DB42-T 192.1-2024 香菇生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程 第1部分：液體菌種

DB42CodeofpracticeforcultivationofLen湖北省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布I 2 2 4 5 7 7 8 8 9 本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)本文件是DB42/T192《香菇生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程》的第1部分。DB42/T192已經(jīng)發(fā)布了以請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。工與核農(nóng)技術(shù)研究所、湖北森源生態(tài)科技股份有丙、沈祥陵、周偉、高新章、焦海濤、史德芳、本文件實(shí)施應(yīng)用中的疑問，可咨詢湖北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳，聯(lián)系電話郵箱：hbsnab@126.com；對(duì)本文件的有關(guān)修改意見建議請(qǐng)反饋至宜昌市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，聯(lián)系電話郵箱：lling.s@163V確立，重點(diǎn)為香菇整個(gè)生產(chǎn)過程中不同生產(chǎn)環(huán)節(jié)的技術(shù)要求，亦便于本文件各部分單獨(dú)使用。DB42/T——第2部分：代料香菇秋栽與貯藏運(yùn)輸。目的在于規(guī)范代料香菇秋栽及貯1香菇生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程第1部分：液體菌種NY/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T1284食用菌菌種中雜菌及害蟲的檢驗(yàn)3.13.23.33.424生產(chǎn)條件4.2場(chǎng)地條件4.3廠房要求4,4生產(chǎn)設(shè)備與設(shè)施346發(fā)酵罐液體菌種（二級(jí)液體栽培種）6.2制備母種6.3搖瓶液體菌種生產(chǎn)6.3.1容器標(biāo)準(zhǔn)高壓蒸汽滅菌，在121℃,0.11MPa～0.1將接種后的錐形瓶放到搖床上進(jìn)行避光振蕩培養(yǎng)，保持溫度23℃~25℃,轉(zhuǎn)速150r/min～170r/min，6.4發(fā)酵罐液體菌種（二級(jí)液體栽培種）生產(chǎn)菌，蒸汽壓力為0.1MPa～0.15MPa、溫度121℃~124℃、滅菌30min～40min。5具體配方根據(jù)原料來源和營養(yǎng)需求，使用適宜的配方，用水應(yīng)符合GB5749要求。常用的配方見附錄A.2。在配料罐中將培養(yǎng)基按配方用水混合好，混合劑，通入壓縮空氣攪拌2min～3min，混合均勻。通入蒸汽將發(fā)酵罐及投入的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，保持罐內(nèi)溫度121℃,維持60min。發(fā)酵罐接種口處放置百級(jí)層流罩，用帶有手柄的接種火焰圈，蘸上95%的酒精，套在接種口上點(diǎn)燃將搖瓶液體菌種快速倒入發(fā)酵罐中，迅速蓋好并擰緊接種口，開始發(fā)酵生產(chǎn)。將堿液罐和消泡劑罐以及附屬的閥門管道等先空消滅菌，分別加入堿液(飽和碳酸鈉溶液）和消泡劑（0.09%的聚氧乙烯聚氧丙烯季戊四醇醚）再實(shí)消滅菌，在液體菌種發(fā)酵培養(yǎng)階段根據(jù)需求，通過自發(fā)酵罐溫度保持在23℃~25℃;培養(yǎng)基初始pH5，持在0.02MPa～0.04MPa；通過發(fā)酵罐的進(jìn)氣閥和排氣閥將通風(fēng)量調(diào)節(jié)至1:0.5V/V～1:1.2V/V(料6裝量體積8%～10%的接種量進(jìn)行接種，合理配置二級(jí)液體栽培種生產(chǎn)發(fā)酵罐的體積和數(shù)量，根據(jù)接種量7.2生產(chǎn)前的檢查及清洗7.3空消7,4液體菌種培養(yǎng)基配方和配制7.5投料與定容7.6發(fā)酵罐實(shí)消7.7冷卻7.8接種打開三級(jí)液體栽培種生產(chǎn)發(fā)酵罐接種口閥門和二級(jí)發(fā)酵罐出料口閥門(這些發(fā)酵罐附屬設(shè)施和兩個(gè)發(fā)酵罐之間連接的管道在空消、實(shí)消時(shí)和接種前都應(yīng)進(jìn)行滅菌)，將二級(jí)液體栽培種生產(chǎn)的液體菌種，積8%～10%的接種量進(jìn)行接種，接種完畢，擰緊接種口的閥門，開始進(jìn)行三級(jí)液體栽培種7.9碳源、氮源流加罐準(zhǔn)備7.10堿液、消泡劑流加罐準(zhǔn)備7.11發(fā)酵罐液體菌種培養(yǎng)條件發(fā)酵罐溫度23℃~25℃;培養(yǎng)基pH5，整個(gè)發(fā)酵過程pH4.5～5；發(fā)酵罐罐內(nèi)壓力保持在0.02MPa~0.04MPa；通過發(fā)酵罐的進(jìn)氣閥和排氣閥將通風(fēng)量調(diào)節(jié)至1:0.5V/V～1:17.12液體菌種培養(yǎng)時(shí)間7.13放罐指標(biāo)7對(duì)搖瓶液體菌種樣品、培養(yǎng)器滅菌后的空白培養(yǎng)基樣品、培養(yǎng)過程中定期取樣，每種樣品留樣5瓶），發(fā)酵罐液體菌種從開始生產(chǎn)24h后，每隔12h從取樣口取樣進(jìn)行以下項(xiàng)目檢測(cè)味者為霉菌、酵母等雜菌污染物，必要時(shí)進(jìn)行水封片鏡細(xì)菌檢驗(yàn)。按照無菌操作將少量培養(yǎng)液接種于營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)液中，置于28℃~30℃恒溫培養(yǎng)24h~48h，觀察培養(yǎng)液是否渾濁。培養(yǎng)液渾濁，為有細(xì)菌污染；培養(yǎng)液澄清，8.2液體菌種質(zhì)量培養(yǎng)液澄清透明，菌絲球、菌絲片段均勻懸浮于液體中，不分層，直徑小于3.5mm可見香菇菌種液體培養(yǎng)中特有的菌絲形態(tài)，菌絲粗劃痕處只有香菇菌絲生長而無霉菌、酵母和細(xì)菌9使用方法8料棒，每棒接種4個(gè)～6個(gè)接種點(diǎn)，每個(gè)接種點(diǎn)接種15mL～20mL。接種完畢后移至發(fā)菌室培養(yǎng)。10.2貯存液體菌種即成即用，在室溫15℃~18℃和持續(xù)通入無菌空氣的條件下可保存1d～2d。詳實(shí)記錄母種、搖瓶液體菌種和發(fā)酵罐液體菌種生產(chǎn)的每個(gè)環(huán)節(jié)，記錄內(nèi)容按附錄B執(zhí)行。生產(chǎn)記9A.1搖瓶菌種培養(yǎng)基配方MgSO4VB1水5g——20g3g3g1.5g5mg1L 20g4g20g5g2g1g5mg1LA.2發(fā)酵罐液體菌種培養(yǎng)基配方VB1M