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ICS65.020.20GB/T37671—2019金針菇菌種國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)IGB/T37671—2019本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由中華全國(guó)供銷合作總社提出并歸口。1GB/T37671—2019金針菇菌種2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本文GB/T191包裝儲(chǔ)運(yùn)圖示標(biāo)志GB/T12728食用菌術(shù)語(yǔ)NY/T528—2010食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程GB/T12728界定的以及下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。為了便于使用,以下重復(fù)列出了生長(zhǎng)在固體培養(yǎng)料上的菌種。[GB/T12728—2006,定義2.5.31]液體菌種liquidspawn培養(yǎng)基為液體狀態(tài)的菌種。[GB/T12728—2006,定義2.5.30]一級(jí)種試管種經(jīng)各種方法選育得到的具有結(jié)實(shí)性的菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物。2GB/T37671—20193.5栽培種spawn三級(jí)種注:改寫GB/T12728—2006,定義2.5.9。3.6鎖狀聯(lián)合clampconnection[GB/T12728—2006,定義2.2.5]3.7[GB/T12728—2006,定義2.5.17]3.8粉孢子oidium一種薄壁的無(wú)性孢子。通常由營(yíng)養(yǎng)菌絲直接斷裂而成。[GB/T12728—2006,定義2.2.28]3.9高溫抑制線弱的現(xiàn)象。[GB/T12728—2006,定義2.5.18]3.10具有不同遺傳基因的菌落間互相抑制產(chǎn)生不生長(zhǎng)區(qū)帶或形成不同形式線形邊緣的現(xiàn)象。[GB/T12728—2006,定義2.3.21]3.11生物學(xué)效率biologicalefficiency單位質(zhì)量培養(yǎng)料的風(fēng)干物質(zhì)所培養(yǎng)產(chǎn)生出的子實(shí)體或菌絲體質(zhì)量(鮮重),常用百分?jǐn)?shù)表示。如風(fēng)干料100kg產(chǎn)生了新鮮子實(shí)體50kg,即為生物學(xué)效率50%。3.12種性characterofvariety[GB/T12728—2006,定義23.13液體原種由母種移植到液體培養(yǎng)基中在搖床上恒溫震蕩擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物。3.14發(fā)酵罐液體菌種liquidspawnculturingbyfermentationtank液體栽培種3GB/T37671—2019由搖瓶液體菌種移植到發(fā)酵罐液體培養(yǎng)基中恒溫培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物。3.15液體菌種培養(yǎng)過(guò)程中每分鐘通入培養(yǎng)基中的無(wú)菌空氣量。以L/min表示。4技術(shù)要求金針菇菌種按照培養(yǎng)基質(zhì)的形態(tài)分為固體菌種和液體菌種。4.2母種4.2.1容器規(guī)格應(yīng)符合NY/T528—2010中4.7.1.2的規(guī)定。4.2.2感官要求應(yīng)符合表1的規(guī)定。要求檢驗(yàn)方法容器潔凈、透明、完整、無(wú)損肉眼觀察棉塞或硅膠塞干燥、潔凈,松緊適度,能滿足透氣和濾菌要求培養(yǎng)基斜面長(zhǎng)度測(cè)量接種塊大小肉眼觀察、測(cè)量菌種外觀菌絲生長(zhǎng)量長(zhǎng)滿斜面肉眼觀察,見(jiàn)5.1.4菌絲體表面特征白色、濃密,有絨毛狀氣生菌絲,有鎖狀聯(lián)合,表面均勻、平整、無(wú)角變、無(wú)原基表面分泌物無(wú)菌落邊緣整齊粉孢子無(wú)或少量雜菌菌落無(wú)肉眼觀察,見(jiàn)5.1.2、5.1.3斜面背面外觀培養(yǎng)基不干縮,顏色均勻、無(wú)暗斑肉眼觀察氣味有金針菇菌種特有的香味,無(wú)酸、臭、霉等異味鼻嗅4.2.3菌絲生長(zhǎng)速度:在馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(以下簡(jiǎn)稱PDA培養(yǎng)基)上,17℃~22℃避光恒溫溫小于17℃條件下,在適宜培養(yǎng)基(參見(jiàn)附錄B)中培養(yǎng)出菇,生物學(xué)效率應(yīng)不低于80%。4.3.1.1容器規(guī)格應(yīng)符合NY/T528—2010中4.7.1.3的規(guī)定。4.3.1.2感官要求應(yīng)符合表2的規(guī)定。4GB/T37671—2019要求檢驗(yàn)方法容器潔凈、透明、完整、無(wú)損肉眼觀察棉塞或塑料蓋干燥、潔凈,松緊適度,能滿足透氣和濾菌要求培養(yǎng)基上表面距瓶(袋)口的距離測(cè)量每支母種接原種數(shù),接種物大小4瓶(袋)~6瓶(袋),≥(12mm×15mm)肉眼觀察、測(cè)量菌種外觀菌絲生長(zhǎng)量長(zhǎng)滿容器肉眼觀察,見(jiàn)5.1.4菌絲體特征菌絲潔白、濃密、生長(zhǎng)均勻,無(wú)角變,無(wú)高溫圈,無(wú)原基,無(wú)子實(shí)體培養(yǎng)基及菌絲體緊貼瓶(袋)壁,無(wú)干縮表面分泌物無(wú)拮抗現(xiàn)象無(wú)粉孢子無(wú)或少量雜菌菌落無(wú)肉眼觀察,見(jiàn)5.1.2、5.1.3螨蟲(chóng)無(wú)見(jiàn)5.1.4氣味有金針菇菌種特有的香味,無(wú)酸、臭、霉等異味鼻嗅4.3.1.3菌絲生長(zhǎng)速度:在適宜培養(yǎng)基上,17℃~22℃避光恒溫培養(yǎng),菌絲長(zhǎng)滿容器(750mL菌種瓶)的時(shí)間為35d~45d。4.3.2.1容器規(guī)格應(yīng)符合NY/T528—2010中4.7.1.4的規(guī)定。4.3.2.2感官要求應(yīng)符合表3的規(guī)定。要求檢驗(yàn)方法容器潔凈、透明、完整、無(wú)損肉眼觀察棉塞或塑料蓋干燥、潔凈,松緊適度,能滿足透氣和濾菌要求培養(yǎng)基上表面距瓶(袋)口的距離測(cè)量每瓶原種接栽培種數(shù)量30瓶(袋)~50瓶(袋)檢查生產(chǎn)記錄菌種外觀菌絲生長(zhǎng)量長(zhǎng)滿容器肉眼觀察,見(jiàn)5.1.4菌絲體特征潔白、濃密,生長(zhǎng)均勻、旺盛,無(wú)角變,無(wú)高溫圈,允許有少量原基但無(wú)子實(shí)體培養(yǎng)基及菌絲體緊貼瓶(袋)壁,無(wú)干縮表面分泌物允許有少量無(wú)色或淺黃色水珠拮抗現(xiàn)象無(wú)粉孢子無(wú)或少量雜菌菌落無(wú)肉眼觀察,見(jiàn)5.1.2、5.1.3螨蟲(chóng)無(wú)見(jiàn)5.1.4氣味有金針菇菌種特有的香味,無(wú)酸、臭、霉等異味鼻嗅5GB/T37671—20194.3.2.3菌絲生長(zhǎng)速度:在適宜培養(yǎng)基上,17℃~22℃避光恒溫培養(yǎng),菌絲長(zhǎng)滿容器(750mL菌種瓶)時(shí)間為30d~40d。4.4液體菌種4.4.1搖瓶液體菌種(液體原種)4.4.1.1使用耐126℃高溫的無(wú)色玻璃錐形瓶。錐形瓶應(yīng)使用透氣性好的棉塞或硅膠塞。4.4.1.2感官要求應(yīng)符合表4的規(guī)定。表4搖瓶液體菌種感官要求要求檢驗(yàn)方法容器潔凈、透明、完整、無(wú)損肉眼觀察棉塞或硅膠塞干燥、潔凈,松緊適度,能滿足透氣和濾菌要求培養(yǎng)基裝量容器的40%~60%測(cè)量母種接種塊大小,接種量(5mm~10mm)×(10mm~15mm),2塊~6塊檢查生產(chǎn)記錄菌液外觀菌液色澤菌絲體白色;濾液清澈透亮肉眼觀察,見(jiàn)5.1.4菌液形態(tài)有大量片狀、叢狀或球狀菌絲體懸浮,分布均勻雜菌菌絲無(wú)肉眼觀察,見(jiàn)5.1.2、5.1.3氣味有金針菇菌種特有的香味,無(wú)酸、臭、霉、甜等異味鼻嗅4.4.1.3培養(yǎng)條件:在適宜培養(yǎng)基內(nèi),置于搖床上,振蕩頻率80次/min~100次/min,振幅6cm~10cm,溫度17℃~22℃,避光培養(yǎng)6d~10d。4.4.2發(fā)酵罐液體菌種(液體栽培種)4.4.2.1使用耐126℃高溫的不銹鋼發(fā)酵罐。罐體內(nèi)壁無(wú)培養(yǎng)料等污物,濾芯無(wú)油污、料污、無(wú)破損,外殼潔凈。閥門、安全閥、壓力表完好,工作正常。4.4.2.2感官要求應(yīng)符合表5的規(guī)定。表5發(fā)酵罐液體菌種感官要求要求檢驗(yàn)方法容器潔凈、完整、無(wú)損肉眼觀察培養(yǎng)基投料量罐體容積的70%~80%測(cè)量接種量培養(yǎng)基投料量的10%檢查生產(chǎn)記錄菌液外觀菌液色澤菌絲體白色;濾液清澈透亮肉眼觀察,見(jiàn)5.1.4菌液形態(tài)有大量片狀、叢狀或球狀菌絲體懸浮,分布均勻雜菌菌絲無(wú)肉眼觀察,見(jiàn)5.1.2、5.1.3氣味有金針菇菌種特有的香味,無(wú)酸、臭、霉、甜等異味鼻嗅4.4.2.3培養(yǎng)條件:在適宜培養(yǎng)基內(nèi),通風(fēng)量保持在0.5L/min~1.2L/min,罐壓保持在0.02MPa~0.04MPa之間,溫度17℃~22℃,培養(yǎng)6d~10d。6GB/T37671—20195試驗(yàn)方法5.1.1鎖狀聯(lián)合:從檢驗(yàn)樣本中挑取菌絲少許,置于潔凈的載玻片上做成水封片,用不低于10×40的光學(xué)顯微鏡對(duì)水封片進(jìn)行觀察,每一檢樣應(yīng)觀察不少于50個(gè)視野。5.1.2細(xì)菌檢驗(yàn):將檢驗(yàn)樣本按無(wú)菌操作接種于按蛋白胨10g、牛肉膏3g、氯化鈉5g、蒸餾水5.1.3霉菌檢驗(yàn):將檢驗(yàn)樣本按無(wú)菌操作接種于PDA培養(yǎng)基(參見(jiàn)附錄A)中,在25℃~28℃條件下5.2.1母種:參見(jiàn)附錄A中的配方,在17℃~22℃條件下培養(yǎng),計(jì)算長(zhǎng)滿所需天數(shù)。5.2.2原種:參見(jiàn)附錄B中的配方,在17℃~22℃條件下培養(yǎng),計(jì)算長(zhǎng)滿所需天數(shù)。5.2.3栽培種:參見(jiàn)附錄B中的配方,在17℃~22℃條件下培養(yǎng),計(jì)算長(zhǎng)滿所需天數(shù)。5.2.4搖瓶液體菌種:參見(jiàn)附錄C中的配方,在17℃~22℃條件下培養(yǎng),計(jì)算培養(yǎng)天數(shù)。根據(jù)表6所列項(xiàng)目,做好栽培記錄。檢驗(yàn)項(xiàng)目檢驗(yàn)結(jié)果檢驗(yàn)項(xiàng)目檢驗(yàn)結(jié)果母種長(zhǎng)滿所需時(shí)間d總產(chǎn)原種長(zhǎng)滿所需時(shí)間d平均單產(chǎn)kg/m2栽培種長(zhǎng)滿菌瓶(袋)所需時(shí)間d總生物學(xué)效率%出第一潮菇所需時(shí)間d色澤、質(zhì)地第一潮菇產(chǎn)量菇形第一潮菇生物學(xué)效率%菌蓋直徑、菌柄長(zhǎng)短mm固體菌種各級(jí)菌種應(yīng)留樣備查,留樣的數(shù)量應(yīng)每個(gè)批號(hào)3支(瓶、袋),于0℃~4℃貯存,貯存至7GB/T37671—2019使用者在正常生產(chǎn)條件下該批菌種出第一潮菇。6檢驗(yàn)規(guī)則液體菌種(栽培種)的抽樣量分別為該批菌種量的10%、5%、1%。6.2判定規(guī)則b)生產(chǎn)單位;c)接種日期;菌種包裝應(yīng)貼有清晰注明以下要素的包裝標(biāo)簽:g)菌種生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)許可證編號(hào)。a)小心輕放標(biāo)志;d)防止倒置標(biāo)志;e)防止重壓標(biāo)志。8GB/T37671—20197.2.2原種、栽培種外包裝采用有足夠強(qiáng)度的紙材制作的紙箱,菌種間用具有緩沖作用的輕質(zhì)材料填7.3運(yùn)輸7.3.3氣溫達(dá)30℃以上時(shí),需用2℃~20℃的冷藏車運(yùn)輸。7.4.1母種在0℃~4℃條件下貯存,貯存期不超過(guò)60d。9GB/T37671—2019(資料性附錄)金針菇母種培養(yǎng)基配方PDA培養(yǎng)基:馬鈴薯(去皮)200g,葡萄糖20g(麥麩50g),瓊脂20g,水1000mL,pH值自然。GB/T37671—2019(資料性附錄)金針菇原種及栽培種培養(yǎng)基配方B.1闊葉樹(shù)木屑65%,棉籽殼15%,麥麩15%,石灰2%,石膏粉1.5%,過(guò)磷酸鈣1.5%,含水量60%~65%,pH值自然。B.2闊葉樹(shù)木屑58%,棉籽殼20%,麥麩20%,糖1%,石膏粉1%,含水量60%~65%,pH值自然。B.3闊葉樹(shù)木屑40%,米糠13%,玉米芯35%,麥麩10%,石灰1%,石膏1%,含水量65%,pH值B.4棉籽殼84%~89%,麥麩10%~15%,石膏1%,糖1%,含水量60%~65%,pH值自然。B.5棉籽殼54%~69%,玉米芯(闊葉樹(shù)木屑)20%~30%,麥麩10%~15%,石膏1%,含水量60%~65%,pH值自然。B.6玉米芯38%~40%,米糠32%~35%,棉籽殼5%~8%,麩皮8%~10%,啤酒糟5%~8%,大豆皮5%~8%,甜菜渣5%~8%,石膏1%~2%,貝化石1%~1.5%,含水量65%,pH值自然。GB/T37671—2019(資料性附錄)C.1玉米粉5%,麩皮1%,酵母粉0.5%,葡萄糖2%,磷酸二氫鉀0.1%,硫酸鎂0.05%,碳酸鈣0.2%,C.2玉米粉1%,豆粉2%,酵母粉0.5%,葡萄糖3%,磷酸二氫鉀0.1%,硫酸鎂0.05%,維生素B?C.3馬鈴薯15%、麩皮7%、蔗糖2%、磷酸二氫鉀0.1%、硫酸鎂0.05%,其余水,pH值自然。C.4葡萄糖1%、紅糖1.3%、黃豆
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