DB13-T 5861-2023 疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)病原微生物核酸檢測(cè)質(zhì)量管理技術(shù)規(guī)范

13I本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專(zhuān)利本文件由河北省衛(wèi)生健康標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（HeB/TC21疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)病原微生物核酸檢測(cè)質(zhì)量管理技術(shù)規(guī)范本文件規(guī)定了疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)病原微生物核酸檢測(cè)質(zhì)量管理的基本要求、質(zhì)量保證、污染控本文件適用于疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)病原微生物核酸檢測(cè)質(zhì)下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用WS233-2017病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則GB19489-2008、JJF1874-2020、JJG646-2003.1實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀quantitativereal-time基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)原理，通過(guò)溫度變化循環(huán)程序進(jìn)行靶互酸片段的體外擴(kuò)增，同時(shí)對(duì)循環(huán)過(guò)程中熒光信號(hào)進(jìn)行實(shí)施采集和處理，定量或定性分析靶核酸片段的儀3.23.3為滿(mǎn)足核酸檢測(cè)質(zhì)量要求提供充分可信性所必要的有計(jì)劃的系4基本要求4.1.1疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)獨(dú)立設(shè)置，配備高壓滅菌區(qū)。區(qū)。各區(qū)域在物理空間上應(yīng)是完全相互獨(dú)立的，無(wú)論是在空間上還是在使用中，應(yīng)始終處于完全分2采用樣本處理、核酸提取及擴(kuò)增檢測(cè)為一體的自動(dòng)化分析儀，則標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分負(fù)壓工作區(qū)，氣壓由走廊向緩沖間、核心工作間方向遞減，形成定向氣流趨勢(shì)；各區(qū)之間氣壓應(yīng)由4.2設(shè)施設(shè)備4.2.1基本配置4.2.1.1試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)應(yīng)配備：a)2℃~8℃和-20℃冰箱；b)超凈工作臺(tái)或生物安全柜；a)2℃~8℃冰箱、-20℃或-80℃冰箱；j)專(zhuān)用個(gè)人防護(hù)裝備（依操作的病原微生c)消耗品：一次性手套、加樣器吸頭（帶）；注：本區(qū)配置視產(chǎn)物分析方法不同而定。實(shí)驗(yàn)室宜根據(jù)自己使4.2.2試劑與耗材使用部門(mén)根據(jù)核酸檢測(cè)需求，提出申購(gòu)計(jì)劃，對(duì)試劑的關(guān)鍵性能參數(shù)如精密度、符合率和檢出3試劑儲(chǔ)存應(yīng)按照試劑盒存儲(chǔ)要求進(jìn)行，超出有效期的試劑與耗材應(yīng)與有效期內(nèi)的試劑耗材分開(kāi)暫存。暫存期限不應(yīng)超過(guò)本單位與醫(yī)療廢物處置機(jī)構(gòu)簽訂的處理周期，并分別按照化學(xué)4.2.3質(zhì)控品檢測(cè)過(guò)程中需使用試劑盒自帶的質(zhì)控品和可溯源至有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的第三方質(zhì)控品。使用需遵守a)嚴(yán)格按質(zhì)控品說(shuō)明書(shū)操作；b)凍干質(zhì)控品的復(fù)溶要確保所用溶劑的質(zhì)量；c)凍干質(zhì)控品復(fù)溶時(shí)所加的量要準(zhǔn)確，并盡量保持每次加入量的一致；d)凍干質(zhì)控品復(fù)溶時(shí)應(yīng)輕輕搖勻，使內(nèi)溶物完全溶解，切忌劇烈震搖；核酸檢測(cè)涉及的檢測(cè)設(shè)備應(yīng)開(kāi)展周期檢定，校準(zhǔn)周期由實(shí)驗(yàn)室根據(jù)設(shè)備的實(shí)際使用情況，選擇校準(zhǔn)周期由實(shí)驗(yàn)室根據(jù)設(shè)備使用情況確定。也可參考校準(zhǔn)證書(shū)建議的有效時(shí)長(zhǎng)，并在使用前對(duì)4.2.5期間核查a)檢測(cè)/校準(zhǔn)方法要求；4.3人員4.3.1實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)指定專(zhuān)職或兼職負(fù)責(zé)人，應(yīng)具有中級(jí)以上專(zhuān)業(yè)技術(shù)職稱(chēng)或同等能力。實(shí)驗(yàn)室4.3.2檢測(cè)人員培訓(xùn)，并通過(guò)理論考核。上崗前應(yīng)由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人進(jìn)行能力確認(rèn)，并由熟悉檢測(cè)目的、程序、方法4.3.2.2檢測(cè)人員健康和培訓(xùn)管理應(yīng)符合WS233-4.3.3特種作業(yè)人員從事壓力容器的操作人員應(yīng)按照國(guó)家有關(guān)規(guī)定經(jīng)特種設(shè)備安全監(jiān)督管理部門(mén)培訓(xùn)，取得國(guó)家特44.3.4檔案管理員4,4樣本檢測(cè)人員應(yīng)根據(jù)樣本特點(diǎn)，對(duì)樣本的接收、流轉(zhuǎn)、保管、處理及樣本的識(shí)別等各個(gè)環(huán)節(jié)制定管a)上呼吸道樣本，包括鼻咽拭子、咽拭子等；b)下呼吸道樣本，深咳痰液、肺泡灌洗d)血清樣本，應(yīng)使用無(wú)抗凝劑的真空釆血應(yīng)置于-80℃或以下保存（如無(wú)-80℃保存條件，則于-20℃冰箱暫存）。應(yīng)設(shè)立專(zhuān)庫(kù)或?qū)９駟为?dú)保存樣本。種類(lèi)樣本（如全血、血漿、血清、皰疹液、腦脊液、痰、灌洗液、皰疹液、尿、便等）和不同病原時(shí)間、存取次數(shù)等）、銷(xiāo)毀等的規(guī)定。樣本處理過(guò)程應(yīng)按照核酸檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行。選擇磁珠法、膜吸附法等進(jìn)行核酸提取，可根據(jù)核酸提取試劑及擴(kuò)增體系的要求選擇配套的樣5.4聚合酶鏈反應(yīng)5.5產(chǎn)物分析符合弱陽(yáng)性質(zhì)控品能夠被檢出，陰性樣本對(duì)照、水、反應(yīng)液對(duì)照陰性，陽(yáng)性對(duì)照陽(yáng)性，陰性對(duì)5.6結(jié)果報(bào)告5檢測(cè)機(jī)構(gòu)應(yīng)按照RB/T214-2017要求出具檢測(cè)報(bào)告，有CMA資質(zhì)可加蓋C5.7室內(nèi)質(zhì)控1～3份陰性對(duì)照，分別是陰性樣本對(duì)照（可采用本實(shí)驗(yàn)室證實(shí)為陰性的標(biāo)本）、水與反應(yīng)液對(duì)照和僅反應(yīng)液對(duì)照。陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照隨機(jī)放5.8外部質(zhì)控消毒劑擦拭或噴灑消毒，然后用拖布蘸清水擦拭殘余消毒劑實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，生物安全柜應(yīng)以含有有效氯1000mg/L含氯消毒劑擦拭消毒作用30分鐘，然后，用濕巾擦拭殘余消毒劑。或用75%酒精（75%酒精濕巾）擦拭消毒，繼續(xù)通風(fēng)10分鐘后，開(kāi)啟紫外線消醫(yī)療廢物的處置應(yīng)按照《醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例》和《醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按以下要求收集檢測(cè)過(guò)程中產(chǎn)生的a)工作液配制過(guò)程產(chǎn)生的醫(yī)療廢物應(yīng)規(guī)范使用雙層黃色醫(yī)療廢物收集袋封裝，轉(zhuǎn)移至高壓滅b)核酸提取過(guò)程產(chǎn)生的廢物規(guī)范使用雙層黃色醫(yī)療廢物收集袋封裝，用含有效氯1000mg/L~c)擴(kuò)增完成后，反應(yīng)管不可開(kāi)蓋，應(yīng)規(guī)范使用雙層黃色醫(yī)療廢物收集袋封裝，轉(zhuǎn)移至高壓滅核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)與臨時(shí)集中存放處管理部門(mén)進(jìn)行醫(yī)療廢物交接，填寫(xiě)《實(shí)驗(yàn)室廢物交接登記6.4個(gè)人防護(hù)6實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備二級(jí)以上個(gè)人防護(hù)用品。實(shí)驗(yàn)室對(duì)個(gè)人防護(hù)用品的選擇、使用、維護(hù)應(yīng)有明確的程序和使用指導(dǎo)，可根據(jù)病原微生物危害等級(jí)分類(lèi)，采取相應(yīng)防護(hù)措施。檢測(cè)人