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DB21DB21/T2743—2017動(dòng)物源細(xì)菌抗菌藥物敏感性檢測(cè)Bacterialantimicrobialsusceptibilitytestingofanimalorigin遼寧省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布IDB21/T2743—2017本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:遼寧省獸藥飼料畜產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心、中國(guó)獸請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些1DB21/T2743—2017本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了動(dòng)物源細(xì)菌常見(jiàn)藥物的微量肉湯稀釋法藥物敏感性試驗(yàn)所需的試劑和材料、儀器設(shè)本標(biāo)準(zhǔn)適用于動(dòng)物源非苛氧菌常見(jiàn)抗菌藥物的微量肉湯稀釋法件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)試劑和材料稱(chēng)取8.50g(精確到0.01g)分析純氯化鈉,加入1L蒸餾水溶解后121℃2DB21/T2743—2017應(yīng)選用來(lái)自國(guó)家級(jí)微生物菌種保藏中心的標(biāo)準(zhǔn)菌株或具有資質(zhì)的菌種保藏機(jī)構(gòu)提供的分類(lèi)明確的5.3無(wú)菌操作臺(tái):可滿足無(wú)菌要求的生物安全柜、超5.4多道移液器:量程20~200μL、100~1000μ動(dòng)物源細(xì)菌抗菌藥物敏感性檢測(cè)動(dòng)物源細(xì)菌抗菌藥物敏感性檢測(cè)測(cè)試菌株菌落培養(yǎng)質(zhì)控菌株測(cè)試菌株菌落培養(yǎng)質(zhì)控菌株抗菌藥物工作溶液制備菌懸液制備菌懸液制備36±l℃培養(yǎng)36±l℃培養(yǎng)判定結(jié)果3DB21/T2743—2017用接種環(huán)挑取瓊脂平板上培養(yǎng)16~18小時(shí)的3~5個(gè)單菌落,用0.85%無(wú)菌生理鹽水或M-H肉用于制備抗菌藥物儲(chǔ)備液的溶劑和稀釋液,除蒸餾水可高壓滅菌外,其余應(yīng)采用0.22μm微孔濾膜將加有菌液和抗菌藥物的板,置36±1℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)16~1在質(zhì)控菌株的最低抑菌濃度符合規(guī)定范圍的前提下,按判斷標(biāo)準(zhǔn)判斷被檢菌株的敏感性-敏感(S)、中度敏感(I)或耐藥(R)。對(duì)于只給出敏感判斷標(biāo)4DB21/T2743—2017考美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)CLSI的M07-A10、M37-A3和M45-A3的要求進(jìn)行質(zhì)量控制,按CLSI的M100-S26和M31-A3的臨床折點(diǎn)判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行耐藥性判讀和結(jié)果分5DB21/T2743—2017除非特殊注明,所用試劑均為分析純;實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符A.1瓊脂培養(yǎng)基A.1.1成分A.1.2制法熱煮沸,使瓊脂溶化。分裝三角瓶,121℃高壓滅菌20min。有特殊生長(zhǎng)要求的細(xì)菌應(yīng)添加輔助生長(zhǎng)試A.2Mueller-Hinton肉湯(M-H肉A.2.1成分A.2.2制法121℃高壓滅菌15min。有特殊生長(zhǎng)要求的細(xì)
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