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文檔簡介
1.2.2微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
一、單選題1.分離土壤中分解尿素的細(xì)菌,對培養(yǎng)基的要求是()①加尿素②不加尿素③加瓊脂④不加瓊脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸鹽⑧不加硝酸鹽A.①③⑤② B.①④⑤⑧ C.①③⑤⑧ D.①③⑥⑦2.尋找纖維素分解菌應(yīng)到()A.濕潤的環(huán)境中 B.腐殖質(zhì)豐富的環(huán)境中C.富含無機(jī)鹽的環(huán)境中 D.養(yǎng)魚的池塘中3.微生物需要從外界吸收營養(yǎng)物質(zhì)來維持正常的生長和繁殖。下列關(guān)于微生物營養(yǎng)的敘述,正確的是()A.尿素分解菌和纖維素分解菌的培養(yǎng)基中可能含有相同的無機(jī)鹽B.篩選硝化細(xì)菌(自養(yǎng)型)的培養(yǎng)基中需加入適宜濃度的有機(jī)碳源C.只含有水和無機(jī)鹽兩類成分的培養(yǎng)基中不可能形成生物群落D.乳酸菌需要的特殊營養(yǎng)物質(zhì)是指其自身不能合成的某些無機(jī)物4.下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”的實(shí)驗(yàn)操作敘述中錯誤的是()A.常用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)B.取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL,分別涂布于各組平板上C.將實(shí)驗(yàn)組和對照組平板倒置,37℃恒溫培養(yǎng)24~48小時(shí)D.確定對照組無菌后,選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)5.下表為某培養(yǎng)基的配方,下列有關(guān)敘述錯誤的是()葡萄糖10.0gK2SO40.2gK2HPO402gCaCO35.0gMgSO4·7H2O0.2g瓊脂20.0gNaCI0.2g——將上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容至1000mLA.培養(yǎng)基中添加了一定的瓊脂,可以用來觀察菌落與測定菌落直徑B.該培養(yǎng)基生長的菌落都具有固氮能力,且都是異養(yǎng)微生物C.為驗(yàn)證該培養(yǎng)基是否有選擇功能需要用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行對照實(shí)驗(yàn)D.該培養(yǎng)基里不含氮源,故從功能上看,該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基6.木材腐朽菌分為白腐菌和褐腐菌兩種,其中白腐菌可以利用木材中的木質(zhì)素(褐色)和纖維素,褐腐菌只能利用木材中的纖維素。研究人員用含有酪蛋白水解產(chǎn)物和鋸末的培養(yǎng)基X培養(yǎng)木腐菌、發(fā)現(xiàn)白腐菌的菌落呈白色,褐腐菌的菌落呈褐色。下列說法錯誤的是()A.培養(yǎng)基X上只有白腐菌或褐腐菌的菌落B.培養(yǎng)基X中需要加入適量的凝固劑C.培養(yǎng)基中的酪蛋白水解產(chǎn)物能為微生物提供氮源D.若在培養(yǎng)基中加入纖維素酶,則褐腐菌可能不能存活7.某種難以降解的物質(zhì)S,會對環(huán)境造成污染,研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。甲、乙是兩種培養(yǎng)基,甲的組分為無機(jī)鹽、水和S,乙的組分為無機(jī)鹽、水、S和物質(zhì)X。下列敘述不正確的是()A.通常采用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基和錐形瓶進(jìn)行滅菌B.甲、乙均為選擇培養(yǎng)基,物質(zhì)X可能是瓊脂C.步驟③將M中的菌液接種到乙上所用的方法是平板劃線法D.步驟④要挑取單個(gè)菌落接種,經(jīng)⑤篩選出高效降解S的菌株8.21題圖表示從某池塘淤泥樣品中篩選高效沉降污水中微小顆粒的微生物操作步驟。有關(guān)說法錯誤的是()A.步驟Ⅱ和Ⅲ所用的接種方法不同B.步驟Ⅲ是為了獲得純培養(yǎng)物C.平板培養(yǎng)皿1和平板培養(yǎng)皿2均屬于固體培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基D.對試管2中微生物進(jìn)行計(jì)數(shù),若菌體較大可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板9.將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸一定時(shí)間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養(yǎng)基。M培養(yǎng)基可用于真菌a的篩選,某同學(xué)將獲得的真菌a利用如圖的方式進(jìn)行稀釋,統(tǒng)計(jì)甲、乙,丙三個(gè)平板中的菌落數(shù)分別是110、140和149。下列分析正確的是()A.若真菌a為酵母菌,通常采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板對活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)B.若在培養(yǎng)真菌a的培養(yǎng)基中添加一定量的青霉素,可抑制細(xì)菌的繁殖C.選取甲、乙、丙三個(gè)培養(yǎng)基的目的是排除無關(guān)變量對實(shí)驗(yàn)的干擾D.根據(jù)三個(gè)平板中的菌落數(shù)可推算培養(yǎng)液中真菌a的密度為1.33×107個(gè)/mL10.野生型菌株X能在基本培養(yǎng)基上生長,亮氨酸缺陷型突變株無法合成亮氨酸,只能在完全培養(yǎng)基上生長。如圖是運(yùn)用影印培養(yǎng)法(一種類似“蓋章”的接種方法,使一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落)純化亮氨酸缺陷型突變株的部分流程圖,1~5為菌落。下列敘述不正確的是()A.培養(yǎng)基A是基本培養(yǎng)基,培養(yǎng)基B是完全培養(yǎng)基B.在基本培養(yǎng)基中添加亮氨酸可制成完全培養(yǎng)基C.可從培養(yǎng)基A中挑取菌落3、5進(jìn)行純化培養(yǎng)D.若要影印多個(gè)平板,要注意“蓋章”的方向不能改變二、多選題11.人體皮膚表面存在著多種微生物,某同學(xué)擬從中分離出葡萄球菌。下述有關(guān)敘述正確的是()A.對配制的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B.使用無菌棉拭子從皮膚表面取樣C.采用平板劃線法對獲得的菌株進(jìn)行計(jì)數(shù)D.觀察菌落的形態(tài)和顏色等進(jìn)行初步判斷12.下表為某培養(yǎng)基的配方,有關(guān)敘述錯誤的是()成分牛肉膏葡萄糖KH2PO4瓊脂蒸餾水含量10g10g2g適量定容至1000mlA.從物理性質(zhì)看,該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基B.該培養(yǎng)基中提供碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖提供氮源的物質(zhì)是牛肉膏C.能在此培養(yǎng)基上生長的只有大腸桿菌D.該培養(yǎng)基調(diào)節(jié)合適的PH后就可以接種使用三、讀圖填空題13.③號試管稀釋倍數(shù)為______。14.自然界中的微生物往往是混雜生長的。人們在研究微生物時(shí)一般要將它們分離提純,然后進(jìn)行數(shù)量的測定。下面是有關(guān)土壤中分解尿素的細(xì)菌分離和計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)過程,請回答有關(guān)問題。(1)為分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌,應(yīng)該用_______________________的培養(yǎng)基進(jìn)行分離。(2)若取土樣6g,應(yīng)加入_______mL的無菌水配制成稀釋10倍土壤溶液。因土壤中細(xì)菌密度很大,需要不斷加以稀釋,配制成101~107不同濃度的土壤溶液。將103~107倍的稀釋液分別吸取0.2mL加入到固體培養(yǎng)基上,用涂布器將菌液鋪平,每個(gè)稀釋度下至少涂布3個(gè)平板。將接種的培養(yǎng)皿放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h~48h,觀察并統(tǒng)計(jì)菌落數(shù),結(jié)果如下表,其中_______倍的稀釋比較合適,由此計(jì)算出每克土壤中的菌落數(shù)為__________。稀釋倍數(shù)103104105106107菌落數(shù)(個(gè))1號平板4783672702652號平板4963542642083號平板509332252293(3)若研究尿素分解菌的群體生長規(guī)律,可采用平板劃線法分離土壤中的尿素分解菌。操作時(shí),接種環(huán)通過灼燒滅菌,在第二次及以后劃線時(shí),總是從上一次的末端開始劃線。這樣做的目的是_______________________。將分離純化后的單個(gè)菌落進(jìn)行液體培養(yǎng),可采用定期取樣的方法進(jìn)行計(jì)數(shù)。若以一個(gè)大方格(體積為0.1mm3)有25個(gè)中方格的計(jì)數(shù)板為例進(jìn)行計(jì)算,設(shè)五個(gè)中方格中總菌數(shù)為50,菌液稀釋倍數(shù)為102,那么原菌液的菌群密度為________個(gè)/mL。
參考答案1.答案:C解析:①②要分離分解尿素的細(xì)菌,應(yīng)配置以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基,①正確、②錯誤;③④分離土壤中分解尿素的細(xì)菌時(shí),制備固體培養(yǎng)基需加入瓊脂糖,③正確,④錯誤;⑤⑥培養(yǎng)基中需要加碳源即葡萄糖,⑤正確,⑥錯誤;⑦⑧要分離分解尿素的細(xì)菌,應(yīng)以尿素為唯一氮源,故不加硝酸鹽,⑦錯誤,⑧正確;故正確的有①③⑤⑧,D正確。故選D。2.答案:B解析:生物與環(huán)境之間存在相互依存的關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中,更容易尋找到纖維素分解菌,故纖維素分解菌主要分布在腐殖質(zhì)豐富的環(huán)境中;故選B。3.答案:A解析:A、尿素分解菌的培養(yǎng)基中含有的無機(jī)鹽是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4,纖維素分解菌的培養(yǎng)基中含有的無機(jī)鹽是NaNO3、KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、KCl。A正確;B、硝化細(xì)菌是自養(yǎng)生物,可以用空氣中CO2作為碳源,用缺乏有機(jī)碳源的培養(yǎng)基可以篩選硝化細(xì)菌。B錯誤;C、只含有水和無機(jī)鹽兩類成分的培養(yǎng)基,可以培養(yǎng)既能固氮又能以CO2作為碳源的微生物(如固氮藍(lán)藻)。C錯誤;D、乳酸菌需要的特殊營養(yǎng)物質(zhì)是維生素,是有機(jī)物。D錯誤。故選A。4.答案:D解析:A、“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)常用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù),A正確;B、取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL,分別涂布于各組平板上,B正確;C、將實(shí)驗(yàn)組和對照組平板倒置,37℃恒溫培養(yǎng)24~48小時(shí),C正確;D、確定對照組無菌后,選擇菌落數(shù)在30-300之間的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù),D錯誤.故選:D.5.答案:B解析:A、培養(yǎng)基中添加了一定的瓊脂,說明該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基,可以用來觀察菌落與測定菌落直徑,A正確;B、培養(yǎng)基沒有加入氮源,該培養(yǎng)基生長的菌落都具有固氮能力,雖然培養(yǎng)基加了葡萄糖,異養(yǎng)型微生物能生長,但自養(yǎng)型微生物也能生長,故不能判斷是否都是異養(yǎng)微生物,B錯誤;C、為驗(yàn)證該培養(yǎng)基是否有選擇功能需要用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行對照實(shí)驗(yàn),若該培養(yǎng)基中微生物數(shù)量明顯少于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,說明其具有選擇功能,C正確;D、該培養(yǎng)基里不含氮源,故從功能上看,該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基,可用于篩選固氮菌,D正確。故選B。6.答案:A解析:其他能利用木質(zhì)素和纖維素的微生物也可能在培養(yǎng)基X上形成菌落,A項(xiàng)錯誤。7.答案:C解析:A、對培養(yǎng)基和錐形瓶滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌法,A正確;B、甲和乙培養(yǎng)基可以用于篩選能降解S的菌株,故均屬于選擇培養(yǎng)基,乙為固體培養(yǎng)基,因此物質(zhì)X可能是瓊脂,B正確;C、圖中將M中的菌液接種到乙上所用的方法是稀釋涂布平板法,C錯誤;D、因?yàn)榧?、乙均為選擇培養(yǎng)基,經(jīng)過不斷分離純化,最終篩選出高效降解S的菌株,D正確。故選C。8.答案:C解析:A、步驟工是將樣品配置成菌液;步驟工是稀釋涂布平板法、步驟皿是平板劃線法,A正確;B、步驟皿是從涂布平板的培養(yǎng)基上挑取單菌落,進(jìn)一步通過平板劃線法進(jìn)行分離、純化,以獲得單一菌落,B正確;C、從物理性質(zhì)看,平板培養(yǎng)皿1和2都要使用固體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基上才能形成單菌落;從功能看,培養(yǎng)皿1和2使用通用培養(yǎng)基即可,此時(shí)還不需要使用選擇培養(yǎng)基,C錯誤;D、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板比細(xì)菌計(jì)數(shù)板厚,常用于菌體較大微生物的計(jì)數(shù),D正確。故選C.9.答案:B解析:A、酵母菌相對較大,可采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù),但該方法統(tǒng)計(jì)的是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和,A錯誤;B、青霉素可抑制細(xì)菌的繁殖,避免細(xì)菌對真菌a的干擾,B正確;C、選取甲、乙、丙三個(gè)培養(yǎng)基的目的是減小實(shí)驗(yàn)誤差,C錯誤;D、根據(jù)三個(gè)平板中的菌落數(shù)可推算培養(yǎng)液中真菌a的密度為(110+140+149)÷3÷0.1×105=1.33×108個(gè)/mL,D錯誤。故選B。10.答案:A解析:由題干可知,亮氨酸缺陷型突變株無法在基本培養(yǎng)基上生長,但是可以在完全培養(yǎng)基上生長,與A相比,B中缺少了3、5兩個(gè)菌落,說明3、5菌落是亮氨酸缺陷型突變株繁殖而來的,故A為完全培養(yǎng)基,B為基本培養(yǎng)基,A錯誤,C正確;在基本培養(yǎng)基中添加亮氨酸,則亮氨酸缺陷型突變株可以生長繁殖形成菌落,即制成了有利于其生長的完全培養(yǎng)基,B正確;若要影印多個(gè)平板,要注意“蓋章”的方向不能改變,防止菌落位置不一致,無法進(jìn)行比較,D正確。11.答案:ABD解析:A、培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌,A正確;B、使用無菌棉拭子從皮膚表面取樣,可以防止雜菌污染,B正確;C、平板劃線法無法對獲得的菌株進(jìn)行計(jì)數(shù),應(yīng)該采用稀釋涂布法對獲得的菌株進(jìn)行計(jì)數(shù),C錯誤;D、菌落形態(tài)包括菌落的大小、形狀、邊緣、光澤、質(zhì)地、顏色和透明程度等,每一種細(xì)菌在一定條件下形成固定的菌落特征,故可通過觀察菌落的形態(tài)和顏色等進(jìn)行初步判斷,D正確。故選ABD。12.答案:ACD解析:A、該培養(yǎng)基含有瓊脂,從物理性質(zhì)看,該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,A錯誤;B、該培養(yǎng)基中提供碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖,提供氮源的物質(zhì)是牛肉膏,B正確;C、很多微生物都能利用葡萄糖,此培養(yǎng)基中能生長多種微生物,不是只有大腸桿菌,C錯誤;D、該培養(yǎng)基調(diào)節(jié)合適的pH后要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌操作,D錯誤。故選ACD。13.答案:104解析:略14.答案:(1)尿素作為唯一的氮源(2)54;105;1.31×108(3)將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得(不連續(xù))單個(gè)菌落;2.5×108解析:(1)要分離出分解尿素的細(xì)菌,應(yīng)該用以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基,屬于選擇培養(yǎng)基,細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨,會使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng),pH升高,培養(yǎng)基中加入的酚紅指示劑將變紅,可以鑒定該類微生物。(2)6g土樣配制成稀釋10倍土壤溶液,總體積應(yīng)為60mL,因此應(yīng)加入54mL的無菌水。稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進(jìn)行培養(yǎng)。一般選擇菌落數(shù)在30?300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。稀釋105倍的三個(gè)平板中平均菌落數(shù)為(277+261+254)+3=26
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