【淺談微生物實驗室培養(yǎng)基的質量保證體系3700字】

淺談微生物實驗室培養(yǎng)基的質量保證體系目錄TOC\o"1-2"\h\u9590淺談微生物實驗室培養(yǎng)基的質量保證體系 19424關鍵詞：培養(yǎng)基質量優(yōu)劣；微生物檢驗；培養(yǎng)基驗收；質量保證體系 1305321培養(yǎng)基質量保證的重要性 2244652培養(yǎng)基的分類 2215363培養(yǎng)基質量控制的相關標準 2186224培養(yǎng)基的質量管理 392044.1培養(yǎng)基的采購與驗收 359754.2培養(yǎng)基的稱重、溶解與分裝 4239494.3培養(yǎng)基的滅菌 4234164.4培養(yǎng)基PH監(jiān)測 46910結語 528618參考文獻 5摘要：在實驗階段，微生物檢驗結果的準確性通常都會受到培養(yǎng)基質量、保存方式、使用方式的影響。所以在檢驗過程中確保嚴格按照培養(yǎng)基使用注意事項以及在驗收時把好質量關尤為重要。筆者將根據(jù)相關文獻的理論以及自身多年工作經(jīng)驗相結合，來談談微生物實驗室使用培養(yǎng)基的時的質量保證體系。也就是要根據(jù)實驗室實際工作需要來選擇適合的培養(yǎng)基質量，對這些質量標準和微生物指標進行確定，以確定質量驗收標準。與此同時，監(jiān)測培養(yǎng)基的重量、溶解與分裝、滅菌及PH值，按標準數(shù)值控制培養(yǎng)基質量，這些都是保障最終檢驗結果準確性的手段。關鍵詞：培養(yǎng)基質量優(yōu)劣；微生物檢驗；培養(yǎng)基驗收；質量保證體系現(xiàn)代微生物檢驗技術已經(jīng)有了長足的發(fā)展，免疫學、分子生物學等新檢驗技術為微生物檢驗帶來了新的檢驗方向，這些新技術的應用已經(jīng)將鑒定時間盡可能的縮短，還大大提高了鑒定的準確度和能力?？墒?，在常規(guī)的微生物檢驗法中還是需要使用到培養(yǎng)基，培養(yǎng)基仍然還是現(xiàn)代微生物檢驗的基礎材料。培養(yǎng)基有液體、半固體、固體三種形態(tài)，可提取自天然環(huán)境下，也可采取合成形式，顧名思義是為微生物繁殖、保存生存活力、鑒定提供環(huán)境支持的一種物質[1]。由于微生物檢驗結果的準確性通常都會受培養(yǎng)基質量、保存方式、使用方式的影響。因此，筆者將根據(jù)相關文獻的理論以及自身多年工作經(jīng)驗相結合，來談談微生物實驗室使用培養(yǎng)基的時的質量保證體系。1培養(yǎng)基質量保證的重要性生物科技是目前我國科技發(fā)展工作的重中之重。微生物檢驗工作又切實的影響著國家的科技發(fā)展進程，因此關注微生物檢驗工作是為了提高科技發(fā)展的效率。特別是當今社會，食品藥品安全問題社會關注度越來越高，而生產(chǎn)食品藥品的各個環(huán)節(jié)都容易受到微生物影響，產(chǎn)生產(chǎn)品質量問題[2]。因此微生物檢驗對于保障食藥品衛(wèi)生安全尤為重要，隨著國家以及民眾對食藥品安全問題的重視，各大相關企業(yè)也非常重視微生物檢驗。目前國家對相關食藥品行業(yè)均有國家檢驗標準，可是，由于食藥品的特殊性質，往往在實際生活中，這些檢驗結果常常出現(xiàn)偏差，使得食藥企業(yè)的生產(chǎn)環(huán)節(jié)沒有得到準確監(jiān)督。因此筆者認為，我們應當關注微生物生物檢驗培養(yǎng)基質量保證體系的研究工作，如此才能制定出對食藥品衛(wèi)生安全有意義的標準體系。培養(yǎng)基的質量形態(tài)保證了微生物繁殖的物質基礎，因此如何制備使用培養(yǎng)基是微生物實驗室在進行生物檢驗前的重中之重?？梢哉f，微生物鑒定結果完全取決于培養(yǎng)基質量優(yōu)劣。從培養(yǎng)基的種類上來細分，按使用用途分為運輸型、增菌型、鑒別型等等；按合成方式分為純化學型、非純化學型；按制作方法分為即用型、實驗室制作型等等[3]。由于培養(yǎng)基的種類繁多，來源不同，制備方法不同，因此有關培養(yǎng)基的質量控制標準和方法都不相同。而有關培養(yǎng)基的質量監(jiān)管卻比較薄弱，因此這就需要微生物實驗室在驗收時應采用技術性驗收標準，把控好培養(yǎng)基的質量優(yōu)劣。2培養(yǎng)基的分類在國家規(guī)定的微生物檢驗標準中，涉及到的培養(yǎng)基[4],通常分為三大類型。第一類為現(xiàn)場配制現(xiàn)場使用的培養(yǎng)基，這種類型的培養(yǎng)基大多可見為VRBA/SC/BS/XLD等，只需要加熱溶解后或煮沸后就可使用的；第二類是無需額外添加劑的培養(yǎng)基，這種只需要執(zhí)行稱重、溶解、滅菌三個程序后就可以直接使用，常見于PCA/LST/NA等等；第三類是需要添加某種添加劑的培養(yǎng)基，這類又分為2種，一種是可以滅菌后直接添加添加劑，屬于基礎培養(yǎng)基，如血平板；第二種是添加劑也需要滅菌，兩者都滅菌后方可配合在一起使用的培養(yǎng)基，如李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基等。3培養(yǎng)基質量控制的相關標準培養(yǎng)基質量優(yōu)劣直接影響著檢驗結果，因此我國現(xiàn)行使用的培養(yǎng)基質控標準主要為GB4789.28-2013《微生物學檢驗培養(yǎng)基和試劑的質量要求》[1],也有行業(yè)標準SN/T1538.1-2016《培養(yǎng)基制備指南第1部分:實驗室培養(yǎng)基制備質量保證通則》[5]和SN/T1538.2-2016《培養(yǎng)基制備指南第2部分:培養(yǎng)基性能測試實用指南》[6]。國外標準主要為ISO11133-2014《Microbiologyoffood,animalfeedandwater-Preparation,production,storageandperformancetestingofculturemedia》[7]。具體使用何種培養(yǎng)基質控標準，則是實驗室根據(jù)實際微生物實驗需要來選擇的。4培養(yǎng)基的質量管理4.1培養(yǎng)基的采購與驗收目前，大多數(shù)的微生物實驗都會選用市面上制成的商業(yè)化合成培養(yǎng)基，既方便又快捷，但某些特殊實驗過程則根據(jù)需要自行采購特殊培養(yǎng)基。那么商業(yè)化培養(yǎng)基有哪些優(yōu)缺點呢？先看看優(yōu)點：①商業(yè)化合成培養(yǎng)基無需配制，直接使用，節(jié)約了實驗人員的時間；②在配制過程中容易受到污染，而商業(yè)化合成培養(yǎng)基無需配制，可以避免這一缺點；③操作誤差較小?？墒怯捎谑袌霰O(jiān)管薄弱等問題導致了商業(yè)化合成培養(yǎng)基的質量參差不齊，實驗結果差異較大。所以在采購時一定要注意生產(chǎn)廠家的質量管理體系認證、口碑、品牌、售后保障等細節(jié)，選購有質量保證的培養(yǎng)基，且驗收時應該嚴格按照培養(yǎng)基驗收標準來驗收，才能確保實驗結果的準確性。驗收標準應該是通過技術性驗收來確定的統(tǒng)一標準，也就是說必須由實驗人員在實驗室認真核驗驗收，并記錄每一批次的培養(yǎng)基數(shù)量、名稱、批號、有效日期等，對相關質檢報告進行實驗查驗，確定每種培養(yǎng)基都能達到理想化指標及微生物性能測量指標，然后才可以入庫保存。每一批次的培養(yǎng)基在正式使用前都需要進行理化指標測試和性能指標測試，以此來確保符合使用標準。（1）理化指標測試在這一測試環(huán)節(jié)中需要檢測培養(yǎng)基的pH值、顏色、澄清度以及穩(wěn)定性等，檢測結果與廠家提供的質檢標準相對比，如果沒有問題，說明廠家在生產(chǎn)環(huán)節(jié)、生產(chǎn)工藝方面把握比較好。（2）性能指標測試微生物實驗的基本生物培養(yǎng)物質就是培養(yǎng)基，培養(yǎng)基內不可以有除了實驗對象以外的其他物質存活，才能確保最終實驗結果的準確性。那么這就要求工作人員在正式使用該批次的培養(yǎng)基之前要檢測培養(yǎng)基的生長率、選擇性和特異性。生長率也就是實驗對象的存活率，培養(yǎng)基對這種實驗對象的促進生長率，要保障微生物在培養(yǎng)基中長期存活和繁殖以便日后的觀察和進一步實驗?？刹扇《糠ā攵糠?、定性法來控制培養(yǎng)基的質量。4.2培養(yǎng)基的稱重、溶解與分裝培養(yǎng)基溶解前需要混合定量的水，再對混合液加熱溶解，這個過程中需要不停攪拌，以便培養(yǎng)基的分散溶解，以防培養(yǎng)基黏在容器底部。如果微生物實驗中培養(yǎng)基含有瓊脂，那么還需要將培養(yǎng)基在實驗前浸泡一定時間。稱量培養(yǎng)基時除了要使用專用容器和量勺，避免與其他物質發(fā)生交叉感染，還要再干燥場所進行，避免培養(yǎng)基受潮，包括容器與量勺也要保持潔凈干燥。分裝培養(yǎng)基時最好選擇玻璃材質，避免金屬容器釋放金屬離子對微生物產(chǎn)生影響，容器的容量要選擇其自身體積5倍的容器盛裝[8]。4.3培養(yǎng)基的滅菌培養(yǎng)基滅菌是質控工作的核心，通常采用干熱滅菌和濕熱滅菌兩種方式。干熱滅菌是將培養(yǎng)基仔細包裝后放入電烘箱，設置溫度為160-170°C，滅菌時長為1-2小時，該滅菌原理是通過干燥高溫空氣對微生物細菌進行徹底滅殺。濕熱滅菌法是使用沸水煮滅菌，或者水蒸汽進行滅菌，通常是把培養(yǎng)基置于高溫高壓的水蒸氣之中進行活菌滅殺。兩種方法相對來說，濕熱滅菌法的穿透滅菌效果比干熱滅菌法效果更好，因此更多的是采用濕熱滅菌法來對培養(yǎng)基滅菌，那么在完成滅菌環(huán)節(jié)后，還需要使用滅菌指示卡來檢測滅菌效果[9]。4.4培養(yǎng)基PH監(jiān)測微生物生長繁殖都需要適宜的pH值，因此在滅菌環(huán)節(jié)之后還要對培養(yǎng)基內的pH值進行檢測，調整合適的pH值環(huán)境，方法是在滅菌后采用水浴鍋保溫，水位高于培養(yǎng)基液面，要使培養(yǎng)基迅速冷卻到適宜溫度，防止培養(yǎng)基營養(yǎng)成分流失，然后取出培養(yǎng)基自然降溫到40度左右。然后在培養(yǎng)基冷卻到47度左右時加入補充物質，這時的補充物質可能是有毒物質，應當提前預防配置溶液。某些環(huán)境下，抗生素需要冷凍保存，解凍后再冷凍就會降低活性，這時就需要補充活性物質。如果是在平板器皿中培養(yǎng)基，其厚度月2mm，平穩(wěn)放置，使瓊脂凝固。結語培養(yǎng)基質量的優(yōu)劣影響著微生物鑒定結果、培養(yǎng)繁殖、分離等等。因此一定要確保培養(yǎng)基的質量符合質量保證體系標準。除了生產(chǎn)環(huán)節(jié)，合適的制備方法、儲存方式也是保障這一標準的前提條件。因此，微生物實驗室應當在日常采購驗收過程中，嚴格遵循實驗室培養(yǎng)基質量保證體系，加強質量控制環(huán)節(jié)的監(jiān)督，規(guī)范日常使用過程，可持續(xù)的提升培養(yǎng)基質控水平。參考文獻[1]GB4789.28-2013食藥品安全國家標準微生物學檢驗培養(yǎng)基和試劑的質量要求[S].GB4789.28-2013Nationalfoodsafetystandard-Foodmicrobiologicalexamination-Qualityrequirementsofmediumandreagent[S].[2]吳鑫.10種中藥飲片微生物限度檢查方法的建立及污染的研究[D].浙江工業(yè)大學，2017.[3]張新秀.淺談微生物檢驗培養(yǎng)基的質量控制方法[J].醫(yī)學信息（上旬刊），2011，24（2）：864-865.[4]SN/T1538.1-2016培養(yǎng)基制備指南第1部分:實驗室培養(yǎng)基制備質量保證通則[S].[5]SN/T1538.1-2016Guidelinesonpreparationandproductionofculturemedia-Part1:Generalguidelinesonqualityassuranceforthepreparationofculturemediainthelaboratory[S].[6]SN/T1538.2-2016食藥品培養(yǎng)基制備指南第2部分:培養(yǎng)基性能測試實用指南[S].[7]SN/T1538.2-2016Guidelinesonprep