GB-T 40252-2021 美澳型核果褐腐病菌活性檢測(cè)方法

美澳型核果褐腐病菌活性檢測(cè)方法ViabilitytestofMoniliniafruticola(G.W國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)本文件描述了應(yīng)用普通熒光顯微鏡或激光掃描共聚焦顯微鏡對(duì)美澳型核果褐腐病菌[Monilin-分生孢子活性conidialviabliityles),核盤菌科(Sclerotiniaceae),鏈核盤菌屬(Monilinia)。分別應(yīng)用二乙酸熒光素(FlouresceinDiacetate,FDA)和碘化丙啶(PropidiumIodide,PI)熒光染料26.2試劑為10mg·mL-1的母液，置于棕色瓶4℃避光保存。使用前用丙酮稀釋，配置成馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA):200g去皮馬鈴薯切成小方塊，加入1000mL自來(lái)水，煮沸15min,用四層紗布過(guò)濾得到濾液，濾刮取寄主癥狀病征的分生孢子裝入到有無(wú)菌水的離心管中，配制成終濃度為每微升含10個(gè)~3PI染色檢測(cè)：將熒光光路打開(kāi)，設(shè)置熒光通道的激發(fā)波長(zhǎng)534存查樣品應(yīng)視樣品的狀態(tài)采用相應(yīng)的保存方式，妥善保存6個(gè)月。如發(fā)現(xiàn)具有活性的美澳型核果理。樣品保存方法應(yīng)符合SN/T2589的規(guī)定。5(資料性)A.1主要寄主ca),病菌還可在木瓜屬(Chaenomeles)、山楂屬(CrataeA.2為害癥狀美澳型核果褐腐病菌為害癥狀見(jiàn)圖A.1。A.3菌落特征菌株在PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)菌落形態(tài)見(jiàn)圖A.2。6圖A.2菌株在PDA上生長(zhǎng)菌落形態(tài)A.4分生孢子形態(tài)學(xué)特征透明，聚集時(shí)為灰黃色。分生孢子梗較短，分枝或不分7(資料性)普通熒光顯微鏡對(duì)美澳型核果褐腐病菌孢子染色觀察結(jié)果圖普通熒光顯微鏡觀察FDA對(duì)美澳型核果褐腐病菌孢子染色效果見(jiàn)圖B.1。圖B.1普通熒光顯微鏡觀察FDA對(duì)美澳型核果褐腐病菌孢子染色效果圖普通熒光顯微鏡觀察PI對(duì)美澳型核果褐腐病菌孢子染色效果見(jiàn)圖B.2。8圖B.2普通熒光顯微鏡觀察PI對(duì)美澳型核果褐腐病菌孢子染色效果圖9激光共聚焦顯微鏡觀察FDA對(duì)美澳型核果褐腐病菌孢子染色效果見(jiàn)圖C.1。激光共聚焦顯微鏡觀察PI對(duì)美澳型核果褐腐病菌孢子染色效果見(jiàn)圖C.2。圖C.2激光共聚焦顯微鏡觀察PI對(duì)美澳型核果褐腐病菌孢子染色效果圖2005,24(5):554-557.2016,35(9):1099-1105.2009,28(2):236-243.[9]FanJY,GuoLY,Jian-PingXU,etal..GeneticDiversityofPopμLationsofMoniliniafructicola(Fungi,Ascomycota,Helotiales)fromChina[J].JournalofEukaryoticMicrobiology,2010,57(2):206-212.[10]HuMJ,ChenY,ChenSN,etal..FirstreportofbrownrotofpeachcausedbyMonilin-iafructicolainsoutheasternChina.[J].PlantDis