AbMole脂肪間質(zhì)干細(xì)胞衍生的外泌體通過WNTbeta-catenin信號(hào)傳導(dǎo)途徑促進(jìn)真皮成纖維細(xì)胞的傷口愈合

AbMole|脂肪間質(zhì)干細(xì)胞衍生的外泌體通過WNT/beta-catenin信號(hào)傳導(dǎo)途徑促進(jìn)真皮成纖維細(xì)胞的傷口愈合皮膚成纖維細(xì)胞的分化、遷移和增殖被認(rèn)為是皮膚傷口愈合的關(guān)鍵因素。脂肪來源的間充質(zhì)干細(xì)胞（ADMSCs）及其外泌體（ADMSC-Exos）被認(rèn)為是組織再生的潛在治療工具；然而，皮膚傷口愈合的潛在機(jī)制仍未被很好地理解。在這項(xiàng)研究中，我們成功地獲得了ADMSC-Exos，并發(fā)現(xiàn)ADMSC-Exos在體外以劑量依賴的方式顯著促進(jìn)成纖維細(xì)胞的遷移和增殖。用ADMSC-Exos處理的成纖維細(xì)胞中COL-I和COL-III的表達(dá)水平明顯增加，而α-SMA的表達(dá)水平則下降。此外，WNT2b和β-catenin的蛋白表達(dá)增強(qiáng)證實(shí)了WNT/β-catenin信號(hào)通路的激活，WNT/β-catenin抑制劑（XAV939）逆轉(zhuǎn)了ADMSC-Exos對(duì)傷口愈合和β-catenin表達(dá)的促進(jìn)作用?？傊覀兊难芯坎糠株U明了ADMSC-Exos在傷口愈合中的機(jī)制，說明了ADMSC-Exos作為一種新的治療方法促進(jìn)皮膚傷口愈合的潛力。XAV939（Abmole，M1796，純度>98%）通過抑制tankyrase1/2而選擇性抑制Wnt/β-catenin介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄，IC50為11nM/4nM，調(diào)節(jié)軸蛋白水平，但對(duì)CRE，NF-κB和TGF-β無作用。Fig.6EfectofADMSC-ExosonwoundhealingafterapplicationofWNT2b/β-cateninpathwayinhibitor.我們應(yīng)用WNT2b/β-catenin通路抑制劑（XAV939），進(jìn)一步觀察ADMSCExos對(duì)傷口愈合的變化。經(jīng)WNT通路抑制劑處理后，ADMSCExos+X處理組的傷口閉合率較ADMSC-Exos處理組下降，且在第7天和第14天差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明阻斷WNT2b/β-catenin通路可抑制ADMSC-Exos促進(jìn)的傷口愈合（圖6A，B）。雖然XAV939治療組和空白對(duì)照組在第3天和第14天的愈合率沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但XAV939治療組在第7天的愈合率明顯低于空白對(duì)照組，表明WNT通路的激活對(duì)傷口愈合有積極作用。H&E分析顯示，三組在第14天沒有明顯的炎癥細(xì)胞浸潤，纖維組織變得致密、有序、連續(xù)上皮化，尤其是ADMSC-Exos組，其次是ADMSC-Exos+X組。Masson分析顯示，ADMSC-Exos組的膠原蛋白更為緊密，排列最為有序和連續(xù)。在XAV939處理組中，膠原蛋白的排列是無序的，比較粗糙和稀疏，上皮層的程度最?。▓D6C）。Fig.7ImmunohistochemicalanalysisafteruseofWNTpathwayinhibitor(XAV939).XAV939處理后，免疫組化平均光密度（AOD）分析顯示，WNT2b蛋白在ADMSC-Exos中的表達(dá)量增加，高于ADMSCExos+X處理組、對(duì)照組和XAV939處理組，而XAV939處理組的表達(dá)量最低（圖7A,C）；ADMSCExos組的β-catenin高于ADMSC-Exos+X處理組、XAV939處理組和對(duì)照組（圖7B,D）。β-catenin在XAV939治療組的表達(dá)水平是最低的。這些結(jié)果表明，XAV939阻斷了傷口愈合過程中ADMSCExo