流式細(xì)胞儀的應(yīng)用

流式細(xì)胞儀的應(yīng)用姓名：學(xué)號：2002015002單位：研究生二隊(duì)專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)對于一個(gè)畢業(yè)以后就從來沒有進(jìn)過實(shí)驗(yàn)室使用過各種尖端儀器的研究生來說，儀器分析這個(gè)課程對我來說顯而易見是重要而又陌生的，就像一個(gè)小孩到了游樂園一樣，每一種儀器都很吸引我，好奇心也驅(qū)使我特別想盡快操作一下這些儀器，唯一的遺憾是本課程課時(shí)太少，不能把中心實(shí)驗(yàn)室的所有儀器都了解一遍。12月4號學(xué)習(xí)了流式細(xì)胞儀的原理與基本應(yīng)用方法，雖然沒有操作過，但是我想對我在本次課上的所學(xué)的內(nèi)容做一下總結(jié)并談?wù)剬α魇郊?xì)胞儀的粗淺認(rèn)識，由于沒有實(shí)際基礎(chǔ)，不對的地方請老師多多諒解并糾正。流式細(xì)胞儀（Flowcytometry）是對細(xì)胞進(jìn)行分選和快速測的儀器。它可以將分散在液體中的各個(gè)細(xì)胞的物理性質(zhì)，生物化學(xué)特征等參數(shù)進(jìn)行快速測量并根據(jù)所得參數(shù)范圍對目的細(xì)胞進(jìn)行分選并存貯。這些參數(shù)可以包括每一個(gè)細(xì)胞的體積、細(xì)胞凋亡及所包含的可標(biāo)記的蛋白質(zhì)或者核酸的快速定量等。與傳統(tǒng)的細(xì)胞測量方法（免疫熒光和免疫印跡）相比，其優(yōu)缺點(diǎn)可總結(jié)如下表：流式細(xì)胞儀免疫熒光免疫印跡優(yōu)點(diǎn)明確陽性細(xì)胞比例同時(shí)檢測多種蛋白表達(dá)蛋白定量容易速度快，靈敏度高陽性細(xì)胞的相對數(shù)量明確組織和細(xì)胞內(nèi)定為檢測整體表達(dá)情況蛋白定量較容易缺點(diǎn)不能在組織和細(xì)胞內(nèi)定位蛋白定量困難僅檢測局部表達(dá)情況1、不能組織或細(xì)胞內(nèi)定位2、不能確定陽性細(xì)胞比例由上表可以看出，與傳統(tǒng)的細(xì)胞檢測方法相比，流式細(xì)胞儀具有無可比擬的技術(shù)優(yōu)勢和應(yīng)用前景，甚至可以說流失細(xì)胞術(shù)完全能夠推動醫(yī)學(xué)科研的發(fā)展，是一個(gè)偉大的發(fā)明。流式細(xì)胞儀的原理：將待測的細(xì)胞樣品制作成單個(gè)細(xì)胞的混懸液，根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶π枰獧z測和分選的細(xì)胞進(jìn)行特異性熒光染色并放入樣品管，在清潔氣體的壓力下進(jìn)入流動室。流動室內(nèi)含有鞘液，鞘液可以約束樣品使之處在噴嘴中心以提高測量精度，并防止樣品靠近噴孔壁以導(dǎo)致堵塞。在這種作用下細(xì)胞排成單列一個(gè)一個(gè)地在鞘液包裹下被噴嘴噴出形成液體流柱。流柱流經(jīng)高度聚焦的激光束時(shí)被特異染色的細(xì)胞被激發(fā)而產(chǎn)生特異性熒光，熒光被檢測系統(tǒng)檢測并轉(zhuǎn)變成電信號進(jìn)入計(jì)算機(jī)分析系統(tǒng)而得到細(xì)胞的物理、生物特性。流式細(xì)胞儀的分選功能是由細(xì)胞分選器來完成的：由噴嘴射出的液柱被分割成一連串的小水滴，根據(jù)選定的某個(gè)參數(shù)由邏輯電路判明是否將被分選，而后由充電電路對選定細(xì)胞液滴充電，帶電液滴攜帶細(xì)胞通過靜電場而發(fā)生偏轉(zhuǎn)，落入收集器中；其它液體被當(dāng)作廢液抽吸掉。通過原理我們也可以很容易的得到流式細(xì)胞儀的基本結(jié)構(gòu)和功能：1、液流系統(tǒng)。流動室由樣品管、鞘液管和噴嘴等組成，常用光學(xué)玻璃、石英等透明、穩(wěn)定的材料制作。設(shè)計(jì)和制作均很精細(xì)，是液流系統(tǒng)的心臟。樣品管貯放樣品，單個(gè)細(xì)胞懸液在液流壓力作用下從樣品管射出；鞘液由鞘液管從四周流向噴孔，包圍在樣品外周后從噴嘴射出。為了保證液流是穩(wěn)液，一般限制液流速度υ<10m/s。由于鞘液的作用，被檢測細(xì)胞被限制在液流的軸線上。流動室上裝有壓電晶體，受到振蕩信號可發(fā)生振動。流式細(xì)胞術(shù)的發(fā)明、改進(jìn)，流式細(xì)胞儀的研制、改進(jìn)的每一步都凝聚了人類最新的科技和智慧，凝聚了生物學(xué)、光學(xué)、流體力學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、分子生物學(xué)、計(jì)算機(jī)科學(xué)等眾多科技領(lǐng)域的先進(jìn)技術(shù)。我相信，在結(jié)合了單克隆抗體技術(shù)、定量細(xì)胞化學(xué)，定量熒光細(xì)胞化學(xué)后，