云南省江川第二中學(xué)2025屆高三下學(xué)期聯(lián)考生物試題含解析

云南省江川第二中學(xué)2025屆高三下學(xué)期聯(lián)考生物試題注意事項：1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．隨著科學(xué)的發(fā)展和人們對生命科學(xué)的深入探索，生物科學(xué)技術(shù)會為人類的繁榮進步作出更大的貢獻。下列關(guān)于生物科學(xué)技術(shù)的有關(guān)敘述，正確的是（）A．在植物體細胞雜交中，可采用質(zhì)壁分離實驗檢測制備的原生質(zhì)體的活性情況B．在生產(chǎn)單克隆抗體的過程中，不需要考慮B淋巴細胞和骨髓瘤細胞之間的免疫排斥C．利用動物體細胞核移植的方法得到克隆動物是培育新物種的一種方式D．設(shè)計試管嬰兒涉及體內(nèi)受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)2．下列有關(guān)細胞呼吸原理的應(yīng)用分析有錯誤的是（）A．種在湖邊的玉米，長期被水淹，生長不好，其原因是細胞有氧呼吸受阻B．植物不能長期忍受無氧呼吸，其原因是無氧呼吸產(chǎn)生的乳酸對細胞有毒害作用C．人體成熟紅細胞只能進行無氧呼吸，分解葡萄糖，產(chǎn)生乳酸，而獲取能量D．人劇烈運動后，會感到肌肉酸痛，是因為肌細胞無氧呼吸產(chǎn)生的乳酸積累導(dǎo)致3．如圖為某細胞膜結(jié)構(gòu)，下列說法正確的是（）A．實驗室常用雞、豬的成熟紅細胞，放在清水中漲破后，可通過差速離心的方法收集到較為純凈的細胞膜B．細胞間的識別與①有關(guān)，細胞癌變后①含量增加C．電子顯微鏡下，細胞膜呈現(xiàn)亮-暗-亮三層，說明細胞膜由蛋白質(zhì)-脂質(zhì)-蛋白質(zhì)三層組成D．如果圖示為紅細胞膜，則O2的運輸方向是A→B或B→A；如果圖示為肝細胞膜，則CO2的運輸方向只有B→A4．下列有關(guān)“基本骨架”或“骨架”的敘述，錯誤的是A．DNA分子中的核糖和磷酸交替連接排在外側(cè)構(gòu)成基本骨架B．每一個單體都以若干個相連的碳原子構(gòu)成的碳鏈為基本骨架C．生物膜的流動鑲嵌模型認(rèn)為磷脂雙分子層構(gòu)成了膜的基本骨架D．真核細胞中有維持細胞形態(tài)保持細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)有序性的細胞骨架5．在人和動物體內(nèi)由特殊腺體和細胞分泌的物質(zhì)，能起到化學(xué)信號的作用。請根據(jù)圖分析（圖中A代表下丘腦神經(jīng)細胞，B代表垂體細胞，D代表血管），下列說法正確的是()A．A分泌的物質(zhì)作用于B，進而提高機體耗氧率和興奮性，則A分泌的物質(zhì)名稱是促甲狀腺激素B．若A分泌的物質(zhì)進入血液后，最終調(diào)節(jié)C細胞對水的重吸收，則A分泌的物質(zhì)名稱是抗利尿激素C．E作用于B，對應(yīng)的E細胞末端處發(fā)生的信號變化電信號→化學(xué)信號→電信號D．如果A突觸小體釋放的遞質(zhì)與突觸后膜結(jié)合，只可導(dǎo)致突觸后膜神經(jīng)元產(chǎn)生興奮6．下列關(guān)于生命活動變化關(guān)系的描述，正確的是A．細胞體積增大，與外界物質(zhì)交換效率提高B．細胞液濃度增大，植物細胞吸水能力減弱C．生長素濃度升高，植物細胞生長速度加快D．體內(nèi)血漿滲透壓降低，抗利尿激素釋放減少7．下圖是吞噬細胞殺滅細菌的示意圖，圖中溶酶體含有多種水解酶，它是細胞內(nèi)的“酶倉庫”。下列說法正確的是（）A．圖中①③過程的完成不穿膜，也不消耗能量B．圖中①～③過程既屬于非特異性免疫，也屬于特異性免疫C．溶酶體中為酸性水解酶，細胞質(zhì)中近中性，細胞質(zhì)中的H+進入溶酶體是主動運輸D．溶酶體內(nèi)的酶為胞內(nèi)酶，是由細胞質(zhì)中的游離核糖體合成8．（10分）阿爾茨海默病(AD)是一種神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，大多進入老年后發(fā)病。AD發(fā)生的主要原因是位于21號染色體上的某個基因(T/t)發(fā)生突變。某家族的AD遺傳系譜圖如圖所示，其中，Ⅲ－7是一名女性，目前表現(xiàn)型未知。對下列系譜圖的分析中不再考慮有任何變異的發(fā)生，下列說法錯誤的是（）A．AD的遺傳方式是常染色體顯性遺傳，Ⅱ－5的基因型是TT或TtB．若Ⅱ－5為純合子，Ⅲ－7一定會攜帶AD致病基因C．若Ⅲ－7已懷孕（與一正常男性結(jié)婚），她生出一個患病男孩的概率是1/3D．用Ⅲ－7與一名家族中無AD遺傳的健康男性結(jié)婚，在備孕前不需要進行遺傳咨詢二、非選擇題9．（10分）艾滋?。ˋIDS）是目前威脅人類生命的重要疾病之一，能導(dǎo)致艾滋病的HIV病毒是一種球形的RNA病毒。HIV最初侵入人體時，人的免疫系統(tǒng)可以摧毀大多數(shù)病毒，接著少數(shù)HIV在體內(nèi)潛伏下來，經(jīng)過2～10年的潛伏期，發(fā)展為艾滋病。下圖甲簡單表示HIV的化學(xué)組成，圖乙表示HIV感染人體后，體液中HIV濃度和人體內(nèi)主要的免疫細胞——T細胞的濃度變化過程。請據(jù)圖回答：（1）圖甲中小分子b是指_____，②過程所需的酶主要是_____。（2）圖乙中表示HIV濃度變化的曲線是_________。在曲線Ⅱ中ED段呈上升狀態(tài)的原因是_________，曲線Ⅰ中的BC段中，效應(yīng)T細胞作用于_____細胞，經(jīng)過一系列變化，最終導(dǎo)致該細胞裂解死亡。（3）如果HIV中決定某一性狀的一段RNA中含堿基U=21%，C=24%，G=30%，則通過逆轉(zhuǎn)錄過程形成的雙鏈DNA含堿基A的比例為_____。（4）脊髓灰質(zhì)炎病毒的遺傳物質(zhì)與HIV相同，但其所寄生的細胞與HIV不同（主要是下圖丙中的c細胞），其寄生和破壞的細胞是神經(jīng)元，患者c細胞受破壞后，相關(guān)下肢會無反應(yīng)，原因是_____。10．（14分）人類胰島素基因位于第11號染色體上，長度8416bp，包含3個外顯子和2個內(nèi)含子，人類胰島素的氨基酸序列已知?；卮鹣嚓P(guān)問題：（1）上圖是利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因的方法，除了此方法外，還可以利用的方法是____________。（2）利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因，在緩沖液中除了要添加模板和引物外，還需要添加的物質(zhì)有_____________________________。（3）經(jīng)過______輪循環(huán)可以得到所需的目的基因，一個DNA分子經(jīng)過5輪循環(huán)，需要引物A_____個，從PCR的過程和DNA分子的特點，試著寫出設(shè)計引物需要注意的問題_____、_____（答出2點即可）。（4）利用SDS-凝膠電泳分離不同DNA分子，遷移速度取決于__________________。（5）利用圖示方法獲取的目的基因，直接構(gòu)建基因表達載體后導(dǎo)入大腸桿菌，（選能或不能）___________表達出人胰島素，理由是______________________________。11．（14分）酵母菌的蛋白質(zhì)可作為飼料蛋白的來源，有些酵母菌能以工業(yè)廢甲醇作為碳源，研究人員擬從土壤樣品中分離出可利用工業(yè)廢甲醇的酵母菌，這樣既能減少污染又可變廢為寶。下圖為主要操作流程示意圖?；卮鹣铝袉栴}：（1）配制培養(yǎng)基時，按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱量各組分，將其溶解、定容后，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的____，及時對培養(yǎng)基進行分裝，并進行高壓蒸汽滅菌：在加熱排除高壓鍋內(nèi)原有的____后，將高壓鍋密閉，繼續(xù)加熱，通常在____的條件下，維持15-30min，可達到良好的滅菌效果。（2）取步驟②中梯度稀釋后的適量液體加入無菌培養(yǎng)皿，然后將高壓蒸汽滅菌后的培養(yǎng)基冷卻至____（25℃/50℃/80℃）左右時倒入培養(yǎng)皿混勻（步驟⑧），冷凝后將培養(yǎng)皿倒置，在適宜的條件下培養(yǎng)一段時間。（3）挑取平板中長出的單菌落，按步驟④所示進行劃線純化，下列敘述合理的是____。a．為保證無菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌b．挑取菌落時，應(yīng)挑取多個菌落，分別測定酵母細胞中甲醇的含量c．劃線時不能劃破培養(yǎng)基表面，以確保能正常形成菌落d．第二區(qū)以后的劃線起始端要與上一區(qū)的劃線的末端相連接，最后一區(qū)的劃線末端不能與第一區(qū)的劃線相連（4）步驟⑤的培養(yǎng)中，應(yīng)加入___作為碳源，并加入適量的氮源、無機鹽和水等成分。為監(jiān)測發(fā)酵罐中酵母菌活細胞的密度，取2mL發(fā)酵液稀釋1000倍后，加入等體積臺盼藍染液染色，用如圖所示的計數(shù)室規(guī)格為25x16型的血細胞計數(shù)板計數(shù)，要達到每毫升4x109個活酵母菌細胞的預(yù)期密度，理論上，圖中標(biāo)號①～⑤五個中格里的呈____色的酵母菌細胞總數(shù)應(yīng)不少于____個。12．2019年6月17日，新華社發(fā)布《屠呦呦團隊放“大招”：“青蒿素抗藥性”等研究獲新突破》，屠呦呦團隊近期提出應(yīng)對“青蒿素抗藥性”難題的切實可行治療方案，并在“青蒿素治療紅斑狼瘡等適應(yīng)癥”方面取得新進展。某課題組為得到青蒿素產(chǎn)量高的新品系，讓青蒿素合成過程的某一關(guān)鍵酶基因fps在野生青蒿素中過量表達，其過程圖如下：回答下列問題：（1）圖中酶1是____________，酶2分別是____________。利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是加熱至90-95℃，目的是破壞了DNA分子中的______鍵。在構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒的過程中，需將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的____________中。（2）檢驗?zāi)康幕蚴欠裾系角噍锼鼗蚪M，可以將放射性同位素標(biāo)記的________________做成分子探針與青蒿素基因組DNA雜交。理論上，與野生型相比，該探針與轉(zhuǎn)基因青蒿素DNA形成的雜交帶的量_________（填較多或較少）。（3）據(jù)圖分析，農(nóng)桿菌的作用是____________________________________。判斷該課題組的研究目的是否達到，必須檢測轉(zhuǎn)基因青蒿素植株中的________________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

1、體細胞雜交可以克服遠源雜交不親和的障礙。操作過程包括：原生質(zhì)體制備、原生質(zhì)體融合、雜種細胞篩選、雜種細胞培養(yǎng)、雜種植株再生以及雜種植株鑒定等步驟。2、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導(dǎo)B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。3、動物體細胞核移植：將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為克隆動物?？寺游锞邆潆p親的遺傳特性，因為其細胞核基因來自提供細胞核的生物，而細胞質(zhì)基因來自提供細胞質(zhì)的生物，但其性狀主要與提供細胞核的生物相似。4、試管嬰兒技術(shù)是通過體外受精獲得許多胚胎，然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)?！驹斀狻緼、在植物體細胞雜交中，去掉細胞壁獲得原生質(zhì)體，不能采用質(zhì)壁分離實驗檢測制備的原生質(zhì)體的活性情況，A錯誤；B、免疫排斥是機體對移植物（異體細胞、組織或器官）通過特異性免疫應(yīng)答使其破壞的過程，細胞之間不存在免疫排斥，B正確；C、通過核移植技術(shù)產(chǎn)生克隆動物屬于無性繁殖，不能培育新物種，C錯誤；D、培育試管嬰兒涉及體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等，D錯誤。故選B。【點睛】本題綜合考查植物體細胞雜交、單克隆抗體制備、核移植技術(shù)和試管嬰兒等知識，要求考生識記識記植物體細胞雜交的過程及采用的方法，識記單克隆抗體制備過程；識記核移植技術(shù)過程、試管嬰兒培育過程，根據(jù)題干進行篩選。2、B【解析】

大多數(shù)高等植物無氧呼吸的產(chǎn)物是酒精和二氧化碳，高等植物某些部位的無氧呼吸產(chǎn)物是乳酸，如馬鈴薯塊莖、甜菜塊根、玉米胚。高等動物無氧呼吸的產(chǎn)物全部是乳酸。【詳解】A、湖邊的玉米長期被水淹，導(dǎo)致根部供氧不足，有氧呼吸受到阻礙，進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精，酒精對根有毒害作用，A正確；B、大多數(shù)植物無氧呼吸的產(chǎn)物是酒精和二氧化碳，不是乳酸，B錯誤；C、人體成熟紅細胞沒有細胞核和復(fù)雜的細胞器，因此沒有有氧呼吸的場所線粒體，只能進行無氧呼吸，C正確；D、人在劇烈運動時肌肉細胞有氧呼吸供能不足，會通過無氧呼吸補充能量的供應(yīng)，無氧呼吸的產(chǎn)物是乳酸，D正確。故選B?！军c睛】本題主要考查無氧呼吸類型，答題關(guān)鍵在于區(qū)分不同生物無氧呼吸產(chǎn)物。3、D【解析】

分析圖形①是糖蛋白、②是載體蛋白、③是磷脂雙分子層；A面是膜外側(cè)，因為膜外側(cè)有糖蛋白，B面是膜內(nèi)測。【詳解】A、雞的紅細胞內(nèi)有細胞核和眾多的細胞器，不能用作提取純凈的細胞膜的材料，同時也不是采用差速離心法，A錯誤；B、細胞癌變后①糖蛋白含量減少，B錯誤；C、電子顯微鏡下，細胞膜呈暗-亮-暗，對應(yīng)的膜結(jié)構(gòu)層是蛋白質(zhì)-脂質(zhì)-蛋白質(zhì)，C錯誤；D、O2在血紅細胞膜的運輸方向可以有膜外向膜內(nèi)也可由膜內(nèi)向膜外，CO2在肝細胞中的運輸方向是膜內(nèi)向膜外運輸，D正確。故選D。4、A【解析】

DNA分子中磷酸和脫氧核糖交替排列構(gòu)成基本骨架；每一個單體都是以若干個相連的碳原子構(gòu)成的碳鏈為基本骨架，許多單體連接成多聚體；桑格和尼克森提出了生物膜的流動鑲嵌模型，認(rèn)為磷脂雙分子層構(gòu)成了膜的基本支架；真核細胞中的細胞骨架是由蛋白質(zhì)纖維組成的，它對于有維持細胞形態(tài)、保持細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)有序性，與細胞運動、能量轉(zhuǎn)換等生命活動密切相關(guān)?！驹斀狻緼.DNA分子中的脫氧核糖和磷酸交替連接排在外側(cè)構(gòu)成基本骨架，A錯誤；B.每一個單體都以若干個相連的碳原子構(gòu)成的碳鏈為基本骨架，B正確；C.流動鑲嵌模型認(rèn)為磷脂雙分子層構(gòu)成了膜的基本支架，C正確；D.真核細胞中有維持細胞形態(tài)、保持細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)有序性的細胞骨架，D正確。

故選A。

5、B【解析】

本題考查神經(jīng)調(diào)節(jié)和激素調(diào)節(jié)的有關(guān)知識，意在考查考生識圖能力和理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力?！驹斀狻緼、下丘腦的神經(jīng)分泌細胞分泌的物質(zhì)名稱為促甲狀腺激素釋放激素，A錯誤；

B、抗利尿激素是由下丘腦分泌后，由垂體后葉釋放到血液中，促進腎小管和集合管對水分的重吸收，B正確；

C、E作用于B，對應(yīng)的E細胞末端發(fā)生的信號變化為電信號→化學(xué)信號，C錯誤；

D、如果A突觸小體釋放的神經(jīng)遞質(zhì)與突觸后膜結(jié)合，可以導(dǎo)致突觸后神經(jīng)元產(chǎn)生興奮或抑制，D錯誤。

故選B。

6、D【解析】

細胞體積增大，相對表面積減小，與外界物質(zhì)交換效率降低，A錯誤；細胞液濃度增大，滲透壓增大，植物細胞吸水能力增強，B錯誤；生長素濃度升高，如果超過生長的最適濃度，植物細胞生長速度反而減慢，C錯誤；體內(nèi)血漿滲透壓降低，抗利尿激素釋放減少，尿量增加，使血漿滲透壓恢復(fù)，D正確。故選D。7、C【解析】

主動運輸是指物質(zhì)逆濃度梯度，在載體的協(xié)助下，在能量的作用下運進或運出細胞膜的過程；題圖分析，①為細菌；②為正在與溶酶體發(fā)生融合的囊泡；③為細菌被溶酶體分解后的代謝廢物；④為線粒體；⑤為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)?！驹斀狻緼、圖中①③過程的完成涉及胞吞和胞吐過程，該過程不穿膜，但消耗能量，A錯誤；B、圖中①～③過程為吞噬細胞殺滅病原體的過程，屬于非特異性免疫，B錯誤；C、溶酶體中為酸性水解酶，細胞質(zhì)中近中性，細胞質(zhì)中的H+進入溶酶體是逆濃度梯度進行的，故為主動運輸，C正確；D、溶酶體內(nèi)的酶為胞內(nèi)酶，其中的酶是由附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體合成的，D錯誤。故選C。8、D【解析】

題意分析，患病的I-1號和I-2號結(jié)婚生出了表現(xiàn)正常的Ⅱ－3號個體，可知控制該病的基因為顯性基因，又知該基因位于21號染色體上，且為常染色體，故該遺傳病為常染色體上的顯性遺傳病【詳解】A、由分析可知，AD的遺傳方式是常染色體顯性遺傳，由于Ⅱ－3號的基因型為tt，可知雙親的基因型均為Tt，則Ⅱ－5的基因型是TT或Tt，A正確；B、若Ⅱ－5為純合子，即基因型為TT，Ⅲ－7的基因型為Tt，即一定會攜帶AD致病基因，B正確；C、Ⅱ－6號的基因型為tt，Ⅱ－5的基因型是1/3TT或2/3Tt，則Ⅲ－7的基因型為1/3tt、2/3Tt，若Ⅲ－7已懷孕（與正常男性結(jié)婚），則她生出一個患病男孩的概率是2/3×1/2=1/3，C正確；D、由于Ⅱ－5的基因型是TT或Tt，Ⅱ－6號的基因型為tt，可見Ⅲ－7可能攜帶AD致病基因，則Ⅲ－7與一名家族中無AD遺傳的健康男性結(jié)婚，可能生出患病的孩子，故在備孕前需要進行遺傳咨詢，D錯誤。故選D。【點睛】本題中已懷孕是關(guān)鍵信息。二、非選擇題9、核糖核苷酸RNA聚合酶ⅠT細胞受抗原刺激后增殖靶細胞23%反射弧結(jié)構(gòu)受破壞，興奮不能傳導(dǎo)到效應(yīng)器【解析】

分析圖甲可知，HIV為RNA病毒，由RNA和蛋白質(zhì)組成，則可推斷大分子A為蛋白質(zhì)，大分子B為RNA，進而可知小分子a為氨基酸，小分子b為核糖核苷酸；分析圖乙可知，圖示為HIV濃度與T細胞濃度的關(guān)系，HIV進入人體后，攻擊T細胞，隨著HIV濃度上升，更多T細胞被破壞，使T細胞數(shù)目下降，從而使人體的特異性免疫能力降低乃至喪失；分析圖丙可知，a為神經(jīng)節(jié)，b為中間神經(jīng)元，c為傳出神經(jīng)元?！驹斀狻浚?）分析題圖可知，小分子b為核糖核苷酸，過程②所需的酶主要為RNA合成酶；（2）圖乙表示HIV濃度與T細胞濃度的關(guān)系，HIV進入人體后，攻擊T細胞，隨著HIV濃度上升，更多T細胞被破壞，數(shù)量減少，故HIV濃度變化的曲線是Ⅰ；曲線Ⅱ中ED段上升狀態(tài)的原因是，T細胞受抗原刺激后增殖；效應(yīng)T細胞參與細胞免疫，直接作用于靶細胞；（3）由RNA中含堿基U=21%，C=24%，G=30%，可知A=25%，通過逆轉(zhuǎn)錄形成的DNA鏈中，其中一條鏈T1=25%，A1=21%，另一條鏈中A2=25%，故雙鏈DNA中含堿基A的比例為A=（25%+21%）/2=23%；（4）c細胞為傳出神經(jīng)元，c細胞受破壞后，反射弧的傳出神經(jīng)元受破壞，興奮不能傳導(dǎo)到效應(yīng)器，使相關(guān)下肢無反應(yīng)?！军c睛】本題考查HIV的結(jié)構(gòu)與作用機理，反射弧的結(jié)構(gòu)的作用機理，以及堿基互補配對原則的計算，同時考查學(xué)生對題圖的理解和對已學(xué)知識的結(jié)合應(yīng)用。在計算逆轉(zhuǎn)錄時，需要考慮到RNA為單鏈，逆轉(zhuǎn)錄獲得的DNA為雙鏈。10、從基因文庫獲取或人工合成四種脫氧核苷酸（dNTP）和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）331引物自身不能有互補序列引物之間不能有互補序列DNA分子的大小不能因為此方法獲得的目的基因中含有內(nèi)含子，大腸桿菌無法正常識別內(nèi)含子而對內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進行翻譯，導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯誤【解析】

根據(jù)題干信息和圖形分析，基因工程的基本步驟包括目的基因的獲取、構(gòu)建基因表達載體、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與表達；圖示目的基因為人類胰島素基因（位于11號常染色體上），其通過PCR技術(shù)進行擴增，需要A、B兩種引物；PCR擴增目的基因的過程包括變性、退貨、延伸。【詳解】（1）獲取目的基因的方法除了PCR技術(shù)，還有從基因文庫獲取或人工合成。（2）用PCR技術(shù)擴增目的基因（人胰島素基因）時，所需的條件有引物、模板(目的基因或人胰島素基因)、原料(4種脫氧核糖核苷酸)和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）等。（3）根據(jù)PCR過程和DNA分子半保留復(fù)制特點可知，前兩輪循環(huán)產(chǎn)生的四個DNA分子的兩條鏈均不等長，第三輪循環(huán)產(chǎn)生的DNA分子存在等長的兩條核苷酸鏈，即僅含引物之間的序列，因此，經(jīng)過三輪循環(huán)可以得到所需的目的基因；一個DNA分子經(jīng)過5輪循環(huán)，理論上至少需要26-2=62個引物，其中A引物31個。引物設(shè)計時需要注意以下幾點：引物自身不能有互補序列；引物之間不能有互補序列；引物長度適當(dāng)；引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合；避免與擴增DNA內(nèi)有過多互補的序列。（4）SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)中分子的遷移速率主要取決于分子的大小，因此利用SDS-凝膠電泳分離不同DNA分子，遷移速度取決于DNA分子的大小。（5）題干信息顯示，圖示獲取的目的基因含有外顯子和內(nèi)含子，因此直接將含有此目的基因的表達載體導(dǎo)入大腸桿菌并不能表達出胰島素，原因是大腸桿菌無法正常識別內(nèi)含子而對內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進行翻譯，導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯誤?！军c睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握基因工程的基本步驟、PCR技術(shù)等相關(guān)知識點，弄清楚PCR技術(shù)的過程和原理，能夠利用公式計算PCR技術(shù)過程中需要的引物的數(shù)量，并能夠分析大腸桿菌不能表達出該目的基因產(chǎn)物的原因。11、pH冷空氣（壓力為）100kPa、（溫度為）121℃50℃a、c、d工業(yè)廢甲醇無40【解析】

1、微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。2、分析題圖：①稱量土樣，里面含有需要分離的酵母菌；②表示梯度稀釋和涂布平板；③④表示平板劃線法，進行純化培養(yǎng)；⑤表示擴大培養(yǎng)，獲得更多的酵母菌?！驹斀狻浚?）配制培養(yǎng)基時，按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱量、溶化，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，及時對培養(yǎng)基進行分裝，高壓蒸汽滅菌。在加熱排除高壓鍋內(nèi)原有的冷空氣后，將高壓鍋密閉，繼續(xù)加熱，通常在（壓力為）100kPa、（溫度為）121℃的條件下，維持15-30min，可達到良好的滅菌效果。（2）倒平板需要將培養(yǎng)基冷卻至50℃進行。（3）a、接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌，做到無菌操作，a正確；b、挑取菌落時，應(yīng)挑取多個菌落，分別測定培養(yǎng)液中，而不是細胞內(nèi)甲醇的含量，b錯誤；c、劃線時應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，否則大量酵母菌聚集，不能形成正常菌落，c正確；d、第二區(qū)域以后的劃線區(qū)域的菌種來源于上一區(qū)域的末端，所以第二區(qū)以后的劃線起始端要與上一區(qū)的劃線的末端相連接，并且最后一區(qū)的劃線末端不能與第一區(qū)的劃線相連，d正確，以便于分離菌落。故選acd。（4）本實驗的目的是分離出可利用工業(yè)廢甲醇的酵母菌，所以應(yīng)該以甲醇作為碳源，活細胞膜具有選擇透過性，經(jīng)等體積臺盼藍染液染色，無色細胞才計數(shù)；為監(jiān)測酵母的活細胞密度，將發(fā)酵液稀釋1000倍后，經(jīng)等體積臺盼藍染液染色，用25×16型血細胞計數(shù)板計數(shù)5個中格中的細胞數(shù)，達到每毫升4×109個活細