檢驗科B-利鈉肽（BNP）測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

玉環(huán)縣人民醫(yī)院檢驗科文件編號：JYK-3-XZ-001版本/修訂號：C/0主題內(nèi)容2012新增作業(yè)指導(dǎo)書生效日期：20120301第2頁共3頁編寫制定日期審核審核日期：核準(zhǔn)執(zhí)行日期李永臣2012-03-01李永臣2012-03-01章林華2012-03-01B-利鈉肽（BNP）測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1、檢驗申請臨床醫(yī)生需認(rèn)真填寫檢驗申請單。2、標(biāo)本采集與處理2.1受檢者準(zhǔn)備：無特殊要求。2.2容器準(zhǔn)備：潔凈干燥塑料試管，勿用玻璃試管。2.3標(biāo)本采集：常規(guī)靜脈采血2ml。2.4抗凝劑選擇：必須使用EDTA抗凝。2.5標(biāo)本的標(biāo)記：送檢單和標(biāo)本試管上在整個過程中應(yīng)有統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識符。若為條形碼，號碼上必須同時包含患者姓名、檢驗?zāi)康摹?biāo)本類型、標(biāo)本采集時間等信息。2.6標(biāo)本保存條件2.6.1全血或血漿標(biāo)本在2~8℃可穩(wěn)定24h；在-20℃以下保存3個月。冰凍標(biāo)本僅最多可凍融三次。2.6.2全血或血漿標(biāo)本在室溫下4h內(nèi)必須測定完畢，否則須分離血漿加蓋在-20℃以下保存。冰凍標(biāo)本測定前須輕輕顛倒混勻直至溶解，恢復(fù)至室溫再離心。2.6.3已完成測定的標(biāo)本至少保存7d。2.7.1當(dāng)標(biāo)本從原始容器中轉(zhuǎn)移到新的容器時，新的容器要有與原容器一致的標(biāo)識。2.7.2已完成測試的標(biāo)本保持完整的識別號，置于2~8℃冰箱內(nèi)保存7d。2.7.3如發(fā)生標(biāo)本的遺失，原始標(biāo)本管的破裂，應(yīng)作完整的說明記錄。2.8標(biāo)本的運送/外送2.8.1標(biāo)本的運送必須與檢驗申請單同時進(jìn)行。已分離的血清或血漿標(biāo)本加蓋后按標(biāo)本保存條件運送,交接雙方核對后應(yīng)有交接記錄。3、標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)3.1標(biāo)本量不夠以及不符合標(biāo)本采集與處理（EDTA抗凝的塑料試管）的標(biāo)本。3.2對于測定和吸樣有干擾的標(biāo)本：如近期使用鼠源性單克隆抗體和患者體內(nèi)有大量的嗜異性抗體。3.3無法確認(rèn)與申請單對應(yīng)關(guān)系的標(biāo)本。4、方法原理Architecti1000SRSTAT腦鈉肽是采用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析（ChemiluminesentMicroparticleImmunoAssay,CMIA）技術(shù)，兩步法對待測樣品中的腦鈉肽進(jìn)行定量檢測。5、試劑及其他用品準(zhǔn)備5.1試劑盒名稱:BNP5.2試劑盒來源/產(chǎn)品號：美國雅培公司5.3試劑盒保存：在2~8℃冰箱保存下可穩(wěn)定至有效期內(nèi)，不可冰凍。在儀器試劑倉內(nèi)可穩(wěn)定336h。5.4試劑盒準(zhǔn)備：液體試劑，開蓋后即可使用。5.5試劑盒主要成分：R1a：磁性微粒子結(jié)合的單克隆抗BNP抗體R1b：0.1NNaOHR1c：包被AP酶的單克隆鼠抗BNP抗體5.6其他用品準(zhǔn)備：RV杯、樣品杯、1號液MUP底物、3號液MatrixCell洗滌液、4號液Line稀釋液。6、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品采用美國雅培公司提供的定標(biāo)液和朗道質(zhì)控品。7、適用儀器Architecti1000SR美國雅培公司。8、標(biāo)本檢測步驟裝載試劑→進(jìn)行校準(zhǔn)→進(jìn)行質(zhì)控→輸入患者標(biāo)本檢測項目→加載樣品→患者標(biāo)本測定→結(jié)果復(fù)核→報告9、分析參數(shù)反應(yīng)類型：雙抗體夾心法標(biāo)本量144μL報告單位：pg/mL10、結(jié)果計算分析儀內(nèi)部能自動對分析結(jié)果進(jìn)行計算11、可報告范圍和異常值處理(超出檢測范圍)根據(jù)臨床需求確定是否稀釋重測。當(dāng)結(jié)果高于檢測值，儀器推薦的稀釋倍數(shù)為1∶5。12、操作性能12.1精密度:根椐NCCLS修改的EP5-A的要求，對三份不同BNP濃度的人血清用分別檢測20d,每天2次（每次重復(fù)測定）,n=80:當(dāng)濃度分別為95、440、1503時,總CV分別為9.4、7.5、8.1(%)；批內(nèi)CV分別為6.3、4.5、4.3(%)。12.2等價性：通過與一個已經(jīng)接受的臨床方法的相關(guān)性研究進(jìn)行等價性評估(NCCLS的EP59-A)。從AXSYM檢測上得到人BNP的結(jié)果同參考方法的結(jié)果進(jìn)行比較。分析中同時包括正常和異常濃度的人BNP樣本，y=1.03x+23(r=0.956)。12.3特異性：標(biāo)本中溶血、黃疸及高脂血基本不影響檢測結(jié)果，一般也無明顯干擾。12.4靈敏度：分析靈敏度為15pg/mL。12.5可報告范圍:15~5000pg/mL。12.6方法的有限性及干擾因素：接受過鼠源性單抗體的患者由于體內(nèi)產(chǎn)生人抗鼠抗體和患者體內(nèi)有大量的嗜異性抗體，可以明顯干擾免疫測定。13、室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則與失控限13.1每星期或更換新瓶或新批號試劑時做室內(nèi)質(zhì)控。13.2根據(jù)每批號質(zhì)控品的BNP的均值及失控線，作Levey-Jennings控制圖。質(zhì)控結(jié)果如超過失控線，查找原因糾正。14、當(dāng)校準(zhǔn)或質(zhì)控結(jié)果達(dá)不到預(yù)設(shè)標(biāo)準(zhǔn)時的糾正措施14.1檢查試劑：核對批號、有效期，有無受污染及變質(zhì)的可能。14.2檢查校準(zhǔn)品：核對批號、有效期，校準(zhǔn)品加樣及位置是否正確。14.3檢查質(zhì)控品：核對批號、有效期，質(zhì)控品加樣及位置是否正確。14.4檢查儀器（管路、光路等）是否正常，以進(jìn)行適當(dāng)?shù)木S護(hù)后再校準(zhǔn)。14.5檢查其他因素。15、當(dāng)檢驗系統(tǒng)（儀器）不能正常工作時應(yīng)采取的補救措施15.1立即報告室主任,及時聯(lián)系維修工程師。15.2由另一臺同類儀器替代使用。首先應(yīng)做定標(biāo)、質(zhì)控，再進(jìn)行標(biāo)本的檢測。15.3如果沒有替代儀器，應(yīng)根據(jù)儀器恢復(fù)（修復(fù)）工作的時間決定，通知發(fā)檢驗報告單窗口推遲取報告時間。待測標(biāo)本分離血漿加蓋置2~8℃下只保存24h，否則置于-20℃以下保存，等儀器維修復(fù)后再檢測。16、參考值/參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平0-65歲<119pg/ml65-75歲<160pg/ml75-100歲<254pg/ml17、臨床意義BNP是診斷左心室功能不全的良好指標(biāo)，可用于無癥狀心衰（NYHAI級）的早期診斷；用于監(jiān)控心衰、急性冠脈綜合癥和預(yù)后評價；用于評價左心室超負(fù)荷（如動脈高壓和肥大性梗阻性心肌病）；可作為左心室射血分?jǐn)?shù)的替代指標(biāo)。18、結(jié)果審核以及與相關(guān)項目的聯(lián)系測定結(jié)果必須經(jīng)過認(rèn)真審核來確認(rèn)此檢測結(jié)果是可靠的，審核通過應(yīng)有審核者簽名。在結(jié)果審核發(fā)出之前，核查患者的一般臨床資料：如性別、年齡和診斷的疾病是否相符合，與其他心臟標(biāo)志、心臟