義翹講堂《非酒精性脂肪性肝病藥物研發(fā)進(jìn)展及靶點(diǎn)》

非酒精性脂肪性肝病藥物研發(fā)進(jìn)展及熱門靶點(diǎn)霍彤博士高級產(chǎn)品經(jīng)理北京義翹神州科技股份有限公司（美國子公司）DrugDevelopmentProgressandHotTargetsforNAFLD義翹神州主要內(nèi)容NAFLD全球藥物研發(fā)進(jìn)展1NAFLD主要病理機(jī)制及相關(guān)通路2重要在研靶點(diǎn)及其應(yīng)用案例3義翹神州NAFLD全球藥物研發(fā)進(jìn)展01義翹神州非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD）定義及背景NAFLD是指除酒精和其他明確損肝因素外，肝內(nèi)脂肪過渡沉積或代謝紊亂引起的慢性疾病。今年6月，美國肝病研究協(xié)會（AASLD）和歐洲肝臟研究協(xié)會（EASL）倡議將其更名為代謝功能障礙相關(guān)的脂肪性肝?。∕ASLD），以突出代謝對疾病的影響。NAFLD的疾病譜包括：單純性非酒精性脂肪肝（NAFL）、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）及其相關(guān)的肝硬化和肝細(xì)胞癌。/10.1016/j.cell.2021.04.01525%NAFLD人群20%發(fā)展為NASH20%發(fā)展為肝纖維化20%發(fā)展為肝硬化最終有轉(zhuǎn)為肝癌的可能義翹神州非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD）藥物治療F1–F4,fibrosisstages1–4緩解肝炎血糖控制緩解脂質(zhì)代謝紊亂針對心血管疾病減緩纖維化過程多個藥物治療階段和方向/10.1038/s41575-020-00408-y義翹神州非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD）藥物研發(fā)藥物獲批情況：尚未有任何針對NAFLD的有效藥物獲得FDA和NMPA批準(zhǔn)臨床2/3期的藥物靶點(diǎn)布局：PPAR、THRB、GLP1、ACC、SCD1、FXR、FGF、Galectin-3/10.1038/s41575-020-00408-y義翹神州臨床3期的重要藥物靶點(diǎn)及銷售預(yù)測：無任何藥物獲FDA批準(zhǔn)極大的患者人群及市場需求全球第一個NASH藥物競爭激烈全球第一支NAFLD/NASH新藥競爭激烈*GlobalData義翹神州NAFLD主要病理機(jī)制及相關(guān)通路02義翹神州NASH病理機(jī)制：從“Two-Hit”模型到復(fù)雜誘因脂肪的積累產(chǎn)生影響第一擊：脂肪積累，但不引發(fā)炎癥和纖維化第二擊：其它因素加劇損傷，如炎癥、氧化應(yīng)激、細(xì)胞死亡肥胖、胰島素抵抗、高脂血癥、心血管疾病、慢性腎臟疾病的協(xié)同誘因Doi:10.3389/fphar.2020.603926“Two-Hit”二次打擊理論復(fù)雜誘因義翹神州從“多誘因”到“多靶點(diǎn)”代謝脂代謝：PPAR、THRB、ACC、FGF21膽酸代謝：FXR、FGF-19糖代謝：GLP-1R、SGLT、mTOR炎癥抑制炎性細(xì)胞招募，阻斷炎性信號纖維化靶向肝臟星形細(xì)胞，增強(qiáng)纖維分解Doi:10.1136/gutjnl-2021-326874NASH的三大藥物研發(fā)方向：義翹神州甲狀腺激素T3提高線粒體和過氧化酶對脂肪酸的β氧化，降低肝型脂肪酸結(jié)合蛋白表達(dá)（l-FABP），阻止肝臟脂肪變性。抑制基因表達(dá)：TR、RXR與TRE結(jié)合，招募輔助抑制因子和組蛋白去乙?；福℉DAC）激活基因表達(dá)：T3的結(jié)合引起TR構(gòu)象變化，釋放輔助抑制因子，招募輔助激活因子和組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶（HAT）Doi:10.3389/fmed.2020.00331代表靶點(diǎn)：TH-THR脂代謝代表靶點(diǎn)：TH-TR義翹神州T3、rT3、T4：甲狀腺激素的3種形式TR：甲狀腺激素受體TRE：甲狀腺激素反應(yīng)元件與脂肪酸氧化相關(guān)的PPARα靶基因主要通過PPRE結(jié)合的依賴方式進(jìn)行調(diào)控。激活的PPARα：促進(jìn)脂肪酸氧化阻礙炎癥反應(yīng)誘導(dǎo)過氧化氫酶（CAT）的表達(dá)，降低肝臟中的過氧化氫水平降低環(huán)氧合酶-1（COX-1）的表達(dá)，改善和減輕肝臟血管阻力https://www.journal-of-hepatology.eu/article/S0168-8278(14)00806-X/fulltext脂代謝代表靶點(diǎn)：PPARα-PPRE義翹神州/1422-0067/24/5/4583FGF19抑制膽固醇7α羥化酶（CYP7A1），抑制膽酸合成FGF19抑制CREB/PGC1α信號級聯(lián)，抑制糖異生FGF19激活STAT-3通路，將正常肝細(xì)胞轉(zhuǎn)化為惡性細(xì)胞膽酸代謝代表靶點(diǎn)：FGF19-FGFR義翹神州膽汁酸激活核受體FXR，導(dǎo)致膽汁分泌增加，合成和攝取減少，維持膽汁酸穩(wěn)態(tài)上調(diào)脂肪酸（FA）氧化降低肪酸FA合成下調(diào)葡萄糖新生腸道FXR導(dǎo)致FGF19水平升高，介導(dǎo)脂肪酸氧化增加DOI:10.1055/s酸代謝代表靶點(diǎn)：FXR義翹神州GLP-1和GLP-1受體激動劑可直接改善肝臟胰島素抵抗GLP-1受體激動劑可以提高脂聯(lián)素水平，間接改善胰島素抵抗程度胰島素信號通路的調(diào)節(jié)將減少肝細(xì)胞三酰甘油的儲存Doi:10.3390/ijms24021703糖代謝代表靶點(diǎn)：GLP1R-GLP1義翹神州重要在研靶點(diǎn)及其應(yīng)用案例03義翹神州文章：Discoveryofecnoglutide-Anovel,long-acting,cAMP-biasedglucagon-likepeptide-1(GLP-1)analog發(fā)表時間：2023年6月22日靶點(diǎn)：GLP-1R義翹產(chǎn)品：重組人GLP-1R蛋白（Cat:13944-H02H）合成一系列GLP-1類似物通過評估cAMP水平，beta-arrestin募集和受體內(nèi)化水平，篩選化合物(M2,M4)案例展示義翹神州通過評估與GLP-1受體的結(jié)合，篩選出最優(yōu)化合物（M4）小鼠模型中顯示，M4化合物有效降低體重實(shí)驗(yàn)步驟：重組人GLP-1R蛋白（義翹神州，13944-H02H）通過氨基偶聯(lián)固定于Biacore，進(jìn)行親和力檢測。加入梯度濃度的GLP-1類似物進(jìn)行篩選

案例展示義翹神州文章：FOXO1inhibitionsynergizeswithFGF21tonormalizeglucosecontrolindiabeticmice發(fā)表時間：2021年2月10日靶點(diǎn)：FGF21義翹產(chǎn)品：重組人FGF21蛋白

（10911-H07E/10911-HNAE）細(xì)胞實(shí)驗(yàn)評估抑制劑活性抑制劑降低小鼠體重，對FOXO1敲除小鼠無明顯效果案例展示義翹神州抑制劑和FGF21具有協(xié)同作用實(shí)驗(yàn)步驟：將重組人FGF21蛋白（義翹神州）配制在生理鹽水中，每日以0.45mg/kg劑量注射小鼠。對于同時注射的小鼠，在第一天開始注射FGF21，第四天開始注射抑制劑。義翹神州文章：Regulationofgenetranscriptionbythyroidhormonereceptorβagonistsinclinicaldevelopmentforthetreatmentofnon-alcoholicsteatohepatitis(NASH)發(fā)表時間：2020年12月11日靶點(diǎn)：

THR-beta（LBD)選擇對照化合物，合成新化合物基于FRET的THR-betaLBD結(jié)合實(shí)驗(yàn)案例展示/10.1371/journal.pone.0240338義翹神州選用Huh-7和PHH細(xì)胞，檢測THRB下游基因表達(dá)水平義翹神州“Primary

invitro

screenssuchastheTR-FRETandluciferasereporterassaysprovidegeneraltrendsastohowtestcompoundsmayinteractwithTHRs.

”作者提出：“FRET和熒光素酶報告基因檢測等原位體外篩選方法能夠提供有關(guān)測試化合物如何與甲狀腺激素受體相互作用的普遍趨勢”義翹神州助力NASH重要靶點(diǎn)的開發(fā)-THRB

≥95%asdeterminedbySDS;≥90%asdeterminedbySEC-HPLC.THRB:Cat:15737-H07ELBDdomain高純度人源蛋白His標(biāo)簽案例展示義翹神州HumanTHR-βProteinHisTagCat:15737-H07EHPLCVerifiedHumanNR1H4/FXRProteinHisTagCat:17624-H07EHPLCVerifiedHumanGLP1-RProteinHis&AVITag(Biotinylated)Cat:15737-H07EHPLCVerifiedPurity≥95%Purity≥95%Purity≥95%ProductCatalogNo.TagCitationsHumanFASN30113-H07EN-His

MouseFASN57840-M07EN-His

MouseNR1H4/FXR53744-M07EN-His

HumanGLP1-R13944-H02HhFc5CitationsHumanPPARA12080-H07EN-His

MousePPARA56956-M07EN-His

HumanACLY11769-H07BN-His7CitationsHumanFGF1912226-HNAENoTag2CitationsMouseFGF2150421-M08HHisTag5CitationsHumanFGF2110911-HNAENoTag

HamsterFGF215A7643-M08HHisTag

HumanFGF2110911-H07EHisTag3CitationsAnti-FASNAb,RabbitpAbCat:100685-T10

Applications:IHC-P,ICC/IFAnti-FGFR1Ab,RabbitpAbCat:109326-T08Applications:IHC-PAnti-JNK2Ab,Rabbit

mAbCat:10745-R011Applications:WB,ELISA,IHC-P,ICC/IF,IPImmunofluorescencestainingofFASNinA549cellsIHCstainingofmouseFGFR1inmousekidneywithrabbitpolyclonalantibodyJurkatwholecelllysateprobedwithanti-JNK2/MAPK9antibodyAntibodyCatalogNo.ApplicationFASN105090-T04IPFGF2150421-R005ELISAFGF2150421-RP02ELISAFGF2150421-RP01ELISAACLY11769-T52WB,ELISA,IPFGF1912226-T16ELISAFGF1912226-R032ELISAFGF1912226-RP01ELISA義翹神州助力NASH靶點(diǎn)開發(fā)NASH研究相關(guān)靶點(diǎn)蛋白NASH研究相關(guān)抗體義翹神州關(guān)于“北京義翹神州”堅(jiān)持自主研發(fā)生產(chǎn)