DB14-T 2332-2021 綿羊腹腔鏡輸精技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.30CCSB4314TechnicaloperationcodeforsheeplaparoscopicinseDB14/T2332—2021前言 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 4輸精場所及人員要求 5輸精準(zhǔn)備 26輸精 27輸精檔案 3附錄A（資料性）腹腔鏡輸精常用器械（以100只母羊標(biāo)準(zhǔn)） 4附錄B（規(guī)范性）輸精器械、用具的洗滌與消毒 5附錄C（規(guī)范性）稀釋液的配置 6IDB14/T2332—2021本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由山西省農(nóng)村農(nóng)業(yè)廳提出并監(jiān)督實(shí)施。本文件由山西省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口。本文件起草單位：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)本文件主要起草人：石磊、喬利英、劉巧霞、張婷、侯東來、任有蛇、張春香、姚繼廣、楊子森、張建新、劉建華、郭建文、王軍偉、焦忠欣、張記芳，王海瑞。DB14/T2332—2021綿羊腹腔鏡輸精技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了綿羊腹腔鏡輸精技術(shù)的術(shù)語和定義、輸精場所及人員要求、輸精準(zhǔn)備、輸精、輸精檔案的具體方法和操作程序。本文件適用于綿羊種羊場、繁殖場和規(guī)模養(yǎng)羊戶的配種員對綿羊進(jìn)行腹腔鏡輸精的技術(shù)操作。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB20557山羊冷凍精液YY0627.1內(nèi)鏡器械NY/T3186羊冷凍精液生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程3術(shù)語和定義GB20557和NY/T3186界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1腹腔鏡輸精laparoscopicinsemination借助腹腔鏡和專用輸精槍將精液直接輸入到發(fā)情的母羊子宮角使其妊娠的一種人工授精技術(shù)。4輸精場所及人員要求4.1場所選擇應(yīng)選擇與配母羊數(shù)量多且相對集中的地方建設(shè)人工授精站（點(diǎn)輸精改良范圍以距人工授精站（點(diǎn)）半徑距離不超過20km為宜。4.2場所應(yīng)具備的條件4.2.1精液處理室面積8m2～10m2，要求屋頂、墻壁、地面平整，并安裝紫外線燈，室溫應(yīng)保持在20℃左右。4.2.2輸精室地面用0.1%的新潔爾滅溶液或3%～5%煤酚皂溶液噴灑消毒，打開紫外線燈消毒30min～60min。4.2.3待配母羊棚（圈）面積30m2～40m2，與輸精室相連通。4.3人員要求1DB14/T2332—2021輸精員為體檢合格并能熟練操作腹腔鏡的技術(shù)人員。輸精前手臂清潔、消毒，更換消毒后的工作服并佩戴口罩和無菌乳膠手套。5輸精準(zhǔn)備5.1.1精液種類新鮮精液、低溫保存精液和冷凍精液。5.1.2輸精器械輸精器械參見附錄A，應(yīng)符合YY0627.1標(biāo)準(zhǔn)的相關(guān)規(guī)定。輸精器械、用具的洗滌和消毒參見附錄B。5.1.3精液準(zhǔn)備符合要求的新鮮精液稀釋后可直接輸精，稀釋液配方參見附錄C，低溫保存的精液需復(fù)溫至37℃,細(xì)管冷凍精液浸入38℃~40℃的水浴中解凍15s～20s后立即取出，將精液置于10mL的小試管中混勻。5.1.4精液檢測新鮮精液的精子活率≥0.7，低溫保存精液精子活率≥0.5，冷凍精液精子活率≥0.3。保持有效精子數(shù)在5000萬個/mL以上。5.1.5發(fā)情鑒定用試情法進(jìn)行發(fā)情鑒定。每天早晨和傍晚各進(jìn)行一次，每次30min。按試情公羊與母羊的比例以1:20為宜。試情公羊進(jìn)入母羊群后，發(fā)現(xiàn)主動接近公羊并接受公羊爬跨的母羊，鑒定為發(fā)情母羊并標(biāo)記。5.1.6輸精母羊的準(zhǔn)備母羊在輸精前24h斷水?dāng)嗔稀Ｊ中g(shù)前將待輸精母羊保定于手術(shù)架上，使用獸用麻醉藥靜松靈或鹿眠寶等按推薦劑量注射進(jìn)行麻醉，然后將母羊乳房前的被毛剃光，用5%的碘伏消毒后用一次性的消毒紙巾擦拭干凈；推進(jìn)輸精室并將保定架抬起至456輸精6.1輸精時間鑒定發(fā)情的母羊在12h～24h輸精。6.2輸精流程6.2.1切口用手術(shù)刀尖在母羊腹中線兩側(cè)乳房基部的2cm～5cm處縱切兩個0.5cm左右的切口，切口部位位于母羊乳頭前方8cm～10cm，刺破皮膚即可，注意避開可見血管。6.2.2穿刺用食指和拇指握住穿刺針與套管針的前段，露出針尖約2cm左右，從切口處分別從兩側(cè)斜向刺入穿刺針與套管針。2DB14/T2332—20216.2.3觀察子宮和卵巢取出穿刺針，將輸精槍和內(nèi)窺鏡分別插入套管，向腹腔內(nèi)充氣5s～8s，使腹腔壁與內(nèi)臟分離。打開光源，利用內(nèi)窺鏡觀察母羊子宮，如果觀察不到子宮，可借助輸精管撥動羊腹腔內(nèi)的器官和脂肪，保證子宮能夠在光源范圍內(nèi)暴露。找到子宮后先觀察子宮角及卵巢上的排卵點(diǎn)，有新鮮排卵點(diǎn)的母羊立即輸精。6.2.4注入精液將裝好精液的輸精槍針頭以點(diǎn)式快速刺入的手法刺入子宮角上1/3處，慢慢輸入精液0.1mL～0.15mL，隨后拔出針頭，找到另一側(cè)子宮角，以同樣的方法輸入精液，每只母羊輸入精液0.2mL～0.3mL，如果發(fā)情母羊沒有排卵點(diǎn)則放棄輸精。6.3術(shù)后護(hù)理輸精完成后將母羊放平，按照3萬～4萬單位/kg體重肌注長效青霉素后，在手術(shù)部位噴傷口愈合噴劑，用固定卡固定傷口；輸精后即可歸群，24h內(nèi)不可采食過多。未輸精的母羊也需要進(jìn)行術(shù)后護(hù)理。7輸精檔案輸精的羊群要建立輸精檔案，內(nèi)容包括母羊編號、發(fā)情狀況、精液信息、輸精時間、妊娠情況和輸精員信息等內(nèi)容，保存時間3年以上。3DB14/T2332—2021腹腔鏡輸精常用器械（以100只母羊標(biāo)準(zhǔn)）名稱數(shù)量名稱數(shù)量6-7mm穿刺套管10mL注射器醫(yī)用手術(shù)推車腹腔鏡專用輸精槍帶壓力閥小型氣泵開膣器6000K以上冷光源載玻片電動剪毛剪蓋玻片帶恒溫臺顯微鏡中性洗滌劑顯微鏡專用擦鏡紙工作服醫(yī)用凡士林記號筆100℃溫度計試情布50mL量筒軟毛刷100mL量筒毛巾75%酒精肥皂95%酒精玻璃棒無菌口罩恒溫箱無菌手套干燥箱消毒紙巾搪瓷盤鞋套鑷子羊用保定架水浴鍋長效青霉素碘伏記錄本獸用麻醉劑電子天平生理鹽水5mL移液器22-23號手術(shù)刀片滅菌紗布蒸餾水2mL離心管保溫瓶4DB14/T2332—2021（規(guī)范性）輸精器械、用具的洗滌與消毒B.1器具洗滌B.1.1玻璃器皿玻璃器皿使用前先用自來水清洗，然后在洗滌劑水中用毛刷刷洗或在超聲波清洗儀中用洗滌劑水洗滌30min以上。B.2金屬器械金屬器械在洗滌劑水中刷洗干凈。所用器械在每次使用后，將采精、輸精及與精液接觸的所有器械都要求用洗滌劑徹底清洗干凈，再用清水沖洗2～3次，最后用蒸餾水沖洗一次，并保持清潔、干燥，存放于清潔的柜內(nèi)。B.3器具消毒B.3.1玻璃器皿的消毒玻璃器皿可包裝好后放入高壓滅菌器內(nèi)100℃滅菌15～20min。B.3.2腹腔鏡的消毒腹腔鏡輸精槍和穿刺套管經(jīng)高壓蒸汽消毒，要求消毒溫度達(dá)到115℃,維持30min。當(dāng)連續(xù)為數(shù)只母羊輸精時，每使用完一次，輸精器的前端插入到碘伏溶液中浸泡，取出后可直接為另一只母羊輸精。使用后的開膣器需洗滌干凈消毒后，再用滅菌生理鹽水棉球沖洗兩次。5DB14/T2332—2021稀釋液的配置C.1奶類稀釋液將健康母?；蚰秆虻男迈r乳汁用多層紗布過濾，將過濾后的乳汁經(jīng)水?。?0℃~95℃)加熱10min~15min，冷卻至至室溫，除去奶皮，也可直接購買脫脂純牛奶，加入青霉素