雞血樣與組織樣品采集技能操作規(guī)范DB41-T 1703-2018

ICS11.220

B41

DB41

河南省地方標準

DB41/T1703—2018

雞血樣與組織樣品采集技能操作規(guī)范

2018-09-29發(fā)布2018-12-29實施

河南省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布

DB41/T1703—2018

前言

本標準按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。

本標準由河南省畜牧局提出并歸口。

本標準起草單位：駐馬店市動物疫病預防控制中心、駐馬店市獸藥飼料（動物產(chǎn)品）質(zhì)量檢驗監(jiān)測

中心、西平縣動物疫病預防控制中心、西平縣獸醫(yī)院、遂平縣動物疫病預防控制中心、平輿縣動物衛(wèi)生

監(jiān)督所、正陽縣動物疫病預防控制中心。

本標準主要起草人：付顯東、楊晴、薛雙、朱鳳霞、劉萌、陳奎、路方、陶順啟、郭小玲、王艷、

羅志忠、楊洋、王學敏、趙新建、王德清、孫國松、馬萌萌。

I

DB41/T1703—2018

雞血樣與組織樣品采集技能操作規(guī)范

1范圍

本標準規(guī)定了雞翅靜脈采血、心臟采血、咽喉/泄殖腔拭子采樣、解剖與采樣的技術(shù)與操作規(guī)范。

本標準適用于雞病診斷、流行病學調(diào)查、疫情監(jiān)測、疫苗免疫效果評估、活雞調(diào)運、評估認證等雞

血樣和組織樣品的采集。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運輸技術(shù)規(guī)范

3術(shù)語和定義

該標準界定的下列術(shù)語和定義適用于本文件。為了便于使用，以下重復列出了NY/T541中的某些

術(shù)語和定義。

3.1

樣品

取自動物或環(huán)境，擬通過檢驗反映動物個體、群體或環(huán)境有關(guān)狀況的材料或物品。

3.2

采樣

按照規(guī)定的程序和要求，從動物或環(huán)境取得一定量的樣本，并經(jīng)過適當?shù)奶幚?，留作待檢樣品的過

程。

4個人防護

采樣人員應做好個人安全防護，穿戴口罩、工作帽、防護服、防護靴、雙層手套，必要時戴防護眼

鏡、面罩。

5采樣原則

5.1先排除后采樣

凡發(fā)現(xiàn)急性死亡的動物，懷疑患有炭疽時，不得解剖。應先采集血樣，進行血液抹片鏡檢，確定不

是炭疽后，方可解剖采樣。

5.2合理選擇采樣方法

5.2.1應根據(jù)采樣的目的，內(nèi)容和要求合理選擇樣品采集的種類、數(shù)量、部位與抽樣方法。樣品數(shù)量

應滿足流行病學調(diào)查和生物統(tǒng)計學的要求。

1

DB41/T1703—2018

5.2.2診斷或被動監(jiān)測時，應選擇癥狀典型成病變明顯或有患病征兆的畜禽，疑似污染物；在無法確

定病因時，采樣種類應盡量全面。

5.2.3主動監(jiān)測時，應根據(jù)畜禽日齡，季節(jié)、周邊疫情情況估計其流行率，確定抽樣單元。在抽樣單

元內(nèi)，應遵循隨機取樣原則。

5.3采樣時限

采集亡動物的病料，應于動物死亡后2h內(nèi)采集，無法完成時，夏天不得超過6h，冬天不得超過24h

5.4無菌操作

采樣過程應注意無菌操作，刀，剪、攝子，器皿，注射器，針頭等采樣用具應事先嚴格滅菌，每種

樣品應單獨采集。

5.5盡量減少應激和損害

活體動物采樣時，應避免過度刺激或害動物；也應避免對采樣者造成危害。

5.6生物安全防護

采樣人員應加強個人防護，嚴格遵守生物安全操作的相關(guān)規(guī)定，嚴防人獸共患病感染：同時，應做

好環(huán)境消毒以及動物或組織的無害化處理，而免污染環(huán)境，防止疫病傳播。

6翅靜脈采血

6.1采樣準備

采樣箱、保溫箱或保溫瓶、酒精棉、干棉球、碘伏、鑷子、采血器、離心管及自封袋、簽字筆、記

號筆、樣品采集登記表、垃圾袋和防護用品。

6.2保定及消毒

側(cè)臥保定，展開翅膀，露出腋窩部，拔掉羽毛，在翅下靜脈處用碘伏棉球由里向外做點狀螺旋式消

毒。

6.3采樣

6.3.1拇指壓迫近心端，待血管怒張后，用采血器，平行刺入翅靜脈，放松對近心端的按壓，把針芯

向外緩慢拉，使血液流入采血器；

6.3.2拔出針頭后用干棉球壓迫止血；

6.3.3采血后，將采血器活塞外拉預留血清析出空間。將采血器套上護針帽，去除推桿；

6.3.4對所采樣品進行編號并放入保溫箱或保溫瓶；

6.3.5填寫樣品采集登記表（見附錄A）。

7心臟采血

7.1采樣準備

采樣箱、保溫箱或保溫瓶、酒精棉、碘酒棉、鑷子、采血器、離心管及自封袋、簽字筆、記號筆、

樣品采集登記表、垃圾袋和防護用品等。

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7.2消毒

選定采血部位，用碘伏棉球由里向外做點狀螺旋式消毒。

7.3采樣

7.3.1側(cè)臥保定采血

抓住兩翅及雙腿，右側(cè)臥保定，在觸及心搏動明顯處，或胸骨脊前端至背部下凹處連線的1/2處垂

直或稍向前方刺入2cm～3cm處插入，回抽見有回血時，順著心臟的跳動頻率把針芯向外緩慢拉，使血

液流入采血器。

7.3.2仰臥保定采血

將雞仰臥保定，使雞胸骨朝上，用手指壓迫嗉囊，露出胸前口，用裝有長針頭的采血器，將針頭沿

其鎖骨俯角刺入，順著體中線方向水平刺入心臟，回抽見有回血時，順著心臟的跳動頻率把針芯向外緩

慢拉使血液流入采血器。

7.3.3拔出針頭后用干棉球壓迫止血；

7.3.4采血后，將采血器活塞外拉預留血清析出空間。將采血器套上護針帽，去除推桿；

7.3.5在采血器上標明樣品編號并將樣品保存至保溫箱或保溫瓶；

7.3.6填寫樣品采集登記表（見附錄A）。

8咽喉/泄殖腔拭子采樣

8.1采樣準備

棉拭子、離心管及自封袋、PBS（見附錄B）、保溫箱或保溫瓶、樣品采集登記表、記號筆、簽字筆、

垃圾袋等。

8.2采樣

8.2.1無菌棉拭子插入咽喉及上顎裂處來回刮3～5次取咽喉分泌物。

8.2.2無菌棉拭子插入泄殖腔約1.5cm～2.0cm，旋轉(zhuǎn)2～3圈后粘上糞便。

8.2.3將棉拭子放入含有PBS的1.5mL塑料離心管中，蓋上管蓋。

8.2.4對所采樣品進行編號并放入保溫箱或保溫瓶。

8.2.5填寫樣品采集登記表（見附錄A）。

9解剖與采樣

9.1采樣準備

注射器、普通剪刀、手術(shù)剪、酒精棉球、酒精燈、火柴、托盤、鑷子、自封袋、尸體袋、保溫箱或

保溫瓶、消毒液桶、樣品采集登記表、記號筆、垃圾袋等。

活雞，無放血致死。

9.2消毒

9.2.1解剖前將雞放在消毒液中完全浸濕。

9.2.2暴露皮下組織和肌肉后用酒精棉球沿切口方向擦拭消毒雞體。

3

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9.2.3每剪開一個部位或采集完一種組織均用酒精棉球擦拭、火焰消毒剪刀兩面和鑷子。

9.3采樣

9.3.1雞放入托盤，先將腹壁和大腿內(nèi)側(cè)的皮膚切開，用力將大腿按下，使髖關(guān)節(jié)脫臼，將兩大腿向

外展開，從而固定雞體；

9.3.2于胸骨末端后方將皮膚橫切，與兩側(cè)大腿的豎切口連接，然后將胸骨末端后方的皮膚拉起，向

前分離到頭部，使整個胸腹及頸部的皮下組織和肌肉充分暴露；

9.3.3在胸骨后腹部橫切穿透腹壁，從胸骨兩側(cè)向前方剪斷肋骨和烏喙骨，然后將胸骨用力向上向前

翻轉(zhuǎn)，暴露體腔；

9.3.4無菌采集各種組織，采樣順序一般是先采集肝臟，然后依次采集脾臟、腎臟、肺臟等組織，每

種樣品均不能夾帶毛、膽囊或其他雜質(zhì)；

9.3.5沿口腔向下剪開頸部皮膚肌肉，使喉頭暴露，采集喉頭氣管；

9.3.6剪開頭部皮膚，打開頭骨，采集腦組織；

9.3.7每種樣品分別裝入自封袋密封，采樣完畢后將尸體裝入尸體袋；

9.3.8對所采樣品進行編號并放入保溫箱或保溫瓶；

9.3.9填寫樣品采集登記表（見附錄A）。

4

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附錄A

（規(guī)范性附錄）

樣品采集登記表

樣品采集登記表見表A.1。

表A.1樣品采集登記表

被采樣單位名稱

采樣地點

聯(lián)系人聯(lián)系電話郵編

動物類別樣品類型采樣日期

動物種類日齡存欄量樣品數(shù)量樣品編號

動物臨床情況

末次免疫

免疫末次

疫苗類型疫苗廠家疫苗批號免疫次數(shù)至采樣

病種免疫劑量

的間隔天數(shù)

動物免

疫情況

檢測目的

被采樣單位蓋章或簽名采樣單位蓋章采樣人簽名

年月日年月日

備注

注1：樣品類型指全血、咽喉/泄殖腔拭子、組織樣品等。

注2：動物種類指種雞、蛋雞、肉雞等。

注3：此單一式三份，第一聯(lián)由采樣單位保存、第二聯(lián)隨樣品、第三聯(lián)由被采樣單位留存。

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附錄B

（規(guī)范性附錄）

PH7.2、0.01mol/LPBS的配制

（1）配制25×PBS：稱量2.74g磷酸氫二鈉和0.79g磷酸二氫鈉加蒸餾水至100mL。

（2）配制1×PBS：稱量40mL25×PBS，加入8.5g氯化鈉，加蒸餾水至1000mL。

（3）用氫氧化鈉或鹽酸調(diào)PH至7.2.

（4）滅菌或過濾。

（5）PBS一經(jīng)使用，于4℃保存不超過3周。

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6

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前言

本標準按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。

本標準由河南省畜牧局提出并歸口。

本標準起草單位：駐馬店市動物疫病預防控制中心、駐馬店市獸藥飼料（動物產(chǎn)品）質(zhì)量檢驗監(jiān)測

中心、西平縣動物疫病預防控制中心、西平縣獸醫(yī)院、遂平縣動物疫病預防控制中心、平輿縣動物衛(wèi)生

監(jiān)督所、正陽縣動物疫病預防控制中心。

本標準主要起草人：付顯東、楊晴、薛雙、朱鳳霞、劉萌、陳奎、路方、陶順啟、郭小玲、王艷、

羅志忠、楊洋、王學敏、趙新建、王德清、孫國松、馬萌萌。

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雞血樣與組織樣品采集技能操作規(guī)范

1范圍

本標準規(guī)定了雞翅靜脈采血、心臟采血、咽喉/泄殖腔拭子采樣、解剖與采樣的技術(shù)與操作規(guī)范。

本標準適用于雞病診斷、流行病學調(diào)查、疫情監(jiān)測、疫苗免疫效果評估、活雞調(diào)運、評估認證等雞

血樣和組織樣品的采集。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運輸技術(shù)規(guī)范

3術(shù)語和定義

該標準界定的下列術(shù)語和定義適用于本文件。為了便于使用，以下重復列出了NY/T541中的某些

術(shù)語和定義。

3.1

樣品

取自動物或環(huán)境，擬通過檢驗反映動物個體、群體或環(huán)境有關(guān)狀況的材料或物品。

3.2

采樣

按照規(guī)定的程序和要求，從動物或環(huán)境取得一定量的樣本，并經(jīng)過適當?shù)奶幚?，留作待檢樣品的過

程。

4個人防護

采樣人員應做好個人安全防護，穿戴口罩、工作帽、防護服、防護靴、雙層手套，必要時戴防護眼

鏡、面罩。

5采樣原則

5.1先排除后采樣

凡發(fā)現(xiàn)急性死亡的動物，懷疑患有炭疽時，不得解剖。應先采集血樣，進行血液抹片鏡檢，確定不

是炭疽后，方可解剖采樣。

5.2合理選擇采樣方法

5.2.1應根據(jù)采樣的目的，內(nèi)容和要求合理選擇樣品采集的種類、數(shù)量、部位與抽樣方法。樣品數(shù)量

應