2016年藥學(xué)論文-解酒降脂保肝湯對(duì)酒精性脂肪肝的預(yù)防作用及機(jī)制

1/12016年藥學(xué)論文—解酒降脂保肝湯對(duì)酒精性脂肪肝的預(yù)防作用及機(jī)制解酒降脂保肝湯對(duì)酒精性脂肪肝的預(yù)防作用及機(jī)制作者：

魏嵋邱榮仙陳丹劉啟如【摘要】目的研究解酒降脂保肝湯對(duì)大鼠酒精性脂肪肝的預(yù)防及作用機(jī)制。

方法用白酒和高脂飲食灌胃法制作大鼠酒精性脂肪肝模型，以解酒降脂保肝湯進(jìn)行治療，與東寶肝泰治療組作對(duì)比觀察。

治療1個(gè)月后處死大鼠，取血及肝組織，檢測(cè)肝功能（ALT，AST)、血脂（TC，TG）及內(nèi)毒素（ET）和丙二醛（MDA），并對(duì)各組大鼠行病理學(xué)檢查。

結(jié)果灌胃10周后大鼠形成酒精性脂肪肝，經(jīng)解酒降脂保肝湯治療1個(gè)月后，血清ALT，AST，TC，TG以及血漿ET，MDA均顯著降低，肝臟脂肪變及炎癥顯著改善。

結(jié)論解酒降脂保肝湯可有效地防治大鼠酒精性脂肪肝，推測(cè)護(hù)肝、抗炎、抗內(nèi)毒素及改善脂質(zhì)過氧化狀態(tài)為其主要作用機(jī)制。

【關(guān)鍵詞】酒精性脂肪肝；解酒降脂保肝湯；大鼠；實(shí)驗(yàn)研究Abstract：

ObjectiveTostudytheprotectiveeffectsofJJBDdecoctiononalcoholicfattyliveranditsmechanisms.MethodsNormalratswereintragastricallyinfusedwithwhitewineandhighfatdietandexecutedafter1month.SerumALT,AST,TC,TGandplasmaET,MDAlevelweredeterminedrespectively,andpathologicalchangesweredetermined.ResultsRatmodelofalcoholicfattyliverwasinducedsuccessfullyafter10weeks.InthegroupsofJJBDdecoction,thelevelsofALT，AST，TC，TG，ET，MDAweredecreasedsignificantly,andsteatosisstateandinflammationofliverwereimproved.ConclusionJJBDdecoctioncanpreventfattydegenerationandinflammationinalcoholicfattyliver,anditsmainmechanismsmayinvolveinrecoveryofliverfunction,anti-inflammation,anti-endotoxin,andlipidperoxideinhibiting.Keywords：

Alcoholicfattyliver;JiejiuJiangzhiBaogandecoction;Rats;Experimentresearch近年來，我國(guó)酒精性脂肪肝的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，其危害性已引起人們的廣泛關(guān)注。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)該病的治療，除了戒酒、對(duì)癥外，目前尚無(wú)特殊療法，而中藥復(fù)方制劑以其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)發(fā)揮著重要作用。

我們對(duì)瀘州醫(yī)學(xué)院中西醫(yī)結(jié)合肝病專家孫同郊教授在長(zhǎng)期臨床實(shí)踐中總結(jié)出來的治療酒精性脂肪肝有效經(jīng)驗(yàn)方解酒降脂保肝湯進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究，觀察其對(duì)酒精性肝病的預(yù)防效果，揭示其治療酒精性脂肪肝的作用機(jī)制，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，并為進(jìn)一步研究和新藥開發(fā)奠定基礎(chǔ)。

1材料SPF級(jí)SD大鼠50只，雄性，體重（20020）g，由四川大學(xué)動(dòng)物科提供；解酒降脂保肝湯（由瀘州醫(yī)學(xué)院附屬中醫(yī)院制劑室生產(chǎn)，批號(hào)20060507）；東寶肝泰（由中國(guó)通化東寶藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)20060123）。

紅星二鍋頭酒（北京釀酒總廠生產(chǎn)，濃度：

56度，相當(dāng)于10.2mol/L）；高脂飼料（自制，普通飲料/豬油=85/15，每1000g飼料中加入15g硫酸亞鐵、10g豬膽酸鈉、50%膽固醇充分混勻，制成成形飼料，60℃烤干）。

鱟試劑藥盒（購(gòu)自上海伊華醫(yī)學(xué)科技有限公司，批號(hào)20060402）；MDA試劑盒（購(gòu)自南京建成生物工程有限公司，批號(hào)20061007）。

2方法2.1動(dòng)物及分組將50只大鼠隨機(jī)分成兩組：

正常對(duì)照組（10只），給予普通飼料，灌服生理鹽水15ml/kg；模型組（40只），按15ml/kg灌服56%紅星二鍋頭酒，1次/d，同時(shí)給予高脂飼料。

10周后造模成功，隨機(jī)取正常對(duì)照組和模型組大鼠各10只，處死大鼠，快速分離血清及血漿，保存于-70℃，待測(cè)肝功能及ET和MDA，取肝組織送病理檢測(cè)。

從11周起，將剩余的27只模型組大鼠隨機(jī)分成3組，每組9只，分別灌胃解酒降脂保肝湯（高劑量組濃度為每天10g/kg，低劑量組濃度為每天5g/kg）、東寶肝泰組（濃度為每天0.9g/kg）。

1月后結(jié)束實(shí)驗(yàn)，最后1次灌胃后禁食12h，處死動(dòng)物，分離血清、血漿，于-70℃低溫保存，取新鮮肝組織送病理檢測(cè)。

2.2檢測(cè)指標(biāo)①肝功能檢測(cè)；②MDA，ET檢測(cè)：

按試劑盒說明操作。

③肝組織病理（HE染色）：

常規(guī)取材、脫水、包埋、切片、HE染色，光鏡下觀察病理變化。

2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理計(jì)量資料用s表示，行方差齊性檢驗(yàn)后單因素組間方差分析t檢驗(yàn)，在SPSS10.0軟件下進(jìn)行。

3結(jié)果3.1大體標(biāo)本肉眼觀察正常對(duì)照組肝臟表面光滑，柔軟而富有彈性，呈暗紅色，邊緣銳利，切面光潔；模型組肝臟體積增大，整個(gè)肝臟呈奶黃色，并見局灶性黃白色變性灶，包膜緊張，邊緣鈍厚，切面油膩。

各治療組之間肉眼觀察差別不明顯，色澤較暗，質(zhì)地、彈性均介于模型組與正常組之間。

3.2光鏡下觀察HE染色：

正常肝組織肝小葉結(jié)構(gòu)完整，肝細(xì)胞索以肝小葉中央靜脈為中心呈放射狀排列，肝細(xì)胞大小一致，胞核居中，肝細(xì)胞無(wú)變性壞死，無(wú)炎細(xì)胞浸潤(rùn)；模型組部分肝小葉呈中度脂肪變性，單個(gè)大脂滴將細(xì)胞核擠向一側(cè)，可見酒精小體，部分肝組織呈氣球樣變性，可見淤血、小灶壞死及少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)；東寶肝泰組肝細(xì)胞呈輕度脂肪變性，部分肝細(xì)胞腫脹，少量肝細(xì)胞再生；解酒降脂保肝湯小劑量組部分肝細(xì)胞呈輕度脂肪變性，輕度腫脹，肝細(xì)胞再生較明顯；解酒降脂保肝湯高劑量組少見肝細(xì)胞呈脂肪變性，部分肝細(xì)胞輕度腫脹，肝細(xì)胞再生明顯。

見圖1。

3.3解酒降脂保肝湯對(duì)酒精性脂肪肝模型大鼠肝功能的影響結(jié)果見表1。

表1各組大鼠血清肝功能指標(biāo)檢測(cè)情況與正常對(duì)照組比較，△△P0.01；與模型組比較，＊P0.05，＊＊P0.01；與東寶肝泰組比較，●P0.05；與低劑量組比較，＃P0.05從表1可以看出，模型組與正常組比較，血中ALT，AST，TC，TG均明顯升高（P0.01）；東寶肝泰組、解酒降脂保肝湯高、低劑量組與模型組比較，均能顯著降低血中ALT，AST，TC，TG（P0.05，P0.01）；各用藥組間大鼠的ALT，AST，TC，TG水平差異不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。

上一頁(yè)12下一頁(yè)3.4解酒降脂保肝湯對(duì)酒精性脂肪肝模型大鼠血漿內(nèi)毒素（ET）和血清丙二醛（MDA）含量的影響結(jié)果見表2。

表2解酒降脂保肝湯對(duì)酒精性脂肪肝模型大鼠血漿ET、血清MDA的影響由表2可見，模型組與正常組比較，血中ET，MDA均明顯升高（P0.01）；東寶肝泰組能顯著降低血中ET,MDA（P0.05），解酒降脂保肝湯高、低劑量組與模型組比較能極顯著顯著降低血中ET，MDA（P0.01）；解酒降脂保肝湯高劑量組在降低ET，MDA方面明顯優(yōu)于東寶肝泰組（P0.05）。

4討論目前，酒精性脂肪肝的確切發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚，但普遍認(rèn)為其與乙醇及其氧化產(chǎn)物的毒性有密切關(guān)系，近年來有人提出了以氧應(yīng)激和脂質(zhì)過氧化為中心的二次打擊假說［1］。

MDA是脂質(zhì)過氧化的整合物，它可以反映人體的氧化反應(yīng)并通過多種途徑對(duì)肝細(xì)胞造成損害［2］，正常情況下，肝細(xì)胞具有抗氧化作用，可以隨時(shí)清除不斷生成的有害自由基，阻斷自由基的鏈?zhǔn)椒糯蠓磻?yīng)，從而起到保護(hù)肝細(xì)胞的作用。

但是，當(dāng)大量飲酒后，氧化抗氧化機(jī)制失去平衡，自由基和脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物就會(huì)損害細(xì)胞膜的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)，最終導(dǎo)致肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能的損害。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，酒精性脂肪肝大鼠模型組血清MDA水平明顯高于正常對(duì)照組，東寶肝泰組、解酒降脂保肝湯高、低劑量組與模型組比較均能顯著降低血中MDA含量。

這一方面證實(shí)了MDA在酒精性脂肪肝發(fā)病機(jī)制中的重要作用，另一方面也證實(shí)了解酒降脂保肝湯確有降低MDA的作用，其療效優(yōu)于東寶肝泰。

此外，內(nèi)毒素在酒精性脂肪肝發(fā)生發(fā)展中也起著非常重要的作用，它可以通過激活Kupffer細(xì)胞造成繼發(fā)性肝損害［3］。

長(zhǎng)期攝入酒精者，腸道的通透性增加，從而誘導(dǎo)低水平的內(nèi)毒素血癥，并誘導(dǎo)Kupffer細(xì)胞大量釋放超氧化物和細(xì)胞因子，繼而產(chǎn)生肝臟損害。

因此，積極地預(yù)防內(nèi)毒素血癥，可有效地減少動(dòng)物因攝入乙醇后造成的肝損害。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)了內(nèi)毒素在酒精性脂肪肝發(fā)病中具有重要作用，同時(shí)也證實(shí)了在解酒降脂保肝湯對(duì)肝臟的保護(hù)作用機(jī)制中，降低血漿內(nèi)毒素水平為其特點(diǎn)之一。

我院中西醫(yī)結(jié)合肝病專家孫同郊教授通過長(zhǎng)期大量臨床實(shí)踐，結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)知識(shí)，認(rèn)識(shí)到酒精性脂肪肝以脾虛肝郁，濕濁內(nèi)蘊(yùn)，血脈瘀阻為其主要病機(jī)，治當(dāng)醒酒解毒，健脾疏肝，祛濕化濁，活血化瘀。

認(rèn)為解酒毒是治療酒精性脂肪肝區(qū)別于其它類型脂肪肝的主要特點(diǎn)，立解酒降脂保肝湯方（由枳椇子、葛根、柴胡、澤瀉、丹參、山楂等12味藥物組成），以圖解酒毒，降脂保肝之功效。

方中枳椇子養(yǎng)陰生津、潤(rùn)燥止渴、涼血，能清熱利尿、解酒毒，主治酒毒、煩熱、口渴、嘔吐、二便不利等癥。

現(xiàn)代研究表明，枳椇子可加快乙醇的代謝，提高谷胱甘肽過氧化酶的活性，降低乙醇所致的ALT，AST，MDA升高等作用［4］；葛根解肌退熱、生津透疹、升陽(yáng)止瀉、解酒毒，現(xiàn)代藥理研究證實(shí)其有較強(qiáng)的抗脂質(zhì)過氧化作用；柴胡解表退熱、疏肝解郁、升陽(yáng)，有抗炎、抗氧化、降血脂、保肝之功效；澤瀉利水滲濕、瀉熱，有較好的降血脂、抗脂肪肝、抗炎作用［5］；丹參活血化瘀，能抗內(nèi)毒素所致的肝損害［6］。

處方以枳椇子、葛根醒脾解酒、祛濕化濁為主藥；臣以柴胡等疏肝理氣，丹參等活血化淤，澤瀉等清熱解毒、除濕化濁；輔以山楂助脾胃運(yùn)化、行氣散淤。

全方配伍精當(dāng)，藥證相合，共奏醒酒解毒、疏肝健脾、祛濕化濁、活血化瘀之功效。

本實(shí)驗(yàn)以白酒灌胃加喂食高脂飼料制作酒精性脂肪肝大鼠模型，從肝臟病理及血清肝功能檢測(cè)結(jié)果可以看出，造模完全成功。

模型組大鼠有脂肪肝形成及明顯的肝臟損害，經(jīng)解毒降脂保肝湯治療后上述指標(biāo)均顯著降低，說明解毒降脂保肝湯有較好的保肝、降脂、解酒毒的功效。

其中，能有效地降低血清MDA和血漿內(nèi)毒素，清除氧自由基、改善脂質(zhì)過氧化狀態(tài)為其作用特點(diǎn)。

【參考文獻(xiàn)】［1］ArteelGE.Oxidantsandantioxidantsinalcoholinducedliverdisease［J］.Gastroenterology,2003，124：

778.［2］張秀明，李健高，魏明競(jìng)，等.現(xiàn)代臨床生物檢驗(yàn)學(xué)，第1版［M］.北京：

人民衛(wèi)生出版社，2001：

1089.［3］NishimuraG,nakaharaK,misawaN,etal.Immunizationagainstintestinalbacterialendotoxinpr