T-SDAHA 006-2024 獸用中藥材 香菇

CCSB42TraditionalChineseherblentinusforveterin2024-08-19發(fā)布山東省動(dòng)物保健品協(xié)會(huì)發(fā)布IT/SDAHA006—2024本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任。本文件由山東省動(dòng)物保健品協(xié)會(huì)提出并歸口。本文件起草單位：山東信得科技股份有限公司、山東省飼料獸藥質(zhì)量檢驗(yàn)中心、四川華西動(dòng)物藥業(yè)有限公司、西峽縣廣隆菇品購銷有限公司。本文件主要起草人：張傳津、章安源、李元曉、李秋、韓愛霞、邱夢潔、邱梅、李靜靜、蘇治華、解龍霄、張志民、翟文澤。本文件為首次發(fā)布。2T/SDAHA006—2024獸用中藥材香菇本文件規(guī)定了獸用中藥材香菇Lentinulaedodes(Berk.)pegler的技術(shù)要求、樣品、試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則、包裝、運(yùn)輸、貯存和保質(zhì)期。本文件適用于獸用中藥材香菇。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和實(shí)驗(yàn)方法中華人民共和國獸藥典二部3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4技術(shù)要求4.1性狀本品子實(shí)體菌蓋直徑在3cm～12cm之間，半球形或扁平球形至稍平展。表面菱色、淺褐色、深褐色至深肉桂色，有深色鱗片，有的有天然裂紋，菌肉白色，細(xì)密。菌褶白色，密、彎生、不等長。干品菌柄中生至偏生，白色，常彎曲，長0.8cm～3cm，直徑0.5cm～1cm，內(nèi)實(shí)，纖維質(zhì)。有香菇特有香味，微甘。4.2技術(shù)指標(biāo)技術(shù)指標(biāo)應(yīng)符合表1的要求。表1技術(shù)指標(biāo)供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上3T/SDAHA006—2024表1（續(xù)）按干燥品計(jì)算，以D-無水葡萄糖(C6H12O6)計(jì)，≥7.85樣品5.1組批同原料、同工藝、同班次生產(chǎn)，質(zhì)量均一、規(guī)格相同的產(chǎn)品為一批。5.2抽樣具體抽取樣數(shù)量規(guī)則如下：設(shè)每批的總包裝數(shù)量為N，當(dāng)N≤3時(shí)，每件取樣；當(dāng)N為3＜N≤300時(shí)，按抽樣量·N+1隨機(jī)抽樣；當(dāng)N＞300時(shí)，按照抽樣量·N/2+1隨機(jī)抽樣，混合。6試驗(yàn)方法6.1性狀取本品適量，在自然光下觀察。6.2菌絲、孢子顯微鑒別取本品適量，置載玻片上，加適量水合氯醛試液，加熱透化，蓋上蓋玻片，置顯微鏡下觀察：本品粉末灰黃色，菌絲眾多，無色透明，具有分支和橫隔。孢子橢圓形，有時(shí)一端稍尖，無色，壁表面光滑，長5μm～7μm，寬3μm～4μm。6.3木糖、半乳糖、葡萄糖鑒別取本品粗粉20g±2g，加水400mL，煎煮60min，過濾，濾渣再加水300mL，煎煮60min，過濾，合并濾液，濃縮至40mL左右（室溫），加入乙醇使含醇量達(dá)60%，邊加邊攪，靜置過夜，過濾，取沉淀，先加60%乙醇50mL洗滌，再加適量95%乙醇洗滌，60℃真空干燥，得多糖樣品。取多糖樣品0.1g，置具塞試管中，加1mol/L硫酸溶液6.5mL，置沸水浴中水解4h，取出，放冷，加碳酸鋇（固體）中和至中性，濾過，濾液作為供試品溶液。另取木糖對(duì)照品、半乳糖對(duì)照品、葡萄糖對(duì)照品，分別加水制成每1mL含5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。按照《中華人民共和國獸藥典》二部附錄薄層色譜法試驗(yàn)，吸取4T/SDAHA006—2024上述供試品溶液、對(duì)照品溶液各3μL，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板（10cm×20cm）上，以乙酸乙酯∶2mL苯胺溶于100mL丙酮中，再加入85％磷酸10mL），于85℃加熱10min。供試品溶液色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。6.4水分按照《中華人民共和國獸藥典》二部附錄水分測定法第一法執(zhí)行。6.5總灰分取本品3.0g±0.3g，按照《中華人民共和國獸藥典》二部附錄灰分測定法執(zhí)行。6.6特征圖譜按照附錄A執(zhí)行。6.7香菇多糖按照附錄B執(zhí)行。7檢驗(yàn)規(guī)則7.1檢驗(yàn)7.1.1檢驗(yàn)項(xiàng)目：技術(shù)指標(biāo)規(guī)定的全部項(xiàng)目。7.1.2檢驗(yàn)由生產(chǎn)企業(yè)的質(zhì)檢部門負(fù)責(zé)。7.1.3檢驗(yàn)合格的，簽發(fā)“產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)合格證”。7.2判定規(guī)則抽取樣品經(jīng)檢驗(yàn)，所檢項(xiàng)目全部合格，判定該批產(chǎn)品為合格。檢驗(yàn)結(jié)果如有1項(xiàng)指標(biāo)不合格，應(yīng)重新自同批產(chǎn)品中抽取兩倍量的樣品進(jìn)行復(fù)檢，以復(fù)檢結(jié)果為準(zhǔn)，若仍有不合格項(xiàng)，判定該批產(chǎn)品為不合格。8包裝、運(yùn)輸、貯存和保質(zhì)期8.1包裝包裝材料應(yīng)符合《中華人民共和國獸藥典》二部附錄及農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的規(guī)定。8.2運(yùn)輸運(yùn)輸設(shè)備應(yīng)清潔衛(wèi)生，不得與有毒、有害、有腐蝕性和含有異味的物品混裝，應(yīng)避免受潮、暴曬。8.3貯存5T/SDAHA006—2024陰涼密閉、干燥處貯存，不得與有毒、有害、有腐蝕性和含有異味的物品放在一起。8.4保質(zhì)期在符合規(guī)定的運(yùn)輸、貯存條件下，原包裝產(chǎn)品的保質(zhì)期與標(biāo)簽中標(biāo)明的保質(zhì)期一致。6T/SDAHA006—2024（規(guī)范性）香菇特征圖譜的測定液相色譜法A.1原理香菇粗粉經(jīng)煎煮、濃縮、醇沉、干燥得到香菇多糖樣品，采用高效分子排阻色譜法進(jìn)行分離，不同分子量的多糖相對(duì)保留時(shí)間不同，建立香菇多糖組分的特征圖譜。A.2試劑或材料除非另有規(guī)定，僅使用分析純?cè)噭?。A.2.1水：符合GB/T6682，一級(jí)A.2.295%乙醇。A.2.30.02mol/L磷酸二氫鉀溶液：取磷酸二氫鉀2.72g，用水稀釋至1000mL。A.2.460%乙醇：取無水乙醇60mL，用水稀釋至100mL。A.2.5對(duì)照品溶液的制備：取D-無水葡萄糖對(duì)照品（CAS:50-99-7,純度：99.9%）50mg，精密稱定，置100mL量瓶中，加0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液，使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。A.2.6微孔濾膜：孔徑0.45μm，水系。A.3儀器設(shè)備A.3.1高效液相色譜儀：配示差折光檢測器；A.3.2色譜柱：凝膠色譜柱，G4000PWxl，7.8mm×300mm，10μm，或性能相當(dāng)者；A.3.3分析天平：感量0.1mg，0.01mg；A.3.4真空干燥箱:真空度0.1MPa，精度±1℃;A.3.5旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。A.4試驗(yàn)步驟A.4.1供試品溶液制備取本品粗粉20g±2g，加水400mL，煎煮60min，過濾，濾渣再加水300mL，煎煮60min，過濾，合并濾液，濃縮至40mL左右（室溫），加入95%乙醇（A.2.2）使含醇量達(dá)60%，邊加邊攪，靜置過夜，過濾，取沉淀，先加60%乙醇（A.2.4）50mL洗滌，再加適量95%乙醇（A.2.2）洗滌，60℃真空干燥，得多糖樣品。取多糖樣品30mg，精密加入流動(dòng)相10mL，密封，水浴溶解，微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得。7T/SDAHA006—2024A.4.2測定分別精密吸取供試品溶液及對(duì)照品溶液各20μL，注入液相色譜儀，測定，記錄色譜圖。A.4.3液相色譜參考條件流動(dòng)相：0.02moL/L磷酸二氫鉀溶液。流速：0.6mL/min。柱溫：30℃。A.5試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理供試品色譜中應(yīng)有4個(gè)特征峰，計(jì)算各特征峰相對(duì)于參照物的保留時(shí)間。供試品中4個(gè)特征峰的相對(duì)保留時(shí)間，按式（1）計(jì)算：r相對(duì)保留時(shí)間=r樣r參照物………………式中：T相對(duì)保留時(shí)間——特征峰的相對(duì)保留時(shí)間；T樣——樣品特征峰的保留時(shí)間，單位為分鐘（minT參照物——參照物的保留時(shí)間，單位為分鐘（min）。測定結(jié)果保留至小數(shù)點(diǎn)后3位。A.6判定供試品色譜中4個(gè)特征峰的相對(duì)保留時(shí)間應(yīng)在規(guī)定值的±5%之內(nèi)，規(guī)定值為：0.508（峰1）、0.618（峰2）、0.866（峰3）、0.988（峰4）。香菇特征色譜圖見圖A.1。圖A.1香菇特征色譜圖8T/SDAHA006—2024（規(guī)范性）香菇多糖含量測定紫外-可見分光光度法B.1原理試料中的多糖在硫酸作用下脫水生成糠醛衍生物，與苯酚生成橙紅色物質(zhì)，在490nm有最大吸收，用紫外-可見分光光度法測定，對(duì)照品比較法定量。B.2試劑或材料除非另有規(guī)定，僅使用分析純?cè)噭.2.1水：符合GB/T6682，一級(jí)。B.2.280%乙醇：取無水乙醇80mL，用水稀釋至100mL。B.2.3苯酚：將適量苯酚置于80℃的水浴中溶解，然后將苯酚移至蒸餾瓶中。放入玻璃珠數(shù)蒸餾，棄去最初2min～3min蒸餾液，收集隨后的蒸餾液，待冷卻后備用。B.2.45%苯酚：取苯酚5mL，用水稀釋至100mL?，F(xiàn)用現(xiàn)配。B.2.5對(duì)照品溶液的制備：取D-無水葡萄糖對(duì)照品（CAS:50-99-7,純度：99.9%）10mg，精密稱定，置100mL量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取5mL，置10mL量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得。B.3儀器設(shè)備B.3.1紫外分光光度計(jì):波長范圍190nm～1100nm，精度±0.3nm,；B.3.2分析天平：感量0.1mg，0.01mg；B.3.3離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于5000rpm；B.3.4真空干燥箱:真空度0.1MPa，精度±1℃。B.4試驗(yàn)步驟B.4.1供試品溶液制備取本品粉末（過三號(hào)篩）0.5g±0.05g，精密稱定，置50mL三角燒瓶中，用5mL水浸潤，緩慢加入20mL無水乙醇，混勻，置超聲提取器中提取30min。4000rpm離心10min，棄去上清液。沉淀用80%乙醇溶液10mL洗滌，同法離心。用50mL水將沉淀轉(zhuǎn)入圓底燒瓶中，置水浴中回流提取2h。放冷，過濾，殘?jiān)盟礈?次～3次，合并濾液轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。B.4.2定量測定9T/SDAHA006—2024精密量取供試品溶液及對(duì)照品溶液各1mL，分別置20mL具塞試管中，精密加5%苯酚1.0mL，搖勻，再迅速精密加5mL硫酸，立即混勻，放置10min。置30℃水浴中反應(yīng)20min，取出，放置至室溫，以相應(yīng)試劑作空白參比，在490nm波長處測定吸光度，即得。B.5數(shù)據(jù)處理樣品中香菇多糖的含量ω以D-無水葡萄糖(C6H12O6)計(jì)，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)（%）表示，按式（1）計(jì)算：×100%……