《月季的花藥培養(yǎng)》復習課件

課題2月季的花藥培養(yǎng)1．花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株有兩條途徑：一是

胚狀體途徑，二是愈傷組織途徑，這兩

種途徑主要取決于激素的種類及濃度配比。

2．影響花藥培養(yǎng)的主要因素是材料的選擇與培養(yǎng)基的組成。3．選擇單核靠邊期的花藥培養(yǎng)成功率最高。4．確定花粉發(fā)育時期的方法有醋酸洋紅法(最常用)和焙花青—鉻礬法(花粉細胞核不易著色時)?；ǚ郯l(fā)育與花藥離體培養(yǎng)1．被子植物的花粉發(fā)育(1)花粉：由

經(jīng)過

分裂形成的

的生殖細胞。

(2)花粉發(fā)育過程及特點：小孢子母細胞↓

：4個單倍體細胞連在一起花粉母細胞減數(shù)單倍體小孢子四分體時期單核靠邊期原生質雙核期：細胞中含有

和

，它們

分別形成一個

和一個

，其中

的生殖細胞形成

花粉管細胞核生殖細胞核營養(yǎng)細胞生殖細胞兩個精子↓(3)被子植物花粉的發(fā)育過程圖示：2．產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑(1)過程圖示：(2)形成原因：主要取決于培養(yǎng)基中

的種類及其

。激素濃度配比3．影響花藥培養(yǎng)的因素(1)主要因素：①材料的選擇：a．不同植物的誘導成功率

。

b．就同一種植物來說，花期早期時的花藥比

的更容易產(chǎn)生花粉植株。

c．一般來說，在單核期，細胞核

的時期，花藥培養(yǎng)成功率最高。很不相同后期由中央移向細胞一側②培養(yǎng)基的組成：培養(yǎng)基的

對花藥培養(yǎng)也有影響。生長條件低溫預處理成分及比例1．花粉發(fā)育時期的單核期細胞具有哪些特征？提示：細胞含有濃厚的原生質，核位于細胞的中央；隨著細胞不斷長大，細胞核由中央移向細胞一側并分裂成一個生殖細胞核和一個花粉管細胞核，進而形成兩個細胞——營養(yǎng)細胞和生殖細胞。2．選取材料時，為什么要選取處于適宜時期花藥？提示：因為：①花粉發(fā)育的過程中，只有某一時期對離體刺激敏感；②選擇單核期以前的花蕾接種，質地幼嫩，極易破損；選擇單核期以后的花藥接種，花瓣已有松動，又給材料的消毒帶來困難。1．花粉發(fā)育的“四分體”與動物細胞減數(shù)分裂過程中“四分體”的比較

(1)被子植物花粉發(fā)育過程中的“四分體”是指由1個花粉母細胞經(jīng)過減數(shù)分裂產(chǎn)生的連在一起的4個單倍體細胞，即“四分體”中的“四”指的是4個小孢子細胞。(2)減數(shù)分裂中的“四分體”是指在聯(lián)會狀態(tài)下的一對同源染色體，因為含有4條染色單體，所以叫做“四分體”，即“四分體”中的“四”指的是4條染色單體。2．菊花莖段組織培養(yǎng)與月季花藥培養(yǎng)比較項目內(nèi)容菊花組織培養(yǎng)月季的花藥培養(yǎng)理論依據(jù)細胞的全能性基本過程脫分化→再分化外植體細胞類型體細胞生殖細胞項目內(nèi)容菊花組織培養(yǎng)月季的花藥培養(yǎng)操作流程制備培養(yǎng)基→外植體消毒→接種→培養(yǎng)→移栽→栽培選材→消毒→接種→培養(yǎng)→篩選和誘導→移栽→栽培選育影響因素選材、營養(yǎng)、激素、pH、溫度、陽光等培養(yǎng)結果正常植株單倍體植株生殖方式無性生殖有性生殖可育性可育高度不育，秋水仙素處理，使染色體加倍后可育花藥培養(yǎng)的操作過程鏡檢醋酸洋紅焙花青-鉻礬花絲酒精25℃左右分化培養(yǎng)基倍性變化1．在剝離花藥時，為什么要盡量不損傷花藥，還要徹底去除花絲？提示：損傷花藥接種后容易從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織；與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成。2．培養(yǎng)形成的植株還需要怎樣處理才能發(fā)育成正常植株？為什么要作進一步的鑒定和篩選？提示：(1)用秋水仙素處理幼苗。(2)因為花藥培養(yǎng)中，特別是通過愈傷組織形成的花粉植株，常常會出現(xiàn)染色體倍性的變化。1．鏡檢花粉發(fā)育時期的方法比較醋酸洋紅法焙花青-鉻礬法不同點方法的使用常用的方法花粉細胞核不易著色時，使用該方法步驟將花藥放在載玻片上→滴1滴1%醋酸洋紅→用鑷柄搗碎花藥→蓋上蓋玻片→鏡檢花藥在卡諾氏固定液中固定20min→取出，放在載玻片上→焙花青-鉻礬溶液染色→蓋上蓋玻片→鏡檢現(xiàn)象花粉細胞核染成深紅色花粉細胞核染成藍黑色相同點都可通過鏡檢來確定花粉是否處于適宜的發(fā)育期2．花粉植株出現(xiàn)染色體組數(shù)目變化的原因分析在花藥培養(yǎng)過程中，尤其是通過愈傷組織形成的花粉植株，常常會出現(xiàn)染色體組數(shù)目的變化，其原因有以下幾個方面：(1)花粉細胞的融合。(2)接種花粉過程中混有小孢子母細胞。(3)在材料的低溫預處理時低溫抑制了紡錘體的形成。(4)在雙核期時，生殖細胞核和花粉管細胞核并沒有形成兩個細胞，而是兩個核發(fā)生了融合。例一：關于被子植物花粉的形成，說法正確的是(

)A．花粉的發(fā)育要經(jīng)歷四分體期、單核期和雙核期B．花粉是花粉母細胞經(jīng)有絲分裂形成的C．花粉發(fā)育經(jīng)歷的四分體期和減數(shù)第一次分裂的四分體時期的含義相同D．花粉母細胞形成花粉粒中精子的過程是一系列減數(shù)分裂的過程[解析]

花粉是花粉母細胞經(jīng)減數(shù)分裂及有絲分裂形成的，經(jīng)歷四分體期、單核期和雙核期等階段。花粉粒中的生殖細胞經(jīng)有絲分裂產(chǎn)生2個精子。四分體期指4個小孢子連在一起，而減數(shù)分裂的四分體時期是指同源染色體配對后，1個四分體含4條染色單體的階段。[答案]

A例二：下列有關花藥離體培養(yǎng)的幾種說法，錯誤的是(

)A．材料的選擇最常用的方法是焙花青-鉻礬法，這種方法能將花粉細胞核染成藍黑色B．材料消毒時需先用酒精浸泡，然后用氯化汞或次氯酸鈣溶液浸泡，最后用無菌水沖洗C．接種花藥后一段時間內(nèi)不需要光照，但幼小植株形成后需要光照D．若接種的花藥長出愈傷組織或形成胚狀體后，要適時轉換培養(yǎng)基，以便進一步分化成再生植株[解析