AbMole脂肪間質(zhì)干細胞衍生的外泌體通過WNTbeta-catenin信號傳導途徑促進真皮成纖維細胞的傷口愈合

AbMole|脂肪間質(zhì)干細胞衍生的外泌體通過WNT/beta-catenin信號傳導途徑促進真皮成纖維細胞的傷口愈合皮膚成纖維細胞的分化、遷移和增殖被認為是皮膚傷口愈合的關(guān)鍵因素。脂肪來源的間充質(zhì)干細胞（ADMSCs）及其外泌體（ADMSC-Exos）被認為是組織再生的潛在治療工具；然而，皮膚傷口愈合的潛在機制仍未被很好地理解。在這項研究中，我們成功地獲得了ADMSC-Exos，并發(fā)現(xiàn)ADMSC-Exos在體外以劑量依賴的方式顯著促進成纖維細胞的遷移和增殖。用ADMSC-Exos處理的成纖維細胞中COL-I和COL-III的表達水平明顯增加，而α-SMA的表達水平則下降。此外，WNT2b和β-catenin的蛋白表達增強證實了WNT/β-catenin信號通路的激活，WNT/β-catenin抑制劑（XAV939）逆轉(zhuǎn)了ADMSC-Exos對傷口愈合和β-catenin表達的促進作用?？傊?，我們的研究部分闡明了ADMSC-Exos在傷口愈合中的機制，說明了ADMSC-Exos作為一種新的治療方法促進皮膚傷口愈合的潛力。XAV939（Abmole，M1796，純度>98%）通過抑制tankyrase1/2而選擇性抑制Wnt/β-catenin介導的轉(zhuǎn)錄，IC50為11nM/4nM，調(diào)節(jié)軸蛋白水平，但對CRE，NF-κB和TGF-β無作用。Fig.6EfectofADMSC-ExosonwoundhealingafterapplicationofWNT2b/β-cateninpathwayinhibitor.我們應(yīng)用WNT2b/β-catenin通路抑制劑（XAV939），進一步觀察ADMSCExos對傷口愈合的變化。經(jīng)WNT通路抑制劑處理后，ADMSCExos+X處理組的傷口閉合率較ADMSC-Exos處理組下降，且在第7天和第14天差異有統(tǒng)計學意義，表明阻斷WNT2b/β-catenin通路可抑制ADMSC-Exos促進的傷口愈合（圖6A，B）。雖然XAV939治療組和空白對照組在第3天和第14天的愈合率沒有統(tǒng)計學差異，但XAV939治療組在第7天的愈合率明顯低于空白對照組，表明WNT通路的激活對傷口愈合有積極作用。H&E分析顯示，三組在第14天沒有明顯的炎癥細胞浸潤，纖維組織變得致密、有序、連續(xù)上皮化，尤其是ADMSC-Exos組，其次是ADMSC-Exos+X組。Masson分析顯示，ADMSC-Exos組的膠原蛋白更為緊密，排列最為有序和連續(xù)。在XAV939處理組中，膠原蛋白的排列是無序的，比較粗糙和稀疏，上皮層的程度最小（圖6C）。Fig.7ImmunohistochemicalanalysisafteruseofWNTpathwayinhibitor(XAV939).XAV939處理后，免疫組化平均光密度（AOD）分析顯示，WNT2b蛋白在ADMSC-Exos中的表達量增加，高于ADMSCExos+X處理組、對照組和XAV939處理組，而XAV939處理組的表達量最低（圖7A,C）；ADMSCExos組的β-catenin高于ADMSC-Exos+X處理組、XAV939處理組和對照組（圖7B,D）。β-catenin在XAV939治療組的表達水平是最低的。這些結(jié)果表明，XAV939阻斷了傷口愈合過程中ADMSCExo