細(xì)菌感染的檢查方法和防治原則課件

細(xì)菌感染的檢查方法和防治原則ExaminationandStrategyofPreventionandTherapyforBacterialInfection檢查與防治標(biāo)本采集與送檢的原則無菌操作區(qū)別取材盡快送檢妥善保護(hù)

檢查與防治病原菌的檢查程序藥物敏感試驗(yàn)標(biāo)本直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)生化試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)明確診斷初步診斷分子生物學(xué)技術(shù)其他檢測(cè)技術(shù)檢查與防治

形態(tài)學(xué)檢查

ExaminationinMorphology

直接涂片鏡檢：染色法：革蘭染色法抗酸染色法不染色法：懸滴法壓片法負(fù)染色法：墨汁壓片

檢查與防治分離培養(yǎng)

isolationandcultivation

分離培養(yǎng)是微生物學(xué)診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，是最可靠的傳統(tǒng)診斷技術(shù)。（圖為普通培養(yǎng)箱）檢查與防治生化反應(yīng)致病性測(cè)定藥敏試驗(yàn)?zāi)摗⑻?、咽拭子腦脊液、分泌物直接涂片，革蘭氏染色，鏡檢，細(xì)菌形態(tài)、排列、染色性 37℃血瓊脂平板24~48小時(shí)觀察細(xì)菌生長(zhǎng)情況：菌落特點(diǎn)挑取可疑菌落涂片、染色、鏡檢純分離血液，穿刺液肉湯（增菌培養(yǎng)）培養(yǎng)液混濁或溶血時(shí)，涂片、染色、鏡檢

病原性球菌的分離培養(yǎng)和鑒定檢查與防治

厭氧罐厭氧袋檢查與防治生化反應(yīng)鑒定細(xì)菌的重要方法之一。針對(duì)一個(gè)菌落或純培養(yǎng)物進(jìn)行鑒定。檢查與防治基本原則①用已知抗體檢測(cè)未知抗原；②用已知抗原檢測(cè)未知抗體。最簡(jiǎn)易的方法有玻片凝集試驗(yàn)。常用的方法有：凝集試驗(yàn)、沉淀試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、ELISA、免疫熒光等。免疫學(xué)試驗(yàn)檢查與防治檢查與防治檢查與防治ELISA病原體檢查與防治

ELISA病原體Patientserum檢查與防治EEELISA病原體PatientserumAnti-IgG檢查與防治分子生物學(xué)技術(shù)

MolecularBiologicalTechniques

核酸雜交

nucleotidehybridization

原位雜交

insituhybridization

斑點(diǎn)雜交

dotblot

SouthernblotNorthernblot

PCR技術(shù)：多聚酶鏈反應(yīng)

(polymerasechainreaction，PCR)檢查與防治

PCR

是一種無細(xì)胞的分子克隆技術(shù)，能在體外將一個(gè)基因或一段DNA序列經(jīng)過多次循環(huán)的DNA復(fù)制，在數(shù)小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增上百萬倍。利于診斷和研究。檢查與防治檢查與防治特異性預(yù)防免疫一、特異性預(yù)防免疫的發(fā)展簡(jiǎn)史1．經(jīng)驗(yàn)免疫學(xué)時(shí)期（17世紀(jì)~19世紀(jì)）

*中國醫(yī)學(xué)家用人痘苗預(yù)防天花*18世紀(jì)末英國醫(yī)生Jenner接種牛痘苗預(yù)防天花

檢查與防治天花病人局部痂皮磨成粉鼻吸入預(yù)防兒童天花中國古代“種人痘”（16~17世紀(jì)）檢查與防治EdwardJenner(1749-1823)Jenner種牛痘圖檢查與防治2．經(jīng)典免疫學(xué)時(shí)期（19世紀(jì)中葉-20世紀(jì)中葉）

免疫學(xué)與微生物學(xué)互相促進(jìn)、共同發(fā)展

*多種病原菌被發(fā)現(xiàn)；*“病原菌致病”概念的提出；*疫苗的發(fā)明；*細(xì)胞吞噬作用的發(fā)現(xiàn)（細(xì)胞免疫）；*免疫血清具有抵御病原菌的作用（體液免疫）；*免疫化學(xué)研究取得重大進(jìn)展；*初步認(rèn)識(shí)多種免疫學(xué)現(xiàn)象的本質(zhì)。檢查與防治EliMetchnikoff(1845-1916)EmilvonBehring(1845-1917)RobertKoch(1843-1910)PaulEhrilich(1854-1915)提出體液免疫理論和抗體生成的側(cè)鏈學(xué)說發(fā)現(xiàn)細(xì)胞吞噬作用，提出細(xì)胞免疫理論發(fā)現(xiàn)結(jié)核桿菌；提出病原菌致病的概念發(fā)現(xiàn)抗毒素并治愈一名白喉患者檢查與防治3．近代和現(xiàn)代免疫學(xué)時(shí)期（自20世紀(jì)中葉至今）

*Burnet（1957年）克隆選擇學(xué)說；*從器官、細(xì)胞和分子水平探討免疫系統(tǒng)結(jié)構(gòu)與功能。MacFarlaneBurnet（1899-1985）TopVirologist;TopEpidemiologistTopImmunologist;1960Nobelprizewinner檢查與防治二、免疫系統(tǒng)的功能檢查與防治免疫防御天然免疫屏障結(jié)構(gòu)體表屏障：物理、化學(xué)、生物屏障

內(nèi)部屏障：血腦屏障、血胎屏障吞噬細(xì)胞：中性粒細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞NK、gdT、B-1、NKT、肥大細(xì)胞、體液中的抗菌物質(zhì)：補(bǔ)體、防御素、炎性介質(zhì)適應(yīng)性免疫粘膜免疫系統(tǒng)體液免疫：抗毒素、抗菌抗體、抗病毒抗體細(xì)胞免疫CTLTDTH及其釋放的CK檢查與防治三、特異性預(yù)防免疫的現(xiàn)狀

1、獲得性免疫的產(chǎn)生方式主動(dòng)免疫

自然主動(dòng)免疫：隱性或顯性感染人工主動(dòng)免疫：接種疫苗或類毒素被動(dòng)免疫自然被動(dòng)免疫：通過胎盤、初乳人工被動(dòng)免疫：注射抗毒素、免疫球蛋白、免疫細(xì)胞、轉(zhuǎn)移因子等檢查與防治比較人工主動(dòng)免疫與人工被動(dòng)免疫內(nèi)容人工主動(dòng)免疫人工被動(dòng)免疫免疫物質(zhì)抗原或類毒素抗體、免疫細(xì)胞、細(xì)胞因子免疫出現(xiàn)時(shí)間慢，2～4周快，即刻免疫維持時(shí)間長(zhǎng)，數(shù)月至數(shù)年短，2～3周主要用途預(yù)防治療或緊急預(yù)防

檢查與防治特異性預(yù)防免疫制劑的種類與應(yīng)用

將疫苗或類毒素接種于人體，使機(jī)體獲得免疫力的一種防治微生物感染的措施。人工主動(dòng)免疫主要生物制劑（一）疫苗（vaccine）滅活疫苗（inactivatedvaccine）減毒活疫苗（liveattenuatedvaccine）

亞單位疫苗（subunitvaccine）核酸疫苗（nucleicacidvaccine）DNA重組疫苗（DNArecombinatingvaccine）治療性疫苗（therapeuticvaccine）

檢查與防治

區(qū)別點(diǎn)死疫苗活疫苗制劑特點(diǎn)死，強(qiáng)毒株活減毒株接種劑量與特點(diǎn)量較大，2~3次量較小，1次保存及有效期易保存，約1年不易保存，4℃數(shù)周免疫效果較低，維持?jǐn)?shù)月~2年較高，維持3~5年甚至更長(zhǎng)比較死疫苗與活疫苗檢查與防治（二）類毒素（toxoid）細(xì)菌外毒素經(jīng)0.3%～0.4%甲醛液作用3～4周后，毒性消失但仍保留免疫原性，則為類毒素。類毒素中加入適量的磷酸鋁或氫氧化鋁等吸附型