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實驗七綜合實驗實驗目的1.學習并掌握小鼠旋轉(zhuǎn)桿平衡實驗、跳臺回避實驗以及無創(chuàng)血壓測試方法2.了解各個測試指標的意義實驗原理1.旋轉(zhuǎn)桿平衡實驗是測試小鼠肌肉協(xié)調(diào)性、疲勞的經(jīng)典實驗。實驗所使用的疲勞轉(zhuǎn)棒儀可用于研究藥物對動作協(xié)調(diào)性和抗疲勞特性的影響。2.跳臺回避實驗屬一次性刺激回避反應實驗,是衡量小鼠智能優(yōu)劣的一種方法。通過給予小鼠厭惡刺激,觀察小鼠的學習記憶能力。3.無創(chuàng)血壓測量通過大、小鼠尾動脈固定,通過壓力感應裝置檢測血壓變化特點,采用計算機分析可以獲得動物的收縮壓、舒張壓及脈搏波頻率變化的系列數(shù)據(jù)。實驗對象小鼠實驗儀器ZB-200疲勞轉(zhuǎn)棒儀STD-88通道大小鼠跳臺實驗系統(tǒng)大小鼠無創(chuàng)血壓測定系統(tǒng)計算機實驗步驟一、旋轉(zhuǎn)桿平衡實驗訓練階段:1.將動物從飼養(yǎng)室轉(zhuǎn)移入實驗操作室,適應60min。2.將旋轉(zhuǎn)杠的速度調(diào)至24r/min,打開旋轉(zhuǎn)設置裝置,置動物與旋轉(zhuǎn)桿上,測定其從旋轉(zhuǎn)桿上滑落的時間,即潛伏期。設定最長潛伏期為60s。3.每天每只動物訓練4次,每次間隔5-10min,連續(xù)訓練3天。4.訓練結(jié)束后,將動物送回飼養(yǎng)室,以70%的乙醇清潔訓練裝置。測試階段:將動物從飼養(yǎng)室轉(zhuǎn)移入實驗操作室,適應60min。打開旋轉(zhuǎn)設置裝置,測定動物在不同旋轉(zhuǎn)速度下的潛伏期,轉(zhuǎn)速分別為5、8、15、20、24、31、33、44r/min。每個速度測定兩次,在計算時取其平均值。測試結(jié)束后,將動物送回飼養(yǎng)室,以70%的乙醇清潔訓練裝置。編號58152024313344CE12CE19CE20CE21CE25AE6AE9AE11AE14AE15二、跳臺回避實驗系統(tǒng)1.打開SDT-8跳臺實驗視頻分析系統(tǒng)軟件,點擊“打開攝像頭”按鈕,再打開實驗箱,將其中所有的跳臺全部翻面,使背面黑色的部分朝上并靠角落放置,再關(guān)閉試驗箱。點擊“曝光+”和“曝光-”兩個按鈕調(diào)節(jié)曝光強度,使軟件自動識別到跳臺區(qū)域,點擊“區(qū)域設定”按鈕。設定完畢后,將所有跳臺翻面,使黑色部分朝下置放,使得區(qū)域設定后倒置跳臺時將跳臺卡入從右上角開始的第二根刺激棒內(nèi)便能保證其放回原位置。關(guān)閉試驗箱。2.實驗包括兩次相隔60min的電擊訓練和一次24h后的記憶保持實驗。①電擊訓練:將小鼠放置于跳臺之上,當它往下跳至刺激柵極時,給予能夠引起小鼠發(fā)聲和退縮的最小電壓(28V)的電擊。將小鼠放回籠內(nèi),清潔箱體。1h后重復上述訓練,記錄跳臺潛伏期。如果小鼠在跳臺上的滯留時間超過60s,即認為它已經(jīng)記住先前的厭惡刺激,不給電擊,放回籠內(nèi);如果小鼠跳臺潛伏期少于60s,則在1h后再次重復訓練一次。如仍不達標,則予以淘汰。②記憶保持實驗:在第一次訓練后的24h進行。方法與訓練相同,但不給電擊。記錄小鼠從跳臺跳下的錯誤次數(shù)。如小鼠300s后仍不跳下跳臺,則終止實驗。實驗除記錄錯誤次數(shù)外,還記錄達到回避標準的動物數(shù)。達標標準為:“記憶保持測試”的潛伏期大于“第二次訓練”潛伏期的3倍且超過60s。以錯誤反應次數(shù)為判斷記憶力的定性指標,達標動物的百分比為記憶的定量指標。編號潛伏期錯誤次數(shù)編號潛伏期錯誤次數(shù)CE12AE6CE19AE9CE20AE11CE21AE14CE25AE15三、大小鼠無創(chuàng)血壓測試預熱無創(chuàng)血壓測試儀,使箱體溫度達到37℃將小鼠的四肢和頭部固定住固定裝置中,將加壓裝置和壓力傳感器固定在小鼠尾部,放入箱體使其適應環(huán)境通過充氣、放氣對尾動脈加壓和釋壓的同時監(jiān)測血流信號,得出血壓值測量記錄平均動脈壓、收縮壓、舒張壓和心率編號血壓心率編號血壓心率CE12AE6CE
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