GB∕ T 40152-2021 蜂蜜中蔗糖轉(zhuǎn)化酶的測定 分光光度法（正式版）

蜂蜜中蔗糖轉(zhuǎn)化酶的測定國家市場監(jiān)督管理總局國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會IGB/T40152—2021本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由中華全國供銷合作總社提出。本文件由全國蜂產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)化工作組(SAC/SWG2)歸口。1蜂蜜中蔗糖轉(zhuǎn)化酶的測定分光光度法3術(shù)語和定義定特定波長下吸光度值確定對硝基苯酚含量來測定蜂蜜中蔗糖轉(zhuǎn)化酶。將蜂蜜溶液加入到底物溶液5試劑和材料5.1磷酸二氫鉀(KH?PO?)。5.2二水合磷酸氫二鈉(Na?HPO?·2H?O)。5.4三羥甲基氨基甲烷Tris。5.60.02mol/L底物溶液(pH為6.0)。2稱取363.4g三羥甲基氨基甲烷，加入900mL水溶解后，用3mol/LHCl調(diào)節(jié)pH至9.5,用水稀釋至1L。6儀器和設(shè)備6.1紫外可見分光光度計。6.2分析天平：感量0.1mg,0.01g。6.3渦旋混勻器。6.4pH計：精度±0.02。6.5恒溫水浴鍋：溫度控制精度±0.1℃。6.7移液管1mL、5mL。6.8定時器：精確度5s。7試樣的制備與保存樣品為均勻無雜質(zhì)的液體或結(jié)晶蜂蜜。對于有結(jié)晶的蜂蜜，于40℃以下融化，混合均勻后待測。8測定步驟8.1樣品的制備：稱取4g(精確至0.01g)蜂蜜于25mL容量瓶中，加入15mL磷酸鹽緩沖液(5.5),充分搖勻溶解，用磷酸鹽緩沖液(5.5)定容至刻度，渦旋混合均勻，冷藏保存?zhèn)溆?，有效期?d。8.2用移液管分別移取5mL底物溶液(5.6)于兩支試管中，將兩支試管同時置于40℃水浴鍋中預(yù)熱5min后，一支試管準(zhǔn)確加入0.5mL樣品溶液(8.1),另一支空白對照試管不加樣品溶液，計時，迅速渦旋10s后將兩支試管再置于40℃水浴鍋中，20min后從水浴鍋中取出試管，分別準(zhǔn)確加入0.5mL的終止溶液(5.7),迅速渦旋混勻，冷卻至室溫。在空白對照試管中準(zhǔn)確加入0.5mL樣品溶液(8.1),再次混合均勻。于波長400nm處分別測樣品溶液以及空白對照溶液的吸光度。9結(jié)果計算試樣中的蔗糖轉(zhuǎn)化酶值按式(1)進(jìn)行計算：X=(A,—A。)×198.68X———樣品的蔗糖轉(zhuǎn)化酶值，單位為標(biāo)準(zhǔn)單位每千克(U/kg);A,——樣品溶液在波長400nm下的吸光度；A?！瞻讓φ杖芤涸诓ㄩL400nm下的吸光度。結(jié)果保留至小數(shù)點后一位。10精密度蔗糖轉(zhuǎn)化酶值>10U/kg