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微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)一、選擇題1.下列關(guān)于4種微生物的敘述,錯(cuò)誤的是()A.CO2和NH3分別是硝化細(xì)菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自NH3的氧化B.CO2和硝酸鹽分別是藍(lán)細(xì)菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自太陽能C.糖類和N2是乳酸菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自乳酸的氧化分解D.葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源,但CO2一定不是酵母菌的碳源2.將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸一定時(shí)間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量的蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養(yǎng)基。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.若M培養(yǎng)基中加入青霉素,可用于真菌的篩選B.制備培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)將pH調(diào)至酸性C.M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液可為微生物提供無機(jī)鹽D.倒平板時(shí),應(yīng)將皿蓋打開一條稍大于瓶口的縫隙3.下表為某培養(yǎng)基的配方,下列敘述正確的有()成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊紅含量10g10g2g0.4g成分亞甲藍(lán)H2O瓊脂含量0.065g定容至1000mL20g①從物理性質(zhì)看該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,從用途看該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基②培養(yǎng)基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖,屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨③該培養(yǎng)基中的蛋白胨可提供特殊營養(yǎng)物質(zhì)④該培養(yǎng)基調(diào)節(jié)合適的pH和消毒后就可以接種使用⑤該培養(yǎng)基可以用于培養(yǎng)HIV⑥該培養(yǎng)基可以用于大腸桿菌的鑒定,其菌落為帶金屬光澤且為深紫色A.2項(xiàng) B.3項(xiàng) C.4項(xiàng) D.5項(xiàng)4.下圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟示意圖,下列說法錯(cuò)誤的是()①②③④A.①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行B.步驟①中,需待倒入的培養(yǎng)基冷卻后蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋C.步驟③中,每次劃線后都需對接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理D.劃線接種結(jié)束后,將平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5.下列關(guān)于滅菌和消毒的理解,錯(cuò)誤的是()A.滅菌是指殺滅物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子B.消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是相同的C.接種環(huán)用灼燒法滅菌D.常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌6.細(xì)菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理,這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌()A.接種環(huán)、手、培養(yǎng)基 B.高壓鍋、手、接種環(huán)C.培養(yǎng)基、手、接種環(huán) D.接種環(huán)、手、高壓鍋7.下列操作與無菌技術(shù)無關(guān)的是()A.接種前用火焰灼燒接種環(huán)B.接種前用酒精棉球擦拭雙手C.將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.在酒精燈的火焰旁完成接種8.下列有關(guān)平板劃線操作的敘述,錯(cuò)誤的是()A.在第二次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來源于菌液B.從第二次劃線開始,每次劃線前,灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種C.第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物D.劃線結(jié)束后,灼燒接種環(huán)能及時(shí)殺死接種環(huán)上的菌種,避免污染環(huán)境和感染操作者9.將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基都放入37℃恒溫箱的目的是()A.對比觀察培養(yǎng)基有沒有被微生物利用B.對比分析培養(yǎng)基上是否生有雜菌C.沒必要放入未接種的培養(yǎng)基D.為了下次接種時(shí)再使用10.做“酵母菌的純培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí),下列敘述錯(cuò)誤的是()A.接種時(shí)為了獲得單菌落,從第二次開始每次劃線前都要灼燒接種環(huán)B.倒平板時(shí),拔出錐形瓶棉塞后,應(yīng)將瓶口迅速通過火焰C.倒平板要在酒精燈火焰旁進(jìn)行,防止雜菌污染D.為了防止雜菌污染,接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后,應(yīng)趁熱快速蘸取菌液二、綜合題11.某同學(xué)配制含瓊脂的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基后,對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,當(dāng)培養(yǎng)基溫度下降到50℃時(shí),在酒精燈火焰附近倒平板,待培養(yǎng)基冷卻至室溫,按表處理。將處理完畢的培養(yǎng)皿置于適宜溫度下培養(yǎng)2~3d,觀察每個(gè)培養(yǎng)皿中的菌落特征和數(shù)目。請思考回答下列問題。組別處理A打開培養(yǎng)皿蓋,距地面0.3m處暴露15minB打開培養(yǎng)皿蓋,距地面0.6m處暴露15minC打開培養(yǎng)皿蓋,距地面0.9m處暴露15minD打開培養(yǎng)皿蓋,距地面1.2m處暴露15minE不打開培養(yǎng)皿蓋(1)上述實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖?/p>
。若E組的培養(yǎng)基表面有菌落生長,說明。
(2)培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為微生物生長提供和。在酒精燈火焰附近進(jìn)行相關(guān)操作是為了。
(3)實(shí)驗(yàn)過程特別強(qiáng)調(diào)溫度控制,請簡要說明下列溫控措施的目的。①“待培養(yǎng)基冷卻至室溫”的目的有。
②“將處理完畢的培養(yǎng)皿置于適宜溫度下培養(yǎng)”的目的是。
(4)培養(yǎng)微生物時(shí)將培養(yǎng)皿倒置的目的是
。
實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,對使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行處理。
12.下表是某微生物培養(yǎng)基的配方,請分析回答下列問題。編號①②③成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4含量0.4g4.0g0.5g編號④⑤成分CaCl2H2O含量0.5g定容至100mL(1)從培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分看,此培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)的微生物的同化作用類型是。利用該培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物時(shí),微生物所需要的碳源來自。
(2)此表中含有的微生物所需的營養(yǎng)成分是
。
(3)若去除該培養(yǎng)基中的①后再加入不含氮元素的有機(jī)物,則此培養(yǎng)基可培養(yǎng)的微生物種類是。
(4)若將氨基酸加入培養(yǎng)基,則它可充當(dāng)?shù)臓I養(yǎng)成分是。
(5)若要觀察微生物的菌落的特點(diǎn),培養(yǎng)基中還應(yīng)添加的成分是。
微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)一、選擇題1.下列關(guān)于4種微生物的敘述,錯(cuò)誤的是()A.CO2和NH3分別是硝化細(xì)菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自NH3的氧化B.CO2和硝酸鹽分別是藍(lán)細(xì)菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自太陽能C.糖類和N2是乳酸菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自乳酸的氧化分解D.葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源,但CO2一定不是酵母菌的碳源解析:硝化細(xì)菌是化能自養(yǎng)需氧型微生物,CO2和NH3分別是硝化細(xì)菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自NH3的氧化;藍(lán)細(xì)菌是自養(yǎng)生物,能進(jìn)行光合作用,CO2和硝酸鹽分別是藍(lán)細(xì)菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自太陽能;乳酸菌是異養(yǎng)厭氧型微生物,糖類和有機(jī)酸是乳酸菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自糖類的氧化分解;酵母菌是異養(yǎng)生物,葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源,酵母菌不能直接利用CO2。答案:C2.將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸一定時(shí)間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量的蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養(yǎng)基。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.若M培養(yǎng)基中加入青霉素,可用于真菌的篩選B.制備培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)將pH調(diào)至酸性C.M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液可為微生物提供無機(jī)鹽D.倒平板時(shí),應(yīng)將皿蓋打開一條稍大于瓶口的縫隙解析:青霉素可抑制細(xì)菌生長,篩選出真菌;制備培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)將pH調(diào)至中性或弱堿性;M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液可為微生物提供碳源、氮源、無機(jī)鹽等;倒平板時(shí),應(yīng)將皿蓋打開一條稍大于瓶口的縫隙。答案:B3.下表為某培養(yǎng)基的配方,下列敘述正確的有()成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊紅含量10g10g2g0.4g成分亞甲藍(lán)H2O瓊脂含量0.065g定容至1000mL20g①從物理性質(zhì)看該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,從用途看該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基②培養(yǎng)基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖,屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨③該培養(yǎng)基中的蛋白胨可提供特殊營養(yǎng)物質(zhì)④該培養(yǎng)基調(diào)節(jié)合適的pH和消毒后就可以接種使用⑤該培養(yǎng)基可以用于培養(yǎng)HIV⑥該培養(yǎng)基可以用于大腸桿菌的鑒定,其菌落為帶金屬光澤且為深紫色A.2項(xiàng) B.3項(xiàng) C.4項(xiàng) D.5項(xiàng)解析:此配方中含有瓊脂,從物理性質(zhì)看該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,含伊紅和亞甲藍(lán),從用途看該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基;葡萄糖是主要的碳源,蛋白胨可作為氮源,同時(shí)還可提供碳源、維生素等物質(zhì);該培養(yǎng)基調(diào)節(jié)合適的pH后,需要進(jìn)行滅菌處理;HIV營寄生生活,需要用活細(xì)胞培養(yǎng),不能用培養(yǎng)基直接培養(yǎng);大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上與伊紅和亞甲藍(lán)結(jié)合,其菌落為帶金屬光澤且為深紫色。答案:C4.下圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟示意圖,下列說法錯(cuò)誤的是()①②③④A.①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行B.步驟①中,需待倒入的培養(yǎng)基冷卻后蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋C.步驟③中,每次劃線后都需對接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理D.劃線接種結(jié)束后,將平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)解析:①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行,防止被雜菌污染;倒完平板后立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋,冷凝后將平板倒過來放置;灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到單菌落;劃線接種結(jié)束后,將平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng),有利于表面的水分更好地?fù)]發(fā)和防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。答案:B5.下列關(guān)于滅菌和消毒的理解,錯(cuò)誤的是()A.滅菌是指殺滅物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子B.消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是相同的C.接種環(huán)用灼燒法滅菌D.常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌解析:消毒是指使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物(不包括芽孢和孢子)。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。兩者實(shí)質(zhì)有很大區(qū)別。答案:B6.細(xì)菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理,這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌()A.接種環(huán)、手、培養(yǎng)基 B.高壓鍋、手、接種環(huán)C.培養(yǎng)基、手、接種環(huán) D.接種環(huán)、手、高壓鍋解析:高壓蒸汽用于培養(yǎng)基的滅菌,酒精用于手的消毒,火焰灼燒用于接種環(huán)的滅菌。答案:C7.下列操作與無菌技術(shù)無關(guān)的是()A.接種前用火焰灼燒接種環(huán)B.接種前用酒精棉球擦拭雙手C.將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.在酒精燈的火焰旁完成接種解析:接種用具、器皿、空氣中都充滿了微生物,都有污染的可能,必須嚴(yán)格地消毒、滅菌。A、B、D三項(xiàng)是實(shí)驗(yàn)操作過程中滅菌或防止雜菌污染的措施。將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)與無菌技術(shù)無關(guān)。答案:C8.下列有關(guān)平板劃線操作的敘述,錯(cuò)誤的是()A.在第二次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來源于菌液B.從第二次劃線開始,每次劃線前,灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種C.第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物D.劃線結(jié)束后,灼燒接種環(huán)能及時(shí)殺死接種環(huán)上的菌種,避免污染環(huán)境和感染操作者解析:在第二次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來源于第一次劃線的末端。答案:A9.將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基都放入37℃恒溫箱的目的是()A.對比觀察培養(yǎng)基有沒有被微生物利用B.對比分析培養(yǎng)基上是否生有雜菌C.沒必要放入未接種的培養(yǎng)基D.為了下次接種時(shí)再使用解析:分析培養(yǎng)基上是否生有雜菌常用的方法是將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基都放入37℃恒溫箱培養(yǎng),看未接種的培養(yǎng)基是否有菌落產(chǎn)生,若有菌落產(chǎn)生,則說明培養(yǎng)基上生有雜菌。答案:B10.做“酵母菌的純培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí),下列敘述錯(cuò)誤的是()A.接種時(shí)為了獲得單菌落,從第二次開始每次劃線前都要灼燒接種環(huán)B.倒平板時(shí),拔出錐形瓶棉塞后,應(yīng)將瓶口迅速通過火焰C.倒平板要在酒精燈火焰旁進(jìn)行,防止雜菌污染D.為了防止雜菌污染,接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后,應(yīng)趁熱快速蘸取菌液解析:從第二次開始每次劃線前灼燒接種環(huán)的目的是殺死接種環(huán)上的菌種,以達(dá)到菌種稀釋的目的,最后獲得單菌落;倒平板時(shí),拔出錐形瓶棉塞后,應(yīng)將瓶口迅速通過火焰,以防止雜菌污染;為了防止雜菌污染,倒平板要在酒精燈火焰旁進(jìn)行;接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后,應(yīng)該在火焰旁待接種環(huán)冷卻后再蘸取菌液,以免接種環(huán)因溫度過高而殺死菌種。答案:D二、綜合題11.某同學(xué)配制含瓊脂的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基后,對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,當(dāng)培養(yǎng)基溫度下降到50℃時(shí),在酒精燈火焰附近倒平板,待培養(yǎng)基冷卻至室溫,按表處理。將處理完畢的培養(yǎng)皿置于適宜溫度下培養(yǎng)2~3d,觀察每個(gè)培養(yǎng)皿中的菌落特征和數(shù)目。請思考回答下列問題。組別處理A打開培養(yǎng)皿蓋,距地面0.3m處暴露15minB打開培養(yǎng)皿蓋,距地面0.6m處暴露15minC打開培養(yǎng)皿蓋,距地面0.9m處暴露15minD打開培養(yǎng)皿蓋,距地面1.2m處暴露15minE不打開培養(yǎng)皿蓋(1)上述實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖?/p>
。若E組的培養(yǎng)基表面有菌落生長,說明。
(2)培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為微生物生長提供和。在酒精燈火焰附近進(jìn)行相關(guān)操作是為了。
(3)實(shí)驗(yàn)過程特別強(qiáng)調(diào)溫度控制,請簡要說明下列溫控措施的目的。①“待培養(yǎng)基冷卻至室溫”的目的有。
②“將處理完畢的培養(yǎng)皿置于適宜溫度下培養(yǎng)”的目的是。
(4)培養(yǎng)微生物時(shí)將培養(yǎng)皿倒置的目的是
。
實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,對使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行處理。
答案:(1)探究不同高度空氣中微生物的種類和數(shù)量培養(yǎng)基滅菌不合格(或受到雜菌污染)(2)碳源氮源避免周圍環(huán)境中微生物的污染(3)①使培養(yǎng)基凝固及防止培養(yǎng)基溫度過高殺死接種在其上的微生物②讓微生物在適宜的溫度下生長(繁殖)(4)防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上(污染培養(yǎng)基和破壞菌落)滅菌12.下表是某微
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