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文檔簡介
ICS65.020.30
CCSB43
41
河南省地方標(biāo)準(zhǔn)
DB41/T2102—2021
多胎綿羊妊娠酮血癥防治技術(shù)規(guī)程
2021-01-26發(fā)布2021-04-25實施
河南省市場監(jiān)督管理局發(fā)布
DB41/T2102—2021
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定
起草。
本文件由河南省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。
本文件起草單位:河南農(nóng)業(yè)大學(xué)、河南省畜牧總站、浚縣中鶴牧業(yè)有限公司、安陽市畜禽改良站。
本文件主要起草人:陳其新、姜義寶、韓帥斌、李曉靜、王京、郭吉利、曹攀、李書舉、寧洋洋、
王賽賽、楊慧霞、徐澤君、王獻(xiàn)偉、程關(guān)勝、康紹華、肖瑩瑩、張繼文、劉旭樂、馬慧、李慧慧。
I
DB41/T2102—2021
多胎綿羊妊娠酮血癥防治技術(shù)規(guī)程
1范圍
本文件規(guī)定了多胎綿羊妊娠酮血癥防治的術(shù)語和定義、發(fā)病原因、發(fā)病特點、臨床癥狀、剖檢、診
斷與防治。
本文件適用于綿羊養(yǎng)殖場以及獸醫(yī)工作者對多胎綿羊妊娠酮血癥的診斷與防治。
2規(guī)范性引用文件
下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,
僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本
文件。
YY/T0014半自動生化分析儀
WS/T350血清葡萄糖測定參考方法
3術(shù)語和定義
下列術(shù)語和定義適用于本文件。
3.1
綿羊妊娠酮血癥OvinePregnancyketosis,OPK
又叫綿羊妊娠毒血癥(OvinePregnancyToxemia),是妊娠后期母羊碳水化合物及揮發(fā)性脂肪酸
代謝紊亂、胎兒營養(yǎng)需求與母體營養(yǎng)供應(yīng)失衡所致的一種代謝紊亂性疾病,以低糖(血糖,肝糖原)、
高酮體(酮血、酮尿)、代謝性酸中毒、肝臟脂肪浸潤以及臨床上表現(xiàn)神經(jīng)癥狀、躺臥等為主要特征。
3.2
酮體ketonebody;acetonebody
脂肪酸在肝臟中氧化分解產(chǎn)生的中間產(chǎn)物β-羥基丁酸、乙酰乙酸及丙酮。
3.3
血液生化指標(biāo)bloodbiochemicalindices
包括血液酮體、血清葡萄糖、血清鈣含量以及血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性。
4發(fā)病原因
4.1群體因素
OPK常見于懷雙羔或多羔的綿羊。群體性營養(yǎng)不良可能誘發(fā)該病,飼養(yǎng)方式改變也會使該病發(fā)病率
升高。肝片吸蟲等寄生蟲感染嚴(yán)重時會引起母羊肝功能損壞,可能誘發(fā)OPK。其它應(yīng)激因素,如惡劣的
天氣條件、抓羊、接種疫苗、突然更換日糧、群體性營養(yǎng)過剩等,都可能是該病的誘因。
4.2個體因素
1
DB41/T2102—2021
過肥和過瘦的綿羊都易發(fā)生OPK。一些疾病,如嚴(yán)重跛足、陰道脫垂、內(nèi)分泌紊亂、瘤胃酸中毒、
低血鈣等,都可能影響母羊食欲,誘導(dǎo)OPK的發(fā)生。
5發(fā)病特點
OPK主要危害飼養(yǎng)管理不當(dāng)?shù)娜焉锖笃冢?10d~145d)母羊。發(fā)病羊一般均為懷雙羔或多羔者,
懷多羔的母羊發(fā)病率會驟升。進(jìn)口肉用種綿羊的雜交后代比國內(nèi)純種多胎性地方品種羊更容易發(fā)病。該
病發(fā)生無明顯季節(jié)性,但冬、春發(fā)病相對較多。
6臨床癥狀
病羊通常體況較差,迅速消瘦,乳腺發(fā)育不良,腹部膨脹比較明顯。初期病羊精神倦怠,離群索居。
進(jìn)而肌肉功能紊亂,姿勢異常,肌肉緊張性、平衡和運動能力逐漸喪失,雙目失明,呼出氣體帶有明顯
的酮臭味。神經(jīng)肌肉功能紊亂包括頭部肌肉微微顫抖、耳和唇部抽搐,部分羊可能表現(xiàn)驚厥。到后期,
病羊姿勢異常,出現(xiàn)角弓反張姿勢,不時磨牙,常仰頭弓背臥在圈舍角落處,最后臥地不起,逐漸陷于
昏迷狀態(tài),呼吸困難,并在3d~4d后死亡。幸存的母羊常發(fā)生難產(chǎn)。即使成功產(chǎn)羔,新生羔羊也會因
宮內(nèi)發(fā)育遲緩,生后難以成活。
7剖檢
病羊尸體通常極度消瘦,子宮內(nèi)可見兩個或多個胎羔。尸檢可見的主要病理變化為肝、腎及腎上腺
脂肪變性。肝臟高度腫大,邊緣鈍化,質(zhì)地脆弱,呈土黃色或檸檬黃色,膽囊腫大,充滿黃綠色水樣膽
汁。腎臟腫大,顏色灰白而發(fā)軟,皮質(zhì)部呈棕土黃色,布滿紅色小點,髓質(zhì)部呈棕紅色,有紅色放射狀
條紋。腎上腺腫大,皮質(zhì)部質(zhì)地發(fā)脆,呈土黃色,髓質(zhì)部呈紫紅色。右心室呈現(xiàn)高度擴(kuò)張,冠狀溝有出
血斑點,心肌呈棕黃色,質(zhì)地稍脆。肺臟膨脹,肺尖高度氣腫,膈葉瘀血水腫,氣管及支氣管空虛。大
腦的軟腦膜有清亮液體,丘腦白質(zhì)有散在出血點。消化器官通常沒有明顯變化。
8診斷
8.1臨床診斷
主要根據(jù)妊娠母羊的病史和臨床表現(xiàn)進(jìn)行診斷。若在妊娠后期(特別是110d~145d)內(nèi),觀察到
妊娠綿羊出現(xiàn)精神沉郁、食欲不振、離群獨處、呼出酮臭味氣體、臥地不起等癥狀,可初步診斷為OPK。
剖檢時,實質(zhì)性器官(特別是肝臟)脂肪浸潤以及在子宮內(nèi)發(fā)現(xiàn)雙胎或多胎等都是重要的輔助性診斷依
據(jù)。
8.2實驗室診斷
8.2.1血液酮體檢測
8.2.1.1Rothera氏法尿酮和血清酮體定性檢查
尿樣采集:待病羊排尿時,立即用潔凈青揮素小瓶接取3mL~5mL,保存待檢。
血樣采集與血清制備:在病羊頸靜脈中1/3區(qū)域,用75%酒精棉球消毒皮膚,使用10mL一次性注射
器采取血樣5mL。將采集的血樣加入無抗凝劑的玻璃試管中,將采血管傾斜靜置30min~45min。待血
液完全凝固后,用移液器將血清移入儲存管,暫存于4℃冰箱,在4h~48h內(nèi)完成測定。
2
DB41/T2102—2021
檢查方法:取亞硝酸鐵氰化鈉3g、硫酸銨100g、無水碳酸銨50g,混勻,研細(xì),備用。檢查時,
取混合粉末少許放在玻片上,加血清或尿液2滴~3滴,立即出現(xiàn)紫紅色即為酮體陽性反應(yīng)。在定性后,
可按8.2.1.3、8.2.1.4進(jìn)行定量檢測。
8.2.1.2試紙條法尿酮定性/半定量檢查
牛尿酮用試紙條(urineketoneteststripsforcow,哈羅德(北京)科技有限公司),主要檢
查尿液中乙酰乙酸。采集尿液,手持試紙條終端,將試紙條浸入在尿液樣本中1s。然后將試紙條從容
器中取出,用吸水紙除去多余的尿液,放置60s。最后將出現(xiàn)的顏色與比色卡進(jìn)行比較,讀取結(jié)果。
不含酮的正常尿液呈陰性,即測試結(jié)果顯示負(fù)號陰性(Neg.)。如果尿中有酮體,試紙的顏色會逐
漸變成紫色,顏色越深說明尿酮含量越高(圖1)。在5mg/dl尿酮(約0.5mmol/L)時,對應(yīng)于血液β-
羥丁酸1.4mmol/L。尿酮檢測試紙條達(dá)到4mmol/L時(深紅色陽性結(jié)果),其對應(yīng)血液β-羥丁酸3.0
mmol/L。
圖1尿酮測定比色卡
8.2.1.3試條法血酮定量檢測
試條法血酮(β-羥丁酸)定量檢測操作步驟見附錄A。
8.2.1.4試劑盒法血酮定量檢測
試劑盒法血酮(β-羥丁酸)定量檢測操作步驟見附錄B。
8.2.1.5血酮生理性/病理性參考值
健康妊娠后期(110d~145d)母羊血液β-羥丁酸濃度為0.15mmol/L±0.16mmol/L,95%生理性
參考值范圍為≤0.46mmol/L。妊娠后期(110d~145d)發(fā)病母綿羊血液β-羥丁酸為4.63mmol/L±1.26
mmol/L,95%病理性參考值范圍為2.16mmol/L~7.10mmol/L。
8.2.2其它病理生化指標(biāo)測定
8.2.2.1血樣采集及制備
同8.2.1.1。
8.2.2.2血清生化指標(biāo)測定方法
8.2.2.2.1血清GLU:血清葡萄糖含量按WS/T350規(guī)定的方法進(jìn)行測定。
8.2.2.2.2血清Ca:血清鈣含量按世界衛(wèi)生組織推薦的鄰甲酚酞絡(luò)合銅法測定。
8.2.2.2.3血清AST:血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性采用試劑盒(IFCC法)進(jìn)行測定。
8.2.2.2.4血清ALT:血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性采用試劑盒(IFCC法)進(jìn)行測定。
8.2.2.3生理性常值與病理性參考值
生理性常值與病理性參考值見表1。
3
DB41/T2102—2021
表1健康羊與OPK羊血清生化指標(biāo)參考值
健康羊OPK羊
指標(biāo)95%生理性95%病理性
平均值平均值
參考值范圍參考值范圍
血清GLU/mmol/L2.27±0.391.50~3.030.87±0.55≤1.95
血清Ca/mmol/L2.27±0.391.50~3.031.93±0.301.34~2.52
血清AST/U/L73.84±13.4747.47~100.27115.36±25.8064.79~165.93
血清ALT/U/L19.88±6.008.12~31.6426.87±3.5819.85~33.89
8.3確診
根據(jù)發(fā)病特點、臨床癥狀可作出初步診斷,經(jīng)實驗室診斷予以確診。符合6或7的癥狀,且按8.2.1.3
或8.2.1.4定量檢測血酮≥2.16mmol/L,或者8.2.1.2試紙條法尿酮定性/半定量檢查結(jié)果達(dá)到4mmol/L
以上時(圖1中陽性結(jié)果3以上),確定為臨床型OPK羊。符合6或7的大部分癥狀,且按8.2.1.3或8.2.1.4
定量檢測血酮在2.16mmol/L~0.46mmol/L,或按8.2.1.1血酮檢測結(jié)果為陽性,或按8.2.1.2試紙條法
尿酮定性/半定量檢查為圖1中的陽性結(jié)果1和陽性結(jié)果2時,定為OPK亞臨床型病羊。
9防治
9.1防治原則
防治總原則是“以防為主,治療為輔”。OPK主要見于母羊妊娠后期,預(yù)防重點在于改善母羊妊娠
后期的營養(yǎng)、合理分群、加強(qiáng)運動、盡量減少各種應(yīng)激等方面。但是,即使能做到早期診斷,OPK的治
療效果一般也不很理想。目前主要是對癥治療,即補(bǔ)糖、保肝、解毒。
9.2預(yù)防方法
9.2.1維持妊娠后期營養(yǎng)均衡
妊娠后期胎羊生長發(fā)育十分迅速,羔羊出生重的60%~80%是在妊娠最后1個半月時期取得的。因此,
必須保證充足、均衡的營養(yǎng)供給。在妊娠的最后6周,要給多胎妊娠母羊飼喂足量的優(yōu)質(zhì)粗飼料和精料,
日糧營養(yǎng)水平要比單胎妊娠母羊高25%以上。
9.2.2加強(qiáng)妊娠后期管理
可根據(jù)懷羔羊數(shù)目不同,對妊娠母羊進(jìn)行適當(dāng)?shù)姆秩?,以便進(jìn)行適宜飼養(yǎng)管理。在產(chǎn)羔前4周~6周測
量母羊血酮濃度,可準(zhǔn)確地評估母羊的營養(yǎng)狀況。加強(qiáng)舍飼母羊的管理,每只妊娠母羊所占漏糞地板羊
舍面積不應(yīng)低于1.4m2,運動場面積不低于3m2~5m2。每天保證運動2h左右,以增加母羊體質(zhì)。應(yīng)盡
量減少各種應(yīng)激,以避免OPK發(fā)生。
9.2.3補(bǔ)飼RPC和RPM
9.2.3.1單獨補(bǔ)飼RPC
4
DB41/T2102—2021
在妊娠110d至分娩前補(bǔ)飼RPC(膽堿有效含量為50%,過瘤胃率≥85%),每只6g/d,每天分2次飼
喂。對于中等飼養(yǎng)管理條件下的多胎母羊群,單獨補(bǔ)飼RPC可使母羊群體OPK發(fā)病率降低13%,血酮水平
降低34%,血糖水平升高18.5%。
9.2.3.2同時補(bǔ)飼RPC和RPM
在妊娠110d至分娩前,給每只妊娠母羊補(bǔ)飼RPC(膽堿有效含量為50%,過瘤胃率≥85%)6g/d和
RPM(過瘤胃率≥85%,小腸吸收率95%)2g/d~5g/d,可產(chǎn)生良好的協(xié)同效應(yīng)。
9.3治療方法
每天2次靜脈注射50%葡萄糖,用量為1mL/kg體重~2mL/kg體重;或靜脈注射20%葡萄萄10mL/kg
體重,配合肌肉注射胰島素。也可口服丙酸鈉2g/kg體重,連用7d,或口服丙二醇或甘油1mL/kg體重,
每日2次~3次,持續(xù)2d~10d。
肌內(nèi)注射0.2mg/kg體重~0.4mg/kg體重的醋酸可的松或靜脈注射氫化可的松0.2mg/kg體重~0.4
mg/kg體重,也可肌肉注射氫化潑尼松1.5mg/kg體重,輔之以靜脈注射葡萄糖及鈣、磷、鎂制劑。
為緩解低血鈣,可將1.2mL/kg體重的硼葡萄糖酸鈣多點皮下注射,同時靜脈注射復(fù)合維生素B或維
生素B1、葡萄糖液。若同時補(bǔ)充鈣、磷,療效會更好。
為糾正酸中毒,可靜脈注射碳酸氫鈉。若胎羔死亡或流產(chǎn),可對母羊進(jìn)行抗生素治療。
在139d妊娠至分娩前,可注射0.4mL/kg~0.5mL/kg體重的地塞米松,24h左右可誘導(dǎo)母綿羊分
娩。
9.4治愈標(biāo)準(zhǔn)
母羊臨床癥狀消失,采食量恢復(fù)正常水平;生理指標(biāo)恢復(fù)正常,即定量檢測結(jié)果血酮含量<
0.46mmol/L,血糖濃度≥1.50mmol/L,血鈣≥1.50mmol/L,血清AST≤100.27U/L,血清ALT≤31.64U/L。
5
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A
A
附錄A
(資料性)
試條法定量測定妊娠母羊血酮水平
A.1檢測原理
綿羊血酮包括三種化合物,其中丙酮占2%,乙酰乙酸占20%,β-羥丁酸占78%。本法主要是通過檢
測血液中β-羥丁酸的含量來表示其酮體含量。試條表面的β-羥丁酸脫氫酶可催化血液中β-羥丁酸與
NAD反應(yīng)生成乙酰乙酸,而氧化型輔酶I則被還原成為還原型輔酶I。生成的還原型輔酶I在340nm處有最
大吸收峰,其吸光度值與樣品β-羥丁酸的含量呈正相關(guān)。
A.2材料和方法
A.2.1材料
5mL含乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管,采血針,怡成TNN型奶牛血酮快速檢測儀,TNN-1型奶牛血酮
試條。
A.2.2方法
A.2.2.1血樣采集
A.2.2.1.1使用EDTA作為抗凝劑制備抗凝血采血管,加入血樣后抗凝劑終濃度在3.7μmol/L~5.4
μmol/L間。
A.2.2.1.2加入血樣占抗凝管的4/5,使血樣與抗凝劑充分混合。
A.2.2.1.3采血針必須為一次性使用產(chǎn)品,也不能使用碘酒消毒,以免引起數(shù)值偏高。
A.2.2.1.4采集血液樣品后盡快測試。
A.2.2.2上機(jī)測定
先打開血酮體測試儀,調(diào)整校正碼與試條包裝上校正碼一致。進(jìn)入“插入”狀態(tài)后,將試條插入到
儀器內(nèi)。待儀器顯示“進(jìn)血”字樣時,將采集到的血樣通過試條反應(yīng)區(qū)上、下虹吸孔自然吸入到反應(yīng)區(qū)。
30s倒計時結(jié)束后,讀取結(jié)果。
A.3判定標(biāo)準(zhǔn)
判定標(biāo)準(zhǔn)見表A.1。
表A.1試條法定量測定血酮結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)
β-羥丁酸結(jié)果判定
≥2.16mmol/L臨床型OPK
2.16mmol/L~0.46mmol/L亞臨床型OPK
≤0.46mmol/L正常妊娠母羊
6
DB41/T2102—2021
B
B
附錄B
(資料性)
試劑盒法定量測定妊娠母羊血酮水平
B.1檢測原理
通過檢測血液中β-羥丁酸的含量來確定酮體含量。基本原理同A.1。
B.2材料與方法
B.2.1材料
5mL采血管,采血針,β-羥丁酸(D3-H)檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所),移液槍,1.5
mL離心管,自動/半自動生化分析儀。其中半自動生化分析儀的使用應(yīng)遵守YY/T0014的規(guī)定。
B.2.2方法
B.2.2.1血樣采集
采集綿羊頸靜脈血樣。樣品為新鮮靜脈EDTA抗凝全血,采集后直接測試。確保采血針首次使用,不
能使用碘酒消毒,以免引起數(shù)值偏高。
B.2.2.2上機(jī)測定
B.2.2.2.1先打開自動/半自動生化分析儀。
B.2.2.2.2輸入上機(jī)參數(shù):主波長為340nm,反應(yīng)方法為兩點終點法,反應(yīng)溫度為37℃,反應(yīng)方向設(shè)
為向上,校準(zhǔn)類型定為線性。
B.2.2.2.3反應(yīng)體系:在1.5mL離心管內(nèi),分別準(zhǔn)備空白對照管、標(biāo)準(zhǔn)管以及樣品測定管。各管內(nèi)反
應(yīng)體系組成見表B.1。
表B.1血酮測定反應(yīng)體系組成
成分空白標(biāo)準(zhǔn)樣品測定
雙蒸水10--
標(biāo)準(zhǔn)品-10-
血清樣本--10
試劑一240240240
試劑二606060
B.2.2.2.4混勻,讀取吸光度A1,置37℃孵育5min,讀取吸光度A2。
B.2.2.2.5計算樣品測定管β-羥丁酸濃度:ΔA=A1-A2,β-羥丁酸(mmol/L)=(測定ΔA值-空白Δ
A值)/(標(biāo)準(zhǔn)ΔA值-空白ΔA值)*標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mmol/L)。
B.2.3判定標(biāo)準(zhǔn)
判定標(biāo)準(zhǔn)見表B.2。
7
DB41/T2102—2021
表B.2試劑盒法定量測定血酮結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)
β-羥丁酸結(jié)果判定
≥2.16mmol/L臨床型OPK
2.16mmol/L~0.46mmol/L亞臨床型OPK
<0.46mmol/L正常妊娠母羊
8
DB41/T2102—2021
前言
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本文件主要起草人:陳其新、姜義寶、韓帥斌、李曉靜、王京、郭吉利、曹攀、李書舉、寧洋洋、
王賽賽、楊慧霞、徐澤君、王獻(xiàn)偉、程關(guān)勝、康紹華、肖瑩瑩、張繼文、劉旭樂、馬慧、李慧慧。
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斷與防治。
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3術(shù)語和定義
下列術(shù)語和定義適用于本文件。
3.1
綿羊妊娠酮血癥OvinePregnancyketosis,OPK
又叫綿羊妊娠毒血癥(OvinePregnancyToxemia),是妊娠后期母羊碳水化合物及揮發(fā)性脂肪酸
代謝紊亂、胎兒營養(yǎng)需求與母體營養(yǎng)供應(yīng)失衡所致的一種代謝紊亂性疾病,以低糖(血糖,肝糖原)、
高酮體(酮血、酮尿)、代謝性酸中毒、肝臟脂肪浸潤以及臨床上表現(xiàn)神經(jīng)癥狀、躺臥等為主要特征。
3.2
酮體ketonebody;acetonebody
脂肪酸在肝臟中氧化分解產(chǎn)生的中間產(chǎn)物β-羥基丁酸、乙酰乙酸及丙酮。
3.3
血液生化指標(biāo)bloodbiochemicalindices
包括血液酮體、血清葡萄糖、血清鈣含量以及血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性。
4發(fā)病原因
4.1群體因素
OPK常見于懷雙羔或多羔的綿羊。群體性營養(yǎng)不良可能誘發(fā)該病,飼養(yǎng)方式改變也會使該病發(fā)病率
升高。肝片吸蟲等寄生蟲感染嚴(yán)重時會引起母羊肝功能損壞,可能誘發(fā)OPK。其它應(yīng)激因素,如惡劣的
天氣條件、抓羊、接種疫苗、突然更換日糧、群體性營養(yǎng)過剩等,都可能是該病的誘因。
4.2個體因素
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