2023-2024學(xué)年山東省煙臺(tái)市高二下學(xué)期4月期中生物試題（解析版）

高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE2山東省煙臺(tái)市2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期4月期中試題注意事項(xiàng)；1．答題前，考生務(wù)必將自己的姓名、考生號(hào)等填寫在答題卡和試卷指定位置。2．回答選擇題時(shí)，選出每小題〖答案〗后，用鉛筆把答題卡上對(duì)應(yīng)題目的〖答案〗標(biāo)號(hào)涂黑。如需改動(dòng)，用橡皮擦干凈后，再選涂其他〖答案〗標(biāo)號(hào)?；卮鸱沁x擇題時(shí)，將〖答案〗寫在答題卡上。寫在本試卷上無(wú)效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求。1.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)大大豐富了食物的品種。酵母菌、毛霉菌、醋酸菌等都是傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中的重要菌種。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是純種發(fā)酵B.果酒發(fā)酵瓶?jī)?nèi)留有一定空間有利于酵母菌的繁殖C.毛霉能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解為小分子肽和氨基酸D.果醋制作過(guò)程中出現(xiàn)CO2，說(shuō)明發(fā)酵底物缺少糖源〖答案〗D〖祥解〗1、果酒制作菌種是酵母菌，代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型真菌，屬于真核細(xì)胞，條件是18～30℃、前期需氧，后期不需氧；2、果醋制作菌種是醋酸菌，屬于原核細(xì)胞，適宜溫度為30～35℃，需要持續(xù)通入氧氣。【詳析】A、家庭制作果酒、果醋與腐乳過(guò)程中所用的菌種均來(lái)源于自然環(huán)境，有多種微生物參與發(fā)酵過(guò)程，因此均不是純種發(fā)酵，A正確；B、果酒發(fā)酵的菌種是酵母菌，代謝類型為兼性厭氧型，所以瓶?jī)?nèi)留有一定空間，增加氧氣含量，有利于酵母菌的繁殖，增加酵母菌的數(shù)量，B正確；C、毛霉可以分泌蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，C正確；D、若缺少糖源、氧氣充足，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，乙醛變?yōu)榇姿?，不?huì)產(chǎn)生CO2，D錯(cuò)誤。故選D。2.泡菜制作通常是把洗凈晾干的蔬菜放入經(jīng)開水消毒過(guò)的泡菜壇中，乳酸菌與酵母菌等多種微生物進(jìn)行代謝產(chǎn)生乳酸、酒精等物質(zhì)，賦予了泡菜特殊的風(fēng)味。泡菜腌制的早期酵母菌代謝活躍，中晚期乳酸菌代謝活躍乳酸積累，其他菌種的代謝被抑制。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.泡菜腌制全過(guò)程需保持密封，以利于菌種的厭氧呼吸B.酵母菌在中晚期的代謝被抑制的原因是泡菜壇中缺氧C.泡菜制作過(guò)程中冒出氣泡是酵母菌等呼吸作用產(chǎn)生的CO2D.在泡菜壇中加入發(fā)酵產(chǎn)生的泡菜汁可以加快發(fā)酵進(jìn)程〖答案〗B〖祥解〗在泡菜發(fā)酵過(guò)程初期，由于發(fā)酵壇內(nèi)有少量氧氣，所以酵母菌會(huì)進(jìn)行有氧呼吸，并產(chǎn)生CO2氣體；當(dāng)氧氣耗盡時(shí)，開始進(jìn)行無(wú)氧呼吸，該過(guò)程也會(huì)產(chǎn)生CO2氣體，且此時(shí)產(chǎn)生的氣體會(huì)增大壇內(nèi)氣壓，使產(chǎn)生的氣體和剩余空氣從壇沿水槽內(nèi)溢出。隨著發(fā)酵過(guò)程的進(jìn)行，乳酸不斷積累，當(dāng)積累到一定程度時(shí)，會(huì)抑制其他微生物的生長(zhǎng)，甚至殺死微生物。到發(fā)酵后期，乳酸含量過(guò)高，pH過(guò)低會(huì)抑制乳酸菌的生長(zhǎng)。在整個(gè)過(guò)程中，亞硝酸鹽含量的變化是先升高后降低?！驹斘觥緼、泡菜腌制的全過(guò)程需保持密封，以利于乳酸菌菌種的厭氧呼吸，A正確；B、酵母菌在中晚期的代謝被抑制的原因是泡菜壇中乳酸含量過(guò)高，pH過(guò)低會(huì)抑制酵母菌代謝，B錯(cuò)誤；C、泡菜制作過(guò)程中冒出氣泡是酵母菌等呼吸作用產(chǎn)生的CO2，C正確；D、在泡菜壇中加入發(fā)酵產(chǎn)生的泡菜汁，其中含有乳酸菌，可以加快乳酸菌的發(fā)酵進(jìn)程，D正確。故選B。3.某種個(gè)體較大的細(xì)菌不能在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，需用液體培養(yǎng)基來(lái)獲得純培養(yǎng)物。在含該菌種的錐形瓶中各取1mL培養(yǎng)液分別加入若干支盛有9mL培養(yǎng)液的a組平行試管（記作a1、a2、a3……an。）中，在平行試管中各取1mL依次加人若干支盛有9mL培養(yǎng)液的b組平行試管中（a1→b1、a2→b2、a3→b3、……an→bn），重復(fù)上述操作（b→c→d→e），培養(yǎng)一段時(shí)間后檢測(cè)各組試管中細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.若e組平行試管中只有e3，出現(xiàn)了細(xì)菌生長(zhǎng)，則該試管中可能獲得了純培養(yǎng)物B.某稀釋倍數(shù)下有細(xì)菌生長(zhǎng)的試管所占比例越高，獲得純培養(yǎng)物的概率就越大C.若d組各平行試管都有細(xì)菌生長(zhǎng)而e組都沒(méi)有，則應(yīng)取d組～e組之間的稀釋倍數(shù)繼續(xù)培養(yǎng)D.不可用顯微鏡計(jì)數(shù)某稀釋倍數(shù)下各試管中生長(zhǎng)的細(xì)菌來(lái)計(jì)算錐形瓶中的細(xì)菌數(shù)量〖答案〗B〖祥解〗根據(jù)題意可知，某稀釋倍數(shù)下有細(xì)菌生長(zhǎng)的試管所占比例越低，說(shuō)明該稀釋度下稀釋得到了單個(gè)細(xì)菌，則獲得純培養(yǎng)物的概率就越大。【詳析】A、若e組平行試管中只有e3出現(xiàn)了細(xì)菌生長(zhǎng)，說(shuō)明該稀釋液中稀釋得到了單個(gè)細(xì)菌，則該試管中可能獲得了純培養(yǎng)物，A正確；B、某稀釋倍數(shù)下有細(xì)菌生長(zhǎng)的試管所占比例越低，獲得純培養(yǎng)物的概率就越大，B錯(cuò)誤；C、若d組各平行試管都有細(xì)菌生長(zhǎng)（說(shuō)明稀釋倍數(shù)較低，獲得純培養(yǎng)物的概率低），而e組都沒(méi)有細(xì)菌生長(zhǎng)（說(shuō)明稀釋倍數(shù)過(guò)高，各個(gè)試管中沒(méi)有得到細(xì)菌），則應(yīng)取d~e之間的稀釋倍數(shù)繼續(xù)培養(yǎng)，C正確；D、根據(jù)題意可知，經(jīng)過(guò)稀釋操作后，需培養(yǎng)一段時(shí)間后再檢測(cè)各組試管中細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。若試管中存在細(xì)菌，在培養(yǎng)期間細(xì)菌會(huì)增殖，故不能用顯微鏡計(jì)數(shù)某稀釋倍數(shù)下各試管中生長(zhǎng)的細(xì)菌來(lái)計(jì)算錐形瓶中的細(xì)菌數(shù)量，D正確。故選B。4.驅(qū)蚊草含有香茅醛，能散發(fā)出一種特殊的檸檬型香氣，從而達(dá)到驅(qū)蚊且對(duì)人體無(wú)害的效果。驅(qū)蚊草是把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合形成雜種細(xì)胞，進(jìn)而培育而成的雜種植株。下列關(guān)于驅(qū)蚊草培育的說(shuō)法，正確的是（）A.原生質(zhì)體由細(xì)胞膜、液泡膜及兩者之間的細(xì)胞質(zhì)組成B.融合原生質(zhì)體需放在無(wú)菌水中培養(yǎng)，以防雜菌污染C.驅(qū)蚊草將選擇性表達(dá)天竺葵細(xì)胞和香茅草細(xì)胞的基因D.雜種細(xì)胞培養(yǎng)成驅(qū)蚊草植株的過(guò)程利用了染色體數(shù)目變異原理〖答案〗C〖祥解〗1、根據(jù)題意可知驅(qū)蚊草的培育屬于細(xì)胞工程育種中的植物體細(xì)胞雜交，其優(yōu)點(diǎn)是打破生殖隔離的限制，克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙；2、在植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程中需要用纖維素酶和果膠酶去除植物細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，在應(yīng)用一定的誘導(dǎo)方法如：化學(xué)法（聚乙二醇）、物理法（振動(dòng)、離心、電刺激）等方法誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合；3、形成雜種細(xì)胞后利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將細(xì)胞培育成植株，需經(jīng)歷脫分化和再分化，即包含細(xì)胞的有絲分裂和細(xì)胞分化?！驹斘觥緼、原生質(zhì)體是去除細(xì)胞壁以后的植物細(xì)胞，由細(xì)胞膜、液泡膜及兩者之間的細(xì)胞質(zhì)組成的結(jié)構(gòu)稱為原生質(zhì)層，A錯(cuò)誤；B、融合原生質(zhì)體需放在等滲或略高滲溶液中培養(yǎng)，如果放在無(wú)菌水中培養(yǎng)會(huì)導(dǎo)致原生質(zhì)體吸水膨脹甚至漲破，B錯(cuò)誤；C、由雜種細(xì)胞→雜種植株過(guò)程為植物組織培養(yǎng)，要通過(guò)有絲分裂和細(xì)胞的分化，細(xì)胞分裂增加細(xì)胞的數(shù)量，細(xì)胞分化增加細(xì)胞的類型，即驅(qū)蚊草將選擇性表達(dá)天竺葵細(xì)胞和香茅草細(xì)胞的基因，C正確；D、雜種細(xì)胞培養(yǎng)成驅(qū)蚊草植株的過(guò)程為植物組織培養(yǎng)，利用了植物細(xì)胞的全能性原理，D錯(cuò)誤。故選C。5.紫草寧具有抗菌、消炎、抗腫瘤等活性。圖1是懸浮培養(yǎng)紫草細(xì)胞制備紫草寧的流程，圖2記錄了過(guò)程②中的一些數(shù)據(jù)。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.雖然紫草寧具有抗菌作用，但生產(chǎn)時(shí)仍需要進(jìn)行無(wú)菌操作B.可用射線誘變紫草愈傷組織后從突變體中篩選高產(chǎn)細(xì)胞株C.圖1中②過(guò)程表示懸浮培養(yǎng)，可提高單個(gè)細(xì)胞中紫草寧的含量D.由圖2可知，紫草細(xì)胞的數(shù)量和培養(yǎng)時(shí)間限制了紫草寧的產(chǎn)量〖答案〗C〖祥解〗在一定的激素和營(yíng)養(yǎng)等條件的誘導(dǎo)下，外植體可脫分化形成愈傷組織。愈傷組織能重新分化成芽、根等器官，該過(guò)程稱為再分化。滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。外植體用酒精消毒30s，然后立即用無(wú)菌水清洗2~3次；再用次氯酸鈉溶液處理30min后，立即用無(wú)菌水清洗2~3次?！驹斘觥緼、紫草素雖具有抗菌作用，但其產(chǎn)生的過(guò)程涉及植物組織培養(yǎng)技術(shù)，植物組織培養(yǎng)的過(guò)程中仍需進(jìn)行無(wú)菌操作，A正確；B、愈傷組織分裂旺盛，易產(chǎn)生突變，因而可用射線誘變紫草愈傷組織后從突變體中篩選高產(chǎn)細(xì)胞株，B正確；C、圖1中②過(guò)程表示懸浮培養(yǎng)，可以增加高產(chǎn)細(xì)胞的數(shù)量，不能提高單個(gè)細(xì)胞合成分泌紫草寧的量，C錯(cuò)誤；D、據(jù)圖2分析可知，隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加，紫草細(xì)胞的數(shù)量在增加，從而合成分泌的紫草寧葉在增加，但在培養(yǎng)到19天后紫草細(xì)胞數(shù)量和紫草寧的產(chǎn)量都已經(jīng)達(dá)到最大值，所以紫草細(xì)胞的數(shù)量和培養(yǎng)時(shí)間限制了紫草寧的產(chǎn)量，D正確。故選C。6.向鼠成纖維細(xì)胞中導(dǎo)入Oct3/4、Sox2、Kf4和c-Myc4四種基因，用多能性標(biāo)志物Fbx15篩選轉(zhuǎn)化后的細(xì)胞，可獲得誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞），該種細(xì)胞具有與胚胎干細(xì)胞（ES）相似的特性。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，除0ct3/4基因外，其余三種基因均可由其他基因代替。下列說(shuō)法正確的是（）A.iPS細(xì)胞具有組織特異性，只能分化為特定細(xì)胞B.可用顯微注射法直接將四種基因注入成纖維細(xì)胞C.iPS細(xì)胞和ES細(xì)胞具有不同的基因組成，但都能體現(xiàn)出細(xì)胞的全能性D.Oct3/4、Sox2、Klf4和c-Myc4四種基因是成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為iPS細(xì)胞的必需基因〖答案〗C〖祥解〗胚胎干細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞?！驹斘觥緼、iPS細(xì)胞具有與胚胎干細(xì)胞（ES）相似的特性，可以分化為多種細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、向鼠成纖維細(xì)胞中導(dǎo)入Oct3/4、Sox2、Kf4和c-Myc4四種基因，需要利用基因工程技術(shù)構(gòu)建基因表達(dá)載體后，才能導(dǎo)入受體細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、成纖維細(xì)胞被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞后，可重新分化為其他各種細(xì)胞，體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性，且全能性升高，C正確；D、據(jù)題干信息“除0ct3/4基因外，其余三種基因均可由其他基因代替”可知，Sox2、Klf4和c-Myc4三種基因不是成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為iPS細(xì)胞的必需基因，D錯(cuò)誤。故選C。7.下圖為豬輸卵管上皮細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程示意圖。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.甲→乙和丙→丁過(guò)程都會(huì)發(fā)生細(xì)胞分裂和分化B.丙、丁過(guò)程均會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制現(xiàn)象C.丙、丁過(guò)程中應(yīng)用松蓋培養(yǎng)瓶以保證培養(yǎng)氣體需要D.通過(guò)定期更換培養(yǎng)液防止培養(yǎng)過(guò)程中有毒物質(zhì)積累〖答案〗A〖祥解〗1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)2、圖示為豬輸卵管上皮細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程示意圖，圖中甲表示剪碎豬輸卵管，乙表示制成細(xì)胞懸液，丙表示原代培養(yǎng)，丁表示傳代培養(yǎng)?！驹斘觥緼、甲表示剪碎豬輸卵管，乙表示制成細(xì)胞懸液，丙表示原代培養(yǎng)，丁表示傳代培養(yǎng)，甲→乙和丙→丁過(guò)程都有細(xì)胞的分裂，不存在細(xì)胞分化，A錯(cuò)誤；B、丙原代培養(yǎng)過(guò)程和丁傳代培養(yǎng)過(guò)程均會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制現(xiàn)象，B正確；C、丙原代培養(yǎng)過(guò)程和丁傳代培養(yǎng)過(guò)程中，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，以保證細(xì)胞對(duì)氣體的需求，C正確；D、定期更換培養(yǎng)液可防止培養(yǎng)過(guò)程中有毒物質(zhì)的積累，對(duì)細(xì)胞造成危害，D正確。故選A。8.RNAm6A修飾（即RNA某位點(diǎn)的甲基化）可通過(guò)提高mRNA結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性來(lái)影響豬核移植早期胚胎的發(fā)育。在核移植中，核供體細(xì)胞的分化程度越高，細(xì)胞內(nèi)甲基轉(zhuǎn)移酶M的表達(dá)水平、RNA修飾水平和核移植重構(gòu)胚的發(fā)育效率越低。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.核移植過(guò)程通常采用顯微操作法去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核B.豬胎兒成纖維細(xì)胞比胚胎干細(xì)胞的RNA修飾水平要低C.RNAm6A修飾和DNA的甲基化都能影響基因的表達(dá)D.向重組細(xì)胞中導(dǎo)人M基因即可提高核移植胚胎的發(fā)育能力〖答案〗D〖祥解〗動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物。【詳析】A、核移植過(guò)程通常采用顯微操作法去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核，A正確；B、由題意“核供體細(xì)胞的分化程度越高，細(xì)胞內(nèi)甲基轉(zhuǎn)移酶M的表達(dá)水平、RNA修飾水平和核移植重構(gòu)胚的發(fā)育效率越低”可知，豬胎兒成纖維細(xì)胞比胚胎干細(xì)胞的分化程度高，RNA修飾水平越低，B正確；C、由題意可知，RNAm6A修飾是RNA某位點(diǎn)的甲基化，即RNAm6A修飾和DNA的甲基化都能影響基因的表達(dá)，C正確；D、向重組細(xì)胞中導(dǎo)入M基因，并且M基因能表達(dá)時(shí)，才能提高核移植胚胎的發(fā)育能力，D錯(cuò)誤。故選D。9.同尾酶是指一組識(shí)別序列不同，但切出的黏性末端相同的限制酶。下圖為EcoRI、Bam-HI、BglI和MboI四種限制酶的識(shí)別序列及酶切位點(diǎn)。下列說(shuō)法正確的是（）A.BamHI、BgⅡ、MboI屬于同尾酶，他們的識(shí)別序列相同B.使用同尾酶構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，切割位點(diǎn)的選擇范圍擴(kuò)大C.選用兩種不同的限制酶切割目的基因，都可以防止目的基因自身環(huán)化D.用DNA連接酶將BamHI和MboI形成的黏性末端連接后，可被二者重新切開〖答案〗B〖祥解〗由于同種限制酶切割得到的目的基因或質(zhì)粒的兩端黏性末端相同，會(huì)出現(xiàn)自體相連的現(xiàn)象，所以為了保證目的基因與載體的正確連接，通常用兩種識(shí)別序列和切割位點(diǎn)不同的限制酶同時(shí)處理含目的基因的DNA片段與載體?！驹斘觥緼、BamHI、BgⅡ、MboI識(shí)別序列不同，但切出的黏性末端相同，屬于同尾酶，A錯(cuò)誤；B、同尾酶是指一組識(shí)別序列不同，但切出的黏性末端相同的限制酶，使用同尾酶構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，切割位點(diǎn)的選擇范圍擴(kuò)大，不同的酶也能切割出相同的黏性末端，B正確；C、圖中BamHI、BgⅡ、MboI識(shí)別序列不同，但切出的黏性末端相同，故選用兩種不同的限制酶切割目的基因，不一定都可以防止目的基因自身環(huán)化，C錯(cuò)誤；D、用DNA連接酶將BamHI和MboI形成的黏性末端連接后，堿基序列與BamHI和MboI識(shí)別的序列均不同，由于限制酶具有專一性，故不可被二者重新切開，D錯(cuò)誤。故選B。10.在基因工程中可利用PCR進(jìn)行體外DNA片段的擴(kuò)增，PCR產(chǎn)物一般通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.PCR利用DNA熱變性原理，通過(guò)調(diào)節(jié)溫度來(lái)控制DNA雙鏈的解聚及與引物的結(jié)合B.耐高溫的DNA聚合酶需要激活，PCR反應(yīng)緩沖液中需要添加Mg2+C.電泳時(shí)DNA分子會(huì)向它所帶電荷相反的電極移動(dòng)，遷移速率與凝膠濃度、DNA分子大小和構(gòu)象有關(guān)D.瓊脂糖凝膠中的DNA擴(kuò)增引物分子被核酸染料染色后可在紫外燈下被檢測(cè)出來(lái)〖答案〗D〖祥解〗PCR原理：在高溫作用下，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過(guò)程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。【詳析】A、在PCR技術(shù)的過(guò)程中包括：高溫變性（解鏈）→低溫復(fù)性→中溫延伸三個(gè)步驟，因此DNA兩條鏈的解旋過(guò)程不需要解旋酶的催化，而是利用了DNA在高溫下變性的原理，通過(guò)控制溫度來(lái)控制雙鏈的解聚與引物的結(jié)合，A正確；B、PCR反應(yīng)的緩沖液中需添加Mg2+，用于激活耐高溫的DNA聚合酶，B正確；C、DNA分子在凝膠中的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象有關(guān)，一般DNA分子越大，遷移速度越慢，大分子物質(zhì)在通過(guò)瓊脂糖時(shí)受到較大阻力，因此雙鏈DNA分子片段長(zhǎng)度越大，在瓊脂糖中的移動(dòng)速率越小，C正確；D、凝膠中的DNA分子通過(guò)染色，可在波長(zhǎng)為300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來(lái)，所以瓊脂糖凝膠中的DNA分子和擴(kuò)增的產(chǎn)物（DNA）被核酸染料染色后，可在紫外燈下檢測(cè)出來(lái)，引物分子較小，不能被檢測(cè)，D錯(cuò)誤。故選D。11.巢式PCR是一種使用兩對(duì)引物擴(kuò)增完整的片段的PCR。第一對(duì)PCR引物擴(kuò)增片段和普通PCR相似。第二對(duì)為內(nèi)部引物結(jié)合在第一次PCR產(chǎn)物內(nèi)部，使得第二次PCR擴(kuò)增片段短于第一次擴(kuò)增，其過(guò)程如下圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.兩輪擴(kuò)增所需引物不同，原料和酶相同B.DNA的合成總是從子鏈的5＇端向3＇延伸與TaqDNA聚合酶的作用有關(guān)C.用內(nèi)引物進(jìn)行PCR時(shí)，擴(kuò)增n次后理論上需要2n個(gè)引物D.巢式PCR可增強(qiáng)擴(kuò)增的特異性〖答案〗C〖祥解〗PCR是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)。原理：DNA復(fù)制。前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶。過(guò)程：（1）高溫變性：DNA解旋過(guò)程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開）；（2）低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；（3）中溫延伸：合成子鏈。【詳析】A、第一輪所用引物為外引物，第二輪所用引物為內(nèi)引物，兩次所用原料均為dNTP（四種游離的脫氧核苷酸），酶均為TaqDNA聚合酶，A正確；B、TaqDNA聚合酶只能識(shí)別模板鏈的3，端，因此DNA的合成總是從子鏈的5＇端向3＇延伸，B正確；C、PCR為體外DNA復(fù)制，每合成一條子鏈即需要一個(gè)引物，擴(kuò)增n次后一共有2n個(gè)DNA，新合成了（2n-1）個(gè)DNA，合成了（2n-1）×2=2n+1-2條新鏈，需要2n+1-2個(gè)引物，C錯(cuò)誤；D、巢式PCR可增強(qiáng)擴(kuò)增的特異性，因?yàn)槿绻猛庖飻U(kuò)增產(chǎn)生了錯(cuò)誤片段，則巢式（內(nèi)）引物能在錯(cuò)誤片段上進(jìn)行配對(duì)的概率低，D正確。故選C。12.控制哺乳動(dòng)物的性別對(duì)于畜牧生產(chǎn)有著十分重要的意義，目前分離精子技術(shù)是有效的控制方法，再通過(guò)胚胎工程技術(shù)就可培育出所需性別的試管動(dòng)物。下圖為試管牛的培育流程。下列說(shuō)法正確的是（）A.過(guò)程①的精子要經(jīng)過(guò)獲能處理，卵細(xì)胞可以直接用于受精B.過(guò)程①在精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間，卵細(xì)胞膜會(huì)立即發(fā)生反應(yīng)，拒絕其他精子進(jìn)入C.經(jīng)過(guò)程①后可以直接進(jìn)行胚胎移植D.胚胎移植時(shí)受體不會(huì)對(duì)胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)〖答案〗D〖祥解〗分析題圖：圖示為試管牛培育過(guò)程圖，牛的精子分離出含Y染色體的精子和含X染色體的精子，與卵細(xì)胞結(jié)合形成受精卵，因此①表示體外受精過(guò)程，接著經(jīng)過(guò)早期胚胎培養(yǎng)過(guò)程和胚胎移植形成試管牛?！驹斘觥緼、過(guò)程①指的是體外受精技術(shù)，該過(guò)程中精子需要獲能處理，卵母細(xì)胞需成熟培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；B、精子入卵后，卵細(xì)胞膜會(huì)立即發(fā)生一種生理反應(yīng)，拒絕其他精子再進(jìn)入卵內(nèi)，稱為卵細(xì)胞膜反應(yīng)，B錯(cuò)誤；C、經(jīng)過(guò)程①后還需要培養(yǎng)到早期胚胎（桑椹胚或囊胚）才可移植，C錯(cuò)誤；D、胚胎移植時(shí)，受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能，D正確。故選D。13.某生物中發(fā)現(xiàn)一種基因的表達(dá)產(chǎn)物是具有較強(qiáng)抗菌性和溶血性的多肽P1，科研人員預(yù)期在P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的蛋白質(zhì)藥物。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.預(yù)期P1功能的下一步是找到并改變相應(yīng)的脫氧核苷酸序列B.對(duì)P1進(jìn)行設(shè)計(jì)和改造最終必須通過(guò)改造基因來(lái)完成C.對(duì)表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)的原理是抗原抗體的特異性結(jié)合D.研發(fā)新的P1的技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程〖答案〗A〖祥解〗蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)改造或合成基因，來(lái)改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類生產(chǎn)和生活的需求。蛋白質(zhì)工程基本思路是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)?！驹斘觥緼、根據(jù)蛋白質(zhì)工程的基本思路：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)，預(yù)期P1功能的下一步是設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，A錯(cuò)誤；B、根據(jù)蛋白質(zhì)工程的基本思路可知，對(duì)P1進(jìn)行設(shè)計(jì)和改造最終必須通過(guò)改造基因來(lái)完成，B正確；C、蛋白質(zhì)工程的表達(dá)產(chǎn)物為蛋白質(zhì)，可以利用抗原一抗體雜交的方法對(duì)該蛋白質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，C正確；D、蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)改造或合成基因，來(lái)改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類生產(chǎn)和生活的需求，因此研發(fā)新的P1的技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程，D正確。故選A。14.胚胎工程理論的發(fā)展和技術(shù)的應(yīng)用提高了良種奶牛的繁育速度，保證了我國(guó)高品質(zhì)牛奶的充足供應(yīng)。如圖表示繁殖良種奶牛以及獲取胚胎干細(xì)胞的流程，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.應(yīng)選擇具有健康的體質(zhì)和正常的繁殖能力良種母牛作供體B.進(jìn)行①胚胎分割可以看作動(dòng)物無(wú)性繁殖或克隆的方法之一C.可從早期囊胚（b）中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞獲得胚胎干細(xì)胞（e）D.進(jìn)行②的優(yōu)勢(shì)是可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力〖答案〗A〖祥解〗胚胎移的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理(選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體。用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理)；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集檢查、培養(yǎng)或保存(對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑堪或胚囊胚階段)；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植;移植后的檢查?！驹斘觥緼、選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的母牛作供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體，A錯(cuò)誤；B、進(jìn)行①胚胎分割屬于無(wú)性生殖，胚胎分割時(shí)，一般采用發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚，對(duì)囊胚期的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，要特別注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響分割后的胚胎恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。來(lái)自同一胚胎分割產(chǎn)生的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，因此，胚胎分割可以看作動(dòng)物無(wú)性繁殖（或克隆）的方法之一，B正確；C、胚胎干細(xì)胞主要來(lái)源于早期受精卵發(fā)育過(guò)程中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞，故可從早期囊胚（b）中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞獲得胚胎干細(xì)胞，C正確；D、②表示為胚胎移植，胚胎移植能夠充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖能力，大大縮短供體本身的繁殖周期，增加供體后代繁殖的數(shù)量，D正確。故選A。15.現(xiàn)代生物技術(shù)在造福人類的同時(shí)，也可能引起--系列的安全性和倫理問(wèn)題。下列說(shuō)法正確的是（）A.整合到油菜葉綠體基因組中的除草劑基因，會(huì)通過(guò)花粉傳入環(huán)境，造成基因污染B.我國(guó)對(duì)“克隆人”這一技術(shù)總體上來(lái)說(shuō)是禁止生殖性性克隆，監(jiān)控和嚴(yán)格審查治療性克隆C.設(shè)計(jì)試管嬰兒與普通試管嬰兒的區(qū)別在于前者在植入前得要對(duì)胚胎進(jìn)行性別鑒定D.進(jìn)行基因檢測(cè)做成基因身份證會(huì)造成基因資訊泄露，因此沒(méi)有必要進(jìn)行基因檢測(cè)〖答案〗B〖祥解〗轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)、過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）．轉(zhuǎn)基因食品、產(chǎn)品上都要標(biāo)注原料來(lái)自轉(zhuǎn)基因生物，如“轉(zhuǎn)基因××”“轉(zhuǎn)基因××加工品（制成品）”“加工原料為轉(zhuǎn)基因××”“本產(chǎn)品為轉(zhuǎn)基因××加工制成”．對(duì)于轉(zhuǎn)基因食物潛在隱患要進(jìn)行開展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、預(yù)警跟蹤等措施多環(huán)節(jié)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)陌踩栽u(píng)價(jià)，保障了現(xiàn)代生物技術(shù)的安全性?！驹斘觥緼、花粉（精子）中不含葉綠體，故整合到油菜葉綠體基因組中的除草劑基因，不會(huì)通過(guò)花粉傳入環(huán)境，不造成基因污染，A錯(cuò)誤；B、生殖性克隆是指通過(guò)克隆技術(shù)產(chǎn)生獨(dú)立生存的新個(gè)體。治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞、組織和器官，用它們來(lái)修復(fù)或替代受損的細(xì)胞、組織和器官，從而達(dá)到治療疾病的目的。兩者有著本質(zhì)的區(qū)別。我國(guó)對(duì)“克隆人”這一技術(shù)總體上來(lái)說(shuō)是禁止生殖性性克隆，監(jiān)控和嚴(yán)格審查治療性克隆，B正確；C、設(shè)計(jì)試管嬰兒的目的是對(duì)已患有疾病的孩子進(jìn)行治療，設(shè)計(jì)試管嬰兒與普通試管嬰兒的區(qū)別在于前者在植入前得要對(duì)胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷，C錯(cuò)誤；D、進(jìn)行基因檢測(cè)做成基因身份證會(huì)造成基因資訊泄露，但是也能了解其患病情況，應(yīng)該辯證地看待，D錯(cuò)誤。故選B。二、選擇題：本題共5小題，每小題3分，共15分。每小題有一個(gè)或多個(gè)選項(xiàng)符合題目要求，全部選對(duì)得3分，選對(duì)但不全的得1分，有選錯(cuò)的得0分。16.影印培養(yǎng)法是指在一系列平板培養(yǎng)基的相同位置上接種并培養(yǎng)出相同菌落的一種微生物培養(yǎng)方法。野生型大腸桿菌能在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)缺陷型的大腸桿菌需要在添加某些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的完全培養(yǎng)基上才能生長(zhǎng)。研究人員用影印培養(yǎng)法對(duì)誘變處理后的大腸桿菌進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變體篩選的部分流程如下圖，1～5為菌落。下列說(shuō)法正確的是（）A.培養(yǎng)基A是基本培養(yǎng)基，培養(yǎng)基B是完全培養(yǎng)基B.將菌液涂布在培養(yǎng)基表面時(shí)可轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿使涂布均勻C.影印培養(yǎng)操作時(shí)，要注意影印的方向不能改變D.可以從培養(yǎng)基A中挑取菌落3或5進(jìn)行純化培養(yǎng)〖答案〗BCD〖祥解〗題圖分析：由圖可知，經(jīng)培養(yǎng)基A能長(zhǎng)出5個(gè)菌落，經(jīng)培養(yǎng)基B的培養(yǎng)平板表面留下1號(hào)、2號(hào)、4號(hào)三個(gè)菌落。由此可推出培養(yǎng)基A是完全培養(yǎng)基，培養(yǎng)基B是基本培養(yǎng)基。其中3號(hào)、5號(hào)是營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌繁殖而來(lái)的菌落。【詳析】A、由題干可知，營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌無(wú)法在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，只能在完全培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，與A相比，B中缺少了3、5兩個(gè)菌落，說(shuō)明3、5菌落即是營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌繁殖而來(lái)的，A為完全培養(yǎng)基，B為基本培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；B、將菌液涂布在培養(yǎng)基表面時(shí)，應(yīng)及時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使菌液均勻分布，B正確；C、影印培養(yǎng)操作時(shí)，要注意“蓋章”的方向不能改變，防止菌落位置不一致，無(wú)法進(jìn)行比較，C正確；D、由圖可知，3和5菌落是營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌生長(zhǎng)繁殖形成的，因此從培養(yǎng)基A中挑取菌落3、5進(jìn)行純化培養(yǎng)即可獲得營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌，D正確。故選BCD17.青蒿素是從植物黃花蒿的葉片中所提取的一種代謝產(chǎn)物，而莖及其他部位中的青蒿素含量極其微小。下圖為培育黃花蒿植株的過(guò)程。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）黃花高莖尖愈傷組織胚狀體黃花蒿植株A.黃花蒿莖尖需用適宜濃度的酒精和次氯酸鈉的混合液消毒B.過(guò)程①②通常要使用適量的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素C.可通過(guò)大量培養(yǎng)愈傷組織以直接獲得青蒿素D.通過(guò)圖示過(guò)程培育的黃花蒿植株具有抗病毒性狀〖答案〗ACD〖祥解〗1、植物組織培養(yǎng)過(guò)程：外植體（離體的植物細(xì)胞、組織或器官）→愈傷組織→胚狀體→新植體。2、誘導(dǎo)愈傷組織應(yīng)該避光培養(yǎng)，原因是：在有光時(shí)往往形成維管組織，而不形成愈傷組織；愈傷組織再分化成胚狀體時(shí)需要光照，原因是：①葉綠素的合成需要光照；②試管苗需要光進(jìn)行光合作用制造有機(jī)物提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。3、植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（微型繁殖、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斘觥緼、外植體經(jīng)自來(lái)水沖洗，先用70%酒精浸泡，再用5%次氯酸鈉浸泡，最后用無(wú)菌水清洗，才能用于接種，A錯(cuò)誤；B、過(guò)程①②分別是脫分化和再分化，在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中通常要使用適量的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，B正確；C、青蒿素是從植物黃花蒿的葉片中所提取的一種代謝產(chǎn)物，而莖及其他部位中的青蒿素含量及其微小，因此通過(guò)大量培養(yǎng)愈傷組織不能直接獲得青蒿素，C錯(cuò)誤；D、要使植株具有抗病毒性狀需要通過(guò)基因工程技術(shù)培育，而通過(guò)圖示過(guò)程培育的黃花蒿植株不具有抗病毒性狀，D錯(cuò)誤。故選ACD。18.下圖是一種“生物導(dǎo)彈”的作用原理示意圖，沒(méi)有與腫瘤細(xì)胞結(jié)合的“生物導(dǎo)彈”一段時(shí)間后被機(jī)體清除。阿霉素是一種抗腫瘤藥物，可抑制DNA和RNA的合成，對(duì)正常細(xì)胞也有一定毒性。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.雜交瘤細(xì)胞釋放單克隆抗體，體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性B.活化阿霉素有選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞的功能C.僅注射圖示“生物導(dǎo)彈”不能對(duì)腫瘤細(xì)胞起抑制作用D.使用圖示“生物導(dǎo)彈”，可以適當(dāng)減少阿霉素用量〖答案〗B〖祥解〗分析題意和題圖：生物導(dǎo)彈是由單克隆抗體和堿性磷酸酶組成，單克隆抗體能與腫瘤細(xì)胞特異性結(jié)合，堿性磷酸酶能將非活化磷酸阿霉素活化，抑制腫瘤細(xì)胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過(guò)程，從而抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，達(dá)到治療腫瘤的目的。治療中，應(yīng)先注射生物導(dǎo)彈再注射非活化磷酸阿霉素?！驹斘觥緼、雜交瘤細(xì)胞通過(guò)胞吐的方式釋放單克隆抗體，體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性，A正確；B、活化阿霉素對(duì)正常細(xì)胞也有一定毒性，不具有選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞的功能，B錯(cuò)誤；C、由圖可知，生物導(dǎo)彈只是單克隆抗體和堿性磷酸酶，如果沒(méi)有阿霉素，抗體也不能發(fā)揮作用，因此僅注射“生物導(dǎo)彈”不能對(duì)腫瘤細(xì)胞起抑制作用，C正確；D、生物導(dǎo)彈是由單克隆抗體和堿性磷酸酶組成，單克隆抗體能與腫瘤細(xì)胞特異性結(jié)合，堿性磷酸酶能將非活化磷酸阿霉素活化，使用圖示“生物導(dǎo)彈”，可以適當(dāng)減少阿霉素用量，D正確。故選B。19.精子進(jìn)入次級(jí)卵母細(xì)胞后，次級(jí)卵母細(xì)胞發(fā)育的“開關(guān)”即被開啟。在雌原核和雄原核接觸前去掉雌原核，受精卵還會(huì)繼續(xù)發(fā)育，最終獲得孤雄胚胎干細(xì)胞系，其流程如下圖。下列說(shuō)法正確的是（）A.在卵母細(xì)胞觀察到雌雄原核可以作為受精標(biāo)志B.去掉雌原核也可以用紫外線照射的方法C.孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞中的基因和精子中的基因一樣D.單倍體細(xì)胞可以作為研究某些隱性基因功能的細(xì)胞模型〖答案〗AD〖祥解〗圖示去除雌原核后，形成了單倍體囊胚，單倍體囊胚細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)來(lái)自于精子細(xì)胞核。【詳析】A、雌原核和雄原核的結(jié)合標(biāo)志著受精作用的完成，故在卵母細(xì)胞觀察到雌雄原核可以作為受精的標(biāo)志，A正確；B、去除動(dòng)物細(xì)胞核常用的方法是顯微操作，包括去除雌原核，B錯(cuò)誤；C、單倍體細(xì)胞中有來(lái)自于卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)，所以單倍體細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)與精子不完全相同，C錯(cuò)誤；D、由于該過(guò)程去除了雌原核，培養(yǎng)出了單倍體，所以可作為研究隱性基因功能的細(xì)胞模型，D正確；故選AD。20.科學(xué)家從某植物中提取乙烯受體基因（Ers1），通過(guò)基因工程技術(shù)將Ers1基因反向連接到質(zhì)粒中，篩選出轉(zhuǎn)入反義Ersl基因的該種植物，其果實(shí)的儲(chǔ)藏期將延長(zhǎng)，過(guò)程如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.PCR時(shí)需在Ers1基因左右兩端分別添加X(jué)hoI、HpaI酶切序列B.過(guò)程②可用氯化鈣處理農(nóng)桿菌，有助于促進(jìn)重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到農(nóng)桿菌細(xì)胞中C.過(guò)程③后可在培養(yǎng)基中添加卡那霉素對(duì)轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞進(jìn)行篩選D.可利用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測(cè)該植物染色體上是否插入目的基因〖答案〗CD〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斘觥緼、根據(jù)題意，Ers1基因的轉(zhuǎn)錄方向由左向右，據(jù)圖可知，質(zhì)粒中限制酶HpaI靠近啟動(dòng)子，限制酶XhoI靠近終止子，若要將Ers1基因反向連接到質(zhì)粒中，則需在Ers1基因左右兩端分別添加X(jué)hoI、HpaI酶切序列，A正確；B、圖中過(guò)程②是將構(gòu)建的基因表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌，方法是感受態(tài)細(xì)胞法，因此需要用氯化鈣處理農(nóng)桿菌，使其處于感受態(tài)，有助于促進(jìn)重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到農(nóng)桿菌細(xì)胞中，B正確；C、過(guò)程③利用農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞的過(guò)程，利用了農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA的特點(diǎn)，T-DNA攜帶目的基因插入到植物細(xì)胞染色體的DNA上，根據(jù)圖中T-DNA的左右邊界可知，攜帶目的基因的T-DNA上帶有潮霉素抗性基因，因此過(guò)程③后可在培養(yǎng)基中添加潮霉素對(duì)轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞進(jìn)行篩選，C錯(cuò)誤；D、利用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)該植物染色體上是否插入目的基因，D錯(cuò)誤。故選CD。三、非選擇題：本題共5小題，共55分。21.產(chǎn)脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。研究人員按照下圖所示流程從某土壤樣品中篩選得到能高效產(chǎn)脂肪酶的酵母菌菌株。（1）甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分有所不同，但都能為酵母菌的生長(zhǎng)提供4類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，即___。圖中甲培養(yǎng)基的作用是___。（2）實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，通常采用___方法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。實(shí)驗(yàn)中初步估測(cè)搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL，若要在每個(gè)平板上涂布0.1mL稀釋后的菌液，且保證平板上長(zhǎng)出的平均菌落數(shù)為200個(gè)，則應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋___倍。（3）為了進(jìn)一步提高酵母菌產(chǎn)酶能力，對(duì)分離所得的菌株，采用射線輻照使其發(fā)生基因突變。將輻照處理后的酵母菌液涂布在以___為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，按照菌落直徑大小進(jìn)行分離和純化，獲得A、B兩突變菌株。分離和純化培養(yǎng)過(guò)程中必須使用固體培養(yǎng)基，理由是___。（4）在處理含油廢水的同時(shí)，可獲得單細(xì)胞蛋白，實(shí)現(xiàn)污染物資源化。評(píng)價(jià)A、B兩菌株的相關(guān)性能，結(jié)果如圖。據(jù)圖分析，應(yīng)選擇菌株___進(jìn)行后續(xù)相關(guān)研究，依據(jù)是___。〖答案〗（1）①.水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽②.選擇和擴(kuò)大培養(yǎng)產(chǎn)脂肪酶酵母的菌種（2）①.高壓蒸汽滅菌②.104（3）①.脂肪（或油脂）②.固體培養(yǎng)基表面才能長(zhǎng)出由單個(gè)微生物繁殖而成的菌落（4）①.A②.該菌株增殖速度快；降解脂肪能力強(qiáng)，凈化效果好〖祥解〗1、滅菌指用強(qiáng)烈的物理或化學(xué)方法殺滅所有微生物，包括致病的和非致病的，以及細(xì)菌的芽孢。常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法。高壓蒸汽滅菌適用于對(duì)一般培養(yǎng)基和玻璃器皿的滅菌，干熱滅菌適用于空玻璃器皿的滅菌，微生物接種時(shí)的金屬接種工具和試管口可以用灼燒滅菌；2、稀釋平板計(jì)數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個(gè)菌落，即是由一個(gè)單細(xì)胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設(shè)計(jì)的計(jì)數(shù)方法，即一個(gè)菌落代表一個(gè)單細(xì)胞。將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋程度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)，經(jīng)培養(yǎng)后，由單個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖形成菌落，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，即可計(jì)算出樣品中的含菌數(shù)；3、培養(yǎng)基的成分：碳源（提供碳，可以是碳酸鹽）、氮源（提供氮）、無(wú)機(jī)鹽（包括微量元素）、水、凝固劑（凝固作用。不一定會(huì)添加，取決于你想使培養(yǎng)基凝固到什么程度，一般使用瓊脂）。但對(duì)于不同種類微生物的培養(yǎng)這些成分、配比是不同的。有的培養(yǎng)基還含有特殊成分，如抗菌素、色素、激素和血清?？傊褪翘荚吹礋o(wú)機(jī)鹽提供微生物所需營(yíng)養(yǎng)，凝固劑制造適宜的生存環(huán)境，特殊添加成分滿足該微生物的特殊需求。（1）由圖可知，甲培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，乙培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，都能為酵母菌的生長(zhǎng)提供4類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，即碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水；圖中甲培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，可以選擇和擴(kuò)大培養(yǎng)產(chǎn)脂肪酶酵母的菌種；（2）培養(yǎng)基常采用高壓蒸汽滅菌方法進(jìn)行滅菌；假設(shè)菌液稀釋被釋放10x倍，則200÷0.1÷10x=2×107，得到x=4，即菌液稀釋被釋放104倍，可使搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL；（3）根據(jù)題意，欲提高酵母菌產(chǎn)酶能力，可對(duì)分離得到的產(chǎn)脂肪酶酵母菌菌株進(jìn)行射線輻射，該育種方式為誘變育種。為了能篩選出符合要求的產(chǎn)脂肪酶酵母菌突變株，可配制以脂肪（或油脂）為唯一碳源的培養(yǎng)基，將輻射處理的酵母菌涂布在該固體培養(yǎng)基上，因?yàn)楣腆w培養(yǎng)基表面才能長(zhǎng)出由單個(gè)微生物繁殖而形成單菌落；（4）據(jù)題圖分析可知，相同時(shí)間內(nèi)，菌株A的細(xì)胞密度高于菌株B，而菌株A的脂肪剩余量低于菌株B的脂肪剩余量，故進(jìn)行相關(guān)研究可選擇菌株A，原因是菌株A增殖速度快，單細(xì)胞蛋白的產(chǎn)量也高，同時(shí)降解脂肪的能力強(qiáng)，凈化效果更好。22.不對(duì)稱體細(xì)胞雜交是指利用射線破壞供體染色質(zhì)，與未經(jīng)射線照射的受體融合，所得融合產(chǎn)物含受體全部遺傳物質(zhì)及供體部分遺傳物質(zhì)。紅豆杉能產(chǎn)生抗癌藥物紫杉醇，為了培育產(chǎn)生紫杉醇的柴胡，科研人員利用紅豆杉（2n=24）與柴胡（2n=12）進(jìn)行了不對(duì)稱體細(xì)胞雜交，獲得了不對(duì)稱紅豆杉—柴胡雜種植株。（1）科研人員剝離紅豆杉種子的胚作為外植體經(jīng)___（填“滅菌”或“消毒”）后接種于MS培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)形成愈傷組織。選用胚作為外植體的原因是___。（2）將紅豆杉愈傷組織和柴胡愈傷組織用___酶分別處理，各自獲得有活力的原生質(zhì)體。用一定劑量的紫外線照射紅豆杉原生質(zhì)體，破壞部分染色體，與未經(jīng)紫外線照射的柴胡原生質(zhì)體用化學(xué)誘導(dǎo)劑___誘導(dǎo)融合，得到融合細(xì)胞。（3）科研人員統(tǒng)計(jì)了7組染色體數(shù)目不大于24條的融合細(xì)胞，如下表所示。材料融合細(xì)胞組號(hào)1234567染色體條數(shù)9～111212～1412～16131424科研人員推測(cè)組號(hào)為___的細(xì)胞為雜種細(xì)胞，并進(jìn)一步采用PCR方法鑒定這幾組細(xì)胞。紅豆杉和柴胡的___較遠(yuǎn)，兩種植物細(xì)胞的染色體間排斥較為明顯，應(yīng)在能夠高效合成紫杉醇的雜種細(xì)胞中選擇___的核基因含量較低的雜種細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。（4）獲得的不對(duì)稱紅豆杉—柴胡雜種植株多數(shù)都表現(xiàn)為不育，原因主要是___。〖答案〗（1）①.消毒②.分化程度低，易于脫分化（2）①.纖維素酶和果膠②.PEG##“聚乙二醇（3）①.3、4、5、6②.親緣關(guān)系③.紅豆杉（4）來(lái)自紅豆杉的染色體不是成對(duì)存在〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：（1）概念：就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)；（2）過(guò)程：①誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括離心、振動(dòng)、電刺激等，化學(xué)法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑；②細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是新的細(xì)胞壁的生成；③植物體細(xì)胞雜交的終點(diǎn)是培育成雜種植株，而不是形成雜種細(xì)胞就結(jié)束；④雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)。（3）意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。（1）剝離紅豆杉種子的胚作為外植體經(jīng)自來(lái)水沖洗，先用70%酒精浸泡，再用5%次氯酸鈉浸泡，最后用無(wú)菌水清洗，才能用于接種，故剝離紅豆杉種子的胚作為外植體經(jīng)消毒后接種于MS培養(yǎng)基上。選用胚作為外植體是因?yàn)榉只潭鹊?，分裂能力?qiáng)，易于脫分化。（2）將紅豆杉愈傷組織和柴胡愈傷組織用纖維素酶和果膠酶分別處理，各自獲得有活力的原生質(zhì)體。而后用一定劑量的紫外線照射紅豆杉原生質(zhì)體，破壞部分染色體，與未經(jīng)紫外線照射的柴胡原生質(zhì)體用化學(xué)誘導(dǎo)劑PEG誘導(dǎo)融合，得到融合細(xì)胞，該過(guò)程依賴膜的流動(dòng)性實(shí)現(xiàn)。（3）因?yàn)椴窈?xì)胞染色體數(shù)為12條，并且紅豆杉細(xì)胞一個(gè)染色體組的染色體數(shù)為12條，因此科研人員篩選的目標(biāo)細(xì)胞不包括染色體數(shù)目大于24條的細(xì)胞。柴胡細(xì)胞染色體數(shù)為12條，多余的染色體是其他細(xì)胞融合參與進(jìn)去的?？膳袛嘟M號(hào)為3、4、5、6的細(xì)胞為雜交細(xì)胞。題中〖提示〗紅豆杉和柴胡兩種植物細(xì)胞的染色體間排斥較為明顯，故它們之間存在較遠(yuǎn)的親緣關(guān)系。實(shí)驗(yàn)將紅豆杉和柴胡的原生質(zhì)體融合成雜交細(xì)胞，其中含有高效合成紫杉醇的基因，那么對(duì)雜交細(xì)胞的培養(yǎng)需要選擇紅豆杉的核基因含量較低的雜交細(xì)胞。（4）用一定劑量的紫外線照射紅豆杉原生質(zhì)體，破壞部分染色體，與未經(jīng)紫外線照射的柴胡原生質(zhì)體用化學(xué)誘導(dǎo)劑PEG誘導(dǎo)融合，得到的融合細(xì)胞中紅豆杉的染色體不是成對(duì)存在，所以獲得的不對(duì)稱紅豆杉—柴胡雜種植株多數(shù)都表現(xiàn)為不育。23.成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（FGF20）會(huì)在肺癌、胃癌和結(jié)腸癌細(xì)胞中過(guò)量表達(dá)，可作為潛在的腫瘤標(biāo)志物。因此抗FGF20單克隆抗體可用于癌癥早期診斷篩查。研究者設(shè)計(jì)如下圖流程制備抗FGF20單克隆抗體。（1）制備抗FGF20單克隆抗體依賴的生物學(xué)技術(shù)有___（答出兩點(diǎn)）。用滅活的FGF20免疫小鼠需要在一定時(shí)間內(nèi)間隔注射3次，其目的是___。（2）寫出過(guò)程①以小鼠脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要步驟：___。（3）過(guò)程③需要多次篩選，篩選所依據(jù)的基本原理是___。選取的所需細(xì)胞群應(yīng)具備的特點(diǎn)是___。（4）體外培養(yǎng)所需細(xì)胞后，即可從培養(yǎng)液中提取到抗FGF20單克隆抗體。培養(yǎng)過(guò)程中還需要提供95%空氣和5%CO2氣體環(huán)境，分別是為了___?！即鸢浮剑?）①.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合②.刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多已免疫的B淋巴細(xì)胞（2）取小鼠脾臟剪碎，用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞，加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液（3）①.抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性②.既能迅速大量增殖，又能分泌抗FGF20抗體（4）維持細(xì)胞有氧呼吸，調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH〖祥解〗單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。（1）制備抗FGF20單克隆抗體依賴的生物學(xué)技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞和B細(xì)胞）和動(dòng)物細(xì)胞融合（誘導(dǎo)骨髓瘤細(xì)胞和B細(xì)胞融合）；用滅活的FGF20免疫小鼠需要在一定時(shí)間內(nèi)間隔注射3次，相當(dāng)于激發(fā)機(jī)體的二次免疫過(guò)程，其目的是刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多已免疫的B淋巴細(xì)胞。（2）過(guò)程①以小鼠脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要步驟是：取小鼠脾臟剪碎，用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞，加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液。（3）過(guò)程③需要多次篩選，篩選所依據(jù)的基本原理是抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性，即抗原與抗體的特異性結(jié)合；選取的所需細(xì)胞群應(yīng)具備的特點(diǎn)是既能迅速大量增殖，又能分泌抗FGF20抗體。（4）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中還需要提供95%空氣和5%CO2氣體環(huán)境，其中95%空氣是為了維持細(xì)胞有氧呼吸，而5%CO2是調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH。24.研究發(fā)現(xiàn)，人溶菌酶（hLZ）是天然抗生素替代品?？茖W(xué)家將該蛋白基因?qū)肷窖蝮w內(nèi)使其能夠在山羊乳腺細(xì)胞中表達(dá)，從山羊乳汁中提取人溶菌酶，下圖表示培育流程。（1）獲取hLZ基因后構(gòu)建重組質(zhì)粒常用到___酶。為了保證hLZ基因在山羊乳腺中表達(dá)，構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)需注意的問(wèn)題是___。（2）胚胎工程最終的技術(shù)環(huán)節(jié)是過(guò)程___（填序號(hào)），其實(shí)質(zhì)是___。（3）在進(jìn)行過(guò)程④之前，必須獲取囊胚的滋養(yǎng)層進(jìn)行___，為了獲得更多的乳腺生物反應(yīng)器，可在該時(shí)期進(jìn)行胚胎分割，分割時(shí)應(yīng)注意___。（4）為探究冷凍胚胎分割前培養(yǎng)時(shí)間對(duì)分割后胚胎發(fā)育率的影響，每組取60枚同種冷凍胚胎，分別在解凍后培養(yǎng)0、15、30、45、60、90、120min進(jìn)行分割，將各組半胚和對(duì)照組整胚用培養(yǎng)液培養(yǎng)24h，統(tǒng)計(jì)胚胎發(fā)育率，結(jié)果見(jiàn)表。冷凍胚胎分割前培養(yǎng)時(shí)間對(duì)胚胎發(fā)育率的影響組別培養(yǎng)胚胎數(shù)/枚培養(yǎng)24h囊胚數(shù)/枚胚胎發(fā)育率/%對(duì)照605795.000min604473.3315min603253.3330min604880.0045min606185.0060min604168.3390min603456.67120min604270.00由表中數(shù)據(jù)可知，分割造成的損傷會(huì)降低胚胎發(fā)育率，判斷的依據(jù)是___；冷凍胚胎分割前最優(yōu)培養(yǎng)時(shí)間大約是___分鐘?！即鸢浮剑?）①.限制酶和DNA連接酶②.將hLA基因與乳腺中特異性表達(dá)的啟動(dòng)子等調(diào)控原件重組在一起（2）①.④②.早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移（3）①.鑒定性別②.將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割（4）①.分割后的胚胎發(fā)育率均低于整胚的發(fā)育率②.45〖祥解〗胚胎分割是指用機(jī)械方法將早期胚胎分割成2等份、4等份或8等份等，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)，其本質(zhì)是無(wú)性繁殖。（1）為了獲取hLZ基因后構(gòu)建重組質(zhì)粒常用到限制酶和DNA連接酶，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要將人溶菌酶（hLZ）基因和乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，這樣才能使目的基因只在乳腺組織中表達(dá)。（2）分割后的胚胎需經(jīng)④胚胎移植才能發(fā)育成新個(gè)體，且胚胎移植前對(duì)供體和受體進(jìn)行了同期發(fā)情處理，因此，胚胎移植的實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移，代孕母牛一般具有健康的體質(zhì)和正常的繁殖能力。（3）科學(xué)家將人溶菌酶（hLZ）基因?qū)肷窖蝮w內(nèi)使其能夠在山羊乳腺細(xì)胞中表達(dá)，從山羊乳汁中提取人溶菌酶，因此在進(jìn)行過(guò)程④胚胎移植之前，必須獲取囊胚的滋養(yǎng)層進(jìn)行鑒定性別，為了獲得更多的乳腺生物反應(yīng)器，可在該時(shí)期進(jìn)行胚胎分割，分割時(shí)應(yīng)注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。（4）由表中數(shù)據(jù)可知，各組半胚的胚胎發(fā)育率無(wú)論在解凍后培養(yǎng)多長(zhǎng)時(shí)間均低于對(duì)照組整胚的胚胎發(fā)育率，因而可得出結(jié)論：分割造成的損傷會(huì)降低胚胎發(fā)育率，結(jié)合表格數(shù)據(jù)可知，冷凍胚胎分割前最優(yōu)培養(yǎng)時(shí)間大約是45分鐘左右，因?yàn)樵摃r(shí)段分割半胚的胚胎發(fā)育率最高，最接近對(duì)照組。25.血管新生在腫瘤發(fā)生和發(fā)展中起關(guān)鍵作用，為了研究血管生成素（Ang）是否能促進(jìn)血管生成及作用原理，科學(xué)家構(gòu)建了綠色熒光蛋白（GFP）基因和血管生成素融合基因，將其導(dǎo)入大腸桿菌來(lái)生產(chǎn)GFP-Ang融合蛋白，過(guò)程如圖，字母a～h代表引物，序號(hào)①～⑤表示過(guò)程。（1）Ang的cDNA可在細(xì)胞中提取mRNA后經(jīng)___獲得。為了過(guò)程②形成正確的GFP-Ang融合基因，在進(jìn)行過(guò)程①（PCR）時(shí)需選擇正確的引物并在引物___（填字母）的5＇端添加BamHⅠ限制酶識(shí)別序列，且添加的識(shí)別序列位于CFP基因中終止密碼子編碼序列的___（“內(nèi)側(cè)”或“外側(cè)”）。（2）過(guò)程③的目的是___。此時(shí)，為了使融合基因定向插入載體，要選用___兩種限制酶切割融合基因和載體。生產(chǎn)中需要大腸桿菌在某些特定誘導(dǎo)物作用下表達(dá)GFP-Ang融合蛋白，則要在載體上構(gòu)建___。（3）以大腸桿菌作為受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)有___（答出兩點(diǎn)）。經(jīng)過(guò)程④后的大腸桿菌需培養(yǎng)在含有___的培養(yǎng)液中，破碎大腸桿菌并提取到發(fā)綠色熒光的物質(zhì)就是GFP-Ang融合蛋白。（4）鑒定GFP-Ang融合蛋白與天然Ang作用效果差異，科學(xué)家取雞胚分別用緩沖液、緩沖液溶解的天然Ang、緩沖液溶解的CFP-Ang融合蛋白處理，統(tǒng)計(jì)雞胚毛細(xì)血管生成情況，結(jié)果如下表。組別血管數(shù)量緩沖液7.38緩沖液溶解的天然Ang36.5緩沖液溶解的GFP-Ang融合蛋白29.94統(tǒng)計(jì)結(jié)果說(shuō)明了___。若進(jìn)一步觀察到綠色熒光分布于毛細(xì)血管表面，則說(shuō)明，Ang發(fā)揮作用的方式可能是與細(xì)胞表面的___相結(jié)合來(lái)實(shí)現(xiàn)的?！即鸢浮剑?）①.逆轉(zhuǎn)錄②.c、g③.內(nèi)側(cè)（2）①.讓目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用②.EcoRⅠ、SalⅠ③.誘導(dǎo)型啟動(dòng)子（3）①.生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單、生長(zhǎng)繁殖快、容易進(jìn)行遺傳操作②.氨芐青霉素（4）①.GFP-Ang融合蛋白可以明顯地促進(jìn)血管生成，效果略低于天然Ang②.Ang受體〖祥解〗PCR技術(shù)的條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；PCR的操作過(guò)程：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。（1）Ang的cDNA可在細(xì)胞中提取mRNA后經(jīng)反轉(zhuǎn)錄獲得，為了過(guò)程②形成正確的GFP-Ang融合基因，在進(jìn)行過(guò)程①（PCR）時(shí)需選擇正確的引物并在引物c、g的5＇端添加BamHⅠ限制酶識(shí)別序列，以確保目的基因與質(zhì)粒正確連接；且添加的識(shí)別序列位于CFP基因中終止密碼子編碼序列的內(nèi)側(cè)，這樣才能使得目的基因保持完整。（2）根據(jù)圖示，過(guò)程③是指將目的基因和質(zhì)粒連接起來(lái)，因此③的目的是讓目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。為了使融合基因定向插入載體，這樣目的基因就能連接到質(zhì)粒上，并與啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)的方向一致，要選用EcoRⅠ、SalⅠ兩種限制酶切割融合基因和載體；生產(chǎn)中需要大腸桿菌在某些特定誘導(dǎo)物作用下表達(dá)GFP-Ang融合蛋白，則要在載體上構(gòu)建誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，在一定的條件下誘導(dǎo)基因成功開始表達(dá)。（3）以大腸桿菌作為受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)有生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單、生長(zhǎng)繁殖快、容易進(jìn)行遺傳操作，由于質(zhì)粒上含有氨芐青霉素的抗性基因，因此可以經(jīng)過(guò)程④后的大腸桿菌需培養(yǎng)在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)液中，以檢測(cè)帶有目的基因的質(zhì)粒能否導(dǎo)入大腸桿菌或目的基因能否成功表達(dá)，破碎大腸桿菌并提取到發(fā)綠色熒光的物質(zhì)就是GFP-Ang融合蛋白。（4）根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)緩沖液溶解的GFP-Ang融合蛋白的血管數(shù)量略少于緩沖液溶解的天然Ang，因此GFP-Ang融合蛋白可以明顯地促進(jìn)血管生成，效果略低于天然Ang；若進(jìn)一步觀察到綠色熒光分布于毛細(xì)血管表面，由于GFP-Ang形成了融合基因，因此GFP和Ang基因會(huì)在同一個(gè)部位表達(dá)，則說(shuō)明Ang發(fā)揮作用的方式可能是與細(xì)胞表面的Ang受體想結(jié)合形成的。山東省煙臺(tái)市2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期4月期中試題注意事項(xiàng)；1．答題前，考生務(wù)必將自己的姓名、考生號(hào)等填寫在答題卡和試卷指定位置。2．回答選擇題時(shí)，選出每小題〖答案〗后，用鉛筆把答題卡上對(duì)應(yīng)題目的〖答案〗標(biāo)號(hào)涂黑。如需改動(dòng)，用橡皮擦干凈后，再選涂其他〖答案〗標(biāo)號(hào)?；卮鸱沁x擇題時(shí)，將〖答案〗寫在答題卡上。寫在本試卷上無(wú)效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求。1.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)大大豐富了食物的品種。酵母菌、毛霉菌、醋酸菌等都是傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中的重要菌種。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是純種發(fā)酵B.果酒發(fā)酵瓶?jī)?nèi)留有一定空間有利于酵母菌的繁殖C.毛霉能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解為小分子肽和氨基酸D.果醋制作過(guò)程中出現(xiàn)CO2，說(shuō)明發(fā)酵底物缺少糖源〖答案〗D〖祥解〗1、果酒制作菌種是酵母菌，代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型真菌，屬于真核細(xì)胞，條件是18～30℃、前期需氧，后期不需氧；2、果醋制作菌種是醋酸菌，屬于原核細(xì)胞，適宜溫度為30～35℃，需要持續(xù)通入氧氣?！驹斘觥緼、家庭制作果酒、果醋與腐乳過(guò)程中所用的菌種均來(lái)源于自然環(huán)境，有多種微生物參與發(fā)酵過(guò)程，因此均不是純種發(fā)酵，A正確；B、果酒發(fā)酵的菌種是酵母菌，代謝類型為兼性厭氧型，所以瓶?jī)?nèi)留有一定空間，增加氧氣含量，有利于酵母菌的繁殖，增加酵母菌的數(shù)量，B正確；C、毛霉可以分泌蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，C正確；D、若缺少糖源、氧氣充足，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰胰┳優(yōu)榇姿?，不?huì)產(chǎn)生CO2，D錯(cuò)誤。故選D。2.泡菜制作通常是把洗凈晾干的蔬菜放入經(jīng)開水消毒過(guò)的泡菜壇中，乳酸菌與酵母菌等多種微生物進(jìn)行代謝產(chǎn)生乳酸、酒精等物質(zhì)，賦予了泡菜特殊的風(fēng)味。泡菜腌制的早期酵母菌代謝活躍，中晚期乳酸菌代謝活躍乳酸積累，其他菌種的代謝被抑制。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.泡菜腌制全過(guò)程需保持密封，以利于菌種的厭氧呼吸B.酵母菌在中晚期的代謝被抑制的原因是泡菜壇中缺氧C.泡菜制作過(guò)程中冒出氣泡是酵母菌等呼吸作用產(chǎn)生的CO2D.在泡菜壇中加入發(fā)酵產(chǎn)生的泡菜汁可以加快發(fā)酵進(jìn)程〖答案〗B〖祥解〗在泡菜發(fā)酵過(guò)程初期，由于發(fā)酵壇內(nèi)有少量氧氣，所以酵母菌會(huì)進(jìn)行有氧呼吸，并產(chǎn)生CO2氣體；當(dāng)氧氣耗盡時(shí)，開始進(jìn)行無(wú)氧呼吸，該過(guò)程也會(huì)產(chǎn)生CO2氣體，且此時(shí)產(chǎn)生的氣體會(huì)增大壇內(nèi)氣壓，使產(chǎn)生的氣體和剩余空氣從壇沿水槽內(nèi)溢出。隨著發(fā)酵過(guò)程的進(jìn)行，乳酸不斷積累，當(dāng)積累到一定程度時(shí)，會(huì)抑制其他微生物的生長(zhǎng)，甚至殺死微生物。到發(fā)酵后期，乳酸含量過(guò)高，pH過(guò)低會(huì)抑制乳酸菌的生長(zhǎng)。在整個(gè)過(guò)程中，亞硝酸鹽含量的變化是先升高后降低?！驹斘觥緼、泡菜腌制的全過(guò)程需保持密封，以利于乳酸菌菌種的厭氧呼吸，A正確；B、酵母菌在中晚期的代謝被抑制的原因是泡菜壇中乳酸含量過(guò)高，pH過(guò)低會(huì)抑制酵母菌代謝，B錯(cuò)誤；C、泡菜制作過(guò)程中冒出氣泡是酵母菌等呼吸作用產(chǎn)生的CO2，C正確；D、在泡菜壇中加入發(fā)酵產(chǎn)生的泡菜汁，其中含有乳酸菌，可以加快乳酸菌的發(fā)酵進(jìn)程，D正確。故選B。3.某種個(gè)體較大的細(xì)菌不能在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，需用液體培養(yǎng)基來(lái)獲得純培養(yǎng)物。在含該菌種的錐形瓶中各取1mL培養(yǎng)液分別加入若干支盛有9mL培養(yǎng)液的a組平行試管（記作a1、a2、a3……an。）中，在平行試管中各取1mL依次加人若干支盛有9mL培養(yǎng)液的b組平行試管中（a1→b1、a2→b2、a3→b3、……an→bn），重復(fù)上述操作（b→c→d→e），培養(yǎng)一段時(shí)間后檢測(cè)各組試管中細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.若e組平行試管中只有e3，出現(xiàn)了細(xì)菌生長(zhǎng)，則該試管中可能獲得了純培養(yǎng)物B.某稀釋倍數(shù)下有細(xì)菌生長(zhǎng)的試管所占比例越高，獲得純培養(yǎng)物的概率就越大C.若d組各平行試管都有細(xì)菌生長(zhǎng)而e組都沒(méi)有，則應(yīng)取d組～e組之間的稀釋倍數(shù)繼續(xù)培養(yǎng)D.不可用顯微鏡計(jì)數(shù)某稀釋倍數(shù)下各試管中生長(zhǎng)的細(xì)菌來(lái)計(jì)算錐形瓶中的細(xì)菌數(shù)量〖答案〗B〖祥解〗根據(jù)題意可知，某稀釋倍數(shù)下有細(xì)菌生長(zhǎng)的試管所占比例越低，說(shuō)明該稀釋度下稀釋得到了單個(gè)細(xì)菌，則獲得純培養(yǎng)物的概率就越大。【詳析】A、若e組平行試管中只有e3出現(xiàn)了細(xì)菌生長(zhǎng)，說(shuō)明該稀釋液中稀釋得到了單個(gè)細(xì)菌，則該試管中可能獲得了純培養(yǎng)物，A正確；B、某稀釋倍數(shù)下有細(xì)菌生長(zhǎng)的試管所占比例越低，獲得純培養(yǎng)物的概率就越大，B錯(cuò)誤；C、若d組各平行試管都有細(xì)菌生長(zhǎng)（說(shuō)明稀釋倍數(shù)較低，獲得純培養(yǎng)物的概率低），而e組都沒(méi)有細(xì)菌生長(zhǎng)（說(shuō)明稀釋倍數(shù)過(guò)高，各個(gè)試管中沒(méi)有得到細(xì)菌），則應(yīng)取d~e之間的稀釋倍數(shù)繼續(xù)培養(yǎng)，C正確；D、根據(jù)題意可知，經(jīng)過(guò)稀釋操作后，需培養(yǎng)一段時(shí)間后再檢測(cè)各組試管中細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。若試管中存在細(xì)菌，在培養(yǎng)期間細(xì)菌會(huì)增殖，故不能用顯微鏡計(jì)數(shù)某稀釋倍數(shù)下各試管中生長(zhǎng)的細(xì)菌來(lái)計(jì)算錐形瓶中的細(xì)菌數(shù)量，D正確。故選B。4.驅(qū)蚊草含有香茅醛，能散發(fā)出一種特殊的檸檬型香氣，從而達(dá)到驅(qū)蚊且對(duì)人體無(wú)害的效果。驅(qū)蚊草是把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合形成雜種細(xì)胞，進(jìn)而培育而成的雜種植株。下列關(guān)于驅(qū)蚊草培育的說(shuō)法，正確的是（）A.原生質(zhì)體由細(xì)胞膜、液泡膜及兩者之間的細(xì)胞質(zhì)組成B.融合原生質(zhì)體需放在無(wú)菌水中培養(yǎng)，以防雜菌污染C.驅(qū)蚊草將選擇性表達(dá)天竺葵細(xì)胞和香茅草細(xì)胞的基因D.雜種細(xì)胞培養(yǎng)成驅(qū)蚊草植株的過(guò)程利用了染色體數(shù)目變異原理〖答案〗C〖祥解〗1、根據(jù)題意可知驅(qū)蚊草的培育屬于細(xì)胞工程育種中的植物體細(xì)胞雜交，其優(yōu)點(diǎn)是打破生殖隔離的限制，克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙；2、在植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程中需要用纖維素酶和果膠酶去除植物細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，在應(yīng)用一定的誘導(dǎo)方法如：化學(xué)法（聚乙二醇）、物理法（振動(dòng)、離心、電刺激）等方法誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合；3、形成雜種細(xì)胞后利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將細(xì)胞培育成植株，需經(jīng)歷脫分化和再分化，即包含細(xì)胞的有絲分裂和細(xì)胞分化。【詳析】A、原生質(zhì)體是去除細(xì)胞壁以后的植物細(xì)胞，由細(xì)胞膜、液泡膜及兩者之間的細(xì)胞質(zhì)組成的結(jié)構(gòu)稱為原生質(zhì)層，A錯(cuò)誤；B、融合原生質(zhì)體需放在等滲或略高滲溶液中培養(yǎng)，如果放在無(wú)菌水中培養(yǎng)會(huì)導(dǎo)致原生質(zhì)體吸水膨脹甚至漲破，B錯(cuò)誤；C、由雜種細(xì)胞→雜種植株過(guò)程為植物組織培養(yǎng)，要通過(guò)有絲分裂和細(xì)胞的分化，細(xì)胞分裂增加細(xì)胞的數(shù)量，細(xì)胞分化增加細(xì)胞的類型，即驅(qū)蚊草將選擇性表達(dá)天竺葵細(xì)胞和香茅草細(xì)胞的基因，C正確；D、雜種細(xì)胞培養(yǎng)成驅(qū)蚊草植株的過(guò)程為植物組織培養(yǎng)，利用了植物細(xì)胞的全能性原理，D錯(cuò)誤。故選C。5.紫草寧具有抗菌、消炎、抗腫瘤等活性。圖1是懸浮培養(yǎng)紫草細(xì)胞制備紫草寧的流程，圖2記錄了過(guò)程②中的一些數(shù)據(jù)。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.雖然紫草寧具有抗菌作用，但生產(chǎn)時(shí)仍需要進(jìn)行無(wú)菌操作B.可用射線誘變紫草愈傷組織后從突變體中篩選高產(chǎn)細(xì)胞株C.圖1中②過(guò)程表示懸浮培養(yǎng)，可提高單個(gè)細(xì)胞中紫草寧的含量D.由圖2可知，紫草細(xì)胞的數(shù)量和培養(yǎng)時(shí)間限制了紫草寧的產(chǎn)量〖答案〗C〖祥解〗在一定的激素和營(yíng)養(yǎng)等條件的誘導(dǎo)下，外植體可脫分化形成愈傷組織。愈傷組織能重新分化成芽、根等器官，該過(guò)程稱為再分化。滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。外植體用酒精消毒30s，然后立即用無(wú)菌水清洗2~3次；再用次氯酸鈉溶液處理30min后，立即用無(wú)菌水清洗2~3次?！驹斘觥緼、紫草素雖具有抗菌作用，但其產(chǎn)生的過(guò)程涉及植物組織培養(yǎng)技術(shù)，植物組織培養(yǎng)的過(guò)程中仍需進(jìn)行無(wú)菌操作，A正確；B、愈傷組織分裂旺盛，易產(chǎn)生突變，因而可用射線誘變紫草愈傷組織后從突變體中篩選高產(chǎn)細(xì)胞株，B正確；C、圖1中②過(guò)程表示懸浮培養(yǎng)，可以增加高產(chǎn)細(xì)胞的數(shù)量，不能提高單個(gè)細(xì)胞合成分泌紫草寧的量，C錯(cuò)誤；D、據(jù)圖2分析可知，隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加，紫草細(xì)胞的數(shù)量在增加，從而合成分泌的紫草寧葉在增加，但在培養(yǎng)到19天后紫草細(xì)胞數(shù)量和紫草寧的產(chǎn)量都已經(jīng)達(dá)到最大值，所以紫草細(xì)胞的數(shù)量和培養(yǎng)時(shí)間限制了紫草寧的產(chǎn)量，D正確。故選C。6.向鼠成纖維細(xì)胞中導(dǎo)入Oct3/4、Sox2、Kf4和c-Myc4四種基因，用多能性標(biāo)志物Fbx15篩選轉(zhuǎn)化后的細(xì)胞，可獲得誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞），該種細(xì)胞具有與胚胎干細(xì)胞（ES）相似的特性。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，除0ct3/4基因外，其余三種基因均可由其他基因代替。下列說(shuō)法正確的是（）A.iPS細(xì)胞具有組織特異性，只能分化為特定細(xì)胞B.可用顯微注射法直接將四種基因注入成纖維細(xì)胞C.iPS細(xì)胞和ES細(xì)胞具有不同的基因組成，但都能體現(xiàn)出細(xì)胞的全能性D.Oct3/4、Sox2、Klf4和c-Myc4四種基因是成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為iPS細(xì)胞的必需基因〖答案〗C〖祥解〗胚胎干細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞?！驹斘觥緼、iPS細(xì)胞具有與胚胎干細(xì)胞（ES）相似的特性，可以分化為多種細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、向鼠成纖維細(xì)胞中導(dǎo)入Oct3/4、Sox2、Kf4和c-Myc4四種基因，需要利用基因工程技術(shù)構(gòu)建基因表達(dá)載體后，才能導(dǎo)入受體細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、成纖維細(xì)胞被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞后，可重新分化為其他各種細(xì)胞，體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性，且全能性升高，C正確；D、據(jù)題干信息“除0ct3/4基因外，其余三種基因均可由其他基因代替”可知，Sox2、Klf4和c-Myc4三種基因不是成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為iPS細(xì)胞的必需基因，D錯(cuò)誤。故選C。7.下圖為豬輸卵管上皮細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程示意圖。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.甲→乙和丙→丁過(guò)程都會(huì)發(fā)生細(xì)胞分裂和分化B.丙、丁過(guò)程均會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制現(xiàn)象C.丙、丁過(guò)程中應(yīng)用松蓋培養(yǎng)瓶以保證培養(yǎng)氣體需要D.通過(guò)定期更換培養(yǎng)液防止培養(yǎng)過(guò)程中有毒物質(zhì)積累〖答案〗A〖祥解〗1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)2、圖示為豬輸卵管上皮細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程示意圖，圖中甲表示剪碎豬輸卵管，乙表示制成細(xì)胞懸液，丙表示原代培養(yǎng)，丁表示傳代培養(yǎng)?！驹斘觥緼、甲表示剪碎豬輸卵管，乙表示制成細(xì)胞懸液，丙表示原代培養(yǎng)，丁表示傳代培養(yǎng)，甲→乙和丙→丁過(guò)程都有細(xì)胞的分裂，不存在細(xì)胞分化，A錯(cuò)誤；B、丙原代培養(yǎng)過(guò)程和丁傳代培養(yǎng)過(guò)程均會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制現(xiàn)象，B正確；C、丙原代培養(yǎng)過(guò)程和丁傳代培養(yǎng)過(guò)程中，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，以保證細(xì)胞對(duì)氣體的需求，C正確；D、定期更換培養(yǎng)液可防止培養(yǎng)過(guò)程中有毒物質(zhì)的積累，對(duì)細(xì)胞造成危害，D正確。故選A。8.RNAm6A修飾（即RNA某位點(diǎn)的甲基化）可通過(guò)提高mRNA結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性來(lái)影響豬核移植早期胚胎的發(fā)育。在核移植中，核供體細(xì)胞的分化程度越高，細(xì)胞內(nèi)甲基轉(zhuǎn)移酶M的表達(dá)水平、RNA修飾水平和核移植重構(gòu)胚的發(fā)育效率越低。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.核移植過(guò)程通常采用顯微操作法去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核B.豬胎兒成纖維細(xì)胞比胚胎干細(xì)胞的RNA修飾水平要低C.RNAm6A修飾和DNA的甲基化都能影響基因的表達(dá)D.向重組細(xì)胞中導(dǎo)人M基因即可提高核移植胚胎的發(fā)育能力〖答案〗D〖祥解〗動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物。【詳析】A、核移植過(guò)程通常采用顯微操作法去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核，A正確；B、由題意“核供體細(xì)胞的分化程度越高，細(xì)胞內(nèi)甲基轉(zhuǎn)移酶M的表達(dá)水平、RNA修飾水平和核移植重構(gòu)胚的發(fā)育效率越低”可知，豬胎兒成纖維細(xì)胞比胚胎干細(xì)胞的分化程度高，RNA修飾水平越低，B正確；C、由題意可知，RNAm6A修飾是RNA某位點(diǎn)的甲基化，即RNAm6A修飾和DNA的甲基化都能影響基因的表達(dá)，C正確；D、向重組細(xì)胞中導(dǎo)入M基因，并且M基因能表達(dá)時(shí)，才能提高核移植胚胎的發(fā)育能力，D錯(cuò)誤。故選D。9.同尾酶是指一組識(shí)別序列不同，但切出的黏性末端相同的限制酶。下圖為EcoRI、Bam-HI、BglI和MboI四種限制酶的識(shí)別序列及酶切位點(diǎn)。下列說(shuō)法正確的是（）A.BamHI、BgⅡ、MboI屬于同尾酶，他們的識(shí)別序列相同B.使用同尾酶構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，切割位點(diǎn)的選擇范圍擴(kuò)大C.選用兩種不同的限制酶切割目的基因，都可以防止目的基因自身環(huán)化D.用DNA連接酶將BamHI和MboI形成的黏性末端連接后，可被二者重新切開〖答案〗B〖祥解〗由于同種限制酶切割得到的目的基因或質(zhì)粒的兩端黏性末端相同，會(huì)出現(xiàn)自體相連的現(xiàn)象，所以為了保證目的基因與載體的正確連接，通常用兩種識(shí)別序列和切割位點(diǎn)不同的限制酶同時(shí)處理含目的基因的DNA片段與載體?！驹斘觥緼、BamHI、BgⅡ、MboI識(shí)別序列不同，但切出的黏性末端相同，屬于同尾酶，A錯(cuò)誤；B、同尾酶是指一組識(shí)別序列不同，但切出的黏性末端相同的限制酶，使用同尾酶構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，切割位點(diǎn)的選擇范圍擴(kuò)大，不同的酶也能切割出相同的黏性末端，B正確；C、圖中BamHI、BgⅡ、MboI識(shí)別序列不同，但切出的黏性末端相同，故選用兩種不同的限制酶切割目的基因，不一定都可以防止目的基因自身環(huán)化，C錯(cuò)誤；D、用DNA連接酶將BamHI和MboI形成的黏性末端連接后，堿基序列與BamHI和MboI識(shí)別的序列均不同，由于限制酶具有專一性，故不可被二者重新切開，D錯(cuò)誤。故選B。10.在基因工程中可利用PCR進(jìn)行體外DNA片段的擴(kuò)增，PCR產(chǎn)物一般通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.PCR利用DNA熱變性原理，通過(guò)調(diào)節(jié)溫度來(lái)控制DNA雙鏈的解聚及與引物的結(jié)合B.耐高溫的DNA聚合酶需要激活，PCR反應(yīng)緩沖液中需要添加Mg2+C.電泳時(shí)DNA分子會(huì)向它所帶電荷相反的電極移動(dòng)，遷移速率與凝膠濃度、DNA分子大小和構(gòu)象有關(guān)D.瓊脂糖凝膠中的DNA擴(kuò)增引物分子被核酸染料染色后可在紫外燈下被檢測(cè)出來(lái)〖答案〗D〖祥解〗PCR原理：在高溫作用下，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過(guò)程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈?！驹斘觥緼、在PCR技術(shù)的過(guò)程中包括：高溫變性（解鏈）→低溫復(fù)性→中溫延伸三個(gè)步驟，因此DNA兩條鏈的解旋過(guò)程不需要解旋酶的催化，而是利用了DNA在高溫下變性的原理，通過(guò)控制溫度來(lái)控制雙鏈的解聚與引物的結(jié)合，A正確；B、PCR反應(yīng)的緩沖液中需添加Mg2+，用于激活耐高溫的DNA聚合酶，B正確；C、DNA分子在凝膠中的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象有關(guān)，一般DNA分子越大，遷移速度越慢，大分子物質(zhì)在通過(guò)瓊脂糖時(shí)受到較大阻力，因此雙鏈DNA分子片段長(zhǎng)度越大，在瓊脂糖中的移動(dòng)速率越小，C正確；D、凝膠中的DNA分子通過(guò)染色，可在波長(zhǎng)為300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來(lái)，所以瓊脂糖凝膠中的DNA分子和擴(kuò)增的產(chǎn)物（DNA）被核酸染料染色后，可在紫外燈下檢測(cè)出來(lái)，引物分子較小，不能被檢測(cè)，D錯(cuò)誤。故選D。11.巢式PCR是一種使用兩對(duì)引物擴(kuò)增完整的片段的PCR。第一對(duì)PCR引物擴(kuò)增片段和普通PCR相似。第二對(duì)為內(nèi)部引物結(jié)合在第一次PCR產(chǎn)物內(nèi)部，使得第二次PCR擴(kuò)增片段短于第一次擴(kuò)增，其過(guò)程如下圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.兩輪擴(kuò)增所需引物不同，原料和酶相同B.DNA的合成總是從子鏈的5＇端向3＇延伸與TaqDNA聚合酶的作用有關(guān)C.用內(nèi)引物進(jìn)行PCR時(shí)，擴(kuò)增n次后理論上需要2n個(gè)引物D.巢式PCR可增強(qiáng)擴(kuò)增的特異性〖答案〗C〖祥解〗PCR是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)。原理：DNA復(fù)制。前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶。過(guò)程：（1）高溫變性：DNA解旋過(guò)程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開）；（2）低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；（3）中溫延伸：合成子鏈。【詳析】A、第一輪所用引物為外引物，