分子試題題庫(kù)

分子試題庫(kù)）

一、名詞解釋

1、基因：能夠表達(dá)和產(chǎn)生蛋白質(zhì)和RNA的DNA序列，是決定遺

傳性狀的功能單位c

2、基因組：細(xì)胞或生物體的一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)的總和。

3、端粒：以線(xiàn)性染色體形式存在的真核基因組DNA末端都有一種

特殊的結(jié)構(gòu)叫端粒。該結(jié)構(gòu)是一段DNA序列和蛋白質(zhì)形成的一種復(fù)合體,

僅在真核細(xì)胞染色體末端存在。

4、操縱子：是指數(shù)個(gè)功能上相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起，構(gòu)成信

息區(qū)，連同其上游的調(diào)控區(qū)（包括啟動(dòng)子和操縱基因）以及下游的轉(zhuǎn)錄終

止信號(hào)所構(gòu)成的基因表達(dá)單位，所轉(zhuǎn)錄的RNA為多順?lè)醋印?/p>

5、順式作用元件：是指那些與結(jié)構(gòu)基因表達(dá)調(diào)控相關(guān)、能夠被基

因調(diào)控蛋白特異性識(shí)別和結(jié)合的特異DNA序列。包括啟動(dòng)子、上游啟動(dòng)子

元件、增強(qiáng)子、加尾信號(hào)和一些反應(yīng)元件等。

6、反式作用因子：是指真核細(xì)胞內(nèi)含有的大量可以通過(guò)直接或間

接結(jié)合順式作用元件而調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄活性的蛋白質(zhì)因子。

7、啟動(dòng)子：是RNA聚合酶特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列。

8、增強(qiáng)子：位于真核基因中遠(yuǎn)離轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)，能明顯增強(qiáng)啟動(dòng)子

轉(zhuǎn)錄效率的特殊DNA序列。它可位于被增強(qiáng)的轉(zhuǎn)錄基因的上游或下游，也

可相距靶基因較遠(yuǎn)。

9、基因表達(dá)：是指生物基因組中結(jié)構(gòu)基因所攜帶的遺傳信息經(jīng)過(guò)

轉(zhuǎn)錄、翻譯等一系列過(guò)程，合成特定的蛋白質(zhì)，進(jìn)而發(fā)揮其特定的生物學(xué)

功能和生物學(xué)效應(yīng)的全過(guò)程。

10、信息分子：調(diào)節(jié)細(xì)胞生命活動(dòng)的化學(xué)物質(zhì)。其中由細(xì)胞分泌

的調(diào)節(jié)靶細(xì)胞生命活動(dòng)的化學(xué)物質(zhì)稱(chēng)為細(xì)胞間信息分子；而在細(xì)胞內(nèi)傳遞

信息調(diào)控信號(hào)的化學(xué)物質(zhì)稱(chēng)為細(xì)胞內(nèi)信息分子C

11、受體：是存在于靶細(xì)胞膜上或細(xì)胞內(nèi)能特異識(shí)別生物活性分

子并與之結(jié)合，進(jìn)而發(fā)生生物學(xué)效應(yīng)的的特殊蛋白質(zhì)。

12、分子克隆：在體外對(duì)DNA分子按照即定目的和方案進(jìn)行人工

重組，將重組分子導(dǎo)入合適宿主，使其在宿主中擴(kuò)增和繁殖，以獲得該DNA

分子的大量拷貝。

13、蛋白激酶：是指能夠?qū)⒘姿峒瘓F(tuán)從磷酸供體分子轉(zhuǎn)移到底物

蛋白的氨基酸受體上的一大類(lèi)酶。

14、蛋白磷酸酶：是具有催化已經(jīng)磷酸化的蛋白質(zhì)分子發(fā)生去磷

酸化反應(yīng)的一類(lèi)酶分子，與蛋白激酶相對(duì)應(yīng)存在，共同構(gòu)成了磷酸化和去

磷酸化這一重要的蛋白質(zhì)活性的開(kāi)關(guān)系統(tǒng)。

15、基因工程：有目的的通過(guò)分子克隆技術(shù)，人為的操作改造基

因，改變生物遺傳性狀的系列過(guò)程。

16、載體：能在連接酶的作用下和外源DNA片段連接并運(yùn)送DNA

分子進(jìn)入受體細(xì)胞的DNA分子。

17、轉(zhuǎn)化：指質(zhì)粒DNA或以它為載體構(gòu)建的重組DNA導(dǎo)入細(xì)菌的

過(guò)程。

18、感染：以噬菌體、粘性質(zhì)粒和真核細(xì)胞病毒為載體的重組DNA

分子，在體外經(jīng)過(guò)包裝成具有感染能力的病毒或噬菌體顆粒，才能感染適

當(dāng)?shù)募?xì)胞，并在細(xì)胞內(nèi)擴(kuò)增。

19、轉(zhuǎn)導(dǎo)：指以噬菌體為載體，在細(xì)菌之間轉(zhuǎn)移DNA的過(guò)程，有

時(shí)也指在真核細(xì)胞之間通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)移和獲得細(xì)胞DNA的過(guò)程。

20、轉(zhuǎn)染：指病毒或以它為載體構(gòu)建的重組子導(dǎo)入真核細(xì)胞的過(guò)

程。

21、DNA變性：在物理或化學(xué)因素的作用下，導(dǎo)致兩條DNA鏈之

間的氫鍵斷裂，而核酸分子中的所有共價(jià)鍵則不受影響。

22、DNA復(fù)性：當(dāng)促使變性的因素解除后，兩條DNA鏈又可以通

過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合形成DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)。

23、退火：指將溫度降至引物的TM值左右或以下，引物與DNA

摸板互補(bǔ)區(qū)域結(jié)合形

成雜交鏈。

24、筑巢PCR：先用一對(duì)外側(cè)引物擴(kuò)增含目的基因的大片段，再用

內(nèi)側(cè)引物以大片段為摸板擴(kuò)增獲取目的基因。可以提高PCR的效率和特異

性。

25、原位PCR：以組織固定處理細(xì)胞內(nèi)的DNA或RNA作為靶序列，

進(jìn)行PCR反應(yīng)的過(guò)程。

26、定量PCR：基因表達(dá)涉及的轉(zhuǎn)錄水平的研究常需要對(duì)mRNA

進(jìn)行定量測(cè)定，對(duì)此采用的PCR技術(shù)就叫定量PCR。

27、基因打靶：是指通過(guò)DNA定點(diǎn)同源重組，改變基因組中的某

一特定基因，從而在生物活體內(nèi)研究此基因的功能。

28、DNA芯片：DNA芯片技術(shù)是指在固相支持物上原位合成寡核

甘酸或者直接將大量的DNA探針以顯微打印的方式有序地固化于支持物

表面，然后與標(biāo)記的樣品雜交，通過(guò)對(duì)雜交信號(hào)的檢測(cè)分析，即可獲得樣

品的遺傳信息。由于常用計(jì)算機(jī)硅芯片作為固相支持物，所以稱(chēng)為DNA芯

片.

29、錯(cuò)義突變：DNA分子中堿基對(duì)的取代，使得mRNA的某一密

碼子發(fā)生變化，由它所編碼的氨基酸就變成另一種的氨基酸，使得多肽鏈

中的氨基酸順序也相應(yīng)的發(fā)生改變的突變。

30、無(wú)義突變：由于堿基對(duì)的取代，使原來(lái)可以翻譯某種氨基酸

的密碼子變成了終止密碼子的突變。

31、同義突變：堿基對(duì)的取代并不都是引起錯(cuò)義突變和翻譯終止，

有時(shí)雖然有堿基被取代，但在蛋白質(zhì)水平上沒(méi)有引起變化，氨基酸沒(méi)有被

取代，這是因?yàn)橥蛔兒蟮拿艽a子和原來(lái)的密碼子代表同一個(gè)氨基酸的突變。

32、移碼突變：在編碼序列中，單個(gè)堿基、數(shù)個(gè)堿基的缺失或插

入以及片段的缺失或插入等均可以使突變位點(diǎn)之后的三聯(lián)體密碼閱讀框

發(fā)生改變，不能編碼原來(lái)的蛋白質(zhì)的突變。

33、癌基因：是細(xì)胞內(nèi)控制細(xì)胞生長(zhǎng)的基因，具有潛在的誘導(dǎo)細(xì)

胞惡性轉(zhuǎn)化的特性。當(dāng)癌基因結(jié)構(gòu)或表達(dá)發(fā)生異常時(shí)，其產(chǎn)物可使細(xì)胞無(wú)

限制增殖，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。包括病毒癌基因和細(xì)胞癌基因。

34、細(xì)胞癌基因：存在于正常的細(xì)胞基因組中，與病毒癌基因有

同源序列，具有促進(jìn)正常細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化和發(fā)育等生理功能。在正

常細(xì)胞內(nèi)未激活的細(xì)胞癌基因叫原癌基因，當(dāng)其受到某些條件激活時(shí)，結(jié)

構(gòu)和表達(dá)發(fā)生異常，能使細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。

35、病毒癌基因：存在于病毒（大多是逆轉(zhuǎn)錄病毒）基因組中能

使靶細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的基因。它不編碼病毒結(jié)構(gòu)成分，對(duì)病毒無(wú)復(fù)制作

用，但是當(dāng)受到外界的條件激活時(shí)可產(chǎn)生誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生的作用。

36、基因診斷：以DNA或RNA為診斷材料，通過(guò)檢查基因的存在、

結(jié)構(gòu)缺陷或表達(dá)異常，對(duì)人體的狀態(tài)和疾病作出診斷的方法和過(guò)程。

37、RFLP：即限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性，個(gè)體之間DNA的核昔酸序

列存在差異，稱(chēng)為DNA多態(tài)性。若因此而改變了限制性?xún)?nèi)切酶的酶切位點(diǎn)

則可導(dǎo)致相應(yīng)的限制性片段的長(zhǎng)度和數(shù)量發(fā)生變化，稱(chēng)為RFLPo

38、基因治療：一股是指將限定的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)入患者特定的靶細(xì)

胞，以最終達(dá)到預(yù)防或改變特殊疾病狀態(tài)為目的治療方法。

39、反義RNA：堿基序列正好與有意義的mRNA互補(bǔ)的RNA稱(chēng)為

反義RNA?？梢宰鳛橐环N調(diào)控特定基因表達(dá)的手段。

40、核酶：是一種可以催化RNA切割和RNA剪接反應(yīng)的由RNA組

成的酶，可以作為基因表達(dá)和病毒復(fù)制的抑制劑。

34、細(xì)胞癌基因：存在于正常的細(xì)胞基因組中，與病毒癌基因有

同源序列，具有促進(jìn)正

常細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化和發(fā)育等生理功能。在正常細(xì)胞內(nèi)未激活的

細(xì)胞癌基因叫原癌基因，當(dāng)其受到某些條件激活時(shí)，結(jié)構(gòu)和表達(dá)發(fā)生異常,

能使細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。

35、病毒癌基因：存在于病毒（大多是逆轉(zhuǎn)錄病毒）基因組中能

使靶細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的基因。它不編碼病毒結(jié)構(gòu)成分，對(duì)病毒無(wú)復(fù)制作

用，但是當(dāng)受到外界的條件激活時(shí)可產(chǎn)生誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生的作用。

36、基因診斷：以DNA或RNA為診斷材料，通過(guò)檢查基因的存在、

結(jié)構(gòu)缺陷或表達(dá)異常，對(duì)人體的狀態(tài)和疾病作出診斷的方法和過(guò)程。

37、RFLP：即限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性，個(gè)體之間DNA的核甘酸序

列存在差異.稱(chēng)為DNA多態(tài)性.若因此而改變了限制性?xún)?nèi)切酶的酶切位點(diǎn)

則可導(dǎo)致相應(yīng)的限制性片段的長(zhǎng)度和數(shù)量發(fā)生變化，稱(chēng)為RFLPo

38、基因治療：一股是指將限定的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)入患者特定的靶細(xì)

胞，以最終達(dá)到預(yù)防或改變特殊疾病狀態(tài)為目的治療方法。

39、反義RNA：堿基序列正好與有意義的mRNA互補(bǔ)的RNA稱(chēng)為

反義RNA?？梢宰鳛橐环N調(diào)控特定基因表達(dá)的手段。

40、核酶:是一種可以催化RNA切割和RNA剪接反應(yīng)的由RNA組

成的酶，可以作為基因表達(dá)和病毒復(fù)制的抑制劑。

41、三鏈DNA：當(dāng)某一DNA或RNA寡核甘酸與DNA高喋吟區(qū)可

結(jié)合形成三鏈，能特異地結(jié)合在DNA的大溝中，并與富含噂吟鏈上的堿基

形成氫鍵。

42、SSCP：?jiǎn)捂湗?gòu)象多態(tài)性檢測(cè)是一種基于DNA構(gòu)象差別來(lái)檢測(cè)

點(diǎn)突變的方法。相同長(zhǎng)度的單鏈DNA,如果堿基序列不同，形成的構(gòu)象就

不同，這樣就形成了單鏈構(gòu)象多態(tài)性。

43、管家基因；在生物體生命的全過(guò)程都是必須的，且在一個(gè)生

物個(gè)體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)的基因。

44、細(xì)胞全能性：指同一種生物的所有細(xì)胞都含有相同的DNA,

即基因的數(shù)目和種類(lèi)是一樣的，但在不同階段，同一個(gè)體的不同組織和器

官中基因表達(dá)的種類(lèi)和數(shù)目是不同的。

45、SD序列：轉(zhuǎn)錄出的mRNA要進(jìn)入核糖體上進(jìn)行翻譯，需要一

段富含喋吟的核甘酸序列與大腸桿菌16SrRNA3,末端富含喀咤的序列互

補(bǔ)，是核糖體的識(shí)別位點(diǎn)。

46、反義核酸技術(shù):是通過(guò)合成一種短鏈且與DNA或RNA互補(bǔ)的，

以DNA或RNA為目標(biāo)抑制翻譯的反義分子，干擾目的基因的轉(zhuǎn)錄、剪接、

轉(zhuǎn)運(yùn)、翻譯等過(guò)程的技術(shù)。

47、核酸探針：探針是指能與某種大分子發(fā)生特異性相互作用，

并在相互作用之后可以檢測(cè)出來(lái)的生物大分子。核酸探針是指能識(shí)別特異

堿基順序的帶有標(biāo)記的一段DNA或RNA分子。

48、周期蛋白：是一類(lèi)呈細(xì)胞周期特異性或時(shí)相性表達(dá)、累積與

分解的蛋白質(zhì)，它與周期素依賴(lài)性激酶共同影響細(xì)胞周期的運(yùn)行。

49、CAP：是大腸桿菌分解代謝物基因活化蛋白，這種蛋白可將葡

萄糖饑餓信號(hào)傳遞個(gè)許多操縱子，使細(xì)菌在缺乏葡萄糖時(shí)可以利用其他碳

源。

50、順?lè)醋?/p>

51、結(jié)構(gòu)域

二、問(wèn)答題

（一）、病毒、原核、真核基因組的特點(diǎn)？

答：1、病毒基因組的特點(diǎn)：

①種類(lèi)單一；②單倍體基因組：每個(gè)基因組在病毒中只出現(xiàn)一次；

③形式多樣；④大小不一；⑤基因重疊；⑥動(dòng)物/細(xì)菌病毒與真核/原核基

因相似：內(nèi)含子；⑦具有不規(guī)則的結(jié)構(gòu)基因；⑧基因編瑪區(qū)無(wú)間隔：通過(guò)

宿主及病毒本身前切；⑨無(wú)帽狀結(jié)構(gòu)；⑩結(jié)構(gòu)基因沒(méi)有翻譯起始序列。

2、原核基因組的特點(diǎn)：

①為一條環(huán)狀雙鏈DNA；②只有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)；③具有操縱子結(jié)構(gòu);

④絕大部分為單拷貝：⑤可表達(dá)基因約50%,大于直核生物小于病毒；⑥

基因一般是連續(xù)的，無(wú)內(nèi)含子；⑦重復(fù)序列很少。

3、真核基因組的特點(diǎn)：

①真核生物基因組遠(yuǎn)大于原核生物基因組，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，基因數(shù)龐大,

具有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)；②基因組DNA與蛋白質(zhì)結(jié)合成染色體，儲(chǔ)存于細(xì)胞核

內(nèi)；③真核基因?yàn)閱雾樂(lè)醋?，而?xì)菌和病毒的結(jié)構(gòu)基因多為多順?lè)醋樱虎?/p>

基因組中非編碼區(qū)多于編四區(qū)；⑤真核基因多為不連續(xù)的斷裂基因，由外

顯子和內(nèi)含子鑲嵌而成；⑥存在大量的重復(fù)序列；⑦功能相關(guān)的基因構(gòu)成

各種基因家族；⑧存在可移動(dòng)的遺傳因素；⑨體細(xì)胞為雙倍體，而精子和

卵子為單倍體。

（二）、乳糖操縱子的作用機(jī)制？

答：1、乳糖操縱子的組成：大腸桿菌乳糖操縱子含Z、Y、A三個(gè)結(jié)

構(gòu)基因，分別編碼半乳糖昔酶、透酶和半乳糖昔乙酰轉(zhuǎn)移酶，此外還有一

個(gè)操縱序列O,一個(gè)啟動(dòng)子P和一個(gè)調(diào)節(jié)基因I。

2、阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)；沒(méi)有乳糖存在時(shí)，I基因編碼的阻遏蛋白結(jié)

合于操縱序列O處，乳糖操縱子處于阻遏狀態(tài)，不能合成分解乳糖的三種

酶；有乳糖存在時(shí)，乳糖作為誘導(dǎo)物誘導(dǎo)阻遏蛋白變構(gòu)，不能結(jié)合于操縱

序列，乳糖操縱子被誘導(dǎo)開(kāi)放合成分解乳糖的三種酶。所以，乳糖操縱子

的這種調(diào)控機(jī)制為可誘導(dǎo)的負(fù)調(diào)控。

3、CAP的正性調(diào)節(jié)：在啟動(dòng)子上游有CAP結(jié)合位點(diǎn)，當(dāng)大腸桿菌從

以葡萄糖為碳源的環(huán)境轉(zhuǎn)變?yōu)橐匀樘菫樘荚吹沫h(huán)境時(shí)，CAMP濃度升高，

與CAP結(jié)合，使CAP發(fā)生變構(gòu),CAP結(jié)合于乳糖操縱子啟動(dòng)序列附近的CAP

結(jié)合位點(diǎn)，激活RNA聚合酶活性,促進(jìn)結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄，調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合于操

縱子后促進(jìn)結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄，對(duì)乳糖操縱子實(shí)行正調(diào)控，加速合成分解乳

糖的三種酶。

4、協(xié)調(diào)調(diào)節(jié)：乳糖操縱子中的I基因編碼的阻遏蛋3的負(fù)調(diào)控與CAP

的正調(diào)控兩種機(jī)制，互相協(xié)調(diào)、互相制約。

（三）、真核生物轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控機(jī)制？

答：真核生物在轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控主要是通過(guò)反式作用因子、順式作用

元件和RNA聚合酶的相互作用來(lái)完成的，主要是反式作用因子結(jié)合順式作

用元件后影響轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成過(guò)程。

1、轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成：真核生物RNA聚合酶識(shí)別的是由通用

轉(zhuǎn)錄因子與DNA形成的蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物，只有當(dāng)一個(gè)或多個(gè)轉(zhuǎn)錄因子

結(jié)合到DNA上，形成有功能的啟動(dòng)子，才能被RNA聚合晦所識(shí)別并結(jié)合。

轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成過(guò)程為：TFIID結(jié)合TATA盒：RNA聚合酶識(shí)別

并結(jié)合TFIID-DNA復(fù)合物形成一個(gè)閉合的復(fù)合物；其他轉(zhuǎn)錄因子與RNA

聚合酶結(jié)合形成一個(gè)開(kāi)放復(fù)合物。在這個(gè)過(guò)程中，反式作用因子的作用

是:促進(jìn)或抑制TFIID與TATA盒結(jié)合;促進(jìn)或抑制RNA聚合酶與TFIID-DNA

復(fù)合物的結(jié)合；促進(jìn)或抑制轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成。

2、反式作用因子：一般具有三個(gè)功能域（DNA識(shí)別結(jié)合域、轉(zhuǎn)錄

活性域和結(jié)合其他蛋白結(jié)合域）；能識(shí)別并結(jié)合上游調(diào)控區(qū)中的順式作用

元件；對(duì)基因的表達(dá)有正性或負(fù)性調(diào)控作用。

3、轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控：

?反式作用因子的活性調(diào)節(jié)：①表達(dá)式調(diào)節(jié)一一反式作用因子合成出

來(lái)就具有活性；②共價(jià)修飾一一磷酸化和夫磷酸化.糖基化：③配體結(jié)合

一一許多激素受體是反式作用因子；④蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用一一蛋白

質(zhì)與蛋白質(zhì)復(fù)合物的解離與形成。

?反式作用因子與順式作用元件的結(jié)合：反式作用因子被激活后，即

可識(shí)別并結(jié)合上游啟動(dòng)

子元件和增強(qiáng)子中的保守性序列，對(duì)基因轉(zhuǎn)錄起調(diào)節(jié)作用。

?反式作用因子的作用方式—成環(huán)、扭曲、滑動(dòng)、Oozing。

?反式作用因子的組合式調(diào)控作用：每一種反式作用因子結(jié)合順式作

用元件后雖然可以發(fā)揮促進(jìn)或抑制作用，但反式作用因子對(duì)基因調(diào)控不是

由單一因子完成的而是幾種因子組合發(fā)揮特定的作用。

（四）、真核生物轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控機(jī)制？

答：（1）、5,端加帽和3,端多聚腺甘酸化的調(diào)控意義：5,端加帽和

3,端多聚腺甘酸化是保持mRNA穩(wěn)定的一個(gè)重要因素，它至少保證mRNA

在轉(zhuǎn)錄過(guò)程中不被降解。

（2）、mRNA選擇性剪接對(duì)基因表達(dá)調(diào)控的作用

（3）、mRNA運(yùn)輸?shù)目刂?/p>

（五）、受體的特點(diǎn)？

答：1、高度專(zhuān)一性；2、高度親和性；3、可逆性；4、可飽和性；5、

特定的作用模式

（六）、表皮生長(zhǎng)因子介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑？

答：表皮生長(zhǎng)因子受體是一個(gè)典型的蛋白酪氨酸激酶受體，這個(gè)信號(hào)

轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的主要步驟是：

1、受體二聚化的形成及其磷酸化：表皮生長(zhǎng)因子與受體的結(jié)合使

受體發(fā)生二聚化，從而改變受體構(gòu)象，使蛋白酪氨酸激酶活性增強(qiáng)，受體

自身的幾個(gè)蛋白酪氨酸殘基在激酶的作用下發(fā)生磷酸化。

2、募集接頭蛋白Grb2：表皮生長(zhǎng)因子受體自身被磷酸化后，不僅

其激酶活性增強(qiáng)，而且其構(gòu)象發(fā)生變化，從而適合與含SH2結(jié)構(gòu)域的蛋白

分子相結(jié)合。Grb2是作為接頭蛋白結(jié)合到受體上。

3、調(diào)控分子SOS的活化：SOS含有可與SH3結(jié)構(gòu)域相結(jié)合的富含

脯氨酸基序，當(dāng)Grb2結(jié)合到磷酸化的表皮生長(zhǎng)因子受體后，它的兩個(gè)SH3

結(jié)構(gòu)域即可結(jié)合SOS,使之活化。

4、低分子量G蛋白R(shí)as的活化：SOS可促進(jìn)Ras釋放GDP,結(jié)合

GTP的反應(yīng)，使Ras激活?；罨腞as作用其下游分子Raf,使之活化。Raf

是MAPK級(jí)聯(lián)反應(yīng)的第一個(gè)分子，由此啟動(dòng)了MAPK的三級(jí)激活過(guò)程。

5、MAPK的級(jí)聯(lián)激活：Raf是一種MAPKKK,它作用于MEK,使之

磷酸化而激活，活化的MEK在作用于MAPK家族的ERKL使之磷酸化激

活由此完成了三級(jí)激活。

6、轉(zhuǎn)錄因子的磷酸化及轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用：活化的ERK可以轉(zhuǎn)至細(xì)胞

核內(nèi)，使某些轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子發(fā)生磷酸化，從而影響基因的轉(zhuǎn)錄。

（七）、CAMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑?

答：1、組成：胞外信息分子（主要是胰高血糖素、腎上腺素和促腎

上腺皮質(zhì)激素），受體，G蛋白，AC,cAMP,PKAo

2、途徑：

?信號(hào)分子與受體結(jié)合，引起受體構(gòu)象變化

?受體活化G蛋白

?活化后的G蛋白激活腺甘酸環(huán)化酶（AC）

?AC催化ATP生成cAMP

?CAMP活化PKA,PKA使目標(biāo)蛋白磷酸化，調(diào)節(jié)代謝酶的活性或調(diào)

節(jié)基因的表達(dá)

（八）、IP3-Ca2+信號(hào)途徑：

?信號(hào)分子與受體結(jié)合，引起受體構(gòu)象變化

?受體活化G蛋白

?活化后的G蛋白激活PLC

?PLC水解PIP2生成IP3和DG

?IP3使鈣通道打開(kāi)，細(xì)胞內(nèi)Ca2+升高

?Ca2+與CaM結(jié)合，激活Ca2+-CaM依賴(lài)的蛋白激酶

?Ca2+-CaM依賴(lài)的蛋白激酶使目標(biāo)蛋白磷酸化。

（九）、分子克隆中常用的工具酶及良好載體的條件？

答；（1）、常用的工具酶

1、限制性核酸內(nèi)切酶：是細(xì)菌產(chǎn)生的一類(lèi)能識(shí)別和切割雙鏈DNA

分子內(nèi)特定的堿基順序的核酸水解酶。

2、DNA連接酶：將兩段DNA分子拼接起來(lái)的前。

3、DNA聚合酶：催化單核甘酸鏈延伸。

4、逆轉(zhuǎn)錄酶：依賴(lài)于RNA的DNA聚合酶，這是一種有效的轉(zhuǎn)錄

RNA成為DNA的酶，產(chǎn)物DNA又稱(chēng)互補(bǔ)DNA。

5、末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶:將脫氧核糖核酸加到DNA的3末端。

6、堿性磷酸酹：催化夫除DNA、RNA等的5磷酸基團(tuán)0

7、依賴(lài)DNA的RNA聚合酶：識(shí)別特異性啟動(dòng)子，RNA轉(zhuǎn)錄。

（2）、良好載體的條件

1、必須有自身的復(fù)制子；2、載體分子上必須有限制性核酸內(nèi)切酶的

酶切位點(diǎn)，即多克隆位點(diǎn)，以供外源DNA插入；3、載體應(yīng)具有可供選擇

的遺傳標(biāo)志，以區(qū)別陽(yáng)性重組子和陰性重組子；4、載體分子必須有足夠

的容量；5、可通過(guò)特定的方法導(dǎo)入細(xì)胞；6、對(duì)于表達(dá)載體還應(yīng)具備與宿

主細(xì)胞相適應(yīng)的啟動(dòng)子、前導(dǎo)順序、增強(qiáng)子、加尾信號(hào)等DNA調(diào)控元件。

（十）、藍(lán)?白篩選的原理？

答：某些質(zhì)粒帶有大腸桿菌的半乳糖甘酶基因片段，在半乳糖甘酶基

因的基因區(qū)外又另外引入了一段含多種單一限制酶位點(diǎn)的DNA序列。這些

位點(diǎn)上如果沒(méi)有克隆外源性DNA片段，在質(zhì)粒被導(dǎo)入lac■的大腸桿菌后，

質(zhì)粒攜帶的半乳糖甘酶基因?qū)⒄１磉_(dá)，與大腸桿菌的半乳糖甘酶基因互

補(bǔ)，產(chǎn)生有活性的半乳糖昔酶，加入人工底物X-gal和誘導(dǎo)劑IPTG后，出

現(xiàn)藍(lán)色的菌落。如果在多克隆位點(diǎn)上插入外源DNA片段，將使lacZ基因

滅活，不能生成半乳糖甘酶，結(jié)果菌落出現(xiàn)白色。由于這種顏色標(biāo)志，重

組克隆和非重組克隆的區(qū)分一目了然。

H^一）SANGER雙脫氧鏈終止法的原理？

答：DNA鏈中核甘酸以3',5'-磷酸二酯鍵連接，合成DNA所用的底

物是2'-脫氧核甘三磷酸。2',3'ddNTP與普通dNTP不同，它們?cè)诿撗?/p>

核糖的3'位置缺少一個(gè)羥基。在DNA聚合酶作用下通過(guò)三磷酸基團(tuán)摻入

到延伸的DNA鏈中，但由于沒(méi)有3'羥基，不能同后續(xù)的dNTP形成磷酸

二酯鍵，因此，正在延伸的DNA鏈不能繼續(xù)延伸.在DNA合成反應(yīng)混合

物的4種普通dNTP中加入少量的一種ddNTP,鏈延伸將與偶然發(fā)生但卻

十分特異的鏈終止競(jìng)爭(zhēng)，產(chǎn)物是一系列的核昔酸鏈，其長(zhǎng)度取決于引物末

端到出現(xiàn)過(guò)早鏈終止位置間的距離。在4組獨(dú)立酶反應(yīng)中分別采用4種不

同的ddNTP,結(jié)果將產(chǎn)生4組寡核昔酸,它們將分別終止于模板鏈的A、C、

G或T位置。

（十二）、核酸分子雜交的原理？

答：具有互補(bǔ)序列的兩條單鏈核酸分子在一定的條件下（適宜的溫度

及離子強(qiáng)度等）堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合，重新形成雙鏈；在這一過(guò)程中，核酸

分子經(jīng)歷了變性和復(fù)性的變化，以及在復(fù)性過(guò)程中個(gè)分子間鍵的形成和斷

裂。雜交的雙方是待測(cè)核酸和已知序列。

（十三）、影響雜交的因素？

答：1、核酸分子的濃度和長(zhǎng)度：核酸濃度越大，復(fù)性速度越快。探

針長(zhǎng)度應(yīng)控制在50-300個(gè)堿基對(duì)為好。

2、溫度；溫度過(guò)高不利于復(fù)性，而溫度過(guò)低，少數(shù)堿基配對(duì)形成的

局部雙鏈不易解離，適宜的溫度是較TM值低25度。

3、離子強(qiáng)度：在低離子強(qiáng)度下，核酸雜交非常緩慢，隨著離子強(qiáng)度

的增加，雜交反應(yīng)率增加。高濃度的鹽使堿基錯(cuò)配的雜交體更穩(wěn)定，所以

進(jìn)行序列不完全同源的核酸分子雜交時(shí)必須維持雜交反應(yīng)液中的鹽濃度

和洗膜液中的鹽濃度。

4、雜交液中的甲酰胺：甲酰胺能降低核酸雜交的TM值。它有以下優(yōu)

點(diǎn)：在低溫下探針更穩(wěn)定；能更好地保留非共價(jià)結(jié)合的核酸。

5、核酸分子的復(fù)雜性：是指存在干反應(yīng)體系中的不同順序的總長(zhǎng)度.

兩個(gè)不同基因組DNA變性后的相對(duì)雜交速率取決于樣品濃度絕對(duì)一致時(shí)

的相對(duì)復(fù)雜性（即DNA中的堿基數(shù)）。

6、非特異性雜交反應(yīng)：在雜交前應(yīng)對(duì)非特異性雜交反應(yīng)位點(diǎn)進(jìn)行封

閉，以減少其對(duì)探針的非特異性吸附作用。

（十四）、探針的種類(lèi)和優(yōu)缺點(diǎn)？

答：1、CDNA探針：通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄獲得CDNA后，將其克隆于適當(dāng)?shù)目?/p>

隆載體，通過(guò)擴(kuò)增重組質(zhì)粒而使CDNA得到大量的擴(kuò)增。提取質(zhì)粒后分離

純化作為探針使用。它是目前應(yīng)用最為廣泛的一種探針。

2、基因組探針：從基因組文庫(kù)里篩選得到一個(gè)特定的基因或基因片

段的克隆后，大量擴(kuò)增、純化，切取插入片段，分離純化為探針。

3、寡核昔酸探針：根據(jù)已知的核酸順序，采用DNA合成儀合成一定

長(zhǎng)度的寡核甘酸片段作為探針。

4、RNA探針：采用基因克隆和體外轉(zhuǎn)錄的方法可以得到RNA或反義

RNA作為探針。（十五）、探針的標(biāo)記法？

答：1、缺口平移法：此法是利用適當(dāng)濃度的DNaseI在DNA雙鏈上

隨機(jī)切割單鏈，造成單鏈切口。切口處產(chǎn)生一個(gè)5末端和3末端，3末端

就可以作為引物，在大腸桿菌DNA聚合酶I的催化下，以互補(bǔ)的DNA單

鏈為摸板，依次將dNTP連接到切口的3末端的羥基上，合成新的DNA單

鏈；同時(shí)DNA聚合酶I的5-3的核酸外切酶活性在切口處將舊鏈從5末

端逐步切除，新合成鏈不斷延伸，從而使原DNA分子上的部分核甘酸殘基

被標(biāo)記的核甘酸所取代。

2、隨機(jī)引物法：隨機(jī)引物是人T合成的長(zhǎng)度為6個(gè)寡核甘酸殘基的

寡聚核甘酸片段的混合物。對(duì)于任何一個(gè)用作探針的DNA片段，隨機(jī)引物

混合物中都會(huì)有一些六核甘酸片段可以與之結(jié)合，起到DNA合成引物的作

用。將這些引物與變性的DNA單鏈結(jié)合后，以4種dNTP（其中一種是標(biāo)

記物標(biāo)記的dNTP）為底物，合成與探針DNA互補(bǔ)的切帶有標(biāo)記物的DNA

探針。

3、PCR標(biāo)記法：在PCR反應(yīng)底物中，將一種dNTP換成標(biāo)記物標(biāo)記的

dNTP,這樣標(biāo)記的dNTP就在PCR反應(yīng)的同時(shí)摻入到新合成的DNA鏈上。

4、末端標(biāo)記法：只是瘠DNA片段的一端進(jìn)行標(biāo)記。

（十六）、PCR的基本原理？

答：PCR是在試管中進(jìn)行的DNA復(fù)制反應(yīng)，基本原理是依據(jù)細(xì)胞內(nèi)

DNA半保留復(fù)制的機(jī)理，以及體外DNA分子于不同溫度下雙鏈和單鏈可以

互相轉(zhuǎn)變的性質(zhì)，人為地控制體外合成系統(tǒng)的溫度，以促使雙鏈DNA變成

單鏈，單鏈DNA與人工合成的引物退火，然后耐熱DNA聚合酶以dNTP

為原料使引物沿著單鏈模板延伸為雙鏈DNAoPCR全過(guò)程每一步的轉(zhuǎn)換是

通過(guò)溫度的改變來(lái)控制的。需要重復(fù)進(jìn)行DNA模板解鏈、引物與模板DNA

結(jié)合、DNA聚合酶催化新生DNA的合成，即高溫變性、低溫退火、中溫延

伸3個(gè)步驟構(gòu)成PCR反應(yīng)的一個(gè)循環(huán)，此循環(huán)的反復(fù)進(jìn)行，就可使目的

DNA得以迅速擴(kuò)增。DNA模板變性：模板雙鏈DNA?單鏈DNA,94℃。退

火：引物+單鏈DNA?雜交鏈，引物的Tm值。引物的延伸：溫度至70C

左右，TaqDNA聚合酶以4種dNTP為原料，以目的DNA為模板，催化以

引物3'末端為起點(diǎn)的5'-3'DNA鏈延伸反應(yīng)，形成新生DNA鏈。新

合成的引物延伸鏈經(jīng)過(guò)

變性后又可作為下一輪循環(huán)反應(yīng)的模板PCR,就是如此反復(fù)循環(huán)，使

目的DNA得到高效快速擴(kuò)增。

(十七)、PCR引物設(shè)計(jì)的基本要求？

答:1、引物長(zhǎng)度一般為15?30個(gè)核甘酸。過(guò)短影響PCR的特異性,

過(guò)長(zhǎng)會(huì)提高相應(yīng)退火溫度，使延伸溫度超過(guò)TaqDNA聚合酶最適溫度74c

影響產(chǎn)物的生成。

2、引物的堿基盡可能隨機(jī)，避免出現(xiàn)喋嗆、喀咤堿基堆積現(xiàn)象。3'

端不應(yīng)有連續(xù)3個(gè)G和C。否則會(huì)使引物和模板錯(cuò)誤配對(duì)。G+C含量一般

占45%-55%。3'端和5'端引物具有相似的Tm值,Tm值計(jì)算公式：Tm

=4(G+C)+2(A+T)

3、引物自身不應(yīng)存在互補(bǔ)序列以避免折疊成發(fā)夾結(jié)構(gòu)。引物的連續(xù)

互補(bǔ)序列，一般不超過(guò)3bp。

4、兩個(gè)引物之間不應(yīng)存在互補(bǔ)序列，尤其應(yīng)避免3'端的互補(bǔ)重疊。

5、引物與非特異擴(kuò)增區(qū)的序列的同源性不超過(guò)70%,引物3,末端

連續(xù)8個(gè)堿基在待擴(kuò)增區(qū)以外不能有完全互補(bǔ)序列，否則易導(dǎo)致非特異性

擴(kuò)增。

6、引物3'端堿基是引發(fā)延伸的起點(diǎn)，因此一定要與模板DNA配對(duì)。

引物3'端最佳堿基選擇是G和C,形成的堿基配對(duì)比較穩(wěn)定。

7、引物與模板結(jié)合時(shí)，引物的5'端最多可以游離十幾個(gè)堿基而不影

響PCR反應(yīng)的進(jìn)行。

8、引物的5'端可以修飾，如附加限制酶位點(diǎn)，引入突變位點(diǎn)，用生

物素、熒光物質(zhì)、地高辛標(biāo)記，加入其它短序列包括起始密碼子、終止密

碼子等

(十八)、PCR的反應(yīng)條件？

答：1、PCR反應(yīng)的緩沖液：

?Tris-HCI緩沖液

?KCI促進(jìn)引物的退火，濃度太高時(shí)會(huì)抑制TaqDNA聚合酶活性。

?加入BSA或明膠有利于保護(hù)TaqDNA聚合酶活性。

?必要時(shí)加入適量二甲基亞碉(DMSO)或甲酰胺利于破壞模板二級(jí)

結(jié)構(gòu)，提高PCR反應(yīng)特異性。

2、鎂離子濃度一般用量1.5-2.0mmol/L,TaqDNA聚合酶活性需要

濃度過(guò)低，會(huì)顯著降低酶活性。濃度過(guò)高又使酶催化

Mg2+oMg2+Mg2+

非特異性擴(kuò)增增強(qiáng)。Mg2+濃度還會(huì)影響引物的退火、模板與PCR產(chǎn)物的

解鏈溫度，從而影響擴(kuò)增片段的產(chǎn)率。

3、底物濃度工作濃度20-200umol/L,dNTPs濃度過(guò)高可加快反應(yīng)速

度，也增加堿基的錯(cuò)配率和實(shí)驗(yàn)成本。降低濃度會(huì)導(dǎo)致反應(yīng)速度下降，可

提高反應(yīng)的特異性。在PCR反應(yīng)中，4種dNTP必須以等摩爾濃度配制，

以減少PCR反應(yīng)的錯(cuò)配誤差并提高使用效率。

4、TaqDNA聚合酶75-80C時(shí)具有最高的聚合酶活性，150個(gè)核甘酸/

秒；具有良好的熱穩(wěn)定性，95c仍有活性，應(yīng)用濃度一股為125u/100ul

反應(yīng)體積。

5、引物0.1-0.5umol/L。引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配或非特異性擴(kuò)增、

生成引物二聚體,使目的DNA片段產(chǎn)率下降。退火溫度與引物Tm值有關(guān)，

引物Tm值在55-80℃范同較為理想°

6、反應(yīng)溫度和循環(huán)次數(shù)

（十九）、影響大腸桿菌系統(tǒng)外源基因表達(dá)的因素？

答：1、啟動(dòng)子的強(qiáng)弱；2、基因的劑量；3、影響RNA轉(zhuǎn)錄和翻譯效

率的因素：SD序列、mRNA；4、外源基因密碼子的選擇；5、表達(dá)產(chǎn)物的

大小；6、表達(dá)產(chǎn)物的穩(wěn)定性。（二十）、大腸桿菌系統(tǒng)表達(dá)外源基因必

須具備的條件？

答：1、要求外源基因的編碼區(qū)不能含有內(nèi)含子；

2、表達(dá)的外源片段要位于大腸桿菌啟動(dòng)子的下游，并形成正確的閱

讀框架；

3、轉(zhuǎn)錄出的mRNA必須有與大腸桿菌16SrRNA3,末端相匹配的SD

序列，才能被有效的翻譯成蛋白質(zhì)。

4、蛋白產(chǎn)物必須穩(wěn)定，不易被細(xì)胞內(nèi)蛋白酶快速降解，且對(duì)宿主無(wú)

害。

（二H"一）、真核細(xì)胞表達(dá)外源基因的條件？

答：1、首先必須具備哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的功能元件。要求哺乳動(dòng)物

細(xì)胞表達(dá)載體帶有能在真核細(xì)胞中表達(dá)外源基因的真核憑錄調(diào)控元件；

2、注意選擇轉(zhuǎn)染的受體細(xì)胞，不同類(lèi)型的細(xì)胞具有不同的特性;

3、注意選擇適當(dāng)?shù)倪x擇標(biāo)記。

（二十二）、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的概念、原理及應(yīng)用？

答：1、概念：是指用人工方法將外源基因?qū)牖蛘系交蚪M內(nèi)，

并能穩(wěn)定傳代的一類(lèi)動(dòng)物。它的特點(diǎn)是“分子及細(xì)胞水平操作，組織及動(dòng)

物整體水平表達(dá)。

2、基本原理：將目的基因或基因組片段用顯微注射等方法注入實(shí)驗(yàn)

動(dòng)物的受精卵或著床前的胚胎細(xì)胞中，使目的基因整合到基因組中，然后

將此受精卵或著床前的胚胎細(xì)胞再植入受體動(dòng)物的輸卵管或子宮中，使其

發(fā)育成攜帶有外源基因的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，人們可以通過(guò)分析轉(zhuǎn)基因和動(dòng)物表

型的關(guān)系，揭示外源基因的功能；也可以通過(guò)轉(zhuǎn)入外源基因培育優(yōu)良的動(dòng)

物品種。

3、應(yīng)用：建立用于研究外源基因表達(dá)調(diào)控體系；建立醫(yī)學(xué)中常用的

疾病模型；培育動(dòng)物新品種；藥理學(xué)和藥用蛋白的生產(chǎn)研究。

（二十三）、基因敲除的基本程序？

答：通過(guò)DNA同源重組，使得胚胎干細(xì)胞特定的內(nèi)源基因被破壞而造

成功能喪失，然后通過(guò)胚胎干細(xì)胞介導(dǎo)得到該基因喪失的小鼠模型的過(guò)程

稱(chēng)為基因敲除。

1>打靶載體的構(gòu)建：同源序列要足夠長(zhǎng)，要含有篩選用的標(biāo)志基

因。

2、胚胎干細(xì)胞的體外培養(yǎng)

3、打靶載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞

4、同源重組胚胎干細(xì)胞的篩選

5、基因敲除胚胎干細(xì)胞注射入胚泡

6、胚泡植入假孕小鼠的子宮中

7、雜交育種獲得純合的基因敲除動(dòng)物

（二十四）、DNA芯片的原理？

答：DNA芯片技術(shù)就是一種大規(guī)模的集成的固相核酸分子雜交，以大

量已知堿基序列的寡核甘酸片段為探針，檢測(cè)樣品中哪些核酸序列與其互

補(bǔ)，然后通過(guò)定性定量分析得出待測(cè)樣品的基因序列及表達(dá)的信息。其方

法包括芯片的制備、樣品的準(zhǔn)備、分子雜交和檢測(cè)分子°（二十五）、誘

變劑的作用機(jī)制？

答：1、堿基的類(lèi)似物誘發(fā)突變

2、改變DNA的化學(xué)結(jié)構(gòu)

3、結(jié)合到DNA分子上誘發(fā)移碼突變

4、紫外線(xiàn)及其他射線(xiàn)引起的DNA分子的變化

（二十六）、突變類(lèi)型及其遺傳效應(yīng)？

答：1、突變類(lèi)型：

①點(diǎn)突變：DNA大分子上一個(gè)堿基的變異。分為轉(zhuǎn)換和顛換。

②缺失：一個(gè)堿基或一段核昔酸鏈從DNA大分子上消失。

③插入：一個(gè)原來(lái)沒(méi)有的堿基或一段原來(lái)沒(méi)有的核甘酸鏈插入到

DNA大分子中間。④倒位；DNA鏈內(nèi)重組，使其中一段方向倒置。

2、突變的遺傳效應(yīng)：

①遺傳密碼的改變：錯(cuò)義突變、無(wú)義突變、同義突變、移碼突變

②對(duì)mRNA剪接的影響：一是使原來(lái)的剪接位點(diǎn)消失；二是產(chǎn)生

新的剪接位點(diǎn)。

③蛋白質(zhì)肽鏈中的片段缺失：

(二十七)、基因治療的策略？

答：1、基因置換或稱(chēng)基因矯正：特定的目的基因?qū)胩囟ǖ募?xì)胞，

通過(guò)定位重組，讓導(dǎo)入的正常基因置換基因組內(nèi)原有的缺陷基因，不涉及

基因組的任何改變。

簡(jiǎn)答題：核酸

L簡(jiǎn)述DNA雙螺旋穩(wěn)定的因素及其作用雙螺旋穩(wěn)定的因素及其作用雙

螺旋穩(wěn)定的因素及其作用雙螺旋穩(wěn)定的因素及其作用。答：1氫鍵作用。

已知DNA雙螺旋的穩(wěn)定因素是堿基對(duì)中的氫鍵由于G、C之間是三個(gè)氫鍵,

而A、T之間是兩個(gè)氫鍵。2堿基堆積力。分布于雙螺旋結(jié)構(gòu)內(nèi)側(cè)的喋吟

與喀咤堿呈疏水性，大量鄰近堿基對(duì)的堆積，使其內(nèi)部形成了強(qiáng)有力的疏

水區(qū)，與介質(zhì)水分子隔開(kāi)。3其他作用因素。例如離子強(qiáng)度。磷酸集團(tuán)上

的負(fù)電荷與介質(zhì)中陽(yáng)離子之間形成離子鍵，可以有效地屏蔽磷酸基之間的

靜電斥力，

2.RNA有哪些主要類(lèi)型有哪些主要類(lèi)型有哪些主要類(lèi)型有哪些主要類(lèi)

型？各有何生理功能各有何生理功能各有何生理功能各有何生理功能？

答：1核糖體RNA(rRNA)：這些RNA分子在代謝上十分穩(wěn)定，是生物體

內(nèi)蛋白質(zhì)合成的“機(jī)器”一核糖體的重要成分。2轉(zhuǎn)移RNA(tRNA)；它們

在代謝上也是穩(wěn)定的，在蛋白質(zhì)的生物合成過(guò)程中起接受、轉(zhuǎn)運(yùn)和摻入氨

基酸的作用。3信使RNA(mRNA)：從DNA上把遺傳密碼即蛋白質(zhì)中氨基

酸排列順序的信息接受過(guò)來(lái)，并起模板作用合成蛋白質(zhì)。

3、試比較DNA與RNA化學(xué)組成的異同答：不同：1戊糖不同：DNA

為脫氧核糖；RNA為核糖。2堿基不同：RNA還有U（尿喀咤），DNA含有

T（胸腺嘴咤）。相同：RNA和DNA都含有A（腺喋吟）、G（鳥(niǎo)喋吟）、（：（胞

喀咤）。

4、簡(jiǎn)述DNA復(fù)件的必要條件和機(jī)制復(fù)件的必要條件答：復(fù)性的

必要條件：1鹽濃度必須高，足以使兩鏈之間磷酸基團(tuán)上負(fù)電荷的排斥力

消失，通常用0.15到0.5mol/L的NaCI。2溫度必須適當(dāng)高，足以防止鏈內(nèi)

隨機(jī)形成氫鍵。復(fù)性的最適溫度比Tm值低20℃到25℃。機(jī)制：復(fù)性是

一個(gè)比較慢的過(guò)程，實(shí)際上重新繞成螺旋這一過(guò)程并不限制復(fù)性速度。變

性DNA的兩條互補(bǔ)單鏈之間要形成氫鍵，必須使配對(duì)的堿基處于正確位置,

因?yàn)樵谧冃訢NA溶液里兩條互補(bǔ)鏈之間處于正確位置是一個(gè)隨機(jī)的過(guò)程。

在變性的DNA溶液中，混合的自由單鏈碰撞是隨機(jī)的，每一復(fù)性的DNA

分子并非都是由原始配對(duì)的互補(bǔ)鏈形成的。隨機(jī)碰撞也可以產(chǎn)生分子雜交。

第六章：遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)

1、作為遺傳物質(zhì)的DNA,其攜帶和轉(zhuǎn)運(yùn)的遺傳信息有哪些？答：1

含有細(xì)胞合成每一個(gè)蛋白質(zhì)中的氨基酸順序；2有合成每個(gè)蛋白質(zhì)的起始

和終止信號(hào)；3有決定某一單位時(shí)間里哪些特定的蛋白質(zhì)被合成并且究竟

合成多少個(gè)蛋白質(zhì)分子的一個(gè)信號(hào)裝置。

2、原核生物基因組的特點(diǎn)是什么？1小，一般具有單一DNA復(fù)制起

點(diǎn)；2單個(gè)染色體，一般呈環(huán)狀；3染色體DNA或RNA并不和蛋白質(zhì)形成

固定地結(jié)合物；4少量重復(fù)序列；5功能上密切相關(guān)的基因構(gòu)成操縱子或

高度集中，并且常轉(zhuǎn)錄成為基因mRNA.

第七章：DNA復(fù)制

1、一個(gè)細(xì)菌要遺傳其復(fù)制必須滿(mǎn)足什么條件？答：1一個(gè)復(fù)制周

期的起始；2對(duì)起始頻率的控制；3復(fù)制后的染色體分配到子代細(xì)胞。

2、DNA聚合酶II發(fā)揮聚合活性時(shí)所需的條件有哪些？答：1模板（有

模板底物引物（RNA）Mg2+）；2適宜的溫度；3必須有十一0H末端的引

物，且此引物必須與模板正確形成氫鍵；4合成從5'-3'方向進(jìn)行。

3、簡(jiǎn)述DNA連接酶作用的條件。答：1DNA連接酶催化一個(gè)DNA鏈

的5'磷酸根與另一DNA鏈的3'羥基形成磷酸二酯鍵，這兩個(gè)鏈都必須

與同一另外的鏈互補(bǔ)結(jié)合，而且兩鏈必

須相鄰。2只能連接一個(gè)切口而不能連接一個(gè)豁口；3所需的能量或

來(lái)自NAD（如大腸桿菌）或ATP（如T4誘導(dǎo)的連接酶和動(dòng)物細(xì)胞中的連接

酶）。

4、請(qǐng)簡(jiǎn)要說(shuō)明復(fù)制過(guò)程的復(fù)雜性。答：復(fù)制過(guò)程十分復(fù)雜，涉及許

多酶和蛋白質(zhì)的協(xié)同作用。目前雖對(duì)大部分復(fù)制有關(guān)的酶和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和

性質(zhì)已弄清楚，但對(duì)DNA的雙鏈究竟是如何解開(kāi)，以及怎樣保持其復(fù)制真

實(shí)性仍是知其然而不知所以，以下事實(shí)足以表明過(guò)程的復(fù)雜性：1復(fù)制需

要為解螺旋提供能量；2單鏈DNA傾向于鏈內(nèi)堿基配對(duì)；3一個(gè)酶只能催

化有限的生理生化反應(yīng)；4一系列的防護(hù)措施既能防止復(fù)制錯(cuò)誤的產(chǎn)生又

能消除偶然出現(xiàn)的錯(cuò)誤；5DNA分子均以高度壓縮狀態(tài)和環(huán)狀超螺旋狀態(tài)

存在，必須解決由此給復(fù)制系統(tǒng)帶來(lái)的強(qiáng)大幾何強(qiáng)制口。

第八章：DNA損傷修復(fù)和基因突變損傷修復(fù)

1、簡(jiǎn)述突變產(chǎn)生的途徑。答：突變體的產(chǎn)生需要堿基順序發(fā)生變化,

這種變化可以由于DNA復(fù)制錯(cuò)誤自發(fā)地產(chǎn)生或者由以下五種途徑促進(jìn)產(chǎn)

生。1插入的不能正確配對(duì)的堿基未被除去；2插入的一個(gè)異構(gòu)化的堿基

在緊接著的復(fù)制中可以發(fā)生替換；3先插入的堿基發(fā)生化學(xué)變化，成為具

有不同配對(duì)特性的堿基；4在復(fù)制期間一個(gè)或多個(gè)堿基的漏減或插接。

第九章：轉(zhuǎn)錄1、簡(jiǎn)述述大腸桿菌RNA聚合酶的特點(diǎn).答：大腸桿

菌RNA聚合酶有五個(gè)亞基組成，Q2BB'C,《亞基很容易從全酶上掉

下來(lái)，C亞基在酶作用的某個(gè)階段掉下來(lái)之后，剩下的a26B'成為核

心隨，而Q2BB'C稱(chēng)為全酶。C是識(shí)別因子。在RNA聚合酶的亞基結(jié)

構(gòu)中，。、B和B'亞基對(duì)酶活性的重組是必需的，3則是不必須的，其

功能尚不清楚。核心酶具催化活性，而C亞基本身沒(méi)有催化活性，其作用

是識(shí)別DNA分子上RNA合成的起始信號(hào)。但C亞基不能單獨(dú)與DNA結(jié)合，

它結(jié)合到核心酶后可能引起酶構(gòu)型的變化，因而改變核心酶與DNA結(jié)合的

特性。B亞基是僅有的可以單獨(dú)與DNA結(jié)合的亞基，它參與RNA聚合酶

與模板反應(yīng)，同時(shí)3亞基也與核心酶和C亞基結(jié)合以及轉(zhuǎn)錄的終止有關(guān)。

B（或B'）也可與終止因子P發(fā)生直接反應(yīng)。。亞基具有與B的結(jié)合點(diǎn)，

參與特定的基因表達(dá)，可能與醵和DNA上的啟動(dòng)區(qū)域的反應(yīng)有關(guān)。大腸桿

菌RNA聚合前還含有2個(gè)Zn原子，它們與B亞基相連接。

2、簡(jiǎn)述原核生物轉(zhuǎn)錄終止子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。答：1具有一個(gè)反向重復(fù)

的序列；2第二區(qū)域是在靠近推測(cè)的莖的環(huán)端（有時(shí)全部在莖中），是一個(gè)

高含GC區(qū)；3第三個(gè)區(qū)（有時(shí)不存在）是一個(gè)TA序列（可能在莖的開(kāi)始）,

在mRNA中產(chǎn)生一個(gè)6-8個(gè)尿喀咤接著一個(gè)腺喋吟順序。

3、簡(jiǎn)要說(shuō)出原核生物mRNA與真核生物mRNA的區(qū)別。答：1從原

核生物來(lái)說(shuō)，mRNA是多順?lè)醋樱瑝勖?，翻譯是偶聯(lián)的，所以合成出來(lái)

的RNA不需加工；真核生物mRNA是單順?lè)醋樱瑝勖L(zhǎng)，mRNA轉(zhuǎn)錄出來(lái)

是前體，需加工，且在細(xì)胞核中合成，再進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，不是偶聯(lián)的。2原

核生物mRNA的5'端在起始密碼上有SD序列與翻譯起始有關(guān)，而真核生

物mRNA沒(méi)有03真核生物mRNA的5'端有帽子3'端有PolyA尾，而原

核生物mRNA沒(méi)有。4原核生物mRNA沒(méi)有內(nèi)含子，而真核生物mRNA有

內(nèi)含子，需加工變成成熟的mRNAo

4、簡(jiǎn)要括原核生物啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)和功能。答：1在左邊距mRNA開(kāi)

始轉(zhuǎn)錄的第一個(gè)堿基5—10個(gè)堿基的地方有一段序列叫Pribowbox即一10

區(qū)，決定轉(zhuǎn)錄的方向。2—35區(qū)位于Pribowbox左側(cè)，是啟動(dòng)子中另一重

要區(qū)域，在一35區(qū)也存在與Pribowbox類(lèi)似的一個(gè)順序，一35區(qū)決定轉(zhuǎn)

錄的頻率。3起始位點(diǎn)的序列，它是影響轉(zhuǎn)錄的起始效率。

5、簡(jiǎn)述真核生物RNA聚合前的特點(diǎn)。答：真核生物的基因組比原

核生物大，RNA聚合酶也更為復(fù)雜。其相對(duì)分子質(zhì)量大都在500000左右,

有8—14個(gè)亞基，并含有Zn2+。RNA聚合酶單獨(dú)不能起蚱用，需負(fù)責(zé)識(shí)別

啟動(dòng)子元件序列的輔助因子，真核生物RNA聚合酶中沒(méi)有細(xì)菌C因子的對(duì)

應(yīng)物，因此必須借助各種轉(zhuǎn)錄因子才能選擇和結(jié)合到啟動(dòng)子上，對(duì)。一鵝

膏蕈堿，含有三種RNA聚合酶，分別為RNA聚合酶I、RNA聚合酶H、RNA

聚合酶HI。

第十章翻譯

1、說(shuō)出蛋白質(zhì)合成所需的重要組成。答：蛋白質(zhì)的合成也就是

生物體內(nèi)遺傳信息傳遞

的“翻譯”過(guò)程。它需要大約兩百多種生物大分子，其中包括核糖體

（由RNA和蛋白質(zhì)組成）、

mRNA、tRNA,以及包括同功受體tRNA、氨酰tRNA合成酶、可溶性

蛋白質(zhì)因子（起始因

子、延伸因子和釋放因子）的參加的協(xié)同作用，以上即為蛋白質(zhì)合成

所需的重要組分

2、簡(jiǎn)要說(shuō)出原核生物蛋白質(zhì)合成的起始過(guò)程。答：原核生物起

始總反應(yīng)式是：

30S+50S+mRNA+fMet-tRNAf

[70S?mRNA?fMet-tRNAf]+GDP+Pi在一定濃度Mg2+的生理?xiàng)l件下，

核糖體亞基很容易締結(jié)，

所以首先70S核糖體必須在IF-1和IF-3作用下解離。70S=50S+30S

50S+30SIF-3然后形成30s?IF-1、2、3復(fù)合物。這三個(gè)因子有結(jié)合的協(xié)

同作用，并且都結(jié)

合在靠近16SrRNA的3,端序列，位于核糖體的界面，從而妨礙了50S

亞基的結(jié)合，進(jìn)而形

成30S（小亞基）起始復(fù)合物：30SIF1、2、3+mRNA+fMet-tRNAf+GTP

f[30SIF-1、

2?mRNA-fMet-tRNAf-GTP]+ir-3o共價(jià)交鏈實(shí)驗(yàn)表明，當(dāng)形成30S

復(fù)合物時(shí)，S7、SI、Sils

S12、S18和S21等蛋白質(zhì)與核糖體識(shí)別mRNA起始位點(diǎn)有關(guān)。70S起

始合物（簡(jiǎn)稱(chēng)起始復(fù)

合物）的生成和IF-2的再循環(huán)通過(guò)以下步驟進(jìn)行。50s亞基的加入伴

隨著GTP被IF-2（依

賴(lài)于核糖體的GTPase）水解，然后IF-2（和IF-1）及GDP、Pi從核糖

體釋放出來(lái)。

3、簡(jiǎn)述大腸桿菌的乳糖操縱子模型.答：乳糖操縱子模型的基

因組成是由調(diào)節(jié)基因控

制位點(diǎn)和一組功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因組成?？刂莆稽c(diǎn)包括啟動(dòng)基因和操

作基因。大腸桿菌的乳

糖轉(zhuǎn)錄子一般也稱(chēng)為乳糖操縱子。包括三個(gè)結(jié)構(gòu)基因：Z、Y、a分別

編碼B一半乳糖昔酶、

B一半乳糖甘透性酶、B一半乳糖背轉(zhuǎn)乙酰酶，此外還有一個(gè)操縱序

列0,一個(gè)啟動(dòng)序列P及

一個(gè)調(diào)節(jié)基因I。I基因編碼一種阻遏蛋白，后者與。序列結(jié)合，使操

縱子受阻遏而處于轉(zhuǎn)

錄失活狀態(tài)。在啟動(dòng)序列P上游還有一個(gè)分解（代謝）物，基因激活

蛋白CAP結(jié)合位點(diǎn)，

由P序列、0序列和CAP結(jié)合位點(diǎn)共同構(gòu)成LAC操縱子的調(diào)控區(qū)，三

個(gè)酶的編碼基因即由

一控制區(qū)調(diào)節(jié)實(shí)現(xiàn)基因產(chǎn)物的協(xié)調(diào)表達(dá)。

原核生物蛋白質(zhì)合成過(guò)程

1氨基酸的活化:氨基酸在進(jìn)行合成多肽鏈之前，必須先經(jīng)過(guò)活化，然

后再與其特異的tRNA

結(jié)合，帶到mRNA相應(yīng)的位置上，這個(gè)過(guò)程靠氨基酰tRNA合成酶催

化，此前催化特定的

氨基酸與特異的tRNA相結(jié)合，生成各種氨基酰tRNA.

2翻譯的起始:蛋白質(zhì)合成的起始是指在模板mRNA編碼區(qū)5'端形成

核糖體-mRNA-起始

tRNA復(fù)合物并將甲酰甲硫氨酸放入核糖體P位點(diǎn)。第一步三元復(fù)合物

30s-mRNA-IF3的形

成，核蛋白體大小亞基分離，30s小亞基與翻譯起始因子IF-1JF-3結(jié)

合，通過(guò)SD序列與

mRNA模板相結(jié)合。第二步30s前起始復(fù)合物的形成，在IF-2和GTP

的幫助下，

fMet-tRNAfMet進(jìn)入小亞基的P位，tRNA上的反密碼子與mRNA上的

起始密碼子配對(duì)。第

三步70s起始復(fù)合物形成，帶有tRNA、mRNA和3個(gè)翻譯起始因子的

小亞基復(fù)合物與50S

大亞基結(jié)合，GTP水解，釋放翻譯起始因子。

3肽鏈的延伸：肽鏈延伸每加一個(gè)氨基酸就是一個(gè)循環(huán)，每個(gè)循環(huán)包

括：AA-tRNA與核糖

體結(jié)合、肽鍵的生成和移位。1)AA-tRNA與核糖體A位點(diǎn)的結(jié)合，需

要消耗GTP,并需EF-Tu、

EF-Ts兩種延伸因子。2)肽鍵的形成是由轉(zhuǎn)肽酶/肽基轉(zhuǎn)移酶催化在核

糖體?mRNA?AA-tRNA

復(fù)合物中，AA-tRNA占據(jù)A位，fMet-tRNAfMet占據(jù)P位。在肽基轉(zhuǎn)

移酶（peptidyltransferase）

的催化下，A位上的AA-tRNA轉(zhuǎn)移到P位，與fMet-tRNAfMet上的氨

基酸生成肽鍵。起始

tRNA在完成使命后離開(kāi)核糖體P位點(diǎn),A位點(diǎn)準(zhǔn)備接受新的AA-tRNA,

開(kāi)始下一輪合成

反應(yīng)。3）移位核糖體向mRNA3'端方向移動(dòng)一個(gè)密碼子。需要消耗

GTP,并需EF-G延伸

因子。

4肽鏈的終止：肽鏈在延伸過(guò)程中，當(dāng)終止密碼子出現(xiàn)在核糖體的A

位時(shí)，沒(méi)有相應(yīng)的

AA-tRNA能與之結(jié)合，而釋放因子能識(shí)別終止密碼子并與之結(jié)合，水

解P位上多肽鏈與tRNA之間的酯鍵。新生的肽鏈和tRNA從核糖體上釋放,

核糖體解體，蛋白質(zhì)合成結(jié)束。

第十一章：原核基因表達(dá)的調(diào)控

1＞簡(jiǎn)單描述大腸桿菌乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)及轉(zhuǎn)錄過(guò)程單。答：結(jié)

構(gòu)基因：B一半乳糖普酶基因（lacZ）、編碼B一半乳糖背透性酶的基因

（lacY）＞B一半乳糖背轉(zhuǎn)乙酰酶基因（lacA）。過(guò)程：乳糖操縱子調(diào)控是

當(dāng)培養(yǎng)基中沒(méi)有乳糖時(shí)，存在于操縱子上游的調(diào)節(jié)基因編碼表達(dá)的阻遏蛋

白結(jié)合到操縱子中的操縱基因上，阻止了結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)。此時(shí)，在細(xì)胞

中只有幾個(gè)B一半乳糖甘酶分子，但將大腸桿菌轉(zhuǎn)到乳糖培養(yǎng)基中時(shí)，由

于誘導(dǎo)物分子結(jié)合在阻遏蛋白的特異部位，引起阻遏蛋白構(gòu)象改變，不能

結(jié)合到操縱基因上，使RNA聚合酶能夠正常催化轉(zhuǎn)錄存在于操縱子上的結(jié)

構(gòu)基因，即操縱子被誘導(dǎo)表達(dá)，B一半乳糖昔酶分子數(shù)量迅速增加，在這

個(gè)系統(tǒng)中的誘導(dǎo)物分子不是乳糖本身，而是乳糖的同分異構(gòu)體一異乳糖。

因?yàn)槿樘沁M(jìn)入大腸桿菌細(xì)胞后被轉(zhuǎn)化成了異乳糖。

2、說(shuō)出為什么大腸桿菌在有葡萄糖和乳糖時(shí).首先利用葡萄糖，而

沒(méi)有葡萄糖時(shí)才利用乳糖？答：葡糖糖效應(yīng)：在葡萄糖存在的情況下,

即使在細(xì)菌培養(yǎng)基中加入乳糖等誘導(dǎo)物與其相對(duì)應(yīng)的操縱子，也不會(huì)啟動(dòng)

產(chǎn)生代謝這些糖的酶。這是因?yàn)槠咸烟鞘亲畛Ｓ玫奶荚础慵?xì)菌所需要的能

量主要從葡萄糖獲得，在這種情況下，細(xì)菌無(wú)需開(kāi)動(dòng)一些不常用的基因去

利用稀有糖，但葡萄糖存在可抑制細(xì)菌細(xì)胞中的腺甘酸環(huán)化酶，減少了環(huán)

腺甘酸(CAMP)的合成，與它結(jié)合的正受體PrCAP因找到配體而不能形成復(fù)

合物，CAMP—CAP是一個(gè)重要的正調(diào)節(jié)物質(zhì)，可以與操縱子的啟動(dòng)子區(qū)結(jié)

合啟動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄，所以葡萄糖存在時(shí)，不易形成CAMP—CAP受其調(diào)控基

因不表達(dá)。如果培養(yǎng)基中葡萄糖含量下降，腺苜酸環(huán)化酶活力就會(huì)相應(yīng)提

高，CAMP合成增加，CAMP與CAP形成復(fù)合物并與啟動(dòng)子結(jié)合促進(jìn)乳糖

操縱子的表達(dá)，這種情況成為葡萄糖效應(yīng)或稱(chēng)為降解物抑制作用。

3、簡(jiǎn)述乳糖操縱子的負(fù)調(diào)控機(jī)制。負(fù)調(diào)控機(jī)制：是當(dāng)培養(yǎng)基中

沒(méi)有乳糖時(shí)，存在于操縱子上游的調(diào)節(jié)基因，編碼表達(dá)的阻遏蛋白結(jié)合到

操縱子中的操縱子基因上，阻止了結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)(即Lac基因被調(diào)節(jié)基

因編碼表達(dá)的阻遏蛋白所阻遏)。此時(shí)，在細(xì)胞中只有幾個(gè)B一半乳糖甘

酶分子。調(diào)控機(jī)制：在乳糖培養(yǎng)基中時(shí)，由于誘導(dǎo)物分子結(jié)合在阻遏蛋

白的特異部位，引起阻遏蛋白構(gòu)象改變，不能結(jié)合到操縱基因上，使RNA

聚合酶能夠正常催化轉(zhuǎn)錄存在于操縱子的基因結(jié)構(gòu)，即操縱子被誘導(dǎo)表達(dá),

3一半乳糖甘酶分子數(shù)量迅速增加。第十二章可轉(zhuǎn)移的遺傳因子

1、述轉(zhuǎn)座因子在與遺傳學(xué)中的應(yīng)用。答：1用于難篩選的基因

的轉(zhuǎn)移；2作為基因定位的標(biāo)記；3篩選插入突變；4構(gòu)建特殊菌株；5克

隆難以進(jìn)行表型鑒定的基因：6用于F因子處在特定位置上的Hfr菌株的

構(gòu)建；7帶有特定基因的轉(zhuǎn)到噬菌體的構(gòu)建；8特定區(qū)段缺失菌株的構(gòu)建。

第十四章真核基因組及基因表達(dá)調(diào)控1、真核生物rRNA基因

（rDNArDNArDNArDNA）的特點(diǎn)的。答：rRNA是細(xì)胞中主要的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)

物之一，在高等真核生物中要求有眾多為rRNA編碼的基因拷貝。這些基

因都位于細(xì)胞核內(nèi)。在許多高等真核生物中，這些基因一前一后地串聯(lián)排

列。每個(gè)轉(zhuǎn)錄單位被不轉(zhuǎn)錄的間隔區(qū)分開(kāi)。被轉(zhuǎn)錄的區(qū)域被RNA聚合酶和

新生的RNA鏈包圍著。新生RNA鏈和蛋白質(zhì)聯(lián)系在一起產(chǎn)生前體核糖體

粒子。這些粒子中含有成熟核糖體中的蛋白質(zhì)以及還有一些非核糖體核蛋

白，這些蛋白質(zhì)具有內(nèi)切酶活性，參與rDNA初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的加工。

2、概述參與真核生物基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的DNA序列。答：絕大多數(shù)

真核基因調(diào)控機(jī)制幾乎普遍涉及編碼基因兩側(cè)的DNA序列一一順式作用

元件。順式作用元件是指可影響自身基因表達(dá)活性的DNA序列。在不同真

核基因的順式作用元件中也會(huì)時(shí)常發(fā)現(xiàn)一些共有序列，

如TATA盒、CCAAT盒等（：這些共有序列就是順式作用元件的核心序列,

它們是真核RNA聚合酶或特異轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合位點(diǎn)。順式作用元件通常是

非編碼序列，但是并非都位于轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游（5'?端）。根據(jù)順式作用元件

在基因中的位置、轉(zhuǎn)錄激活作用的性質(zhì)及發(fā)揮作用的方式，可將真核基因

的這些功能元件分為啟動(dòng)子、增強(qiáng)子及沉默子等。

第十七章重組DNA與遺傳工程

1、重組DNA技術(shù)的要素。答：1載體；2工具酶；3外源DNA,

即要克隆或表達(dá)的DNA片段；4原核或（表達(dá)系統(tǒng)）真核宿主細(xì)胞。

2、重組DNA技術(shù)的意義與應(yīng)用技術(shù)的意義°答：現(xiàn)代DNA技術(shù)

使我們能夠分離和擴(kuò)增某一個(gè)具體基因，從而可以研究基因的精細(xì)結(jié)構(gòu)及

功能，是人類(lèi)從分子水平上對(duì)各種生命現(xiàn)象的認(rèn)識(shí)產(chǎn)生了一個(gè)巨大的飛躍。

人們利用重組DNA技術(shù)，使基因在細(xì)菌或培養(yǎng)的真核細(xì)胞中表達(dá)而獲得有

重大意義的醫(yī)藥產(chǎn)品如干擾素、激素、免疫調(diào)節(jié)因子及蛋白質(zhì)疫苗等。利

用重組DNA技術(shù)，人們還可以創(chuàng)造出新的抗病、抗蟲(chóng)害和高產(chǎn)的動(dòng)植物品

種

2012年1月分子生物學(xué)自考試卷大題

26.半不連續(xù)復(fù)制

27..上游啟動(dòng)子元件

28..遺傳密碼遺傳密碼遺傳密碼遺傳密碼

29..報(bào)告基因

30..鋅指結(jié)構(gòu)

31.簡(jiǎn)述DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型

32..簡(jiǎn)述啟動(dòng)子的作用等點(diǎn)

33..簡(jiǎn)述原核生物蛋白質(zhì)生物合成的起始過(guò)程

34..簡(jiǎn)述半乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

35..簡(jiǎn)述在原核生物翻譯水平上影響基因表達(dá)調(diào)控的因素3

36.試述利用X噬菌體構(gòu)建基因組DNA文庫(kù)的方法

37..試述真核生物基因表達(dá)調(diào)控的主要特點(diǎn)

一、名詞解釋

1.cDNA與cccDNA：cDNA是由mRNA通過(guò)反轉(zhuǎn)錄酶合成的雙鏈DNA；

cccDNA是游離于染色體之外的質(zhì)粒雙鏈閉合環(huán)形DNA.

2.標(biāo)準(zhǔn)折疊單位：蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元a—螺旋與折疊通過(guò)各

種連接多肽可以組成特殊幾何排列的結(jié)構(gòu)塊，此種確定的折疊類(lèi)型通常稱(chēng)

為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。幾乎所有的三級(jí)結(jié)構(gòu)都可以用這些折疊類(lèi)型，乃至他們的

組合型來(lái)予以描述，因此又將其稱(chēng)為標(biāo)準(zhǔn)折疊單位。

3.CAP：環(huán)腺甘酸(cAMP)受體蛋白CRP(cAMPreceptorprotein),

cAMP與CRP結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱(chēng)激活蛋白CAP(cAMPactivated

protein)

4.回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互補(bǔ)序列，常是限制

性酶切位點(diǎn)。

5.micRNA：互補(bǔ)干擾RNA或稱(chēng)反義RNA,與mRNA序列互補(bǔ)，可抑

制mRNA的翻譯。

6.核酶：具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加二過(guò)程中起到自我

催化的作用。

7.模體；蛋白質(zhì)分子空間結(jié)構(gòu)中存在著某些立體形狀和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)頗

為類(lèi)似的局部區(qū)域。

8.信號(hào)肽：在蛋白質(zhì)合成過(guò)程中N端有15-36個(gè)氨基酸殘基的肽段，

引導(dǎo)蛋白質(zhì)的跨膜。

9.弱化子：在操縱區(qū)與結(jié)構(gòu)基因之間的一段可以終止轉(zhuǎn)錄作用的核

甘酸序列。

10.魔斑：當(dāng)細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中，遇到氨基酸全面缺乏時(shí)，細(xì)菌將會(huì)產(chǎn)

生一個(gè)應(yīng)急反應(yīng)，停止全部基因的表達(dá)。產(chǎn)生這一應(yīng)急反應(yīng)的信號(hào)是鳥(niǎo)苜

四磷酸（ppGpp）和鳥(niǎo)背五磷酸（pppGpp）cPpGpp與pppGpp的作用不只是

一個(gè)或幾個(gè)操縱子，而是影響一大批，所以稱(chēng)他們是超級(jí)調(diào)控子或稱(chēng)為魔

斑。

11.上游啟動(dòng)子元件：是指對(duì)啟動(dòng)子的活性起到一種調(diào)節(jié)作用的DNA

序列，-10區(qū)的TATA、?35區(qū)的TGACA及增強(qiáng)子，弱化子等。

12.DNA探針：是帶有標(biāo)記的一段已知序列DNA,用以檢測(cè)未知序列、

篩選目的基因等方面廣泛應(yīng)用。

13.SD序列：是核糖體與mRNA結(jié)合序列，對(duì)翻譯起到調(diào)控作用。

14.單克隆抗體：只針對(duì)單一抗原決定簇起作用的抗體。

15.考斯質(zhì)粒：是經(jīng)過(guò)人工構(gòu)建的一種外源DNA載體，保留噬菌體兩

端