科技支撐計(jì)劃可行性研究報(bào)告提綱

PAGEPAGE12010年南昌市科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目可行性研究報(bào)告項(xiàng)目名稱：治療角膜病的漢防己甲素申報(bào)單位：南昌弘益科技有限公司（蓋章）項(xiàng)目聯(lián)系人：熊艷君電話13970091856通訊地址：江西省南昌國家高新開發(fā)區(qū)火炬大街789號郵政編碼：330096

治療角膜病的漢防己甲素可行性研究報(bào)告一、選題的必要性（一）項(xiàng)目所處技術(shù)領(lǐng)域產(chǎn)業(yè)政策本項(xiàng)目是漢防己甲素新的給藥途徑治療角膜病創(chuàng)新藥物，具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)，屬于國家《當(dāng)前優(yōu)先發(fā)展的高技術(shù)產(chǎn)業(yè)化重點(diǎn)領(lǐng)域》和《國家重點(diǎn)支持的高新技術(shù)領(lǐng)域》，是《國家產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整指導(dǎo)目錄》、《國家產(chǎn)業(yè)技術(shù)政策》和江西省“六個(gè)一”工程十大戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)發(fā)展規(guī)劃鼓勵(lì)發(fā)展的產(chǎn)業(yè)和產(chǎn)品。（二）項(xiàng)目所處技術(shù)領(lǐng)域的國內(nèi)外現(xiàn)狀和技術(shù)發(fā)展趨勢角膜病是我國的主要致盲眼病之一。角膜疾病主要有炎癥、外傷、先天性異常、變性、營養(yǎng)不良和腫瘤等。其中感染性角膜炎癥占有重要地位。肺炎球菌較易直接感染角膜，其它病原菌則需要大量局部侵襲或機(jī)體抵抗力下降時(shí)才易致病。角膜緣血供豐富，角膜周邊部和中央部之間在免疫相關(guān)的細(xì)胞和活性因子的分布上存在顯著差異，角膜周邊部或角膜緣的淋巴細(xì)胞以及補(bǔ)體成分含量高于角膜中央部。此外角膜的周邊和角鞏緣含有抗原提呈細(xì)胞——樹突狀細(xì)胞（表達(dá)MHC-II和共刺激分子，能有效的活化T細(xì)胞）。周邊上皮層和角膜前基質(zhì)層，存在少量的淋巴細(xì)胞。血管黏附分子和細(xì)胞因子也可以把血管內(nèi)不同類別的白細(xì)胞吸引到角膜緣。因此，臨床上角膜周邊部或角膜緣易發(fā)生免疫性角膜?。ㄈ缧Q蝕性角膜潰瘍、泡性角結(jié)膜炎和邊緣性角膜潰瘍等），而一些感染性角膜病則易發(fā)生于角膜中央?yún)^(qū)。角膜上皮是抵御病原微生物侵襲角膜的第一道屏障，上皮遭受損傷后，極容易發(fā)生感染性炎癥。上皮層損傷后可以再生，不留瘢痕。角膜前彈力層受損后不能再生，由上皮細(xì)胞或瘢痕組織填充。角膜基質(zhì)層對維持角膜的透明性及抵抗眼力壓有重要作用，損傷后由瘢痕組織修復(fù)填補(bǔ)，使角膜失去透明性。角膜后彈力層受損后可以由內(nèi)皮細(xì)胞分泌再生，修復(fù)速度為每月10μm，接近正常厚度。內(nèi)皮細(xì)胞的屏障功能遭到破壞后，傷口緣的Descemet's膜收縮并向基質(zhì)層卷曲，數(shù)小時(shí)之內(nèi)，毗鄰的內(nèi)皮細(xì)胞向傷口區(qū)遷徙，通過細(xì)胞重組、增大和遷徙，重建完整的內(nèi)皮單層結(jié)構(gòu)。當(dāng)完整的單層內(nèi)皮細(xì)胞重新覆蓋Descemet's膜時(shí)，細(xì)胞間形成接觸抑制和穩(wěn)定的細(xì)胞連接。此時(shí)，參與創(chuàng)傷修復(fù)的細(xì)胞體積大于未參與修復(fù)區(qū)域的細(xì)胞。如果內(nèi)皮損傷較重，局部的內(nèi)皮細(xì)胞會(huì)形成復(fù)層及纖維化，引起異常的基底膜樣物質(zhì)沉積。角膜是重要的光學(xué)通路，角膜病尤其是位于角膜中央的病灶，嚴(yán)重影響視力，所以角膜病要給予積極的治療。角膜各層對局部使用藥物的滲透性不同，脂溶性物質(zhì)可以迅速通過緊密連接的上皮層，水溶性物質(zhì)易于通過基質(zhì)層。因此，為了提高藥物眼部使用的生物利用度，理想藥物應(yīng)具備雙相溶解性方能穿透角膜進(jìn)入眼內(nèi)。角膜移植是重要的復(fù)明及治療手段，角膜免疫學(xué)上處于相對的“赦免狀態(tài)”，角膜的免疫赦免包含以下幾種因素：①無血管，免疫效應(yīng)因子無法輸送。②無淋巴管，抗原和抗原提呈細(xì)胞無法進(jìn)入局部淋巴結(jié)。③表達(dá)免疫抑制因子，包括TGF-β。④表達(dá)Fas配體，對活化的淋巴細(xì)胞可以誘導(dǎo)Fas介導(dǎo)的凋亡。但角膜仍存在著參與免疫反應(yīng)的各種成分如T、B淋巴細(xì)胞，朗罕氏細(xì)胞、免疫球蛋白、補(bǔ)體以及組織相容性抗原等。因此，雖然角膜移植是器官移植中成功率最高的一種。但在某些抗原刺激下，尤其當(dāng)病變角膜出現(xiàn)新生血管時(shí)，角膜移植亦出現(xiàn)免疫排斥反應(yīng)。因此，藥物仍然是治療角膜病的重要方法。角膜病治愈后遺留厚薄不等的瘢痕。淺層的瘢痕性混濁如云霧狀，通過混濁部分仍能看清后面虹膜紋理者稱角膜云翳?；鞚彷^厚略呈白色，但仍可透見虹膜者稱角膜斑翳?；鞚岷芎癯蚀砂咨?，不能透見虹膜者稱角膜白斑。如果角膜瘢痕組織中嵌有虹膜組織時(shí)，使形成粘連性角膜白斑，提示病變角膜有穿破史。若白斑面積大，而虹膜又與之廣泛粘連，則可能堵塞房角，房水流出受阻致使眼壓升高，引起繼發(fā)性青光眼。高眼壓作用下，混雜有虹膜組織的角膜瘢痕膨出形成紫黑色隆起，稱為角膜葡萄腫。角膜斑翳對視力的影響與發(fā)生的部位有關(guān)，如斑翳在中央部位遮蔽了瞳孔，既使很薄，也嚴(yán)重影響視力，因此必須及時(shí)治療。對角膜斑翳有不少治療方法，至今仍選擇使用的有球結(jié)膜下注射高滲水、碘離子導(dǎo)入、狄奧寧和黃降泵軟膏局部應(yīng)用等治療方法，雖有一定效果，但都不夠滿意，效療低，有的操作不便，有的有副作用。角膜斑翳是角膜病治愈后遺留的瘢痕，瘢痕形成時(shí)，角膜的吸收功能降低，在這種情況下斑翳也就難以消散。目前，世界上治療角膜病，特別治療角膜斑翳方法和藥物極為有限，開發(fā)有效的治療藥物具有重要的社會(huì)意義和經(jīng)濟(jì)效益。漢防己甲素又稱粉防己堿，是從防己科千金藤屬植物StephaniatetrandraS.moore的塊根中分離出的主要生物堿，屬于雙芐基異喹啉類化合物，早期在臨床上主要用于治療早期輕度高血壓，亦可用于重癥高血壓及高血壓危象。目前，漢防己甲素在臨床上用于抗風(fēng)濕及抗腫瘤輔助治療取得較好的療效，臨床應(yīng)用的劑型有注射液和片劑。近年來的研究證實(shí)漢防己甲素是天然的非選擇性鈣通道阻滯劑，又是鈣蛋白的拮抗劑，除了抗炎作用機(jī)制外，還可作為有效IL-1阻滯劑而不是花生四烯酸阻滯劑抗眼部炎癥反應(yīng)，甚至其效能超過糖皮質(zhì)激素，而且，漢防己甲素還通過非競爭性方法顯著抑制內(nèi)毒素，有效用于治療眼部炎癥，包括葡萄膜炎，角膜炎等，以及其導(dǎo)致的視網(wǎng)膜病變。另外，漢防己甲素對白內(nèi)障、青光眼、視網(wǎng)膜疾病、眼內(nèi)腫瘤等眼疾病都有一定的藥理作用，對眼部炎癥、青光眼、增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變和視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤有良好的治療作用，但未見漢防己甲素用于角膜病，特別是角膜斑翳的報(bào)道。（三）項(xiàng)目技術(shù)先進(jìn)性，對相關(guān)領(lǐng)域技術(shù)進(jìn)步的推動(dòng)作用1、漢防己甲素用于角膜病的機(jī)理研究處于國際領(lǐng)先水平研究結(jié)果表明，漢防己甲素通過將細(xì)胞周期停滯在G0/G1期和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡而抑制角膜基質(zhì)細(xì)胞增殖，并能減少纖維連接蛋白在兔角膜基質(zhì)細(xì)胞間的堆積而發(fā)揮作用。體外動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，漢防己甲素通過減少TGF-β1的表達(dá)和抑制NF-ΚB的活性以及減少細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的生成，對兔準(zhǔn)分子激光角膜屈光術(shù)（PPK）后角膜上皮下霧狀混濁（Haze）形成有明顯抑制作用。通過不同濃度漢防己甲素的對比研究，篩選出0.1%濃度漢防己甲素為最低有效濃度；同時(shí)，運(yùn)用描述性毒理學(xué)進(jìn)一步證實(shí)0.1%及以下濃度漢防己甲素對兔眼眼組織無刺激性、毒性，應(yīng)可安全用于眼部，0.3%漢防己甲素為最高耐受濃度，而漢防己甲素在眼部較長時(shí)間使用不會(huì)引起眼壓升高。2、漢防己甲素用于角膜病的藥效研究處于國際領(lǐng)先水平研究結(jié)果表明，漢防己甲素對細(xì)菌性角膜炎、角膜煙曲菌病、痢疾桿菌誘發(fā)的角膜炎、角膜斑翳有顯著治療作用。3、漢防己甲素滴眼液藥代動(dòng)力學(xué)研究處于國際領(lǐng)先水平采用HPLC法研究漢防己甲素滴眼液在兔眼部的藥代動(dòng)力學(xué)，結(jié)果表明，漢防己甲素滴眼液單次滴眼后，在淚液中迅速消除；在眼內(nèi)各組織中，漢防己甲素在角膜中的濃度最大，在角膜中的AUC遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于其他眼內(nèi)組織的AUC值，約為房水中的AUC的8倍、虹膜睫狀體AUC的5倍、晶體狀A(yù)UC的15倍、玻璃體AUC的25倍，說明漢防己甲素進(jìn)入眼內(nèi)的藥物大部蓄積在角膜組織中，進(jìn)入眼內(nèi)其他組織的量相對較少。漢防己甲素滴眼液單次滴眼后，在兔眼各組織中的藥物濃度變化均符合血管外給藥一室模型一級動(dòng)力學(xué)過程。漢防己甲素滴眼液單次滴眼后，在角膜中能達(dá)到較高濃度，而且消除速率相對較慢。漢防己甲素在眼部的這種代謝特點(diǎn)為開發(fā)治療角膜病的滴眼液提供了重要依據(jù)。本項(xiàng)目研究開發(fā)了一種治療角膜病的創(chuàng)新藥物，作為自主創(chuàng)新的經(jīng)濟(jì)增長點(diǎn)，對于正確引導(dǎo)我國醫(yī)藥行業(yè)藥物研究開發(fā)，促進(jìn)產(chǎn)業(yè)技術(shù)升級和產(chǎn)品結(jié)構(gòu)調(diào)整具有積極的作用。（四）項(xiàng)目目前進(jìn)展情況及市場分析1、項(xiàng)目目前進(jìn)展情況對漢防己甲素用于角膜病的機(jī)理以及治療角膜炎、角膜斑翳等角膜病的作用進(jìn)行了探索性研究，并對漢防己甲素眼部用藥的藥代動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了基礎(chǔ)性研究，選擇漢防己甲素滴眼液作為治療角膜病的劑型，開展?jié)h防己甲素滴眼液藥學(xué)、藥理毒性學(xué)和藥效學(xué)研究。2、項(xiàng)目產(chǎn)品市場分析角膜病是我國的主要致盲眼病之一，但治療方法和藥物極其有限。本項(xiàng)目治療角膜病的漢防己甲素滴眼液具有顯著的藥物經(jīng)濟(jì)學(xué)價(jià)值和經(jīng)濟(jì)社會(huì)效益。治療角膜病的漢防己甲素滴眼液作為具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的創(chuàng)新藥物，目前國內(nèi)外尚未見相關(guān)研究和上市報(bào)道，亦未見相關(guān)專利報(bào)道，預(yù)計(jì)其年銷售峰值將達(dá)8億元。二、技術(shù)方案論述（一）項(xiàng)目技術(shù)關(guān)鍵點(diǎn)或創(chuàng)新點(diǎn)論述，項(xiàng)目完成時(shí)達(dá)到的技術(shù)水平查新報(bào)告表明，將檢索到的文獻(xiàn)資料與本項(xiàng)目的查新點(diǎn)對比分析后得出結(jié)論：國內(nèi)未檢索到研發(fā)治療角膜病的漢防己甲素全身用藥制劑，包括片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑、混懸劑、注射劑；治療角膜病的漢防己甲素局部用藥制劑，包括黏膜給藥制劑、貼劑、透皮吸收劑、氣霧劑、噴霧劑、粉霧劑；以及治療角膜斑翳的漢防己甲素滴眼液的文獻(xiàn)報(bào)道。本項(xiàng)目的查新點(diǎn)具有新穎性。1、項(xiàng)目技術(shù)創(chuàng)新點(diǎn)論述1.1漢防己甲素用于角膜病作用機(jī)理研究結(jié)果表明，漢防己甲素通過將細(xì)胞周期停滯在G0/G1期和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡而抑制角膜基質(zhì)細(xì)胞增殖，并能減少纖維連接蛋白在兔角膜基質(zhì)細(xì)胞間的堆積而發(fā)揮作用。體外動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，漢防己甲素通過減少TGF-β1的表達(dá)和抑制NF-ΚB的活性以及減少細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的生成，對兔準(zhǔn)分子激光角膜屈光術(shù)（PPK）后角膜上皮下霧狀混濁（Haze）形成有明顯抑制作用。通過不同濃度漢防己甲素的對比研究，篩選出0.1%濃度漢防己甲素為最低有效濃度；同時(shí)，運(yùn)用描述性毒理學(xué)進(jìn)一步證實(shí)0.1%及以下濃度漢防己甲素對兔眼眼組織無刺激性、毒性，應(yīng)可安全用于眼部，0.3%漢防己甲素為最高耐受濃度，而漢防己甲素在眼部較長時(shí)間使用不會(huì)引起眼壓升高。藥效研究結(jié)果表明，漢防己甲素對細(xì)菌性角膜炎、角膜煙曲菌病、痢疾桿菌誘發(fā)的角膜炎、角膜斑翳有顯著治療作用。1.2治療角膜病的漢防己甲素全身用藥制劑，包括片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑、混懸劑、注射劑。1.3治療角膜病的漢防己甲素局部用藥制劑，包括眼部給藥制劑、黏膜給藥制劑、貼劑、透皮吸收劑、氣霧劑、噴霧劑、粉霧劑。1.4漢防己甲素滴眼液處方及制備工藝。1.5治療角膜病的漢防己甲素滴眼液采用HPLC法研究漢防己甲素滴眼液在兔眼部的藥代動(dòng)力學(xué)，結(jié)果表明，漢防己甲素滴眼液單次滴眼后，在淚液中迅速消除；在眼內(nèi)各組織中，漢防己甲素在角膜中的濃度最大，在角膜中的AUC遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于其他眼內(nèi)組織的AUC值，約為房水中的AUC的8倍、虹膜睫狀體AUC的5倍、晶體狀A(yù)UC的15倍、玻璃體AUC的25倍，說明漢防己甲素進(jìn)入眼內(nèi)的藥物大部蓄積在角膜組織中，進(jìn)入眼內(nèi)其他組織的量相對較少。漢防己甲素滴眼液單次滴眼后，在兔眼各組織中的藥物濃度變化均符合血管外給藥一室模型一級動(dòng)力學(xué)過程。漢防己甲素滴眼液單次滴眼后，在角膜中能達(dá)到較高濃度，而且消除速率相對較慢。漢防己甲素在眼部的這種代謝特點(diǎn)為開發(fā)治療角膜病的滴眼液提供了重要依據(jù)。2、項(xiàng)目完成時(shí)達(dá)到的技術(shù)水平治療角膜病的漢防己甲素制劑，特別是漢防己甲素滴眼液達(dá)到國際領(lǐng)先水平。（二）項(xiàng)目技術(shù)方案論述1、藥學(xué)研究1.1處方、工藝研究（1）制劑規(guī)格的確定根據(jù)本項(xiàng)目前期研究結(jié)果，確定漢防己甲素滴眼液的濃度分別為0.1%和0.3%，制劑規(guī)格分別為5ml：5mg和5ml：15mg。（2）處方篩選以漢防己甲素的溶解度、穩(wěn)定性和藥理活性為指標(biāo)，確定溶液的最佳pH值。通過穩(wěn)定性試驗(yàn)篩選滲透壓調(diào)節(jié)劑、緩沖劑、抗氧劑、防腐劑和黏度劑的種類與用量，進(jìn)行滲透壓調(diào)節(jié)，并結(jié)合眼刺激性試驗(yàn)和藥效學(xué)研究，確定處方。①酸的篩選漢防己甲素為雙芐基異喹啉類生物堿，不溶于水，與酸形成可溶性鹽可改善其溶解度，分別對不同的酸及加入量進(jìn)行篩選，在100℃②滲透壓調(diào)節(jié)劑的篩選常用的滲透壓調(diào)節(jié)劑有氯化鈉、葡萄糖和甘露醇，分別按上述酸的加入量，用0.65%氯化鈉、5%葡萄糖和5%甘露醇做滲透壓調(diào)節(jié)劑，用10%氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液的pH值為6.0，在100℃③緩沖劑的篩選為保證溶液的穩(wěn)定性，分別用適合眼用的磷酸鹽、硼酸-硼砂、硼酸-醋酸鈉為緩沖劑，調(diào)節(jié)溶液的pH值為6.0，在100℃④溶液的pH值眼睛耐受的pH值范圍為5～9，pH值過高或過低都會(huì)對眼睛產(chǎn)生刺激性。漢防己甲素為生物堿，pH值大于7.5時(shí)有游離堿析出，溶液渾濁，所以可篩選的pH值范圍為5.0～7.0。按上述方法分別配制pH5.0、6.0、6.5和7.0的溶液，在100℃⑤抗氧劑的篩選適合pH值為6.0的眼用抗氧劑有維生素C、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉和乙二胺四乙酸二鈉，常用量分別為0.02%～0.5%、0.1%～0.2%、0.025%～0.1%和0.01%～0.1%?？紤]到維生素C氧化變色，所以不選用，重點(diǎn)考察亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉和乙二胺四乙酸二鈉，用量分別為0.2%、0.3%和0.03%，用10%氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液pH值為6.0，在100℃⑥防腐劑的篩選適合pH為6.0的眼用防腐劑有苯扎氯銨和尼泊金乙酯。尼泊金乙酯在282nm波長處有強(qiáng)吸收，干擾漢防己甲素的含量測定。因此選用苯扎氯銨為防腐劑，并對其用量進(jìn)行篩選。用量分別為0.01%、0.015%和0.02%，調(diào)節(jié)溶液的pH值為6.0，在100℃⑦黏度劑的選擇常用的眼用黏度劑有羥丙甲纖維素、聚乙烯吡咯烷酮K30。按照眼用黏度劑的常用量，用10%氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液pH值為6.0，在100℃⑧滲透壓調(diào)節(jié)采用滲透壓測定儀測量滲透壓，調(diào)整滲透壓調(diào)節(jié)劑的加入量，使為等滲（286mOsmol/kg）。（3）制備工藝研究①主藥和輔料的粉碎及粒徑驗(yàn)證。②溶液的配制方法研究驗(yàn)證。③溶液的pH值、滲透壓調(diào)節(jié)方法研究驗(yàn)證。④溶液的無菌處理方法研究驗(yàn)證。⑤半成品控制方法研究驗(yàn)證。（4）影響因素試驗(yàn)采用確定的處方、工藝制備的樣品，灌裝于聚酯滴眼液瓶中，分別在光照（4500LX）和高溫（40℃、60（5）凍融試驗(yàn)為考察在運(yùn)輸或使用過程中溫度對產(chǎn)品質(zhì)量的影響，模擬藥品在運(yùn)輸和使用過程中可能遇到的溫度條件，考察采用擬上市包裝的樣品的穩(wěn)定性。采用確定的處方、工藝制備的樣品，灌裝于聚酯滴眼液瓶中，熱循環(huán)三次，每次在-20℃～-10℃2天、然后在401.2中試放大生產(chǎn)研究按照處方、工藝研究結(jié)果，進(jìn)行中試放大生產(chǎn)研究，進(jìn)一步考察中試放大規(guī)模條件下的工藝技術(shù)參數(shù)，制備中試放大樣品。1.3工業(yè)化生產(chǎn)研究驗(yàn)證根據(jù)中試放大生產(chǎn)研究結(jié)果，進(jìn)一步在工業(yè)化生產(chǎn)條件下對廠房、設(shè)備、處方、工藝、清場清潔等進(jìn)行驗(yàn)證，工業(yè)化生產(chǎn)產(chǎn)品。1.4質(zhì)量研究根據(jù)本品的理化特性，按照中國藥典2010年版二部附錄IG眼用制劑滴眼劑和中國藥典2010年版二部附錄XIXA藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法指導(dǎo)原則的規(guī)定，參照《化學(xué)藥物制劑研究基本技術(shù)指導(dǎo)原則》（【H】GPH4-1）、《化學(xué)藥物質(zhì)量控制分析方法驗(yàn)證技術(shù)指導(dǎo)原則》（【H】GPH5-1）、《化學(xué)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立的規(guī)范化過程技術(shù)指導(dǎo)原則》（【H】GPH1-1）的要求，對漢防己甲素滴眼液的外觀性狀、鑒別、可見異物、pH、裝量、滲透壓摩爾濃度、無菌、含量均勻度、雜質(zhì)和含量測定分析控制方法進(jìn)行研究驗(yàn)證，并對產(chǎn)品質(zhì)量進(jìn)行分析檢測，為制定產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。1.5穩(wěn)定性研究根據(jù)本品的理化特性，按照中國藥典2010年版二部附錄XIXC原料藥與藥物制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原則的規(guī)定，參照《化學(xué)藥物穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》（【H】GPH6-1）的要求，以外觀、有關(guān)物質(zhì)、pH和含量為指標(biāo)，考察采用擬上市包裝的樣品加速試驗(yàn)（40℃，RH75%）6個(gè)月和長期試驗(yàn)（252、藥理毒理研究已上市的漢防己甲素劑型為注射劑和片劑，適應(yīng)癥為抗風(fēng)濕藥及抗癌增效藥。治療角膜病的漢防己甲素滴眼液屬于增加新適應(yīng)癥、改變給藥途徑、改變已上市銷售的制劑劑型的化學(xué)藥品第1類新藥，是局部用藥制劑，根據(jù)《藥品注冊管理辦法》的規(guī)定，進(jìn)行漢防己甲素滴眼液治療角膜病的相關(guān)主要藥效學(xué)和非臨床安全性研究。2.1主要藥效學(xué)研究（1）漢防己甲素滴眼液對細(xì)菌性角膜炎的作用用金黃色葡萄球菌及綠膿桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株感染新西蘭白兔，制成細(xì)菌性角膜炎動(dòng)物模型，用比濁法測定細(xì)菌數(shù)，用生理鹽水為對照，觀察給予漢防己甲素滴眼后兔外眼形態(tài)學(xué)和角膜上細(xì)菌生長情況。（2）漢防己甲素滴眼液對角膜煙曲菌病的治療作用角膜劃痕后板層內(nèi)注射致角膜煙曲菌病。將煙曲菌懸液（106/ml）0.1ml注入新西蘭白兔一只眼角膜基層內(nèi)，至4mm區(qū)域水腫混濁為止，另一只眼以同法注入生理鹽水作為對照，制成角膜煙曲病動(dòng)物模型，給予漢防己甲素滴眼液和0.25%氯霉素滴眼液，每日用裂隙燈觀察其角膜、前房、虹膜及晶體等變化，動(dòng)物接種后分別于1、2、4、6、8、10、15、20、25及30天采用耳靜脈注射空氣法處死，立即取材制備組織學(xué)標(biāo)本。電鏡標(biāo)本僅限于1、2、4、6及8天者，同時(shí)取正常及對照眼角膜檢查。取材后，將角膜組織于Carnoy液中固定12小時(shí)，石蠟包埋，HE染色，用光鏡觀察。取材后，立即將角膜置入2.5%戊二醛液中固定2小時(shí)，然后切成4mm×5mm組織塊，經(jīng)梯度乙醇脫水、臨界點(diǎn)干燥及真空噴鍍金膜后用掃描電鏡觀察。將角膜組織于2.5%戊二醛液中固定2小時(shí)，切成2mm×3mm小塊，1%四氧化鋨后固定，梯度乙醇脫水，環(huán)氧樹脂包埋，半薄切片定位后超薄切片，檸檬酸鉛及醋酸鈾雙重染色后于透射電鏡下觀察，評價(jià)漢防己甲素滴眼液對角膜煙曲菌病的治療作用。（3）漢防己甲素滴眼液對痢疾桿菌誘發(fā)的角膜炎的作用將有毒痢疾菌株的新鮮斜面培養(yǎng)物制成一定濃度的鹽水菌懸液，滴入豚鼠角膜結(jié)合膜囊內(nèi)，制成痢疾桿菌感染實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，用生理鹽水作為對照，觀察漢防己甲素滴眼液對痢疾桿菌誘發(fā)角膜炎的作用。（4）漢防己甲素滴眼液對角膜斑翳的治療作用取經(jīng)視力檢查、角膜內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)和密度檢查、角膜地形圖檢查、裂隙燈檢查、A超檢查確定為角膜斑翳模型豚鼠，用漢防己甲素滴眼液每天3～6次，連續(xù)30天，用狄奧寧軟膏為對照。觀察漢防己甲素滴眼液對角膜斑翳的治療作用。2.2非臨床安全性研究（1）眼刺激性試驗(yàn)以新西蘭白兔眼為動(dòng)物模型，對漢防己甲素滴眼液的眼刺激性進(jìn)行試驗(yàn)。在體法用眼刺激性實(shí)驗(yàn)評價(jià)眼刺激性，評價(jià)漢防己甲素滴眼液單次給藥或重復(fù)給藥的眼刺激性；離體法用角膜水化值為評價(jià)指標(biāo)，漢防己甲素滴眼液重復(fù)多次給藥角膜水化值的變化，對角膜的刺激性。（2）溶血性試驗(yàn)取兔血，除去纖維蛋白原，使成脫纖血液。加入生理鹽水，搖勻，離心，除去上清液，沉淀的紅細(xì)胞再用生理鹽水洗滌至上清液不顯紅色為止。將所得紅細(xì)胞用生理鹽水制成2%的混懸液，供試驗(yàn)用。取漢防己甲素滴眼液作為供試品溶液；以生理鹽水為陰性對照，以蒸餾水為陽性對照，依次加入2%紅細(xì)胞懸液，立即置37℃±0.5℃2.3過敏性試驗(yàn)（1）眼部被動(dòng)過敏試驗(yàn)用兔，用漢防己素滴眼液作為供試液，以牛血清白蛋白為陽性對照，以漢防己素滴眼液輔料生理鹽水溶液（除無漢防己素外，其它輔料和用量與漢防己素滴眼液相同）為陰性對照，腹腔注射制備抗血清。用生理鹽水稀釋抗體血清，滴入兔眼，進(jìn)行被動(dòng)致敏。被動(dòng)致敏48小時(shí)后，各組靜脈注射與致敏劑量相同的激發(fā)抗原加等量的1%伊文思蘭染料共1ml，進(jìn)行激發(fā)。30分鐘后麻醉處死各組動(dòng)物，觀察兔眼組織變化，評價(jià)漢防己素滴眼液的過敏情況。（2）全身主動(dòng)過敏試驗(yàn)用豚鼠，用漢防己素滴眼液作為供試液，以牛血清白蛋白為陽性對照，以漢防己素滴眼液輔料生理鹽水溶液（除無漢防己素外，其它輔料和用量與漢防己素滴眼液相同）為陰性對照，隔日一次腹腔注射，共3～5次，致敏。在末次注射后第14天快速靜脈注射給藥激發(fā)，激發(fā)劑量為致敏劑量的3～5倍。致敏期間每日觀察動(dòng)物的癥狀。初次、最后一次致敏和激發(fā)當(dāng)日測定每組每只動(dòng)物的體重。靜脈注射激發(fā)立刻至30分鐘，詳細(xì)觀察每只動(dòng)物的過敏反應(yīng)癥狀，癥狀出現(xiàn)及消失時(shí)間。最長觀察3小時(shí)。判斷過敏反應(yīng)發(fā)生程度。計(jì)算過敏反應(yīng)發(fā)生率。根據(jù)過敏反應(yīng)發(fā)生率和發(fā)生程度進(jìn)行綜合判斷。評價(jià)漢防己素滴眼液的全身主動(dòng)過敏情況。（3）光過敏反應(yīng)試驗(yàn)用白色豚鼠，設(shè)陽性對照和陰性對照組。眼內(nèi)滴入受試物，照射紫外線，每日操作一次，連續(xù)5日進(jìn)行致敏，7～10天后，再次眼內(nèi)滴入受試物，照射紫外線進(jìn)行激發(fā)。評價(jià)漢防己素滴眼液的光過敏反應(yīng)。2.4漢防己甲素滴眼液非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究用微量注射器給新西蘭白兔雙眼結(jié)膜囊內(nèi)滴入50μl0.5%漢防己甲素滴眼液，輕輕閉合雙瞼約1min，滴眼后分別于0.167、0.5、1.0、1.25、1.5、2、2.5、3.0、4.0和12.0h耳緣靜脈栓塞處死動(dòng)物，用生理鹽水沖洗結(jié)膜囊，立即抽取房水，取角膜組織，并用濾紙吸干后稱重。所有樣品均儲(chǔ)存于-20℃（1）角膜樣品的處理取兔眼角膜，生理鹽水沖洗表面，吸干水分，稱重，將角膜剪碎，加甲醇0.8ml，勻漿，漩渦混合3min，15000r·min-1離心20min，取上清液作為檢測液。（2）房水樣品處理取房水200μl，加入甲醇200μl，漩渦混合3min，15000r·min-1離心20min，取上清液作為檢測液。（3）角膜和房水中漢防己甲素濃度分析檢測方法研究驗(yàn)證采用RP-HPLC法檢測角膜和房水中的漢防己甲素濃度，用甲醇沉淀蛋白質(zhì)。對分析檢測方法的線性、準(zhǔn)確性、精確性、耐用性、最低檢測限進(jìn)行研究驗(yàn)證，建立漢防己甲素在角膜和房水中的分析檢測方法。（4）藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)測定測定漢防己甲素在兔眼角膜組織及房水中達(dá)峰時(shí)間、峰濃度、消除速率常數(shù)、吸收速率常數(shù)、清除半衰期、曲線下面積、淚液轉(zhuǎn)移率、淚液的初始藥物濃度，計(jì)算角膜上皮藥物的滲透系數(shù)，評價(jià)漢防己甲素在角膜組織與房水中藥物濃度變化的動(dòng)力學(xué)模型、在角膜組織中的滲透性、在房水中的濃度變化過程，為制定臨床研究方案提供依據(jù)。3、臨床研究3.1臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究男性健康志愿者，采用LC-MS/MS分析檢測技術(shù)，測定漢防己甲素在人體眼角膜組織及房水中達(dá)峰時(shí)間、峰濃度、消除速率常數(shù)、吸收速率常數(shù)、清除半衰期、曲線下面積、淚液轉(zhuǎn)移率、淚液的初始藥物濃度，計(jì)算角膜上皮藥物的滲透系數(shù)，評價(jià)漢防己甲素在人體角膜組織與房水中藥物濃度變化的動(dòng)力學(xué)模型、在人體角膜組織中的滲透性、在房水中的濃度變化過程，為臨床研究提供依據(jù)。3.2臨床研究（1）I期臨床試驗(yàn)采用劑量遞增方案，在人體（主要是健康志愿者）進(jìn)行不同劑量給藥，考察人體對漢防己甲素滴眼液的耐受性，找出人體可耐受的劑量，了解在此劑量下的不良反應(yīng)，為II期臨床研究推薦合適的劑量。（2）II期臨床試驗(yàn)采用隨機(jī)、雙盲、多中心、安慰劑對照試驗(yàn)方法，評價(jià)漢防己甲素滴眼液兩個(gè)劑量組治療角膜病的安全性和有效性，為III期臨床研究驗(yàn)證推薦劑量。（3）III期臨床試驗(yàn)采用隨機(jī)、雙盲、多中心、安慰劑對照試驗(yàn)方法，用II期臨床試驗(yàn)推薦的劑量，驗(yàn)證漢防己甲素滴眼液治療角膜病的安全性和有效性，為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。（三）項(xiàng)目技術(shù)質(zhì)量指標(biāo)1、項(xiàng)目產(chǎn)品達(dá)到的主要技術(shù)性能指標(biāo)1.1對眼部炎癥、青光眼、增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、角膜病，特別是角膜斑翳有良好的治療作用。1.2漢防己甲素滴眼液成品率97%，漢防己甲素滴眼液含量大于95%，雜質(zhì)含量小于1.5%。1.3漢防己甲素滴眼液眼部給藥安全有效，質(zhì)量可控。2、項(xiàng)目產(chǎn)品執(zhí)行的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：國家藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。3、通過的國家相關(guān)行業(yè)許可認(rèn)證：漢防己甲素滴眼液通過藥品GMP認(rèn)證，取得《藥品GMP證書》。（四）分階段描述項(xiàng)目執(zhí)行過程中各階段目標(biāo)1、臨床前研究1.1時(shí)間：2010年1月～2011年12月1.2目標(biāo)：獲得國家食品藥品監(jiān)督管理局申請臨床研究注冊《受理通知書》。2、臨床研究2.1時(shí)間：2013年6月～2014年12月2.2目標(biāo)：（1）獲得國家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)進(jìn)行臨床研究，完成臨床研究。（2）獲得國家食品藥品監(jiān)督管理局申請生產(chǎn)注冊《受理通知書》。3、產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化3.1時(shí)間：2015年1月～2015年12月3.2目標(biāo)：（1）獲得國家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)，取得《新藥證書》和《注冊批件》。（2）通過藥品GMP認(rèn)證，取得漢防己甲素滴眼液《藥品GMP證書》。（五）項(xiàng)目經(jīng)費(fèi)預(yù)算情況項(xiàng)目總投資2540萬元。已完成投資80萬元，用于漢防己甲素滴眼液制劑、作用機(jī)理、藥效、藥代動(dòng)力學(xué)研究。1、本項(xiàng)目須新增投資2460萬元，其投資構(gòu)成和投資預(yù)算如下：1.1項(xiàng)目研究、注冊等費(fèi)用（1）藥學(xué)研究費(fèi)用：包括處方工藝研究、質(zhì)量研究、穩(wěn)定性研究、樣品小試、中試和工業(yè)化生產(chǎn)等費(fèi)用120萬元。（2）藥理毒理研究費(fèi)用：160萬元。（3）非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究費(fèi)用：50萬元。（4）臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究費(fèi)用：60萬元。（5）臨床研究費(fèi)用：1000萬元。（6）申請臨床研究注冊復(fù)核檢驗(yàn)和注冊審批費(fèi)用：10萬元。（7）申請生產(chǎn)注冊復(fù)核檢驗(yàn)和注冊審批費(fèi)用：30萬元。（8）知識(shí)產(chǎn)權(quán)費(fèi)用：5萬元。（9）其他費(fèi)用：包括項(xiàng)目技術(shù)咨詢、成果鑒定、學(xué)術(shù)交流、會(huì)議、差旅費(fèi)、勞務(wù)費(fèi)、管理等費(fèi)用50萬元。小計(jì)：1485萬元。1.2項(xiàng)目生產(chǎn)車間建設(shè)工程費(fèi)用建設(shè)1000M2（1）土建工程費(fèi)用：200萬元。（2）通風(fēng)、空調(diào)、消防、凈化安裝、裝修工程費(fèi)用：500萬元。小計(jì)：700萬元。1.3項(xiàng)目生產(chǎn)設(shè)備、分析檢測儀器采購費(fèi)用（1）生產(chǎn)設(shè)備采購費(fèi)用①溶液配制系統(tǒng)3套：30萬元。②溶液過濾系統(tǒng)3套：90萬元。③溶液灌裝系統(tǒng)2套：60萬元。（2）分析檢測儀器采購費(fèi)用①液相色譜儀1套：35萬元。②氣相色譜儀1套：50萬元。小計(jì)：265萬元。1.4藥品GMP認(rèn)證費(fèi)用：10萬元。合計(jì)：2460萬元。2、科技經(jīng)費(fèi)使用預(yù)算序號科目申報(bào)經(jīng)費(fèi)1設(shè)備、儀器購置費(fèi)202材料、樣品加工費(fèi)503測試化驗(yàn)加工費(fèi)504資料、調(diào)研費(fèi)55燃料動(dòng)力費(fèi)56技術(shù)合作與交流費(fèi)1507出版/文獻(xiàn)/信息傳播/知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)費(fèi)58專家咨詢費(fèi)59鑒定或驗(yàn)收費(fèi)2010管理費(fèi)1011其他合計(jì)320三、項(xiàng)目實(shí)施支撐條件（一）項(xiàng)目技術(shù)來源及知識(shí)產(chǎn)權(quán)情況本項(xiàng)目漢防己甲素制劑技術(shù)及其治療角膜病的用途均為自有技術(shù)，均具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)（專利申請?zhí)枺?00910186826.0）。（二）項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)、檢測等外部配套條件1、已建有原料藥和制劑小試實(shí)驗(yàn)室、中試工程技術(shù)研究中心。2、已建有制劑生產(chǎn)水、電、汽、環(huán)保、倉儲(chǔ)等輔助設(shè)施。3、已建有理化分析、光譜分析、色譜等分析檢測中心，配有紅外光譜、紫外-可見光譜等分析檢測儀器。（三）項(xiàng)目申請單位人才資源情況1、項(xiàng)目單位主要負(fù)責(zé)人朱丹基本情況朱丹，女，1952年7月21日出生，畢業(yè)于中國藥科大學(xué)，高級工程師。曾任解放軍186醫(yī)院藥劑科藥師、江西省藥品檢驗(yàn)所主管藥師，制劑工藝和藥品質(zhì)量研究為其專長，并負(fù)責(zé)新藥藥代動(dòng)力學(xué)和臨床研究。以朱丹為首的科研團(tuán)隊(duì)通過不斷創(chuàng)新共獲得國家藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的新藥30個(gè)，批準(zhǔn)進(jìn)行臨床研究的新藥8個(gè)，已經(jīng)申請注冊和在研新藥12項(xiàng)；申請發(fā)明專利116項(xiàng)。榮獲南昌市五一勞動(dòng)獎(jiǎng)?wù)?、南昌市科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)、江西省技術(shù)發(fā)明三等獎(jiǎng)。2、項(xiàng)目主要負(fù)責(zé)人劉孝樂基本情況劉孝樂，男，1962年10月1日出生，大學(xué)學(xué)歷，藥學(xué)專業(yè)，高級工程師，是南昌弘益科技有限公司總經(jīng)理，國家創(chuàng)新型試點(diǎn)企業(yè)、國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)試點(diǎn)企業(yè)、江西省創(chuàng)新型試點(diǎn)企業(yè)、江西省知識(shí)產(chǎn)權(quán)試點(diǎn)企業(yè)技術(shù)創(chuàng)新負(fù)責(zé)人。劉孝樂同志近5年專業(yè)方面獲獎(jiǎng)情況：（1）2005年被評為江西省科技創(chuàng)業(yè)十佳領(lǐng)軍人物。（2）2006年被評為南昌市十大杰出創(chuàng)新青年企業(yè)家。（3）2007年、2008年被評為南昌高新區(qū)創(chuàng)新先進(jìn)個(gè)人。（4）2007年獲中國民營科技發(fā)展貢獻(xiàn)獎(jiǎng)。（5）2007年南昌市科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)項(xiàng)目負(fù)責(zé)人。（6）2008年江西省技術(shù)發(fā)明三等獎(jiǎng)項(xiàng)目負(fù)責(zé)人。（7）2008年江西省優(yōu)秀科技新產(chǎn)品獎(jiǎng)（6項(xiàng)）項(xiàng)目負(fù)責(zé)人。（8）2008年江西省優(yōu)秀新產(chǎn)品二等獎(jiǎng)項(xiàng)目負(fù)責(zé)人。（9）2008年江西省優(yōu)秀新產(chǎn)品三等獎(jiǎng)項(xiàng)目負(fù)責(zé)人。（10）2008年南昌市優(yōu)秀新產(chǎn)品二等獎(jiǎng)項(xiàng)目負(fù)責(zé)人。（11）2008年南昌市優(yōu)秀新產(chǎn)品三等獎(jiǎng)項(xiàng)目負(fù)責(zé)人。（12）2008年南昌市“521”（13）2008年享受南昌市政府特殊津貼。3、項(xiàng)目研發(fā)負(fù)責(zé)人高永良基本情況高永良，男，1951年出生，現(xiàn)任南昌弘益科技有限公司首席研發(fā)專家，畢業(yè)于中國藥科大學(xué)，曾任軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院毒物藥物研究所制劑研究室主任，研究員（教授），博士生導(dǎo)師，主要研究領(lǐng)域?yàn)樗巹W(xué)。先后主持并完成了7個(gè)國家新藥品種研究，已獲新藥證書6個(gè)，申報(bào)發(fā)明專利18項(xiàng)，其中5項(xiàng)新藥成果和專利已轉(zhuǎn)化生產(chǎn)，取得的經(jīng)濟(jì)效益逾48億人民幣。獲獎(jiǎng)研究成果有六項(xiàng)。作為第一署名的獲軍隊(duì)科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)3項(xiàng)和家科技進(jìn)步三等獎(jiǎng)1項(xiàng)；第二署名省科學(xué)技進(jìn)步獎(jiǎng)一等和二等獎(jiǎng)各1項(xiàng)。已培養(yǎng)碩士研究生36名，博士研究生6名。擔(dān)任全國藥學(xué)會(huì)制劑專業(yè)委員會(huì)委員，國家、北京市、全軍新藥審評委員，全軍藥學(xué)會(huì)藥劑專業(yè)委員會(huì)主任委員，國家發(fā)改委藥品價(jià)格評審專家，國家863項(xiàng)目評審專家。1993年獲“全國首屆中國青年醫(yī)學(xué)科技之星”稱號。1994年享受國務(wù)院特殊津貼。1995年獲“吳階平—保羅楊森醫(yī)藥研究獎(jiǎng)”制劑學(xué)科一等獎(jiǎng)和光華科技基金三等獎(jiǎng)，“2000年中國藥學(xué)發(fā)展獎(jiǎng)”（藥劑學(xué)獎(jiǎng)）獲得者。其事跡和突出貢獻(xiàn)，先后被人民日報(bào)、解放軍報(bào)、健康報(bào)、中央電視臺(tái)等新聞媒介報(bào)道。2009年被提名為中國工程院院士候選人。4、項(xiàng)目技術(shù)負(fù)責(zé)人錢進(jìn)基本情況錢進(jìn)，女，1948年6月26日出生，大學(xué)學(xué)歷，藥學(xué)專業(yè)，高級工程師，主持阿莫西林鈉與克拉維酸鉀復(fù)合制劑等20項(xiàng)新藥研究開發(fā)工作，并已獲得國家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的新藥證書，取得了良好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。獲得中國專利優(yōu)秀獎(jiǎng)、江西省科學(xué)技術(shù)進(jìn)步二等獎(jiǎng)，江西省科技技術(shù)進(jìn)步三等獎(jiǎng)、江西優(yōu)秀重點(diǎn)新產(chǎn)品獎(jiǎng)、江西省醫(yī)藥科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)，江西技術(shù)發(fā)明三等獎(jiǎng)、第十二屆上海經(jīng)濟(jì)區(qū)醫(yī)藥情報(bào)網(wǎng)年會(huì)三等獎(jiǎng)。榮獲南昌市科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)、江西省技術(shù)發(fā)明三等獎(jiǎng)。5、項(xiàng)目申報(bào)單位技術(shù)人員總數(shù)、中高級技術(shù)人員比例項(xiàng)目申報(bào)單位南昌弘益科技有限公司現(xiàn)有員工136人，其中技術(shù)人員98人，占員工總數(shù)的72%；高級技術(shù)人員占員工總數(shù)的12%，中級技術(shù)人員占員工總數(shù)的23%。（四）項(xiàng)目組人員專業(yè)結(jié)構(gòu)、職稱結(jié)構(gòu)序號姓名性別出生日期職稱職務(wù)學(xué)歷專業(yè)1錢進(jìn)女1948.6高級工程師總工程師大專藥學(xué)2高永良男1951.11研究員首席研發(fā)專家學(xué)士藥學(xué)3朱丹女1952.7高級工程師董事長學(xué)士藥學(xué)4劉孝樂男1962.10高級工程師課題總師大學(xué)藥學(xué)5穆正義男1953.6高級工程師技術(shù)總監(jiān)學(xué)士藥學(xué)6朱曉洪男1953.3主任藥師工程中心副主任學(xué)士藥學(xué)7李勁彤男1971.2研究員博士醫(yī)學(xué)8葉英女1964.11研究員首席科學(xué)家博士藥學(xué)9陶琳女1981.1工程師藥研所副所長學(xué)士藥學(xué)10趙銀鷹女1959.10高級工程師副總工程師學(xué)士藥學(xué)11蔣俊超男1986.10助理工程師學(xué)士藥學(xué)12黃國琴女1987.5技術(shù)員藥學(xué)13方丹丹女1986.7技術(shù)員藥學(xué)14章和清男1979.1助理工程師車間主任助理藥學(xué)15趙巖女1984.10助理工程師學(xué)士生物16章勇男1986.5技術(shù)員藥學(xué)（五）項(xiàng)目新增投資籌集情況項(xiàng)目新增投資2460萬元全部由項(xiàng)目申報(bào)單位自籌，其中申請銀行貸款1130萬元。四、項(xiàng)目預(yù)期經(jīng)濟(jì)效益（一）預(yù)期市場需求角膜病是我國的主要致盲眼病之一，但治療方法和藥物極其有限。本項(xiàng)目治療角膜病的漢防己甲素滴眼液具有顯著的療效和安全性，填補(bǔ)角膜病治療藥物市場空白，具有顯著的藥物經(jīng)濟(jì)學(xué)價(jià)值和經(jīng)濟(jì)社會(huì)效益。治療角膜病的漢防己甲素滴眼液作為具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的創(chuàng)新藥物，目前國內(nèi)外尚未見相關(guān)研究和上市報(bào)道，亦未見相關(guān)專利報(bào)道，預(yù)計(jì)其年銷售峰值將達(dá)8億元。（二）預(yù)期盈利水平以下按年產(chǎn)銷500萬支漢防己甲素滴眼液分析經(jīng)濟(jì)效益（1）成本：每3.37元/支：①藥材、輔料費(fèi)用：1.03元/支；②包裝材料費(fèi)用：1.34元/支；③制造費(fèi)用：每粒1.00元；（2）銷售價(jià)格：12元/支（3）稅金：1.54元/支①每支應(yīng)繳增值稅=[(12÷1.17)×17%]-[(1.03+1.34)÷1.17×17%=1.40元/支②每支應(yīng)繳附加稅=1.40×(7%+3%)=0.14元/支（4）項(xiàng)目達(dá)產(chǎn)時(shí)財(cái)務(wù)分析：①年銷售額=500萬支×12元/支=6000.00萬元②年銷售利潤=銷售額-成本-稅金=6000.00萬元-（3.37元×500）-(1.54元×500)=6000.00萬元-1685.00萬元-770.00萬元=3545.00萬元（5）三項(xiàng)費(fèi)用（管理費(fèi)用、銷售費(fèi)用、財(cái)務(wù)費(fèi)用）=6000.00×25%=1500.00萬元（6）凈利潤：3545.00-1500.00=2045.00萬元（7）投資利潤率=利潤÷投資額=2045.00÷2540.00=80.51%。（8）利稅率=利稅總額÷投資額=(2045.00+770.00)÷2540.00=110.82%（9）投資回收期(不含建設(shè)期)=投資額÷年現(xiàn)金凈流量=2540.00萬元÷2045.00萬元/年=1.24年（三）預(yù)期產(chǎn)業(yè)化前景1、漢防己甲素用于角膜病的機(jī)理研究為本項(xiàng)目奠定了基礎(chǔ)研究結(jié)果表明，漢防己甲素通過將細(xì)胞周期停滯在G0/G1期和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡而抑制角膜基質(zhì)細(xì)胞增殖，并能減少纖維連接蛋白在兔角膜基質(zhì)細(xì)胞間的堆積而發(fā)揮作用。體外動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，漢防己甲素通過減少TGF-β1的表達(dá)和抑制NF-ΚB的活性以及減少細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的生成，對兔準(zhǔn)分子激光角膜屈光術(shù)（PPK）后角膜上皮下霧狀混濁（Haze）形成有明顯抑制作用。通過不同濃度漢防己甲素的對比研究，篩選出0.1%濃度漢防己甲素為最低有效濃度；同時(shí)，運(yùn)用描