呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座

呼吸道病毒及檢驗(yàn)呼吸道病毒：是指主要以呼吸道為侵入門戶，引發(fā)呼吸道以及全身感染。臨床上急性呼吸感染中有90～95%是由這群毒引發(fā)。感染特點(diǎn)呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第1頁RNA病毒——正粘病毒科：流感病毒副粘病毒科：副流感病毒、呼吸道合胞病毒、

麻疹病毒、腮腺炎病毒；其它病毒如：風(fēng)疹病毒、冠狀病毒、鼻病毒等DNA病毒——腺病毒主要種類呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第2頁是指對人或一些動物紅細(xì)胞表面粘蛋白有親和性病毒。正、副粘病毒分別以其核酸是否分節(jié)段為標(biāo)準(zhǔn)，分節(jié)段者為正粘病毒，不分節(jié)段者為副粘病毒。

粘病毒（Orthomyxovirus）呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第3頁第一節(jié)流行性感冒病毒呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第4頁1918年西班牙流感呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第5頁6級甲型H1N1流感.4~5月全球發(fā)病人數(shù)：>2萬人截止.12，死亡人數(shù)>9000呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第6頁截至年2月28日，全國31個(gè)省份累計(jì)匯報(bào)甲型H1N1流感確診病例12.7萬例，死亡病例793例

呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第7頁流行性感冒病毒（influenzavirus）流感病毒是一個(gè)什么樣病毒？為何輕易引發(fā)流行??流感怎樣傳輸、有何癥狀？?怎樣進(jìn)行微生物學(xué)檢驗(yàn)？?怎樣防治這種疾?。?呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第8頁（一）形態(tài)與結(jié)構(gòu)

球形（80～120nm）絲狀、桿狀，長短不一一、生物學(xué)性狀形態(tài)呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第9頁分三部分關(guān)鍵核蛋白（NP）——衣殼包膜結(jié)構(gòu)：呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第10頁1、關(guān)鍵：

含RNA及RNA多聚酶

所以

易發(fā)生基因重組，造成基因編碼蛋白抗原發(fā)生變異而出現(xiàn)新亞型。

RNA分節(jié)段，7~8段特點(diǎn)呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第11頁

呈螺旋對稱

其抗原性穩(wěn)定，含有型特異性。

2、衣殼：核蛋白（NP）核蛋白呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第12頁

內(nèi)層：基質(zhì)蛋白（MP），分型依據(jù)。據(jù)NP和MP分型：A型—甲型流感病毒B型—乙型流感病毒C型—丙型流感病毒3、包膜

外層：脂質(zhì)雙層，起源于宿主細(xì)胞膜呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第13頁（1）血凝素(HemagglutininHA)：（柱形）凝集紅細(xì)胞—血凝現(xiàn)象，用于判定病毒吸附宿主細(xì)胞—與受體結(jié)合（侵入細(xì)胞關(guān)鍵）抗原性—對應(yīng)抗體，有中和作用

易變異（分亞型）（2）神經(jīng)氨酸酶（NeuraminidaseNA）：（蘑菇形）

參加病毒釋放，促進(jìn)病毒擴(kuò)散抗原性——非中和抗體

易變異（分亞型）呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第14頁

亞型（甲型流感病毒）

當(dāng)前已發(fā)覺HA有15種（H1-H15），NA有9種（N1-N9），全部亞型均可從禽、鳥類中分離到，但帶有病毒禽鳥未必會發(fā)病。人類流行亞型：主要是由H1、H2、H3和N1、N2幾個(gè)抗原組成。流感病毒傳輸路線呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第15頁

易變異

甲型HA、NA抗原性最易變異乙型和丙型流感病毒抗原性比較穩(wěn)定（二）為何流感病毒易引發(fā)流行？原因呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第16頁（1）甲型流感病毒抗原變異幅度小，屬于量變，可引發(fā)小規(guī)模流感流行，稱抗原漂移（Antigenicdrift）（2）若抗原變異幅度大，系質(zhì)變，形成新亞型，能夠引發(fā)大規(guī)模甚至世界性流感流行，稱抗原轉(zhuǎn)變(Antigenicshift)。為何抗原變異與流行親密相關(guān)？呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第17頁甲型流感病毒在不一樣年代抗原改變流行年代亞型

代表毒株*表面抗原HANA

1918~甲0(原甲型)H0N1A/puertoRico/8/341947~甲1(亞甲型)H1N1A/FM/1/471957~甲2(亞洲甲型)H2N2A/Singpore/1/571968~甲3(香港甲型)H3N2A/HongKong/1/681977~甲1

H1N1A/USSR/90/77

甲3

H3N2~甲型H1N1*：型/分離地點(diǎn)/編號/分離年份呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第18頁二、流感病毒致病性

主要是病人、隱性感染者、病禽傳染源傳輸路徑飛沫（主要）、接觸感染流行季節(jié)

多為冬春季呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第19頁發(fā)燒、畏寒咳嗽、咽痛全身酸痛、疲乏無力頭痛腹瀉、嘔吐（部分病人）流感癥狀重者繼發(fā)肺炎、呼吸衰竭、甚至死亡呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第20頁包含：體液免疫和細(xì)胞免疫中和抗體(抗－HA)：SlgA、IgG、IgM血清中抗體可維持10年，但僅對同型病毒有免疫力。免疫性呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第21頁三、微生物學(xué)檢驗(yàn)（一）分離培養(yǎng)與判定1、標(biāo)本采集和處理鼻腔洗液、鼻咽拭子、咽漱液、支氣管分泌物（接種前加入青霉素和鏈霉素）。時(shí)間：發(fā)病后3天內(nèi)（鼻咽分泌物病毒量達(dá)104-107/ml）；盡快送檢；低溫保留。

呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第22頁2、檢驗(yàn)程序標(biāo)本9~11日齡雞胚33~35℃，3d收獲羊水和尿液陽性陰性血凝抑制試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)盲傳3次MDCK細(xì)胞33~35℃，7~10d觀察CPE紅細(xì)胞吸附陽性陰性盲傳血凝抑制試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第23頁

（1）雞胚培養(yǎng)

首次分離：接種于雞胚羊膜腔內(nèi)傳代：接種尿囊腔2～4日后：取羊水、尿囊液做血凝試驗(yàn)，檢驗(yàn)有沒有病毒增殖。若試驗(yàn)為陰性，需在雞胚中盲目傳代三次后再試驗(yàn)。若血凝試驗(yàn)為陽性，可用已知流感病毒各型特異性抗體與新分離病毒進(jìn)行血凝抑制試驗(yàn)，判定型別。

3、檢驗(yàn)方法呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第24頁

（2）細(xì)胞培養(yǎng)

原代人胚腎細(xì)胞、猴腎細(xì)胞、MDCK細(xì)胞，觀察CPE。做血凝試驗(yàn)或紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)判定。

（3）動物分離培養(yǎng)

雪貂呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第25頁取病人急性期（發(fā)病3日內(nèi)）和恢復(fù)期（發(fā)病2～4周）雙份血清，一樣與已知各亞型流感病毒進(jìn)行血凝抑制試驗(yàn)或其它試驗(yàn)?；謴?fù)期血清抗體效價(jià)是急性期4倍或4倍以上，含有幫助診療意義。

其它試驗(yàn)：補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、酶免疫試驗(yàn)、固相放免等。（二）血清學(xué)試驗(yàn)呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第26頁（1）免疫熒光、免疫酶等方法檢測感染細(xì)胞或培養(yǎng)細(xì)胞中病毒抗原。敏感、快速。（2）分子雜交測病毒RNA：甲型（3）PCR法測病毒RNA（4）其它：免疫電鏡（三）快速診療呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第27頁四、怎樣防治流感？1、普通性預(yù)防：呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第28頁雙手要勤洗；打嚏掩口鼻居室常通風(fēng)；無事少聚集臟手勿觸口；吐痰包紙里感冒戴口罩；染疫要隔離呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第29頁制備疫苗必須與流行型別相同

2、接種流感疫苗：（最有效預(yù)防方法）要求禁忌癥雞蛋過敏史免疫缺點(diǎn)患病期間呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第30頁（1）抗病毒治療（2）合并細(xì)菌感染：抗生素3、治療：早期隔離治療呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第31頁小結(jié)1、流感病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)、變異與流行（掌握）2、流感傳染源、傳輸路徑（掌握）3、流感病毒微生物學(xué)檢驗(yàn)（掌握）4、流感防治標(biāo)準(zhǔn)（熟悉）思索題：請你對流感病毒各種微生物學(xué)檢驗(yàn)方法在臨床應(yīng)用價(jià)值分別做一評價(jià)。課后：注意查閱流感病毒相關(guān)研究進(jìn)展及流行情況呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第32頁流感病毒粘附細(xì)胞呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第33頁1997：禽流感然而呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第34頁抗-HA中和作用：阻止流感病毒感染細(xì)胞呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第35頁一、麻疹病毒二、腮腺炎病毒三、副流感病毒四、呼吸道合胞病毒第二節(jié)副粘病毒呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第36頁麻疹病毒（Measlesvirus）是引發(fā)麻疹病原體。麻疹是兒童最常見一個(gè)急性呼吸道傳染病。臨床上以發(fā)燒、上呼吸道炎癥、結(jié)膜炎、口腔粘膜斑及全身丘疹為特征。麻疹病毒

呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第37頁形態(tài)大致與流感病毒相同，為球形、絲狀等各種形態(tài)，直徑為140～180nm，長者可達(dá)270nm；結(jié)構(gòu)由內(nèi)向外為核衣殼和外面脂蛋白包膜兩部分，其核衣殼內(nèi)核酸為單股負(fù)鏈RNA，不分節(jié)段，不易發(fā)生重組；包膜結(jié)構(gòu)與流感病毒相同，膜上也有兩種糖蛋白剌突：一個(gè)稱為H蛋白，能凝集猴、狒狒等動物紅細(xì)胞；另一個(gè)稱為F蛋白。一、生物學(xué)性狀呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第38頁麻疹病毒無神經(jīng)氨酸酶，該病毒只有一個(gè)血清型。在人胚腎、人羊膜細(xì)胞及Hela、Vero等各種傳代細(xì)胞中可增殖，出現(xiàn)細(xì)胞病變，形成多核巨細(xì)胞，胞核胞漿中可形成嗜酸性包涵體。呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第39頁麻疹是一個(gè)經(jīng)典全身出疹急性傳染病。其傳染性強(qiáng)、易感接觸后90%以上都發(fā)生麻疹，兒童首次感染幾乎都發(fā)病，傳染源是麻疹患兒。病毒呼吸道上皮細(xì)胞內(nèi)血流全身淋巴組織單核吞噬細(xì)胞第一次病毒血癥發(fā)燒、咳嗽、眼結(jié)膜充血、口腔粘膜斑等第二次病毒血癥損傷血管內(nèi)皮，使全身相繼出現(xiàn)紅疹中樞N.S（亞急性硬化性全腦炎）極少數(shù)9～12天3～5天二、致病性與免疫性呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第40頁麻疹病毒感染免疫力持久，普通不會出現(xiàn)二次感染。免疫性呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第41頁麻疹因臨床癥狀經(jīng)典，普通無需作微生物學(xué)檢驗(yàn)。六個(gè)月以內(nèi)嬰兒有被動免疫力，但隨年紀(jì)增加逐步消失，易感性增加，給6個(gè)月～1歲兒童普遍接種麻疹減毒活疫苗是預(yù)防麻疹最好方法。給有接觸麻疹患兒病史體弱易感兒注射丙種球蛋白或健康成人全血，有預(yù)防發(fā)病或減輕癥狀作用。三、微生物學(xué)診療和預(yù)防呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第42頁病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)致病特異預(yù)防免疫力麻疹病毒球形；有包膜，RNA麻疹：柯氏斑；全身丘疹，高熱、咳嗽等亞急性硬化性全腦炎減毒活疫苗丙種球蛋白牢靠腮腺炎V球形；有包膜，RNA腮腺炎并發(fā)：睪丸炎、卵巢炎減毒活疫苗牢靠風(fēng)疹病毒球形；有包膜，RNA風(fēng)疹：先有上呼吸道癥狀；隨之出現(xiàn)斑丘疹先天性風(fēng)疹綜合征風(fēng)疹疫苗牢靠其它呼吸道病毒呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第43頁經(jīng)典冠狀病毒與SARS病毒比較

冠狀病毒：1965年，Tyrrell首次用人胚器官培養(yǎng)成功。1968年正式命名，1975年建立冠狀病毒科。

形態(tài)結(jié)構(gòu)：為單股正鏈RNA病毒致病：豬、牛、狗等動物感染后可引發(fā)腹瀉，人和禽類主要經(jīng)過呼吸道感染，只侵犯上呼吸道，引發(fā)普通感冒，爾偶引發(fā)腹瀉。SARS病毒呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第44頁香港衛(wèi)生署

嚴(yán)重呼吸道癥候群(SARS)病徵出現(xiàn)率呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第45頁

參考資料：

《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》周正任

主編

《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》陸德源主編

《Nature》

網(wǎng)站：

/hardin/md/ej.html

/sites/entrez呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第46頁禽流感病毒近年來發(fā)覺禽流感病毒也可傳染人，由禽類傳染人禽流感病毒有三種：甲型H5N1、甲型H7N7及甲型H9N2，其中H5N1型為高致病性禽流感病毒。甲型流感病毒除了感染人外，還可引發(fā)禽、豬等各種動物感染，禽流感病毒即屬這類病毒。呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第47頁禽流感病毒為單負(fù)鏈RNA病毒，有包膜，表面有刺突。形態(tài)呈球形、桿狀或絲狀。

1、形態(tài)結(jié)構(gòu)與變異性

呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第48頁禽流感病毒在電鏡下形態(tài)，左圖中染成黃色即為禽流感病毒呼吸道病毒和檢驗(yàn)專家講座第49頁假如已造成亞洲65人死亡H5N1型禽流感病毒與人類流感病毒發(fā)生基因重組，從而變異為能在人際間傳輸病毒，后果將會怎樣？WHO負(fù)責(zé)公共醫(yī)療教授預(yù)測，到時(shí)全球?qū)⒂?00萬至1.5億人被禽流感奪去性命