浙江省金華市名校2025屆高三第六次模擬考試生物試卷含解析

浙江省金華市名校2025屆高三第六次模擬考試生物試卷注意事項1．考試結束后，請將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請務必將自己的姓名、準考證號用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請認真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準考證號與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應選項的方框涂滿、涂黑；如需改動，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號等須加黑、加粗．一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列有關不同脂質特性和功能的敘述，錯誤的是（）A．油脂可被蘇丹Ⅲ染液染成橙黃色B．磷脂中的每個脂肪酸分子都有兩條碳氫鏈C．血液中的膽固醇過多會引發(fā)心腦血管疾病D．植物蠟具有防止果實的水分過多蒸發(fā)及微生物侵襲的功能2．某研究小組為了研究一定濃度的IAA和GA1對黃瓜幼苗生長的影響，進行了相關實驗。實驗設置（其中CK處理的為對照組）和結果如下表所示。下列敘述錯誤的是（）不同處理對黃瓜幼苗生長的影響處理胚軸長（cm）根體積（cm1）根干重（g）根鮮重（g）CK1．72672．22672．22112．2486GA11．42222．27112．22512．2871IAA1．54672．25512．22472．2855GA1+IAA1．95112．24112．22442．2691A．實驗處理的對象是種子，處理前可將其浸泡一段時間B．根據(jù)一般實驗設計的要求，表中對照組應該加入等量的配制其他三組溶液所用的溶劑C．從根體積、根干重和鮮重這些指標可以看出，GA1比IAA更能促進根的生長D．GA1和IAA在促進黃瓜幼苗根系生長方面表現(xiàn)為協(xié)同作用3．下列關于細胞的生命歷程的敘述，正確的是（）A．癌細胞表面粘連蛋白減少，因此能無限增殖B．細胞衰老的過程中，線粒體和細胞核體積減小C．細胞凋亡受基因控制，通常對生物的生存不利D．根尖中的各種細胞都是由分生區(qū)細胞分化形成的4．當人體注射了用禽流感病毒蛋白制備的疫苗后，體內不會發(fā)生的反應是A．吞噬(巨噬)細胞處理和呈遞抗原B．產(chǎn)生針對該禽流感病毒蛋白的抗體C．效應T細胞消滅被疫苗感染的細胞D．形成能識別禽流感病毒的記憶細胞5．有些實驗可以通過染色改進實驗效果，下列敘述不合理的是（）A．觀察菠菜葉肉細胞時，用二苯胺染色后葉綠體的結構更清晰B．在蔗糖溶液中加入適量紅墨水，可用于觀察白洋蔥鱗片葉表皮細胞的質壁分離C．用龍膽紫染液染色，觀察洋蔥根尖分生區(qū)細胞中的染色體D．探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化，可用臺盼藍染液區(qū)分菌體死活6．突觸是神經(jīng)元之間在功能上發(fā)生聯(lián)系的結構，也是信息傳遞的關鍵部位。下列相關敘述正確的是（）A．突觸由突觸前膜和突觸后膜構成B．突觸前膜釋放的神經(jīng)遞質運輸至突觸后膜需要消耗能量C．興奮傳遞到突觸后膜后，膜上發(fā)生化學信號到電信號的轉換D．神經(jīng)遞質發(fā)揮作用后引起突觸后神經(jīng)元興奮7．研究表明，抑郁癥與單胺類遞質傳遞功能下降相關。單胺氧化酶是一種單胺類遞質的降解酶，其抑制劑(MAOID)是一種常用抗抑郁藥。據(jù)圖分析，下列敘述錯誤的是（）A．細胞X通過胞吐釋放神經(jīng)遞質，可保證遞質大量迅速釋放B．單胺類遞質與蛋白M結合后，即可使細胞Y產(chǎn)生動作電位C．若細胞Y上蛋白M的數(shù)量減少，則可能會導致人患抑郁癥D．MAOID能增加突觸間隙的神經(jīng)遞質濃度，從而起到抗抑郁的作用8．（10分）下列關于肺炎雙球菌轉化實驗的敘述，正確的是（）A．活體和離體轉化實驗都證明S型菌的DNA可以使小鼠死亡B．R型菌轉化為S型菌后，其DNA分子中嘌呤與嘧啶比例相同C．S型菌和R型菌性狀的不同是基因選擇性表達的結果D．S型菌的DNA與R型菌混合懸浮培養(yǎng)，一段時間后可觀察到光滑型和粗糙型兩種菌落二、非選擇題9．（10分）基因工程目前已成為生物科學的核心技術，在農(nóng)牧業(yè)、工業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生等方面有良好的應用前景?；卮鹣铝袉栴}：（1）基因表達載體中的復制原點，本質上是一段富含A—T堿基對的DNA序列，它易與引物結合而成為復制起點的原理是____________。啟動子與復制原點的化學本質____________（填“相同”或“不同”），啟動子功能的含義主要是________________________。（2）利用PCR技術擴增目的基因，可在PCR擴增儀中進行的三步反應是____________。若在PCR擴增儀中加入模板DNA分子100個，則經(jīng)過30次循環(huán)后，DNA分子數(shù)量將達到____________個。（3）植物基因工程技術主要用于提高農(nóng)作物的抗逆能力，如抗蟲性、抗病性等。我國的抗蟲棉就是通過____________法導人抗蟲基因____________基因培育成功的；抗病毒的轉基因小麥是導入抗病毒基因培育的，使用最多的抗病毒基因有________________________。10．（14分）一般信息傳遞有三個基本環(huán)節(jié)：信息產(chǎn)生（信源）、信息傳輸（信道）、信息接收（信宿）。任何一個環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，都會導致信息傳遞失敗。（1）尿崩癥患者水分調節(jié)過程中信息傳遞出現(xiàn)問題，臨床上表現(xiàn)為排出大量低滲尿液?？煞譃閮深惽闆r：一類是信源環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，發(fā)病原因是由于_____________分泌的抗利尿激素的量不足所致。另一類是信宿環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，病因是_____________，而使抗利尿激素不能發(fā)揮作用。（2）生態(tài)系統(tǒng)中有些昆蟲的雌性個體能釋放性外激素吸引雄性個體，這類信息屬于_____________信息。有科學家發(fā)現(xiàn)，如果將雄性昆蟲的觸角切除，兩性個體間不能再通過這種方式傳播信息，這屬于破壞了信息傳遞的_____________環(huán)節(jié)。農(nóng)林生產(chǎn)中可以利用生態(tài)系統(tǒng)信息傳遞的作用來防治害蟲，例如人們利用性外激素誘殺雄蟲，以達到防治害蟲的效果。請分析其中的生物學原理__________________________。11．（14分）癌細胞表面蛋白“PDL-1”與T細胞表面蛋白“PD-1”特異性結合后，可抑制T細胞活性并啟動其凋亡，導致腫瘤細胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進行克隆、表達及生物學活性鑒定，為制備抗體打基礎。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點見圖2：α鏈：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1（1）首先提取細胞中的mRNA反轉錄生成____________________作為模板；設計含有不同的限制酶切點的α和β序列為引物，通過____________________技術擴增目的基因。（2）選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質?！陛d體進行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構建表達載體。該表達載體的組成，除了目的基因、標記基因抗卡那霉素基因外，還必須具有____________________等。（3）而后一定溫度下，與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中，可篩選出已經(jīng)完成轉化的大腸桿菌，繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴增重組DNA。（4）將擴增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉入可高度表達外源基因的原代293T細胞。一段時間后，為確定PD-1基因是否表達，檢測細胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學活性和功能，則可裂解293T細胞，提取該物質看能否與____________________發(fā)生結合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。研究中還會有一步驟，只將“pIRES2-EGFP載體”轉入293T細胞，其目的是_________________________。12．某生物興趣小組欲采用固定化酵母釀造啤酒，請根據(jù)其釀造過程回答下列相關問題。（1）利用海藻酸鈉制備固定化酵母細胞，應使用圖1-圖3中的圖_____________（填序號）所示方法。而制備固定化酶則不宜用此方法，原因是____________。用濃度較低的海藻酸鈉溶液制作凝膠珠，酵母菌催化活性較低的原因是____________。（2）興趣小組設計的實驗操作步驟如下。第一步：將定量的海藻酸鈉加入到定量的蒸餾水中，并和酵母菌充分混合；第二步：以恒定的速度緩慢地將注射器中的混合液滴加到配制好的CaCl2溶液中，并將形成的凝膠珠在CaCl2溶液中浸泡30min左右；第三步：將等量的凝膠珠分別加入到裝有葡萄糖溶液的簡易葡萄酒釀制裝置中（如圖4和圖5）。①請訂正上述步驟中的錯誤。______________。②與圖5裝置相比，圖4裝置釀制葡萄酒的優(yōu)點是___________。葡萄汁裝入圖4裝置時，要留有約1/3的空間，這種做法的目的是_______（答出兩點即可）。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

脂質包括磷脂（細胞膜的成分）、油脂（貯能物質）、植物蠟（保護細胞）、膽固醇、性激素等。磷脂中由含氮基團、磷酸基團、甘油和2分子脂肪酸組成?！驹斀狻緼、蘇丹Ⅲ染液可將油脂染成橙黃色，A正確；B、磷脂中的甘油連接著兩個脂肪酸分子，每個脂肪酸分子都有1條碳氫鏈，B錯誤；C、膽固醇是人體所必需的，血液中的膽固醇過多會引發(fā)心腦血管疾病，C正確；D、植物蠟具有防止果實的水分過多蒸發(fā)及微生物侵襲的功能，對植物細胞起保護作用，D正確。故選B。2、D【解析】

對照實驗：在探究某種條件對研究對象的影響時，對研究對象進行的除了該條件不同以外，其他條件都相同的實驗。根據(jù)變量設置一組對照實驗，使實驗結果具有說服力；一般來說，對實驗變量進行處理的，就是實驗組，沒有處理是的就是對照組。【詳解】A、由于種子本身會產(chǎn)生激素，為了排除內源激素對實驗結果的影響，因此處理前可將其浸泡一段時間，A正確；B、CK處理的為對照組，根據(jù)實驗設計的無關變量一致原則和單一變量原則，對照組應該加入等量的配制其他三組溶液所用的溶劑，B正確；C、與CK相比，根體積、根干重和鮮重方面用GA1比IAA處理促進效果更明顯，故僅從上述指標觀測GA1比IAA更能促進根的生長，C正確；D、據(jù)表格數(shù)據(jù)分析，GA1和IAA同時使用時，根體積、根干重和鮮重均比兩種物質單獨使用時有所下降，故GA1和IAA在促進黃瓜幼苗根系生長方面表現(xiàn)無協(xié)同關系，D錯誤。故選D?！军c睛】解答此題需要明確實驗設計的變量原則與對照關系，能結合圖表數(shù)據(jù)分析各項。3、D【解析】

細胞正常的生命力程包括生長、分裂、分化、衰老、凋亡，都生物體的生存都是有利的，而細胞癌變是畸形分化的結果，是不正常的生命現(xiàn)象?；貞浐褪崂砑毎只⑺ダ?、凋亡和癌變的相關知識點，結合選項分析答題。【詳解】A、癌細胞表面粘連蛋白減少，導致癌細胞容易擴散和轉移，A錯誤；B、細胞衰老的過程中，線粒體體積減小，而細胞核體積增大，B錯誤；C、細胞凋亡受基因控制，通常對生物的生存是有利的，C錯誤；D、根尖分生區(qū)細胞具有不斷的分裂的能力，根尖中的各種細胞都是由分生區(qū)細胞分裂、分化形成的，D正確。故選D。4、C【解析】A.在特異性免疫發(fā)生的時都有吞噬（巨噬）細胞處理和呈遞抗原，A不符合題意；B.產(chǎn)生針對該禽流感病毒蛋白的抗體，在疫苗注射后會發(fā)生，B不符合題意；C.禽流感病毒蛋白制備的疫苗只有抗原的特點沒有侵染細胞的特點，故效應T細胞消滅被疫苗感染的細胞不會發(fā)生，C符合題意；D.形成能識別禽流感病毒的記憶細胞，會在體內發(fā)生，D不符合題意。故選C。5、A【解析】

本題考查的是高中生物必修課本上的一些實驗，包括觀察細胞中的葉綠體實驗、觀察植物細胞質壁分離和復原實驗、觀察植物細胞有絲分裂實驗、探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化實驗，回憶這些實驗的原理、過程、結果與結論等，結合選項分析答題。【詳解】A、二苯胺可以使DNA呈現(xiàn)藍色，但是需要水浴加熱，而葉綠體本身是綠色的，觀察時不需要染色，A錯誤；B、白色洋蔥鱗片葉表皮細胞的細胞液無色，在蔗糖溶液中加入適量的紅墨水使之成為紅色，會使觀察到的質壁分離現(xiàn)象更明顯，B正確；C、龍膽紫等堿性染料可將染色體染成深色，便于觀察洋蔥根尖分生區(qū)細胞中的染色體，C正確；D、活細胞的細胞膜對物質進出細胞具有選擇透過性，其細胞膜可以阻止活細胞不需要的臺盼藍染色劑進入，因此活細胞不能被臺盼藍染成藍色，而當細胞死亡后，細胞膜的選擇透過性喪失，臺盼藍染色劑才能進入細胞，因此凡被染成藍色的均為死細胞，D正確。故選A。6、C【解析】

興奮在神經(jīng)元之間傳遞時，需通過突觸結構，突觸包括突觸前膜、突觸間隙和突觸后膜，當興奮傳至軸突末端時，突觸前膜內的突觸小泡釋放神經(jīng)遞質到突觸間隙，作用于突觸后膜上的受體，引起突觸后膜所在神經(jīng)元的興奮，因此興奮在突觸處單向傳遞，只能由一個神經(jīng)元的軸突向另一個神經(jīng)元的樹突或胞體傳遞?！驹斀狻緼、相鄰的兩神經(jīng)元之間通過突觸結構建立聯(lián)系，突觸由突觸前膜、突觸間隙和突觸后膜構成，A錯誤；B、突觸前膜釋放的神經(jīng)遞質通過擴散到達突觸后膜，不需要消耗能量，B錯誤；C、興奮在兩神經(jīng)元之間的傳遞是通過神經(jīng)遞質實現(xiàn)的，神經(jīng)遞質與突觸后膜結合后，引起了突觸后膜上發(fā)生化學信號到電信號的轉換，從而產(chǎn)生興奮，C正確；D、突觸前膜釋放的神經(jīng)遞質分為興奮性遞質和抑制性遞質，神經(jīng)遞質與突觸后膜結合后會引起突觸后神經(jīng)元興奮或抑制，D錯誤。故選C?！军c睛】本題的知識點是突觸的結構，興奮在突觸間傳遞的信號變化，興奮在突觸間傳遞的特點，對于突觸結構和興奮在突觸間傳遞的過程的理解是解題的關鍵。7、B【解析】

由圖可知，細胞X可以釋放神經(jīng)遞質，作用于細胞Y，故細胞X屬于突觸前神經(jīng)元?！驹斀狻緼、細胞X通過胞吐釋放小分子神經(jīng)遞質，可保證遞質在短時間內大量釋放，該過程需要消耗能量，A正確；B、單胺類遞質與蛋白M結合后，陽離子內流后才使細胞Y產(chǎn)生動作電位，B錯誤；C、細胞Y上蛋白M的數(shù)量減少，神經(jīng)遞質無法作用于蛋白M，有可能導致人患抑郁癥，C正確；D、MAOID能夠抑制單胺氧化酶的活性，抑制其分解神經(jīng)遞質，故增加突觸間隙的單胺類神經(jīng)遞質濃度，從而起到抗抑郁的作用，D正確。故選B?！军c睛】解答本題的關鍵是掌握突觸的結構，分析圖中數(shù)字和字母代表的結構的名稱，明確神經(jīng)遞質的作用機理以及作用后會被降解。8、B【解析】

肺炎雙球菌體內轉化實驗：R型細菌→小鼠→存活；S型細菌→小鼠→死亡；加熱殺死的S型細菌→小鼠→存活；加熱殺死的S型細菌+R型細菌→小鼠→死亡；在艾弗里證明遺傳物質是DNA的實驗中，艾弗里將S型細菌的DNA、蛋白質、糖類等物質分離開，單獨的、直接的觀察它們各自的作用．另外還增加了一組對照實驗，即DNA酶和S型活菌中提取的DNA與R型菌混合培養(yǎng)。【詳解】A、活體轉化實驗證明S型菌中有某種轉化因子使R型菌發(fā)生轉化，離體轉化實驗證明DNA為轉化因子，但是使小鼠死亡的不是S型菌的DNA，而是活的S型肺炎雙球菌，A錯誤；B、R型菌轉化為S型菌后，遺傳物質還是DNA，遵循堿基互補配對原則，故DNA分子中嘌呤與嘧啶比例相同，各占50%，B正確；C、S型菌和R型菌性狀不同的本質原因是遺傳物質不同，C錯誤；D、混合懸浮培養(yǎng)用的是液體培養(yǎng)基，不會形成菌落，要看到菌落，還需使用固體培養(yǎng)基進行涂布分離，D錯誤。故選B。【點睛】R型和S型肺炎雙球菌的區(qū)別是前者沒有莢膜（菌落表現(xiàn)粗糙），后者有莢膜（菌落表現(xiàn)光滑）；由肺炎雙球菌轉化實驗可知，只有S型菌有毒，會導致小鼠死亡，S型菌的DNA才會是R型菌轉化為S型菌。二、非選擇題9、A-T堿基對多，相對氫鍵少，DNA易解旋相同啟動子驅動基因轉錄成mRNA高溫變性，低溫退火、中溫延伸100×230花粉管通道Bt毒蛋白病毒外殼蛋白基因和病毒的復制酶基因【解析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)可分為變性、復性、延伸三步。在循環(huán)之前，常需要進行一次預變性，以便增加大分子模板DNA徹底變性的概率。PCR過程為:變性，當溫度上升到90℃以上時，氫鍵斷裂，雙鏈DNA解旋為單鏈。復性，當溫度降低到50℃左右時，兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合。延伸，溫度上升到72℃左右，溶液中的四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補配對原則合成新的DNA鏈。【詳解】（1）基因表達載體包括啟動子、終止子、目的基因、標記基因和復制原點等，所以復制原點和啟動子化學本質相同，都是一段特定的DNA序列。已知復制原點中含A-T堿基對多，因此含氫鍵少，結構不穩(wěn)定，易解旋，可做為復制的起點，而啟動子是驅動基因轉錄成mRNA的。（2）PCR技術擴增目的基因包括三步反應：高溫變性（氫鍵斷裂）、低溫退火（復性）形成氫鍵和中溫延伸形成子鏈。PCR擴增儀可以自動調控溫度，實現(xiàn)三步反應循環(huán)完成。PCR技術擴增目的基因的原理是DNA雙鏈復制，結果使DNA呈指數(shù)增長，即2n（n為擴增循環(huán)的次數(shù)），所以100個DNA分子，30次循環(huán)，使DNA數(shù)量可達到100×230個。（3）植物基因工程培育抗蟲抗病等轉基因植物用到的抗蟲基因有Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制劑基因等，我國的抗蟲棉就是利用花粉管通道法導入Bt毒蛋白基因培育的；抗病毒基因有病毒外殼蛋白基因和病毒的復制酶基因。【點睛】基因表達載體的構建是基因工程的關鍵步驟，熟知基因表達載體中各部分的結構和功能是解答本題的關鍵，最后一問提醒學生要關注生物科學的新進展。10、下丘腦腎臟相應細胞表而缺乏受體（腎臟相應細胞表而受體對抗利尿激素不敏感）化學信息接收（信宿）通過大量誘殺害蟲的雄性個體，破壞害蟲種群正常的性別比例，使很多雌性個體不能完成交配，降低出生率，從而使該種害蟲的種群密度明顯降低，以達到防治害蟲的效果【解析】

1、生態(tài)系統(tǒng)中信息的類型（1）物理信息：生態(tài)系統(tǒng)中的光、聲、顏色、溫度、濕度、磁力等，通過物理過程傳遞的信息。（2）化學信息：生物在生命活動過程中，產(chǎn)生的一些可以傳遞信息的化學物質。（3）行為信息：是指某些動物通過某些特殊行為，在同種或異種生物間傳遞的某種信息。2、信息傳遞在生態(tài)系統(tǒng)中的作用（1）個體：生命活動的正常進行，離不開信息的作用。（2）種群：生物種群的繁衍，離不開信息傳遞（3）群落和生態(tài)系統(tǒng)：能調節(jié)生物的種間關系，維持生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定?！驹斀狻浚?）尿崩癥患者水分調節(jié)過程中信息傳遞出現(xiàn)問題，可分為兩類情況：一類是信源環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，發(fā)病原因是由于下丘腦分泌的抗利尿激素的量不足所致。另一類是信宿環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，腎臟相應細胞表而缺乏受體（腎臟相應細胞表而受體對抗利尿激素不敏感），而使抗利尿激素不能發(fā)揮作用。（2）生態(tài)系統(tǒng)中有些昆蟲的雌性個體能釋放性外激素吸引雄性個體，這類信息屬于化學信息。如果將雄性昆蟲的觸角切除，兩性個體間不能再通過這種方式傳播信息，這屬于破壞了信息傳遞的信息接收環(huán)節(jié)。農(nóng)林生產(chǎn)中通過大量誘殺害蟲的雄性個體，破壞害蟲種群正常的性別比例，使很多雌性個體不能完成交配，降低出生率，從而使該種害蟲的種群密度明顯降低，以達到防治害蟲的效果?！军c睛】本題考查個體和生態(tài)系統(tǒng)層次信息傳遞相關知識點，掌握相關知識結合題意答題。11、cDNAPCRXhoIEoRI啟動子、終止子、復制原點卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對照【解析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA采用分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質采用抗原—抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫（cDNA）。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因，而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因，可以mRNA為模板反轉錄形成cDNA；由于PCR技術利用的是DNA分子復制的原理，所以用該cDNA進行PCR技術擴增短時間內可以獲得大量的目的基因。（2）分析圖1中堿基序列，α鏈上有“—CTCGAC—”識別序列，β鏈上有“—GAATTC—”堿基識別序列，與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質粒”載體進行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構建基因表達載體。基因表達載體的組成包括目的基因、標記基因、啟動子、終止子、復制原點等。（3）根據(jù)第（2）題可知，基因表達載體上的標記基因是卡那霉素抗性基因，因此一定溫度下，與經(jīng)過Ca2+處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基，可篩選出已經(jīng)完成轉化的大腸桿菌。（4）基因表達的產(chǎn)物是蛋白質，一段時間后，為確定PD-1基因是否表達，可以檢測細胞膜表面是否具有PD-1基因表達的PD-1蛋白。為判斷其是否具有生物學活性和功能，可采用抗原—抗體雜交技術，即從裂解293T細胞中，提取PD-1蛋白看能否與PDL-1發(fā)生結合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。為了增加實驗的可信度，還需要設置對照實驗，