如何有效解決HPLC漏氣液問題

2/2如何有效解決HPLC漏氣/液問題？

2023-07-0419:27對于操作人員來說，漏液是一件讓人苦惱的事情，因為有些漏液問題比較直觀，容易解決，但有些漏液問題比較復雜，需要深入排查。今天小析姐就和大家聊一聊液相色譜漏液如何解決。

漏氣，漏液是從內(nèi)部向外漏，而漏氣則是外部了的氣體進入液相色譜儀的流路內(nèi)部形成氣泡。下面按流路的方向逐個部件分析產(chǎn)生氣泡的原因和相應解決方法。

1、過濾頭

做油液時，在流路管中有不規(guī)則但持續(xù)的小氣泡產(chǎn)生，這時考慮的是流動相有沒有脫氣（需要特別提醒即使是有了真空脫氣機也是要先超聲脫氣的，起碼可以減少脫氣機的工作壓力并提高工作效率），如果已脫氣，則要注意過濾頭的污染也會造成這種現(xiàn)象。處理方法比較簡單，擰下過濾頭在稀硝酸中浸泡，超聲半小時，洗凈后裝回去即可。

2、透明流路管

指的是在過濾頭和輸送泵之間的那一段管路。這一個部分往往不是有點氣泡，而經(jīng)常是整個管中全是空氣而操作人員卻渾然不知，以致輸送泵工作了半天才發(fā)現(xiàn)流動相瓶里的液體一點也沒少。這也是我們常說的液相色譜儀至少一周要開機一次的原因（我們做液相一定要有“微滲”的概論）。如果長時間不用，這一段管路的液體會徹底干掉，而充滿空氣的管路和充滿液體的管路不仔細看是分辨不出來的。這種情況對于輸送泵很危險，因為泵從設計來說是輸送液體而不是輸送氣體，內(nèi)部的液體對于活塞來說起到了機油的作用，如果活塞桿還殘存了一些緩沖鹽，則極易拉傷，造成不可逆轉(zhuǎn)的影響。

對于這種情況，要突出“預防為主”如：液相色譜使用人員要相對固定和穩(wěn)定，工作中合理搭配資源，每臺機一周至少一次實驗，如長期不用起碼每周要沖流動相2小時。養(yǎng)成良好的工作習慣很重要。

如果流路管中真漏氣了怎么辦？

我的建議是用外力使管路中充滿液體。具體如下：

1、找到流路管進入輸送泵的接頭。2、擰下來。3、用一干凈洗耳球的尖端對準管路的平整切口。4、吸液體，看液面從流動相瓶里上升，至離洗耳球5cm左右時停止該動作。5、快速把接頭擰回輸送泵上（這個過程可能會有少許流動相外泄，這是正常現(xiàn)象）。6、開機，打開排液閥門，啟動輸送泵。7、等排液管中流出的溶液沒有氣泡時，再關(guān)閉排液閥，儀器正常工作。

3、輸送泵和柱子

入口/出口單向閥出現(xiàn)問題入口/出口單向閥出現(xiàn)問題可更換新的閥芯，查看是否繼續(xù)漏液，更換時注意閥芯的方向是流動相流動的方向（切記方向不要放反）。入口/出口單向閥未擰緊用扳手適當擰緊入口/出口單向閥，直到液體不再往外流出。連接主泵頭與平衡泵頭的U型連接管處出現(xiàn)泄漏U型管出現(xiàn)泄漏，可嘗試用扳手適當擰緊U型管的固定螺絲。

4、柱塞密封圈

柱塞密封圈泄漏主要是由于流動相中鹽項析出磨損柱塞密封圈導致，為防止此現(xiàn)象發(fā)生，一定不要讓后密封清洗溶液走空，否則等待你的就是使用牛角注射器吸取后密封清洗管路溶液了。

5、自動進樣器

再次就是我們的先進工作者自動進樣器。針座密封泄漏成千上萬次的進樣后，針座密封磨損嚴重，導致密封不緊，需更換進樣針座密封墊。進樣針彎曲當進樣針觸碰障礙物后，會導致進樣針彎曲，當進樣針扎入進樣針座，也會導致密封不緊，從而產(chǎn)生漏液，此時需將進樣針拆下進行維護或者更換。進樣針與樣品環(huán)（sampleloop）連接松動當六通閥切換到進樣狀態(tài)時，有溶液從進樣針流下，就是進樣針與sampleloop連接松動導致，此時需將進樣針拆下，重新緊固連接處即可。

6、檢測器

應該說，整個流路中只要有一個氣泡都會在檢測器上得到強烈的信號反映，檢測器內(nèi)部的氣泡一般都能被沖走，但也有很難沖掉的殘留氣泡的情況。如果檢測器內(nèi)有殘留氣泡，會有特別明顯的表現(xiàn)形式，就是在走基線時會時不時間隔出現(xiàn)直上直下信號很大的信號峰。這時先看普通流量能否沖走，如果沖不走，那唯一的辦法就是拆柱，把檢測器直接連接到輸送泵的出口，加大幾部流量沖洗，則肯定能沖走氣泡。

一般我們所說的液相色譜漏液主要是以下幾個部分的漏液：接頭處漏