化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則 第14部分：藻類生長(zhǎng)抑制試驗(yàn) 編制說(shuō)明

《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則第14部分：藻類生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)》編制說(shuō)明（一）任務(wù)來(lái)源根據(jù)國(guó)標(biāo)委發(fā)[2023]64號(hào)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)關(guān)于下達(dá)2023年國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)制修訂計(jì)劃的通知（2023年1日發(fā)）第902項(xiàng)，由農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)藥檢定所主持承擔(dān)“化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則第14部分：藻類生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)”的修訂工作，項(xiàng)目周期12個(gè)月。計(jì)劃號(hào)20233471-T-326。（二）制定背景我國(guó)是農(nóng)業(yè)大國(guó)，也是農(nóng)藥生產(chǎn)和使用大國(guó)。農(nóng)藥是一種特殊商品，它既是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)必需的生產(chǎn)資料，它的使用對(duì)控制病、蟲(chóng)、草害，保障糧食安全發(fā)揮著巨大的作用，但同時(shí)也可能對(duì)生態(tài)環(huán)境造成不容忽視的污染和危害，甚至對(duì)人類健康產(chǎn)生嚴(yán)重威脅。農(nóng)藥對(duì)生態(tài)環(huán)境的污染危害已成為全球廣泛關(guān)注的重大環(huán)境問(wèn)題，農(nóng)藥的安全性（包括環(huán)境和人體健康）管理也已逐步成為全球農(nóng)藥管理的重點(diǎn)。為了加強(qiáng)農(nóng)藥的環(huán)境管理，以便在使用農(nóng)藥的同時(shí)保護(hù)日益脆弱的生態(tài)環(huán)境，世界各國(guó)都加大了監(jiān)管力度。農(nóng)藥環(huán)境管理的法律、標(biāo)準(zhǔn)不斷完善，歐盟、美國(guó)、日本、澳大利亞、加拿大、巴西等國(guó)家和地區(qū)先后建立了農(nóng)藥環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估技術(shù)體系。我國(guó)也于2016年發(fā)布了NY/T2882《農(nóng)藥登記環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估指南》系列農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，建立了農(nóng)藥對(duì)水生生態(tài)系統(tǒng)、鳥(niǎo)類、蜜蜂、家蠶、地下水、非靶標(biāo)節(jié)肢動(dòng)物和土壤生物的環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法。據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部測(cè)算，2020年我國(guó)水稻、小麥、玉米三大糧食作物農(nóng)藥利用率約為40%，其余少數(shù)部分通過(guò)飄移、徑流、淋溶等方式進(jìn)入水環(huán)境，可能對(duì)水生生物造成危害，其中藻類是水生態(tài)系統(tǒng)的初級(jí)生產(chǎn)者，是水生食物鏈的基礎(chǔ)，對(duì)水環(huán)境中的多種化學(xué)物質(zhì)非常敏感。因此，確定農(nóng)藥對(duì)藻類生長(zhǎng)抑制毒性是評(píng)估農(nóng)藥環(huán)境安全性的基礎(chǔ)。2017年新發(fā)布的《農(nóng)藥登記資料要求》（農(nóng)業(yè)部2569號(hào)公告）也規(guī)定化學(xué)農(nóng)藥申請(qǐng)農(nóng)藥登記時(shí)需要提交藻類生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)資料以及環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告。我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T31270.14-2014《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則第14部分：藻類生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)》（以下簡(jiǎn)稱原標(biāo)準(zhǔn)）在我國(guó)的農(nóng)藥管理與新農(nóng)藥的開(kāi)發(fā)研制過(guò)程中發(fā)揮了重要作用。但該標(biāo)準(zhǔn)中試驗(yàn)程序的描述比較簡(jiǎn)單，與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)不同處較多。隨著綠水青山就是金山銀山的理念深入人心，國(guó)家、社會(huì)和公眾對(duì)我國(guó)的農(nóng)藥管理工作提出了更高的要求。因此，為了滿足農(nóng)藥管理的需求，促進(jìn)我國(guó)農(nóng)藥的國(guó)際貿(mào)易，進(jìn)一步加強(qiáng)與規(guī)范農(nóng)藥對(duì)生態(tài)環(huán)境的安全評(píng)價(jià)工作，修訂《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則第14部分：藻類生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)》國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)是非常必要的。《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則第14部分：藻類生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)》國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的修訂，旨在進(jìn)一步完善我國(guó)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)技術(shù)體系，通過(guò)農(nóng)藥登記前的環(huán)境安全性評(píng)價(jià)，從源頭控制農(nóng)藥對(duì)環(huán)境可能產(chǎn)生的污染。同時(shí)試驗(yàn)準(zhǔn)則的標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化，可保證試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠及可比性。因此，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的修訂，對(duì)于規(guī)范我國(guó)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)工作，使之適應(yīng)新形勢(shì)的要求，從而更好地為我國(guó)的農(nóng)藥登記和農(nóng)藥環(huán)境管理提供技術(shù)支持具有重要意義。GB/T31270.14-2014至今已實(shí)施近10年，廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥登記、新農(nóng)藥研制篩選和科研等領(lǐng)域，測(cè)定化學(xué)農(nóng)藥溞類急性活動(dòng)抑制毒性方面具備深厚的研究基礎(chǔ)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。2011年OECD適用于化學(xué)品測(cè)試的“藻類生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)”試驗(yàn)指南（OECD,2011:Guideline201:FreshwaterAlgaand的相關(guān)指南文件（USEPA(2012).AlgalToxicity(OCSPP850.4500),EcologicalEffectsTestGuidelines.）可以為標(biāo)準(zhǔn)的修訂提供方法參考。（三）起草過(guò)程部農(nóng)藥檢定所組織相關(guān)專家成立了標(biāo)準(zhǔn)起草工作組,提出標(biāo)準(zhǔn)修訂實(shí)施方案。起草組成員主要包括：陳朗、曲甍甍、趙榆、楊海榮、周艷明、袁善奎、王菲迪、俞瑞鮮、藍(lán)帥、周彬彬、蒲倩云。的現(xiàn)狀，確定了本標(biāo)準(zhǔn)的框架結(jié)構(gòu)和主要內(nèi)容。并同時(shí)按照GB二、標(biāo)準(zhǔn)編制原則、主要內(nèi)容及其確定依據(jù)，修訂行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，還包括修訂前后技術(shù)內(nèi)容的對(duì)比；本標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容包括化學(xué)農(nóng)藥藻類生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)的試驗(yàn)條件、試劑或材料、儀器設(shè)備、樣品、試驗(yàn)步驟、試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理、質(zhì)量控制以及試驗(yàn)報(bào)告等的基本要求。修訂這些內(nèi)容時(shí)遵循科學(xué)合理、可操作可重復(fù)的原則?？茖W(xué)合理性體現(xiàn)在方法設(shè)計(jì)以確保所獲得的毒性終點(diǎn)——半數(shù)效應(yīng)濃度（EC50）能準(zhǔn)確反映供試農(nóng)藥的毒性屬性為目標(biāo)，從而為農(nóng)藥登記環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供科學(xué)數(shù)據(jù)支持?？刹僮骺芍貜?fù)體現(xiàn)在把“科學(xué)性第一”放在首位的基礎(chǔ)上，標(biāo)準(zhǔn)修訂過(guò)程中充分考慮國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有技術(shù)能力和平臺(tái)，確保對(duì)試驗(yàn)各相關(guān)要素都進(jìn)行了全面的、充分的描述，確保各要素的有關(guān)規(guī)定具有可操作性，確保農(nóng)藥登記環(huán)境安全性數(shù)據(jù)的可靠。同時(shí)，本標(biāo)準(zhǔn)還遵循以下原則：1.規(guī)范性原則一是格式的規(guī)范性，本標(biāo)準(zhǔn)的編制要符合GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》等基礎(chǔ)標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定；二是指內(nèi)容的規(guī)范性，標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的試驗(yàn)方法，力求做到試驗(yàn)條件的規(guī)范化。2.針對(duì)性原則本標(biāo)準(zhǔn)主要瞄準(zhǔn)以化學(xué)農(nóng)藥為研究對(duì)象開(kāi)展的藻類生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化，標(biāo)準(zhǔn)旨在為化學(xué)農(nóng)藥這一特殊性被試物開(kāi)展以登記為目的的試驗(yàn)提供具體依據(jù)。3.前瞻性、先進(jìn)性原則充分考慮與國(guó)際通用試驗(yàn)準(zhǔn)則的接軌。注意吸收國(guó)內(nèi)外相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，國(guó)際農(nóng)藥環(huán)境安全性評(píng)價(jià)技術(shù)最新進(jìn)展。1.范圍。給出了本標(biāo)準(zhǔn)的適用范圍。2.規(guī)范性引用文件。給出了難處理農(nóng)藥這類被試物配制試驗(yàn)藥液時(shí)應(yīng)采用的方法標(biāo)準(zhǔn)以及近頭狀尖胞藻的標(biāo)準(zhǔn)化培養(yǎng)方法。3.術(shù)語(yǔ)和定義。給出了半效應(yīng)濃度、平均生長(zhǎng)速率、生物量增長(zhǎng)量等本標(biāo)準(zhǔn)涉及的術(shù)語(yǔ)、定義。4.原理。簡(jiǎn)單介紹了化學(xué)農(nóng)藥藻類生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)的目的和基本方法。5.試驗(yàn)條件。規(guī)定了試驗(yàn)期間溫度、光照、pH值和培養(yǎng)條件等方面的要求。6.試劑或材料。規(guī)定了試劑、供試生物、試驗(yàn)容器（規(guī)格、材質(zhì)）和試驗(yàn)培養(yǎng)基（類別、配方）等方面的要求。7.儀器設(shè)備。列出了試驗(yàn)所需的儀器設(shè)備。8.樣品。對(duì)被試物和參比物的信息進(jìn)行描述。其中，針對(duì)被試物給出了可供試驗(yàn)設(shè)計(jì)參考的各類數(shù)據(jù)信息。供試藻的預(yù)培養(yǎng)方法，試驗(yàn)藥液的制備方法，染毒與培養(yǎng)方法，觀察與測(cè)定方法（藻細(xì)胞計(jì)數(shù)與觀察、水質(zhì)參數(shù)被試物濃度檢測(cè)方法等試驗(yàn)實(shí)施方面的要求。10.試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理。規(guī)定了數(shù)據(jù)整理方法、繪圖要求，生物量增長(zhǎng)與比生長(zhǎng)速率及其抑制百分率的計(jì)算方法，以及EC50統(tǒng)計(jì)方法、結(jié)果表達(dá)方法。11.質(zhì)量控制。規(guī)定了對(duì)照組受試藻的初始濃度、生長(zhǎng)速率及其變異系數(shù)要求，被試物濃度檢測(cè)要求以及參比物試驗(yàn)等質(zhì)量控制要求。12.試驗(yàn)報(bào)告。給出了試驗(yàn)報(bào)告中至少應(yīng)包含的內(nèi)容。13.附錄A（資料性）培養(yǎng)基配方。列出了3種培養(yǎng)基14.附錄B（資料性）對(duì)照組比生長(zhǎng)速率變異系數(shù)的計(jì)算示例,給出了分時(shí)段比生長(zhǎng)速率平均變異系數(shù)和試驗(yàn)期間平均比生長(zhǎng)速率變異系數(shù)計(jì)算示例。經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織（OECD）2011年發(fā)布的化學(xué)品藻Cyanobacteria,GrowthInhibitionTest.OECDGuidelinesfortheTestingofChemicals）。該文件是國(guó)際通行的研究藻類急性毒性試驗(yàn)準(zhǔn)則，內(nèi)容較為完善，大多數(shù)國(guó)家農(nóng)藥管理機(jī)構(gòu)接受按該準(zhǔn)則開(kāi)展的農(nóng)藥急性毒性試驗(yàn)資料。本標(biāo)準(zhǔn)參考其制定。除文字性修改外，本標(biāo)準(zhǔn)與OECD201的技術(shù)內(nèi)容基本一致，但基于“可操作、可重復(fù)”、“針對(duì)性”等原則和近年來(lái)標(biāo)準(zhǔn)起草單位和國(guó)內(nèi)主要實(shí)驗(yàn)室的經(jīng)驗(yàn)，本標(biāo)準(zhǔn)的修訂過(guò)程中在OECD201基礎(chǔ)上進(jìn)行了擴(kuò)展和細(xì)化。具體如下：本標(biāo)準(zhǔn)限定了標(biāo)準(zhǔn)的適用范圍為出于化學(xué)農(nóng)藥登記目的而開(kāi)展的溞類急性活動(dòng)抑制試驗(yàn)，即對(duì)被試物進(jìn)行了限定。同時(shí)，鑒于NY/T3273的發(fā)布，可以為易揮發(fā)、難溶解化學(xué)農(nóng)藥提供方法指導(dǎo)，刪除了GB/T31270-2014版關(guān)于“不適用于易揮發(fā)、難溶解的化學(xué)農(nóng)藥”的相關(guān)描述。2.規(guī)范性引用文件。給出了易揮發(fā)、難溶解等難處理農(nóng)藥這類被試物配制試驗(yàn)藥液時(shí)應(yīng)采用的方法標(biāo)準(zhǔn)——NY/T3273難處理農(nóng)藥水生生物毒性試驗(yàn)指南。NY/T3273主要參考OECDGD23（2000）制定，該導(dǎo)則文件也是OECD201的重要補(bǔ)充。同時(shí)，增加了供試藻種之一——近頭狀尖胞藻實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)應(yīng)采用的方法標(biāo)準(zhǔn)：NY/T4195.6《農(nóng)藥登記環(huán)境影響試驗(yàn)生物試材培養(yǎng)第6部分：近頭狀尖胞藻》。3.術(shù)語(yǔ)和定義。給出了半效應(yīng)濃度、比生長(zhǎng)速率、生物量增長(zhǎng)等本標(biāo)準(zhǔn)涉及的術(shù)語(yǔ)、定義。與GB/T31270-2014版相比刪除了幾個(gè)行業(yè)內(nèi)已有共性認(rèn)知的術(shù)語(yǔ)，比如化學(xué)農(nóng)藥、原藥、制劑、有效成分等。4.原理。簡(jiǎn)單介紹了化學(xué)農(nóng)藥藻類生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)的目的和基本方法。在GB/T31270-2014版基礎(chǔ)上進(jìn)行了文字性修5.試驗(yàn)條件。對(duì)有關(guān)試驗(yàn)期間溫度、光照、pH值和培201基本一致。6.試劑或材料。增加了試劑方面的總結(jié)，有關(guān)供試生物（藻種、初始接種濃度等）、試驗(yàn)容器（規(guī)格、材質(zhì)）和培養(yǎng)基（類別、配制）等方面的具體要求參照OECD201進(jìn)行了修改，與OECD201基本一致。新增了硅藻和藍(lán)藻類的供試藻種，包括舟形藻（Naviculapelliculosa）、水華魚(yú)腥藻（Anabaenaflos-aquae）和聚球藻（Synechococcusleopoliensis刪除了普通小球藻，主要原因是目前國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室鮮有采用該藻種開(kāi)展試驗(yàn)的，且其中文名稱目前尚存爭(zhēng)議；此外，根據(jù)國(guó)際上的最新命名，將Pseudokirchneriellasubcapitata的中文名稱由羊角月牙藻修改為近頭狀尖胞藻，英文名修改為Raphidocelissubcapitata。7.儀器設(shè)備。儀器設(shè)備類型參照OECD201進(jìn)行了修改，與OECD201基本一致。8.樣品。對(duì)被試物和參比物的信息描述參照OECD201進(jìn)行了修改，與OECD201基本一致。9.試驗(yàn)步驟。給出了藻液預(yù)培養(yǎng)，預(yù)試驗(yàn)、正式試驗(yàn)和限度試驗(yàn)流程，試驗(yàn)藥液的制備方法，染毒與培養(yǎng)方法，觀察與測(cè)定方法（藻細(xì)胞計(jì)數(shù)、水質(zhì)參數(shù)濃度檢測(cè)方法，等試驗(yàn)實(shí)施方面的要求。上述技術(shù)要求與OECD201基本一致，但做了以下補(bǔ)充和細(xì)化：1）針對(duì)近年來(lái)評(píng)審中遇到問(wèn)題，農(nóng)藥登記相關(guān)試驗(yàn)報(bào)告鮮有描述試驗(yàn)藥液狀態(tài)，導(dǎo)致對(duì)于有疑惑的試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行原因分析時(shí)缺少該類關(guān)鍵信息，難以判斷試驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性。因此，本次修訂在9.3.2試驗(yàn)藥液制備部分，規(guī)定了觀察并描述試驗(yàn)液狀態(tài)、顏色等的要求。2）針對(duì)農(nóng)藥作為被試物時(shí)，部分具有揮發(fā)性強(qiáng)、吸附性強(qiáng)、在測(cè)試條件下不穩(wěn)定和/或難溶于水而難以達(dá)到或者保持暴露濃度或者試驗(yàn)藥液有顏色的情形，要求參照NY/T3273《難處理農(nóng)藥水生生物毒性試驗(yàn)指南》采取相應(yīng)措施配制試驗(yàn)藥液。3）操作方面，對(duì)于試驗(yàn)藥液短暫靜置后出現(xiàn)沉淀的情形，根據(jù)《農(nóng)藥登記環(huán)境影響試驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題解答》給出了去除沉淀物的操作方法，從而給試驗(yàn)人員提供更多的技術(shù)參考，詳見(jiàn)9.3.2.4。4）針對(duì)被試物為農(nóng)藥中的特殊劑型——混配制劑，為避免實(shí)驗(yàn)室通過(guò)簡(jiǎn)單的直接離心、過(guò)膜等方法制備儲(chǔ)備液，出現(xiàn)其中溶解度相對(duì)小的有效成分大部分被濾掉，進(jìn)而導(dǎo)致試驗(yàn)藥液中各有效成分的濃度比相較于產(chǎn)品中的配比發(fā)生極大變化的情況，在9.3.2.4部分特別指出應(yīng)避免類似操作。5）基于生態(tài)毒理學(xué)試驗(yàn)基本原理，在培養(yǎng)（9.3.4）環(huán)節(jié)規(guī)定了試驗(yàn)容器在培養(yǎng)區(qū)域內(nèi)須隨機(jī)擺放。6）與OECD201的要求一致，規(guī)定化學(xué)分析時(shí)應(yīng)充分考慮被試物的“溶解態(tài)濃度”。在此基礎(chǔ)上，為便于指導(dǎo)國(guó)內(nèi)技術(shù)人員達(dá)到技術(shù)要求，給出了具體的水樣前處理方法，詳見(jiàn)9.3.6.2。7）與OECD201的要求一致，規(guī)定對(duì)于不穩(wěn)定的被試物，對(duì)采集的樣品應(yīng)立即進(jìn)行分析檢測(cè)。在此基礎(chǔ)上，給出了如未進(jìn)行即時(shí)分析情形下的技術(shù)要求：須有儲(chǔ)存穩(wěn)定性分析數(shù)據(jù)的支持，進(jìn)一步細(xì)化了操作要求。10.試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理。數(shù)據(jù)整理方法、繪圖要求，以及EC50統(tǒng)計(jì)方法、結(jié)果表達(dá)方法等均參照OECD201進(jìn)行了修改，與OECD201基本一致。11.質(zhì)量控制。規(guī)定了供試藻，對(duì)照組受試藻的初始濃度、生長(zhǎng)率及其變異系數(shù)要求，以及參比物試驗(yàn)等質(zhì)量控制要求，與OECD201基本一致，主要是刪除了環(huán)境條件相關(guān)表述，刪除了普通小球藻相關(guān)內(nèi)容，新增了對(duì)照組分時(shí)段生長(zhǎng)率的平均變異系數(shù)限值和試驗(yàn)期間平均生長(zhǎng)率變異系數(shù)限值，新增了參比物質(zhì)試驗(yàn)結(jié)果有效性參考值。此外，還新增了對(duì)試驗(yàn)中偏離試驗(yàn)準(zhǔn)則的情形進(jìn)行描述和評(píng)估的要求，有利于獲得兼有完整性和科學(xué)性的試驗(yàn)報(bào)告。12.試驗(yàn)報(bào)告。給出了試驗(yàn)報(bào)告中至少應(yīng)包含的內(nèi)容。參照OECD201進(jìn)行了修改，與OECD201基本一致,但根據(jù)國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室目前試驗(yàn)報(bào)告完整性方面的短板，做了一些細(xì)——要求必要時(shí)附預(yù)試驗(yàn)結(jié)果；——要求描述試驗(yàn)藥液外觀、為測(cè)定溶解性濃度所做的相關(guān)操作、分析方法的重現(xiàn)性及靈敏度、回收率、最低定量限、試驗(yàn)過(guò)程中發(fā)生的可能影響結(jié)果的事件，偏離試驗(yàn)準(zhǔn)則的情況、后果及相關(guān)解釋與評(píng)價(jià)等；——對(duì)試驗(yàn)藥液濃度分析結(jié)果的呈現(xiàn)形式做了細(xì)化，使數(shù)據(jù)更加直觀、完整：要求同時(shí)給出上機(jī)實(shí)測(cè)濃度、稀釋或濃縮倍數(shù)及最終的測(cè)定濃度要求被試物為混配制劑的，同時(shí)給出單個(gè)有效成分和有效成分之和的濃度等。13.附錄A（資料性）培養(yǎng)基配方。列出了3種培養(yǎng)基的配方。刪除了不必要的SE培養(yǎng)基配方，參考OECD201新增了OECD藻類培養(yǎng)基配方。14.附錄B（資料性）對(duì)照組比生長(zhǎng)率變異系數(shù)的計(jì)算示例,給出了分時(shí)段生長(zhǎng)率平均變異系數(shù)和試驗(yàn)期間平均生長(zhǎng)率變異系數(shù)計(jì)算示例。15.由于我國(guó)目前對(duì)農(nóng)藥的環(huán)境管理是基于對(duì)鳥(niǎo)類、水生生態(tài)系統(tǒng)、蜜蜂、家蠶、非靶標(biāo)節(jié)肢動(dòng)物、土壤生物和地下水的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果，而不是簡(jiǎn)單地依據(jù)對(duì)非靶標(biāo)生物的毒對(duì)藻類毒性等級(jí)劃分”相關(guān)內(nèi)容。1)更改了標(biāo)準(zhǔn)適用范圍，修訂后的標(biāo)準(zhǔn)適用范圍可涵蓋易揮發(fā)、難溶解化學(xué)農(nóng)藥（見(jiàn)第1部分,2014年版的第1部3)更改了術(shù)語(yǔ)和定義，更改了平均生長(zhǎng)率、生物量增長(zhǎng)的定義，使定義更加精準(zhǔn)和通俗易懂；刪除了供試物、化學(xué)農(nóng)藥、原藥、制劑、有效成分、參比物質(zhì)的定義（見(jiàn)3.2、4)更改了試驗(yàn)條件，新增了試驗(yàn)期間持續(xù)振蕩或攪拌藻液的要求，細(xì)化了光照條件和pH值要求（見(jiàn)第5章,2014年版的4.1.55)增加了試劑要求（見(jiàn)6.16)更改了供試生物要求，新增了硅藻和藍(lán)藻類供試藻種，刪除了普通小球藻，將羊角月牙藻修改為近頭狀尖胞藻（見(jiàn)6.2,2014年版的4.1.1）7)增加了試驗(yàn)容器基本要求（見(jiàn)6.38)更改了培養(yǎng)基要求，增加了不同藻種適宜的培養(yǎng)基類別，以及基本的培養(yǎng)基選用要求（見(jiàn)6.4,2014年版的4.1.49)更改了儀器設(shè)備相關(guān)要求，新增超凈工作臺(tái)等無(wú)菌操作設(shè)備、器具，光照振蕩培養(yǎng)箱等培養(yǎng)設(shè)備，配備球形傳感器或余弦傳感器的照度計(jì)等光照監(jiān)控設(shè)備、溫度監(jiān)控設(shè)備、化學(xué)分析設(shè)備等的要求（見(jiàn)第7章,2014年版的4.1.3第8.1部分,2014年版的4.1.211)更改了藻液預(yù)培養(yǎng)方法，新增了一種通過(guò)儲(chǔ)備培養(yǎng)快速獲取供試藻液的方法（見(jiàn)第9.1部分,2014年版的4.2.112)增加了試驗(yàn)藥液制備相關(guān)要求（見(jiàn)9.3.2試驗(yàn)期間持續(xù)振蕩或攪拌等要求（見(jiàn)第9.3.3、9.3.4部分,2014年版的4.2.3以及比色皿光程要求（見(jiàn)9.3.5,2014年版的4.2.315)增加了濃度檢測(cè)方法（見(jiàn)9.3.616)增加了數(shù)據(jù)整理要求（見(jiàn)10.117)更改了半效應(yīng)濃度統(tǒng)計(jì)方法，新增了試驗(yàn)結(jié)果表達(dá)方式（見(jiàn)10.4,2014年版的4.3.318)更改了質(zhì)量控制條件，刪除了環(huán)境條件相關(guān)表述，新增了描述和評(píng)估試驗(yàn)偏離的要求，刪除了普通小球藻相關(guān)內(nèi)容，新增了對(duì)照組各時(shí)段生長(zhǎng)率的平均變異系數(shù)限值和試驗(yàn)期間平均生長(zhǎng)率變異系數(shù)限值，新增了參比物質(zhì)試驗(yàn)結(jié)果有效性參考值（見(jiàn)第11章,2014年版的4.419)更改了試驗(yàn)報(bào)告相關(guān)要求，新增了對(duì)試驗(yàn)方法特別是濃度設(shè)置依據(jù)、試驗(yàn)藥液配制、外觀、化學(xué)分析及其前處理方法、化學(xué)分析典型譜圖等的報(bào)告要求，以及對(duì)分析方法驗(yàn)證結(jié)果、試驗(yàn)藥液濃度檢測(cè)結(jié)果報(bào)告的要求，細(xì)化了被試物信息、供試生物信息、試驗(yàn)條件、試驗(yàn)結(jié)果（水質(zhì)參數(shù)、20)刪除了標(biāo)準(zhǔn)推薦的供試藻種無(wú)需使用的SE培養(yǎng)基的配方（2014年版的4.4附錄A表A.321)增加了OECD藻類培養(yǎng)基配方（見(jiàn)附錄A表A.322)增加了對(duì)照組生長(zhǎng)率變異系數(shù)的計(jì)算示例（見(jiàn)附錄23)刪除了農(nóng)藥對(duì)藻類毒性等級(jí)劃分相關(guān)內(nèi)容（2014年版的附錄B）。三、試驗(yàn)驗(yàn)證的分析、綜述報(bào)告，技術(shù)經(jīng)濟(jì)論證，預(yù)期的經(jīng)濟(jì)效益、社會(huì)效益和生態(tài)效益；為驗(yàn)證該方法在國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室的可行性和各實(shí)驗(yàn)室間結(jié)果的可重復(fù)性，標(biāo)準(zhǔn)制定工作組組織開(kāi)展了驗(yàn)證試驗(yàn)。由北京綠城堡農(nóng)業(yè)科技有限公司、浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全與營(yíng)養(yǎng)研究所、沈陽(yáng)沈化院測(cè)試技術(shù)有限公司安全評(píng)價(jià)中心等三家實(shí)驗(yàn)室采用95%氯吡嘧磺隆原藥開(kāi)展了藻類生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)。藻類生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)結(jié)果匯總見(jiàn)表2。驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果顯示，三家實(shí)驗(yàn)室的試驗(yàn)結(jié)果基本一致，表明本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的試驗(yàn)方法在國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室具有較好的可操作性、可重復(fù)性。表2藻類生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果匯總表目前國(guó)際通用的研究農(nóng)藥藻類生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)的試驗(yàn)準(zhǔn)則是經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織（OECD）于2011年發(fā)布了化學(xué)品Cyanobacteria,GrowthInhibitionTest.OECDGuidelinesfortheTestingofChemicals），大多數(shù)國(guó)家農(nóng)藥管理機(jī)構(gòu)接受按該準(zhǔn)則開(kāi)展的農(nóng)藥藻類生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)資料。本標(biāo)準(zhǔn)在OECD201基礎(chǔ)上制定，除文字性修改外，本標(biāo)準(zhǔn)與OECD201的技術(shù)內(nèi)容基本一致，但為適應(yīng)我國(guó)實(shí)際情況做了部分修改（見(jiàn)主要內(nèi)容確定依據(jù)部分）。與OECD等試驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)相據(jù)估計(jì)，我國(guó)農(nóng)藥的有效利用率約為40%，其余少數(shù)部分通過(guò)飄移、徑流、淋溶等方式進(jìn)入水環(huán)境，可能對(duì)水生生物造成危害，其中可能對(duì)水生生物造成危害，其中藻類是水生態(tài)系統(tǒng)的初級(jí)生產(chǎn)者，是水生食物鏈的基礎(chǔ)，對(duì)水環(huán)境中的多種化學(xué)物質(zhì)非常敏感。因此農(nóng)藥對(duì)藻類的毒性是評(píng)估農(nóng)藥環(huán)境安全性的基礎(chǔ)，我國(guó)《農(nóng)藥登記資料要求》也規(guī)定化學(xué)農(nóng)藥申請(qǐng)農(nóng)藥登記時(shí)需要提交藻類生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)報(bào)告。本標(biāo)準(zhǔn)的制定實(shí)施有利于規(guī)范農(nóng)藥的藻類生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)，明確農(nóng)藥對(duì)藻類的急性毒性，試驗(yàn)結(jié)果可用于農(nóng)藥對(duì)水生生態(tài)系統(tǒng)的環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，減少高風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥的登記使用，促進(jìn)農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展、保障生態(tài)環(huán)境安全。四、與國(guó)際、國(guó)外同類標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)內(nèi)容的對(duì)比情況，或者與測(cè)試的國(guó)外樣品、樣機(jī)的有關(guān)數(shù)據(jù)對(duì)比情況；本標(biāo)準(zhǔn)制定和起草過(guò)程中參考了國(guó)際通行的OECD試驗(yàn)準(zhǔn)則，結(jié)合我國(guó)藻種等實(shí)際情況，與歐美發(fā)達(dá)國(guó)家和國(guó)際組織現(xiàn)行的試驗(yàn)準(zhǔn)則水平相當(dāng)。五、以國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)為基礎(chǔ)的起草情況，以及是否合規(guī)引用或者采用國(guó)際國(guó)外標(biāo)準(zhǔn)，并說(shuō)明未采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的原因；本標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)內(nèi)容主要參照經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織（O