shí)的1/10。因此，盡早儲存干細(xì)胞，可以最大限度保持細(xì)胞免疫功能的強(qiáng)壯。目前國際上的干細(xì)胞治療技術(shù)，重要應(yīng)用在腫瘤、病毒感染等方面，在臨床上已有許多成功案例，而有沒有好的免疫細(xì)胞，則是治療成功的關(guān)鍵因素之一。我們的干細(xì)胞庫將不同于臍帶血細(xì)胞庫，衛(wèi)生部門并未明確規(guī)定各省成體干細(xì)胞庫的數(shù)量，且并未嚴(yán)禁跨地區(qū)收集樣本。國內(nèi)對于成體細(xì)胞庫的建立仍處在起始階段，2023年4月，我國的第一個(gè)成體干細(xì)胞庫才在常州落成。此外，針對本市及周邊省份的部隊(duì)機(jī)構(gòu)、政府機(jī)關(guān)及事業(yè)單位開展集體存儲業(yè)務(wù)需求，我們還將與此類機(jī)構(gòu)展開長期的合作，針對單位的集體保健業(yè)務(wù)開展干細(xì)胞存儲，這一業(yè)務(wù)模式將比現(xiàn)行的干細(xì)胞存儲效率提高300%。我們從干細(xì)胞臨床治療技術(shù)出發(fā)，建立一個(gè)自體干細(xì)胞儲存庫，其特點(diǎn)：對象以中青年為主（建議50歲以前）：實(shí)踐告訴我們，20歲以下是干細(xì)胞最具活力的時(shí)期，超過60歲干細(xì)胞的活力會急劇下降。并且多數(shù)人50歲開始身體機(jī)能和組織會出現(xiàn)不同的損傷，需要干細(xì)胞進(jìn)行治療。經(jīng)濟(jì)且目的明確：儲存時(shí)間相對較短，且目的明確，顧客容易接受，用于即將到來的有關(guān)老年疾病和抗衰老治療。干細(xì)胞存儲可以結(jié)合臨床細(xì)胞治療進(jìn)行:對于細(xì)胞治療的患者，將其一部分干細(xì)胞直接存儲，即方便又合用。項(xiàng)目的重要技術(shù)和創(chuàng)新點(diǎn)AMOT臨床治療骨傷疾病技術(shù)方案和技術(shù)路線：血小板裂解液擴(kuò)增自體骨髓細(xì)胞治療骨傷疾病的技術(shù)分臨床和實(shí)驗(yàn)室兩個(gè)部分。其技術(shù)線路操作程序見上圖。臨床操作：臨床操作涉及骨髓和外周血的采集，骨髓是用來分離自體骨髓有核細(xì)胞。外周血是用來制備血小板裂解液和自體細(xì)胞因子以便進(jìn)行自體骨髓有核細(xì)胞的培養(yǎng)，擴(kuò)增以及進(jìn)行預(yù)解決、后解決之用。臨床操作還涉及細(xì)胞的移植和自體細(xì)胞因子的輔助治療注射。所有的操作都是在核磁共振或者B-超導(dǎo)航下進(jìn)行的。非手術(shù)治療方法：涉及冷熱療法、器具校正、物理和中醫(yī)療法等。這些治療只能緩解疼痛,暫時(shí)減輕臨床癥狀，但有時(shí)會帶來許多副作用。像傳統(tǒng)單一藥物治療股骨頭壞死的方法，對于血運(yùn)阻斷的患者沒有任何治療效果，對于血運(yùn)沒有阻斷的患者療效也很有限。低頻脈沖超聲對骨愈合和軟骨損傷的作用效果也很有限，只能用于輔助治療手段。手術(shù)治療方法：手術(shù)方法有多種，其中經(jīng)常運(yùn)用的方法有：1）關(guān)節(jié)灌洗術(shù)和清理術(shù)，只能延緩關(guān)節(jié)炎癥病變的進(jìn)展。2）骨髓刺激方法，穿透軟骨損傷區(qū)的軟骨下骨出血,釋放出未分化間充質(zhì)細(xì)胞，只能得到部分修復(fù)。3）微創(chuàng)療法治療股骨頭壞死，將藥物直接動脈灌注到股骨頭供血血管。其治療效果很有限，且只適合于臨床的初期患者。4）股骨頭的人工減壓，這種臨床治療方法只能緩解患者的暫時(shí)疼痛，和微創(chuàng)療法同樣，患者易反復(fù)并進(jìn)行多次手術(shù)。5）人工關(guān)節(jié)置換術(shù)，此方法重要適合于65歲以上的患者。但仍存在關(guān)節(jié)感染、假體松動和產(chǎn)生磨損顆粒以及假體使用壽命等問題，特別很多患者存在骨質(zhì)疏松問題，容易導(dǎo)致假體松動和脫離。軟骨組織工程技術(shù)：組織工程的三大要素:種子細(xì)胞即干細(xì)胞、支架材料、細(xì)胞因子。目前此技術(shù)還僅限于研究階段，其重要存在問題是缺少抱負(fù)的支架材料，此外干細(xì)胞的體外分化會產(chǎn)生嚴(yán)重的遺傳變異或癌變的也許性，這也嚴(yán)重限制該技術(shù)的臨床發(fā)展。本技術(shù)的創(chuàng)新點(diǎn)：和目前臨床的常用技術(shù)相比：該技術(shù)是運(yùn)用現(xiàn)代再生醫(yī)學(xué)的原理進(jìn)行組織再生修復(fù)，是治本。特別是可以對中初期的患者進(jìn)行有效的臨床治療，使患者免去組織的進(jìn)一步損傷發(fā)展，導(dǎo)致不可逆轉(zhuǎn)，不僅使患者導(dǎo)致經(jīng)濟(jì)上的巨大損失，也給生活帶來痛苦。和臨床現(xiàn)有類似技術(shù)相比該技術(shù)具有下列創(chuàng)新點(diǎn)：完全自體，不存在倫理問題：目前部分類似的臨床實(shí)驗(yàn)和技術(shù)重要是異體的臍帶血或臍帶干細(xì)胞，不僅存在倫理問題，也解決不了也許的遺傳疾病傳染和細(xì)胞制劑的質(zhì)量控制；技術(shù)成熟，安全性高，療效顯著：本技術(shù)對臨床的安全性和有效性進(jìn)行了系統(tǒng)的研究和評估，并公開發(fā)表在著名的雜志上。國內(nèi)的類似技術(shù)尚沒有進(jìn)行大量的系統(tǒng)研究報(bào)告，其療效性，特別是安全性尚沒有進(jìn)行進(jìn)一步的評估；技術(shù)的綜合性治療方法：本技術(shù)運(yùn)用激活自體細(xì)胞因子技術(shù)（aPRPs），外科手術(shù)技術(shù)并結(jié)合細(xì)胞治療技術(shù)，對疾病進(jìn)行標(biāo)本兼治。類似的臨床技術(shù)缺少這種綜合的治療方案，對血液循環(huán)阻遏而引起骨病的根源沒能進(jìn)行有效的治療，因而治療效果非常有限；細(xì)胞移植技術(shù)先進(jìn)：本技術(shù)的細(xì)胞移植是在X-光或者B-超的現(xiàn)場監(jiān)視下進(jìn)行的，使細(xì)胞被移植到真正的損傷需要修復(fù)的部位，增長了療效?，F(xiàn)有類似的臨床技術(shù)基本以外部注射的方式進(jìn)行，尚有的以靜脈注射的方式移植。移植的細(xì)胞真正到達(dá)損傷的部位十分有限，也間接地影響了臨床治療效果?！癉C-CIK生物細(xì)胞免疫抗癌技術(shù)”治療優(yōu)勢這一技術(shù)是用人體自身的免疫細(xì)胞殺死腫瘤細(xì)胞，同時(shí)可以大大增強(qiáng)人體的免疫功能，克制腫瘤細(xì)胞生長。本技術(shù)雖不能完全替代傳統(tǒng)的手術(shù)、放療和化療，但技術(shù)具有無可比擬的優(yōu)勢:安全性高：運(yùn)用人體自身細(xì)胞殺死腫瘤細(xì)胞，無毒副作用，病人不痛苦;針對性強(qiáng)：DC細(xì)胞能誘導(dǎo)出殺傷腫瘤細(xì)胞的免疫細(xì)胞，CIK細(xì)胞具有非特異性殺傷腫瘤細(xì)胞;持久性免疫：啟動機(jī)體免疫系統(tǒng)，恢復(fù)機(jī)體免疫功能，持久殺傷腫瘤細(xì)胞，長期阻止癌細(xì)胞擴(kuò)散、復(fù)發(fā);全身性：重建和提高患者全身的機(jī)體免疫功能，全面辨認(rèn)、搜索、殺傷腫瘤細(xì)胞，有效防止腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移;徹底性：提高機(jī)體免疫能力，徹底清除體內(nèi)殘留腫瘤細(xì)胞和微小轉(zhuǎn)移病灶;適應(yīng)癥廣：有效治療絕大多數(shù)實(shí)體腫瘤，并能消滅對放、化療不敏感及轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞.自體干細(xì)胞存儲項(xiàng)目擁有符合FDA相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的一整套操作程序，標(biāo)準(zhǔn)操作流程覆蓋了從檢測、采樣到保存、檢查、安全措施等在內(nèi)的一系列程序。著重收集成體來源的干細(xì)胞，并逐步推廣國內(nèi)獨(dú)家的VSEL相關(guān)采集技術(shù)和使用方法。五、項(xiàng)目的產(chǎn)品定位和總體開發(fā)目的項(xiàng)目技術(shù)產(chǎn)品的目的市場本技術(shù)屬于現(xiàn)代生物高科技技術(shù)，運(yùn)用再生醫(yī)學(xué)和細(xì)胞免疫的原理對人類骨傷骨病進(jìn)行再生修復(fù)治療和腫瘤患者進(jìn)行免疫治療的現(xiàn)代和未來發(fā)展的臨床技術(shù)。骨關(guān)節(jié)疾?。ˋMOT）服務(wù)對象是各種骨傷疾病的患者，涉及股骨頭壞死、各種骨性關(guān)節(jié)炎、半月板損傷、骨不連以及肌腱/韌帶的損傷等。它的重要市場是在大中城市的三甲醫(yī)院（目前全國大約有500家以上的三甲級醫(yī)院）。團(tuán)隊(duì)已經(jīng)具有相關(guān)技術(shù)的開發(fā)經(jīng)驗(yàn)，并且對現(xiàn)在的技術(shù)市場和目的客戶非常熟悉。在合作的開發(fā)醫(yī)院，適應(yīng)骨傷疾病患者有20%接受此技術(shù)的治療，然后通過市場拓展多家合作醫(yī)院，其市場的潛力將是巨大的。根據(jù)我們以往的經(jīng)驗(yàn)，通過一年以上的臨床實(shí)行，將有至少30%的適宜患者接受此項(xiàng)新技術(shù)的治療。DC-CIK細(xì)胞治療腫瘤技術(shù)該技術(shù)為治療腫瘤患者，其目的市場是大中城市的三甲等醫(yī)院的腫瘤治療。創(chuàng)傷愈合和骨傷疾病自體治療（aPRPs）產(chǎn)品的目的客戶是全國各地的骨科?？漆t(yī)院，特別適合各種創(chuàng)傷愈合的治療。aPRPs的市場可以擴(kuò)展到城鄉(xiāng)、市里和農(nóng)村。皮膚損傷疾?。ˋMST）重要市場目的集中在大中城市的大型醫(yī)院，盼望在五年內(nèi)完畢臨床實(shí)驗(yàn)并進(jìn)行規(guī)模性生產(chǎn)開發(fā)。自體干細(xì)胞存儲和干細(xì)胞抗衰老（AMAT）項(xiàng)目目的客戶重要以成年人為主，特別是中年群體。技術(shù)產(chǎn)品的市場需求限度骨關(guān)節(jié)疾病（AMOT）目前干細(xì)胞治療骨傷疾病只在臨床上進(jìn)行了有限規(guī)模的實(shí)驗(yàn)，尚沒有開發(fā)出成熟的技術(shù)。我國現(xiàn)有這類患者超過1.5億，骨傷疾病發(fā)病率極高，不僅發(fā)生在年齡較大的人群，由于各種運(yùn)動和活動，年輕人群體中也是非經(jīng)常見的疾病。隨著年齡的增大，骨傷疾病的發(fā)病率呈現(xiàn)直線上升趨勢。結(jié)合中國的實(shí)際情況，我們國家越來越接近或進(jìn)入老齡社會，此病患病數(shù)量還會連續(xù)地增長。近年來，無論是綜合性醫(yī)院的骨科?？七€是骨科?？漆t(yī)院都是發(fā)展最快的一個(gè)領(lǐng)域，這是由于骨傷患者的增長導(dǎo)致的，并且這種骨傷患者的數(shù)量還會連續(xù)不斷地增長。骨傷患者的來源一是隨著年齡的增長，關(guān)節(jié)由于長時(shí)間的過度負(fù)重等因素導(dǎo)致關(guān)節(jié)損傷，軟骨退行性病變；二是各種運(yùn)動，劇烈活動導(dǎo)致的各種骨傷，特別是軟骨、肌腱和韌帶的損傷；三是各種意外傷害，特別是交通事故等導(dǎo)致的各種骨傷疾??；四是其它藥物等導(dǎo)致的骨關(guān)節(jié)等損傷。目前國內(nèi)雖然也有幾家公司和醫(yī)療機(jī)構(gòu)，像協(xié)和干細(xì)胞、深圳北科等也在開展干細(xì)胞治療技術(shù)，但骨傷疾病的市場非常大，特別是在氣候偏冷的北方和沿海地區(qū)，各種骨性關(guān)節(jié)炎和股骨頭壞死的患者發(fā)病率大大高于其它地區(qū)。創(chuàng)傷愈合和骨傷疾病自體治療（aPRPs）類似aPRPs的富含血小板血漿醫(yī)療產(chǎn)品在國內(nèi)外已經(jīng)廣泛應(yīng)用各種創(chuàng)傷愈合和骨傷疾病的輔助治療。國外開發(fā)出各種制備富含血小板血漿的制備套裝，比如Mycells。國內(nèi)雖然很多醫(yī)生進(jìn)行臨床實(shí)驗(yàn)和運(yùn)用，由于沒有正式的SFDA批準(zhǔn)或者大部分中小醫(yī)院并不具有合格的臨床實(shí)驗(yàn)室，因而這一技術(shù)和技術(shù)產(chǎn)品的臨床運(yùn)用受到了極大的限制。aPRPs的市場潛力極其巨大。皮膚損傷疾?。ˋMST）各種因素引起的難以愈合的各種皮膚損傷，涉及糖尿病足、嚴(yán)重?zé)齻推つw癌引起的臨床病例近些年呈現(xiàn)顯著增長的趨勢。據(jù)記錄，美國每年僅燒傷患者入院就有10-30萬之多，中國遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于這個(gè)數(shù)字，保守估計(jì)，加上各種因素引起的皮膚損傷患者要達(dá)成幾百萬。AMST技術(shù)為此類患者帶來了福音。CD-CIK細(xì)胞免疫治療腫瘤疾病癌癥是嚴(yán)重威脅人類生命和社會發(fā)展的重大疾病，已成為人類死亡的第一疾病，2023年諸多國家預(yù)計(jì)有900萬人死于癌癥，2030年這個(gè)數(shù)字將達(dá)成1140萬人。2023年-2023年中國第三次全死因調(diào)查顯示，我國城鄉(xiāng)居民癌癥死亡率為135.88/10萬，屬發(fā)病率高的國家，并且仍呈連續(xù)增長的趨勢。目前，腫瘤的發(fā)生機(jī)制尚未形成普遍接受的理論。研究者普遍認(rèn)可腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與人體的免疫功能密切相關(guān)。即在正常情況下，腫瘤與機(jī)體的防御機(jī)能之間處在一種動態(tài)的平衡，而一旦這種平衡被破壞，就也許發(fā)生腫瘤。身體各組織細(xì)胞受到外界化學(xué)、物理、生物等因素刺激或自身細(xì)胞衰老變異等因素的影響，使得體內(nèi)某些細(xì)胞發(fā)生突變，成為癌前細(xì)胞；而機(jī)體免疫功能低下或者由于免疫異常，無法及時(shí)辨認(rèn)、殺傷、清除這些異常細(xì)胞，突變細(xì)胞在組織內(nèi)復(fù)制生長，達(dá)成一定數(shù)量后破壞器官功能，腫瘤即發(fā)生。腫瘤患者，特別是惡性腫瘤病人往往免疫功能，特別是細(xì)胞免疫功能低下，因而疾病呈進(jìn)展、活動、預(yù)后差。因此，提高機(jī)體免疫力，建立有效的免疫應(yīng)答是治療腫瘤最有希望的途徑。自體干細(xì)胞存儲項(xiàng)目 隨著再生醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，進(jìn)行自體干細(xì)胞治療的患者越來越多。2023年，我國細(xì)胞市場規(guī)模以銷售收入計(jì)為5.4億，并以每年30%的速度增長，保守估計(jì)國內(nèi)細(xì)胞治療市場僅移植治療一個(gè)版塊到2025年即達(dá)1萬億人民幣，治療患者將達(dá)5000萬。這就是成體干細(xì)胞庫的龐大市場合在。技術(shù)產(chǎn)品的市場價(jià)格和收入預(yù)測自體骨髓細(xì)胞治療骨傷疾病技術(shù)依據(jù)我們已有的經(jīng)驗(yàn)，每位患者運(yùn)用該技術(shù)治療，公司平均可收入2.0-2.5萬元。正常開發(fā)的醫(yī)院，就是在合作初期每年至少可以做200例患者，隨著技術(shù)的不