醫(yī)院感染的細(xì)菌學(xué)監(jiān)測

醫(yī)院感染相關(guān)的細(xì)菌學(xué)監(jiān)測醫(yī)院感染是當(dāng)前一個(gè)非常重要的問題，建立健全醫(yī)院感染的微生物學(xué)監(jiān)測制度，對(duì)消毒、隔離、滅菌、環(huán)境污染以及相關(guān)重要科室特別是手術(shù)室、供應(yīng)室、制劑室、產(chǎn)房、嬰兒室、透析室、重癥監(jiān)護(hù)病房等進(jìn)行必要的細(xì)菌學(xué)監(jiān)測，是微生物工作者的一項(xiàng)重要任務(wù)。一、醫(yī)院感染的病原學(xué)及流行病學(xué)監(jiān)測二、醫(yī)院傳染源及環(huán)境衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測三、消毒滅菌效果生物檢測四、微生物實(shí)驗(yàn)室在醫(yī)院感染中的作用一、醫(yī)院感染的病原學(xué)及流行病學(xué)監(jiān)測醫(yī)院感染的監(jiān)測是一種利用流行病學(xué)的方法，系統(tǒng)地、主動(dòng)地、連續(xù)地對(duì)醫(yī)院感染的發(fā)生、種類、分布及影響因素進(jìn)行觀察和檢測，并對(duì)各種監(jiān)測資料進(jìn)行系統(tǒng)分析，以此制定預(yù)防、控制措施，降低醫(yī)院感染發(fā)生率。1、醫(yī)院感染的病原學(xué)及特點(diǎn)（1）大多數(shù)醫(yī)院感染病原體為條件致病菌除少數(shù)病原體與社會(huì)感染病原體相同，如結(jié)核桿菌、白喉?xiàng)U菌等有強(qiáng)毒力及侵襲力外，大多數(shù)為正常菌群。（2）免疫功能低下與感染病原菌種類有密切的關(guān)系。在免疫低下病人的感染中，需氧菌特別是革蘭陰性桿菌最多。（3）醫(yī)院感染中病原菌的耐藥性。大多數(shù)醫(yī)院感染病原菌為耐藥性細(xì)菌或多重耐藥菌。2、醫(yī)院感染流行病學(xué)監(jiān)測醫(yī)院感染流行病學(xué)主要研究感染在醫(yī)院中的流行規(guī)律及其影響因素，感染的發(fā)生、分布、致病因素，包括病原體的來源、傳播、宿主和環(huán)境等，從而為科學(xué)地制訂有效預(yù)防措施提供依據(jù)。流行病學(xué)監(jiān)測應(yīng)從感染源、傳播方式和易感者等方面進(jìn)行。（1）感染源包括外源性和內(nèi)源性感染源。外源性感染源分交叉感染和環(huán)境感染，交叉感染是在醫(yī)院內(nèi)從他人（病人、病人家屬或醫(yī)院工作人員）處獲得的感染，病人是醫(yī)院中主要的傳染源。環(huán)境感染的感染源來自污染的環(huán)境。內(nèi)源性是指人體內(nèi)四大儲(chǔ)菌庫：皮膚、鼻咽口腔、泌尿生殖道和腸道，其中以腸道最為重要。當(dāng)儲(chǔ)菌庫的細(xì)菌在體內(nèi)易位時(shí)即可發(fā)生感染。（2）傳播方式1）呼吸道傳播。主要是通過病人所呼出帶有病原的飛沫，近距離地傳給其他病人和醫(yī)務(wù)人員；通過飛沫散播的病菌，可遠(yuǎn)距離散播，如結(jié)核桿菌；醫(yī)院中常見的醫(yī)源性呼吸道感染的傳播因素，如超聲霧化治療、氧氣濕化瓶的污染、實(shí)驗(yàn)室的操作等，均可造成污染氣溶膠的吸入而獲得感染。2）消化道傳播。又稱糞口傳播，醫(yī)院感染中常見的有甲型肝炎、感染性腹瀉、鼠傷寒沙門菌感染。3）接觸傳播。是指直接接觸、間接接觸、侵入性操作、血液/體液傳播及垂直傳播。侵入性操作是醫(yī)院中特有的傳播方式，也非常多見，它既可以帶入外源性感染，而且還可將自體細(xì)菌帶到另外部位。（3）易感者醫(yī)院感染主要在病人中發(fā)生，而醫(yī)務(wù)人員很少得病，是因?yàn)椴∪嘶蚨嗷蛏儆兄煌潭鹊拿庖吖δ苋睋p，以致毒力弱的細(xì)菌也可引起感染。

掌握醫(yī)院感染流行病學(xué)情況對(duì)于明確醫(yī)院感染的原因，切斷醫(yī)院感染的傳播途徑，控制預(yù)防醫(yī)院感染的發(fā)生有著重要的意義。同時(shí)應(yīng)盡一切努力避免病人防御機(jī)制的損傷，對(duì)高度易感病人早期監(jiān)護(hù)與防護(hù)，各種損傷性診療嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作原則，對(duì)器械及醫(yī)護(hù)人員的手嚴(yán)格滅菌與消毒，采取預(yù)防性消毒隔離措施，切斷傳播途徑。二、醫(yī)院傳染源及環(huán)境衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測1、傳染源監(jiān)測包括對(duì)病人、帶菌者及易感人群的監(jiān)測。這些傳染源可以直接或間接接觸方式在病人中傳播感染。院內(nèi)易感人群多見于機(jī)體抵抗力下降的老人、小兒和重癥病人，或者由于長期使用免疫抑制劑、大量抗菌劑、抗癌藥物、放射治療以及某些大型手術(shù)后的病人。2、環(huán)境衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測

環(huán)境因素作為傳播媒介和儲(chǔ)源，引起醫(yī)院感染的危險(xiǎn)是存在的。應(yīng)有目的和有選擇地對(duì)某些環(huán)境進(jìn)行監(jiān)測很有必要。（1）環(huán)境監(jiān)測的主要對(duì)象1）環(huán)境衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測包括對(duì)空氣、物體表面和醫(yī)務(wù)人員手的監(jiān)測。醫(yī)院每月對(duì)手術(shù)室、重癥監(jiān)護(hù)病房/室（ICU）、產(chǎn)房、母嬰室、新生兒病房、骨髓移植病房、血液病房、血液透析室、供應(yīng)室無菌區(qū)、治療室、換藥室等重點(diǎn)部門進(jìn)行環(huán)境衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測。2）醫(yī)院環(huán)境區(qū)域劃分Ⅰ類區(qū)域?qū)恿鳚崈羰中g(shù)室、層流潔凈病房Ⅱ類區(qū)域普通手術(shù)室、產(chǎn)房、嬰兒室、早產(chǎn)兒室、普通保護(hù)性隔離室、供應(yīng)室無菌區(qū)、燒傷病房、重癥監(jiān)護(hù)病房Ⅲ類區(qū)域兒科病房、婦產(chǎn)科檢查室、注射室、換藥室、治療室、供應(yīng)室清潔區(qū)、急診室、化驗(yàn)室、各類普通病房和房間。Ⅳ類區(qū)域傳染病科及病房（2）空氣消毒效果的監(jiān)測1）采樣時(shí)間在消毒處理后、操作前進(jìn)行采樣。2）采樣方法

平板暴露法?！舨键c(diǎn)方法室內(nèi)面積≤30m2，設(shè)內(nèi)、中、外對(duì)角線3點(diǎn)，內(nèi)、外點(diǎn)布點(diǎn)部位距墻壁1m處；室內(nèi)面積＞30m2，設(shè)四角及中央5點(diǎn)，四角的布點(diǎn)部位距墻壁1m處?！舨蓸臃椒▽⑵胀I養(yǎng)瓊脂平板（直徑為9cm）放在室內(nèi)各采樣點(diǎn)處，采樣高度為距地面1.5m。采樣時(shí)將平板蓋打開，扣放于平板旁，暴露5min，蓋好立即送檢。3）檢測方法35℃環(huán)境中培養(yǎng)24-48h，觀察并計(jì)數(shù)細(xì)菌菌落數(shù)。平板暴露法結(jié)果計(jì)算公式：細(xì)菌總數(shù)（CFU/m3）=50000N/(A×T)式中：A為平板面積（cm2）；T為平板暴露時(shí)間（min）；N為平均菌落數(shù)（CFU）。4）結(jié)果判斷Ⅰ類區(qū)域細(xì)菌總數(shù)≤10CFU/m3（或0.2CFU/平板），未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格。Ⅱ類區(qū)域細(xì)菌總數(shù)≤200CFU/m3（或4CFU/平板），未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格。Ⅲ類區(qū)域細(xì)菌總數(shù)≤500CFU/m3（或10CFU/平板），未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格。5）注意事項(xiàng)采樣前，關(guān)好門、窗，在無人走動(dòng)的情況下，靜止10min

中進(jìn)行采樣。（3）手和皮膚黏膜消毒效果的監(jiān)測

醫(yī)務(wù)人員的手經(jīng)常直接或間接地同污染物品或病人接觸，在醫(yī)院感染傳播中起著十分重要的作用。手部細(xì)菌的監(jiān)測有兩個(gè)目的，一是通過定性和定量檢查，了解手部細(xì)菌污染情況；二是評(píng)價(jià)手的清潔和消毒效果。1）采樣時(shí)間應(yīng)在消毒后立即進(jìn)行。①手的采樣被檢人五指并攏，用浸有復(fù)方中和劑的無菌棉拭子，在雙手指曲面從指根到指端往返涂抹2次（一只手涂擦面積約30cm2），并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)采樣棉拭子，剪去與操作者手接觸部位，將棉拭子投入含9ml的復(fù)方中和劑的無菌試管內(nèi)，立即送檢。備注：復(fù)方中和劑即醫(yī)院感染監(jiān)測培養(yǎng)基，其內(nèi)含有Tween80+卵磷脂+硫代硫酸鈉等成分，其對(duì)應(yīng)的消毒劑為復(fù)方消毒劑。②皮膚黏膜采樣用5cm×5cm的標(biāo)準(zhǔn)滅菌規(guī)格板，放在被檢皮膚處，用浸有復(fù)方中和劑的無菌棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返均勻涂擦各5次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子，剪去手接觸部位后，將棉拭子投入9ml的含有復(fù)方中和劑的無菌試管內(nèi)，立即送檢。不規(guī)則的黏膜皮膚處可用棉拭子直接涂擦采樣。2）檢測①細(xì)菌總數(shù)檢測將采樣管在混勻器上振蕩20s或用力振蕩達(dá)80次，用無菌吸管吸取0.1ml待檢樣品接種并密涂于滅菌平皿，置36℃±1℃溫箱培養(yǎng)48h，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。其計(jì)算公式為：菌落總數(shù)（CFU/cm2）=平板菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)/采樣面積cm2②致病菌檢測同細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定。3）結(jié)果判定①消毒洗手Ⅰ類、Ⅱ類區(qū)域工作人員細(xì)菌總數(shù)≤5CFU/cm2，并未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌為消毒合格。Ⅲ類區(qū)域工作人員細(xì)菌總數(shù)≤10CFU/cm2，并未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌為消毒合格。Ⅳ類區(qū)域工作人員細(xì)菌總數(shù)≤15CFU/cm2，并未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌為消毒合格。母嬰同室、嬰兒室、新生兒室及兒科病房的工作人員手上，不得檢出沙門菌、大腸桿菌、溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌為消毒合格。②皮膚黏膜參照手衛(wèi)生學(xué)標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。另外，皮膚黏膜采樣處，若表面不足5cm×5cm可用相應(yīng)面積的規(guī)格板采樣。（4）物體表面消毒效果的監(jiān)測1）采樣時(shí)間選擇消毒處理后4h內(nèi)采樣。2）采樣方法用5cm×5cm的標(biāo)準(zhǔn)滅菌規(guī)格板，放在被檢物體表面，采樣面積要求≥100cm2，連續(xù)采樣4個(gè)，用浸有含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返均勻涂抹各5次，并隨之轉(zhuǎn)棉拭子，剪去手接觸部位后，將棉拭子投入9ml的含有復(fù)方中和劑的無菌試管內(nèi)，立即送檢。門把手等不規(guī)則物體表面用棉拭子直接涂擦采樣。3）檢測方法①細(xì)菌總數(shù)檢測檢測方法同手的監(jiān)測。小型物體表面的結(jié)果，用CFU/件表示。②致病菌檢測檢測方法同消毒洗手檢測“未檢出致病菌”。4）結(jié)果判定Ⅰ類、Ⅱ類區(qū)域細(xì)菌總數(shù)≤5CFU/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。Ⅲ類區(qū)域細(xì)菌總數(shù)≤10CFU/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。Ⅳ類區(qū)域細(xì)菌總數(shù)≤15CFU/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。母嬰同室、早產(chǎn)兒室、嬰兒室、新生兒室及兒科病房的物體表面，不得檢出沙門菌。三、消毒滅菌效果生物監(jiān)測消毒效果的監(jiān)測，是評(píng)價(jià)消毒設(shè)備運(yùn)轉(zhuǎn)是否正常、消毒劑是否有效、消毒方法是否合理、消毒效果是否達(dá)標(biāo)的手段。醫(yī)院必須對(duì)消毒、滅菌效果定期進(jìn)行監(jiān)測，不合格物品不得進(jìn)入臨床使用部門。1、熱力滅菌效果的生物監(jiān)測方法（1）壓力蒸氣滅菌效果生物監(jiān)測方法1）指示菌株耐熱的嗜熱脂肪桿菌芽胞（ATCC7953），菌片含菌量為（5.0-50.0）×10^5CFU/片，在121℃±0.5℃條件下，殺滅90%微生物所需時(shí)間D121值為1.3-1.9min，殺菌時(shí)間（KT值）≤19min，存活時(shí)間（ST值）為≥3.9min。2）培養(yǎng)基試驗(yàn)用培養(yǎng)基為溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基。3）檢測方法將兩個(gè)嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片分別裝入滅菌小紙袋內(nèi)，置于標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包中心部位。在滅菌柜室內(nèi)，上、中層中央和排氣口處各放置一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包。手提壓力蒸氣滅菌器用通氣貯物盒代替標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包，盒內(nèi)盛滿中試管，指示菌片放于中心部分的兩只滅菌試管內(nèi)，將貯物盒平放于手提壓力蒸氣滅菌器底部。經(jīng)一個(gè)滅菌周期后，在無菌條件下，取出標(biāo)準(zhǔn)試劑包或通氣貯物盒中的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中，置于60℃培養(yǎng)3h（快速生物檢測）或58℃培養(yǎng)24h（慢速生物檢測）或56℃培養(yǎng)48h（慢速生物檢測），觀察培養(yǎng)基顏色變化。檢測時(shí)設(shè)陰性對(duì)照和陽性對(duì)照。備注：

下排氣壓力蒸氣滅菌器：標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包：由3件平紋長袖手術(shù)衣、4塊小手術(shù)巾、2塊中手術(shù)巾、1塊大手術(shù)巾、30塊10cm×10cm的紗布8層，敷料包裹成25cm×30cm×30cm大小。預(yù)真空和脈動(dòng)真空壓力蒸氣滅菌器：標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包：由16條全棉手術(shù)巾每條41cm×66cm，將每條手術(shù)巾的長邊先折成3層，短邊折成2層然后疊放，做成23cm×23cm×15cm大小的測試包。手提壓力蒸氣滅菌器：標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包：由通氣貯物盒（22cm×13cm×6cm）代替標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包，盒內(nèi)盛滿中試管，指示菌片放于中心部位的兩只滅菌試管內(nèi)（試管口用滅菌牛皮紙包封）4）結(jié)果判斷滅過菌的芽胞內(nèi)，指示菌片接種的溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基不變色，判為滅菌合格；若監(jiān)測儀器報(bào)警并培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S色時(shí)，則滅菌不合格。5）注意事項(xiàng)檢測所用菌片須經(jīng)衛(wèi)生部認(rèn)可，并在有效期內(nèi)使用。生物指示物監(jiān)測應(yīng)每月一次。（2）干熱滅菌效果生物監(jiān)測方法1）指示菌株

枯草桿菌黑色變種芽孢（ATCC9372）），菌片含菌量為（5.0-50.0）×10^5CFU/片，在溫度160±2℃時(shí)，其D值為1.3-1.9min，存活時(shí)間≥3.9min，死亡時(shí)間≤19min。2)檢測方法將枯草桿菌芽胞菌片分別裝入滅菌中試管內(nèi)（1片/管）。滅菌器與每層門把手對(duì)角線內(nèi)，外角處放置2個(gè)含菌片的試管，試管帽置于試管旁，關(guān)好柜門，經(jīng)一個(gè)滅菌周期后，待溫度降至80℃時(shí)，加蓋試管帽后取出試管。置于36℃培養(yǎng)4h（快速生物檢測），觀察培養(yǎng)基顏色變化。檢測時(shí)設(shè)陰性對(duì)照和陽性對(duì)照。4）結(jié)果判斷滅過菌的芽胞內(nèi)，若每個(gè)指示菌片接種的肉湯管均澄清，判為滅菌合格，若指示菌片之一接種的肉湯管渾濁，判為不合格。對(duì)難以判定的肉湯管，取0.1ml接種于營養(yǎng)瓊脂平板，用滅菌L棒涂勻，放36±1℃培養(yǎng)48h，觀察菌落形態(tài)，并做涂片染色鏡檢，判斷是否有指示菌生長，若有，則滅菌不合格；若無，則滅菌合格。5）注意事項(xiàng)檢測所用菌片須經(jīng)衛(wèi)生部認(rèn)可，并在有效期內(nèi)使用。生物指示物監(jiān)測應(yīng)每月一次。2、環(huán)氧乙烷（EO）滅菌效果生物檢測1）指示菌株

枯草桿菌黑色變種芽胞（ATCC9372），菌片含菌量為（5.0-50.0）×10^3CFU/片，在環(huán)氧乙烷劑量為（600±30）mg/L，作用溫度為54±2℃，相對(duì)濕度為60%±10%條件下，其殺滅90%該微生物的D值為2.6-5.8min，存活時(shí)間≥7.8min，死亡時(shí)間應(yīng)≤58min。2）培養(yǎng)基

含復(fù)方中和劑的5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基。3）檢測方法一般每月用生物指示物監(jiān)測一次。在環(huán)氧乙烷劑量為（600±30）mg/L，作用溫度為54±2℃，相對(duì)濕度為60%±10%條件下，經(jīng)一個(gè)滅菌周期后，取出芽胞，置于36℃培養(yǎng)4h（快速生物檢測），觀察培養(yǎng)基顏色變化。檢測時(shí)設(shè)陰性對(duì)照和陽性對(duì)照。備注：在消毒效果用該微生物監(jiān)測時(shí)，菌量為（5.0-50.0）×10^3CFU/片。放置菌片的數(shù)量應(yīng)該足夠多。1）滅菌柜室可用體積＜5m3時(shí)，至少放置10個(gè)菌片。2）滅菌柜室可用體積為5-10m3時(shí)，每增加1m3，增加一個(gè)菌片。3）滅菌柜室可用體積＞10m3時(shí)，每增加2m3，增加一個(gè)菌片。生物指示物應(yīng)放在那些在性能鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)是最難滅菌的部位，并均勻分布于整個(gè)滅菌物品中。生物指示物應(yīng)在預(yù)處理之前放入被滅菌物品內(nèi)或被滅菌物品的試件內(nèi)。應(yīng)盡量在滅菌周期完成后立即將生物指示物從被滅菌物品中取出并進(jìn)行培養(yǎng)。4）結(jié)果判斷經(jīng)培養(yǎng)，陽性對(duì)照在24h內(nèi)有菌生長；監(jiān)測樣品若連續(xù)培養(yǎng)觀察5d，全部無菌生長，可報(bào)告生物指示物培養(yǎng)陰性，滅菌合格。5）注意事項(xiàng)檢測所用化學(xué)和微生物指示物須經(jīng)衛(wèi)生部認(rèn)可，并在有效期內(nèi)使用。生物指示物監(jiān)測應(yīng)每月一次。備注：微生物室現(xiàn)所擁有的監(jiān)測芽胞滅菌效果的儀器分四類：48h、56℃培養(yǎng)儀；24h、58℃培養(yǎng)儀；4h、36℃培養(yǎng)儀；3h、60℃培養(yǎng)儀，其中，4h、36℃的儀器所檢測的芽胞類型為枯草桿菌黑色變種芽胞，其余的儀器所檢測的芽胞類型為耐熱的嗜熱脂肪桿菌芽胞。不同的滅菌器，所采用的芽胞類型不同：1、下排氣壓力蒸氣滅菌器、預(yù)真空和脈動(dòng)真空壓力蒸汽滅菌器、手提壓力蒸氣滅菌器-經(jīng)3h、60℃儀器培養(yǎng)，嗜熱脂肪桿菌芽胞2、臺(tái)式/卡式滅菌器-經(jīng)3h、60℃儀器培養(yǎng)，嗜熱脂肪桿菌芽胞3、環(huán)氧乙烷（EO）類滅菌器和干熱滅菌效果-經(jīng)4h、36℃儀器培養(yǎng)，枯草桿菌黑色變種芽胞4、低溫等離子滅菌器-經(jīng)24h、58℃儀器培養(yǎng)，嗜熱脂肪桿菌芽胞5、壓力蒸汽滅菌器-經(jīng)48h、56℃儀器培養(yǎng)，嗜熱脂肪桿菌芽胞3、醫(yī)療器械滅菌效果的監(jiān)測（1）采樣時(shí)間在滅菌處理后，存放有效期內(nèi)采樣。（2）采樣量及采樣方法對(duì)不能用破壞性方法取樣的特殊醫(yī)療用品，可用浸有無菌生理鹽水采樣液或無菌的復(fù)方中和劑的棉試子，在被檢物體表面涂抹采樣，被采表面<100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2,取100cm2。并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)采樣棉拭子，剪去手接觸部位；將棉拭子放入裝有9ml的肉湯或復(fù)方中和劑的無菌試管內(nèi)及時(shí)送檢。（3）培養(yǎng)在生物安全柜內(nèi)，取0.1ml，接種于營養(yǎng)瓊脂平板上，密涂，放于30-37℃環(huán)境中培養(yǎng)48h。（4）結(jié)果判定無細(xì)菌生長，且無致病菌生長，為滅菌合格。（5）注意事項(xiàng)送檢時(shí)間不得超過6h，若樣品保存于0-4℃，則不得超過24h；若消毒因子為化學(xué)消毒劑，采樣液中應(yīng)加入相應(yīng)中和劑。

備注：醫(yī)療器械包括縫合針、針頭、刀片、手術(shù)鉗、鑷子等

4、使用中消毒液染菌量測定（1）采樣量及采樣方法用無菌吸管吸取消毒液1.0ml，加入9.0ml含有復(fù)方中和劑的無菌管內(nèi)混勻，密封，及時(shí)送檢。（2）培養(yǎng)在生物安全柜內(nèi)，取0.1ml，接種于營養(yǎng)瓊脂平板上，密涂，放于30-37℃環(huán)境中培養(yǎng)48h。（4）結(jié)果判斷消毒液染菌量≤100CFU/mL，并未檢出致病菌為合格。（5）注意事項(xiàng)采樣后1h內(nèi)檢測同時(shí)選用適宜的中和劑。（6）應(yīng)同時(shí)對(duì)消毒、滅菌物品進(jìn)行消毒、滅菌效果監(jiān)測。消毒物品不得檢出致病性微生物（接觸黏膜的醫(yī)療用品細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)≤20CFU/g或100cm2；接觸皮膚的醫(yī)療用品細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)≤200CFU/g或100cm2），滅菌物品不得檢出任何微生物（在滅菌處理后，存放期內(nèi)采樣監(jiān)測）。備注：微生物室所采用的中和劑為復(fù)方中和劑即醫(yī)院感染監(jiān)測培養(yǎng)基，其內(nèi)含有Tween80+卵磷脂+硫代硫酸鈉等成分，其對(duì)應(yīng)的消毒劑為復(fù)方消毒劑。5、內(nèi)鏡消毒