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文檔簡介
DB3301/TXXXX—XXXX
雜交蘭種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程
1范圍
本文件規(guī)定了雜交蘭種苗組培擴(kuò)繁的組培苗培養(yǎng)、組培苗馴化移栽、質(zhì)量等級、包裝、標(biāo)簽和運(yùn)輸
的要求。
本文件適用于雜交蘭種苗組培擴(kuò)繁至馴化栽培的生產(chǎn)過程。
2規(guī)范性引用文件
下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,
僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本
文件。
GB/T8321(所有部分)農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則
NY/T496—2010肥料合理使用準(zhǔn)則通則
NY/T1276—2007農(nóng)藥安全使用規(guī)范總則
3術(shù)語和定義
下列術(shù)語和定義適用于本文件。
雜交蘭Cymbidiumhybrid
由國蘭和大花蕙蘭種間雜交選育的一類蘭花雜交種。
類原球莖protocorm-likebodies
蘭花外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)時,莖尖生長點(diǎn)組織逐漸膨大形成的、可發(fā)育成完整試管苗的扁形球狀物。
4組培苗培養(yǎng)
外植體的選擇和處理
4.1.1母株的預(yù)處理
于春秋季,宜使用50%多菌靈可濕性粉劑800倍液等廣譜殺菌劑,對長勢均勻、無病蟲害且?guī)в行?/p>
生芽的健康母株進(jìn)行灌根處理,每隔3天1次,連續(xù)處理2次~3次,放置于通風(fēng)良好、清潔、干燥的
環(huán)境,溫度宜15℃~25℃,光照宜8000lux~12000lux。
4.1.2外植體的選取
母株基質(zhì)干透后,選擇苞葉尚未展開、露出基質(zhì)表面2cm~6cm的新生芽,從基部切斷取下,置
于無菌樣品袋中帶回實(shí)驗(yàn)室。
1
DB3301/TXXXX—XXXX
4.1.3外植體消毒
4.1.3.1用潔凈的軟毛刷輕刷外植體表面,去除表面污垢,浸入洗潔精等清潔劑中震蕩清洗50min~
80min,再流水充分沖洗,置于超凈工作臺上。
4.1.3.2剝?nèi)?片~2片外苞葉,75%酒精浸泡消毒90s,無菌水清洗2次~3次。
4.1.3.3再剝?nèi)?片~2片外苞葉,浸入10%NaClO溶液,加入2滴~3滴吐溫20,處理10min,無
菌水清洗3次~4次。
4.1.3.4浸入0.1%HgCl2溶液,加入2滴~3滴吐溫20,根據(jù)芽的大小滅菌15min~17min,無菌水
清洗5次~6次。
4.1.3.5再剝?nèi)?片~2片外苞葉,將剝離的芽浸入0.05%HgCl2溶液中消毒60s,無菌水清洗5次~
6次。
初代培養(yǎng)
4.2.1接種
取消毒后的芽,剝離0.3cm~0.5cm的莖尖組織接種于初代培養(yǎng)基誘導(dǎo)類原球莖。
4.2.2培養(yǎng)基
培養(yǎng)基配方宜為:1/2MS+1mg/L6-BA+1mg/LIBA+1g/L活性炭+30g/L蔗糖+5g/L瓊脂,
pH值5.6~5.8。
4.2.3培養(yǎng)條件
光照16h/d,光照強(qiáng)度500lux~1000lux,溫度(25±1)℃;暗培養(yǎng)時溫度為(20±1)℃。
繼代培養(yǎng)
4.3.1轉(zhuǎn)接
初代培養(yǎng)60d后,將誘導(dǎo)形成的類原球莖分割為體積約0.4cm×0.4cm×0.4cm的團(tuán)塊,接
種于繼代培養(yǎng)基上,每隔60d~75d繼代一次,分割時去除類原球莖上分化的芽和根,繼代次數(shù)不宜
超過12代。
4.3.2培養(yǎng)基
培養(yǎng)基配方宜為:Hyponex1(花寶1號)+0.5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+50g/L香蕉泥+2
g/L水解酪蛋白+1g/L活性炭+30g/L蔗糖+5g/L瓊脂,pH值5.6~5.8。
4.3.3培養(yǎng)條件
光照16h/d,光照強(qiáng)度500lux~1000lux,溫度(25±1)℃;暗培養(yǎng)時溫度為(20±1)℃。
分化培養(yǎng)
4.4.1轉(zhuǎn)接
將增殖的類原球莖分割為體積約0.4cm×0.4cm×0.4cm的團(tuán)塊,轉(zhuǎn)接至分化培養(yǎng)基上分化
成芽,類原球莖之間的距離不宜少于1.5cm。
4.4.2培養(yǎng)基
2
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培養(yǎng)基配方宜為:1/2MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+10%椰汁+0.2g/L活性炭+20g/L
蔗糖+6g/L瓊脂,pH值5.6~5.8。
4.4.3培養(yǎng)條件
光照16h/d,光照強(qiáng)度1200lux~2000lux,溫度(25±1)℃;暗培養(yǎng)時溫度為(20±1)℃。
生根培養(yǎng)
4.5.1轉(zhuǎn)接
待芽長至3cm~5cm時,將其切下接種于生根培養(yǎng)基培養(yǎng)50d~70d。
4.5.2培養(yǎng)基
培養(yǎng)基配方宜為:Hyponex1(花寶1號)+0.1mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+100g/L香蕉泥+2
g/L水解酪蛋白+1g/L活性炭+30g/L蔗糖+7g/L瓊脂,pH值5.6~5.8。
4.5.3培養(yǎng)條件
光照16h/d,光照強(qiáng)度2000lux~2500lux,溫度(25±1)℃;暗培養(yǎng)時溫度為(20±1)℃。
5組培苗馴化移栽
瓶苗馴化
當(dāng)苗高長至8cm~12cm、根數(shù)達(dá)到3條~5條、根長3cm~5cm時,將瓶苗轉(zhuǎn)移至溫室馴化培養(yǎng),
覆蓋70%遮陽率的遮陽網(wǎng)5d~7d,而后揭去遮陽網(wǎng)繼續(xù)培養(yǎng)10d~20d,移栽前,打開瓶口放置2d~
3d。光照強(qiáng)度宜4000lux~5000lux,白天溫度宜25℃~30℃,夜間溫度不宜低于20℃,宜春、
秋兩季馴化。
瓶苗移栽
取出幼苗,洗凈根部培養(yǎng)基,宜用50%多菌靈可濕性粉劑1000倍液等廣譜殺菌劑浸泡15min,晾
干至根變白后移栽至營養(yǎng)缽。宜選用經(jīng)消毒的基質(zhì),體積比為松鱗、鹿沼土與仙土=1:1:1。
幼苗栽培管理
栽后具體管理措施詳見附錄A。
6質(zhì)量等級
組培苗質(zhì)量等級見附錄B。
7包裝、標(biāo)簽和運(yùn)輸
包裝
7.1.1組培瓶苗
3
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將符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的組培瓶苗用封口膜封住瓶口,整齊排列裝于紙箱中,瓶與紙箱之間用海綿等緩沖
物隔離填充。
7.1.2營養(yǎng)缽苗
將營養(yǎng)缽苗整齊排列于紙箱中,縫隙用海綿等緩沖物隔離填充。幼苗在包裝前應(yīng)根據(jù)運(yùn)輸時間和環(huán)
境控制基質(zhì)水分含量,一般包裝時栽培基質(zhì)含水量根據(jù)包裝方式及貯運(yùn)時間控制,通常應(yīng)控制在50%以
內(nèi),外觀為表面基質(zhì)較干,盆內(nèi)基質(zhì)濕潤。密封的包裝箱箱側(cè)應(yīng)設(shè)通風(fēng)孔。
標(biāo)簽
每箱應(yīng)貼上標(biāo)簽,標(biāo)明品種名稱、等級、數(shù)量、產(chǎn)地、出苗日期等,并在紙箱上做好“請勿倒置”
的明顯標(biāo)志。
運(yùn)輸
運(yùn)輸時選擇整潔的保溫車輛,車廂內(nèi)溫度保持在15℃~25℃之間,車輛行駛過程中避免劇烈顛
簸以防組培瓶破碎或幼苗脫落,并應(yīng)在5h以內(nèi)到達(dá)目的地。此外,不宜在嚴(yán)寒、酷熱天氣運(yùn)輸。
8模式圖
雜交蘭種苗生產(chǎn)模式圖見附錄C。
4
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A
A
附錄A
(資料性)
雜交蘭組培苗栽后管理
雜交蘭組培苗栽后管理措施參見表A.1。
表A.1雜交蘭組培苗栽后管理措施
根據(jù)實(shí)際環(huán)境調(diào)節(jié)光照,加強(qiáng)通風(fēng),栽后15d內(nèi)弱光照,遮陽70%~80%,光照強(qiáng)度不超過3000lux;
光照
15d~30d可適當(dāng)增加光照強(qiáng)度,一般不超過5000lux;30d后進(jìn)一步增加光照,但不宜超過8000lux。
溫度幼苗最適溫度為15℃~30℃,早晚溫差5℃~15℃。
幼苗移栽后第一次澆水澆透,之后視天氣情況,基質(zhì)見干即澆。一般春秋季每5d~7d澆一次,夏
澆水
季每2d~4d澆一次,冬季每7d~10d澆一次。
幼苗定植緩苗15d后,施一次時效180d、N:P:K比例為13:13:13的顆粒緩釋肥1g~3g,或
施肥每周施一次1500倍N:P:K比例為20:20:20的水溶性肥料。肥料使用應(yīng)按照NY/T496—2010的要
求執(zhí)行。
緩苗15d~30d后,每隔15d噴施殺菌劑,殺菌劑可選擇戊唑醇、多菌靈、可殺得3000或咪鮮胺;
根據(jù)蟲害發(fā)生情況,殺蟲劑可選用阿維菌素、愛卡螨或噠螨靈防治紅蜘蛛,速勒馬與盈輝優(yōu)瑪復(fù)配劑防
病蟲害預(yù)防
治薊馬,吡蟲噻嗪酮防治蚧殼蟲,吡蟲啉防治蚜蟲。施藥防治應(yīng)按照GB/T8321(所有部分)和NY/T1276
—2007的要求執(zhí)行。
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B
B
附錄B
(資料性)
雜交蘭組培苗產(chǎn)品質(zhì)量等級
雜交蘭組培苗產(chǎn)品質(zhì)量等級參見表B.1。
表B.1組培苗產(chǎn)品質(zhì)量等級
等級
評級項(xiàng)目
一級二級
幼
溫馨提示
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