生物學(xué)基本技能 教案 V 消毒與滅菌

基本技能V消毒與滅菌一、目標(biāo)與任務(wù)本次教學(xué)主題基本技能V消毒與滅菌學(xué)時授課班級授課日期授課地點主講教師實驗?zāi)康?.了解消毒和滅菌的概念。2.掌握實驗室以及日常生活中常用的消毒方法和技術(shù)。3.掌握實驗室以及日常生活中常用的滅菌方法和技術(shù)技能分解消毒與滅菌的概念消毒的技術(shù)方法滅菌的技術(shù)方法實驗操作實訓(xùn)思政元素強化衛(wèi)生觀念，樹立正確的消殺意識；合理消毒與滅菌教學(xué)方法講授法、演示法、討論法、案例分析法、課堂觀摩法、實訓(xùn)法教學(xué)媒體教材、課件、教案、多媒體、投影儀二、教學(xué)進度教學(xué)過程教學(xué)內(nèi)容教學(xué)活動教學(xué)時間（分鐘）教師活動學(xué)生活動理論知識講授一、消毒與滅菌的概念消毒是指用物理或化學(xué)的方法殺死病原微生物，但不一定能殺死細菌芽孢的方法過程。消毒處理后的物品可能仍然是帶菌的，不屬于無菌物品。消毒的對象往往是空間、環(huán)境以及物品表面。消毒的方法通常包括熏蒸、照射、涂抹、浸泡等。滅菌是指用物理或化學(xué)的方法殺滅全部微生物，包括致病和非致病微生物以及芽孢的方法過程。經(jīng)過滅菌處理后的物品屬于無菌物品，滅菌的對象往往是物品的外部整體直到物品的內(nèi)部。滅菌的方法通常包括高壓、高溫、過濾等。二、消毒的技術(shù)方法（一）消毒劑的種類根據(jù)消毒劑的成分可把消毒劑分為含氯消毒劑、過氧化物類消毒劑、醛類消毒劑、醇類消毒劑、含碘消毒劑、酚類消毒劑、環(huán)氧乙烷、雙胍類消毒劑和季銨鹽類消毒劑九大類。根據(jù)殺滅的微生物類別以及消毒效果，把消毒劑分為高效消毒劑、中效消毒劑、低效消毒劑三大類。根據(jù)消毒劑使用的場所可以分為家用級消毒劑、食品級消毒劑、工業(yè)級消毒劑三大類。（二）常用消毒劑的配制（1）石灰水配制。石灰水常用10%～20%的乳劑，將生石灰與水按1∶7混合反應(yīng)后濾除殘渣即可得到。使用時應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用，不宜久儲。（2）0.1%新潔爾滅配制。配制0.1%新潔爾滅時，先用量筒量取水9800mL倒入配液桶中，放冷至30℃以下；再用量筒量取5%新潔爾滅200mL倒入水中，攪拌均勻后備用；最后在容器上貼標(biāo)簽，注明品名、濃度、配制時間、配制人。（3）3%來蘇爾配制。配制3%來蘇爾時，先用量筒量取水10000mL倒入配液桶中，放冷至30℃以下；再用量筒量取50%來蘇爾640mL倒入水中，攪拌均勻后備用；最后在容器上貼標(biāo)簽，注明品名、濃度、配制時間、配制人。（4）75%乙醇溶液配制。配制75%乙醇溶液時，先用量筒量取藥用乙醇（95%）7890mL倒入配液桶中，加溫度在30℃以下的水2110mL,攪拌均勻后，用酒精比重計測溶液的酒精度；再用95%乙醇或注射用水補足，使酒精度達75％；最后在容器上貼標(biāo)簽，注明品名、濃度、配制時間、配制人。（5）3%過氧化氫溶液配制。配制3%過氧化氫溶液時，先用量筒量取水9000mL倒入配液桶中，放冷至30℃以下；再用量筒量取30%過氧化氫1000mL倒入水中，攪拌均勻后備用；最后在容器上貼標(biāo)簽，注明品名、濃度、配制時間、配制人。（6）5%苯酚溶液配制。配制5%苯酚溶液需要取苯酚50g加入1000mL水中，充分混合溶解后在容器上貼標(biāo)簽，注明品名、濃度、配制時間、配制人。高濃度的苯酚具有強刺激性和腐蝕性，因此在配制過程中需要戴護目鏡、手套等必要的保護裝備。苯酚應(yīng)儲存于陰涼、通風(fēng)的庫房中，遠離火種、熱源、避免光照，庫溫一般不可超過30℃。（7）漂白粉懸液配制。一般配成10%～20%的混懸液，先稱好漂白粉倒入大桶中，將團塊搗碎，加入少量水調(diào)成漿，再倒入其余水充分?jǐn)嚢琛，F(xiàn)用現(xiàn)配，配好后貼標(biāo)簽，注明品名、濃度、配制時間、配制人。（8）2%氫氧化鈉溶液配制。配制2%氫氧化鈉溶液時，先用托盤天平稱取氫氧化鈉80g放入5000mL燒杯中；再加純化水至4000mL，攪拌使其完全溶解后，移至配液桶中備用；最后在容器上貼標(biāo)簽，注明品名、濃度、配制時間、配制人。（9）84消毒液配制。84消毒液一般稀釋濃度為1∶200或1∶500。稀釋成1∶200時，戴上橡膠手套，將2.5mL的84消毒液倒入500mL水中；稀釋成1∶500時，將1mL的84消毒液倒入500mL水中。在沒有量筒的情況下，可以用84消毒液的瓶蓋、500mL的礦泉水瓶做量器，用2瓶水，加1瓶蓋約10mL消毒液配制。（三）常用的消毒方法（1）擦拭消毒法：用消毒劑將抹布浸濕，然后對消毒物進行擦拭的方法。（2）氣體熏蒸消毒法：指在專用消毒柜、消毒箱或消毒袋等較小范圍中進行消毒的方法，是用消毒劑氣體對物品進行消毒。（3）煙霧熏蒸消毒法：用點燃后產(chǎn)生的消毒劑煙霧對較大范圍進行消毒處理的方法。常用的有醛-氯煙霧劑和酸-氯煙霧劑。適用于醫(yī)院病房、家庭居室、車船、倉儲等通風(fēng)良好的大空間的空氣和物體表面消毒。（4）熱蒸氣沖洗消毒法：在4kg/cm2壓力下進行沖洗，可殺滅多數(shù)微生物。適用于車輛等大型裝備的消毒。（5）沖洗消毒法：利用噴槍噴水或消毒劑溶液進行消毒或沖洗消除污染物的處理方法。適用于車輛、艦船、帳篷以及其他裝備的去污消毒。常用的消毒劑如含有效碘1000～2000mg/L的碘伏溶液、含有效氯500～100mg/L的含氯消毒劑溶液和0.1%～0.2%雙長鏈季銨鹽類消毒劑等。（6）液體流動浸泡消毒法：用連續(xù)制備的消毒劑溶液進行流動浸泡或沖洗的消毒處理方法，如對手部或皮膚進行的流動沖洗消毒。常用的消毒劑有酸性氧化電位水消毒劑和臭氧水消毒劑。（7）粉劑噴灑消毒法：用噴粉器或人工撒布消毒粉劑進行消毒的處理方法。適用于地面潮濕、濕度較大的空間消毒。（8）浸泡消毒法：將消毒物品全部浸泡于消毒劑中進行消毒的處理方法。適用于體積較小的物品消毒。處理時注意事先要把消毒物品清洗干凈，先除去污垢，再進行消毒。（四）化學(xué)消毒劑使用的原則（1）合理使用，能不用時則不用，必須用時盡量少用。（2）根據(jù)物品的性能和各種微生物的特性，選擇合適的消毒劑。（3）嚴(yán)格掌握消毒劑的有效濃度、消毒時間和使用方法。（4）消毒劑應(yīng)定期更換，易揮發(fā)的消毒劑要密封。（5）待消毒的物品必須先清洗、擦干。（6）消毒劑中不能放置紗布、棉花等物品。（7）消毒后的物品在使用前必須用無菌水沖洗。（8）熟悉消毒劑的副作用，做好工作人員防護。（五）消毒的具體操作技術(shù)1.氣體消毒操作（1）甲醛氣體消毒：采用甲醛的氣體或蒸氣對需消毒的藥品、材料、空間等進行消毒。它的優(yōu)點是在室溫下進行、不加熱消毒物品、穿透力強、殺滅作用快等。（2）環(huán)氧乙烷氣體消毒：環(huán)氧乙烷是一種非常活潑的化學(xué)消毒劑，在低溫下為無色透明液體，溫度為10.73℃（沸點）時變?yōu)闅怏w，對各種微生物的殺滅效果好，穿透能力強。2.液體消毒操作大部分表面消毒劑是以液體的形式擦拭或噴灑在皮膚、物品和環(huán)境表面進行殺菌消毒的，這種方法稱為藥液消毒。3.各種物品和部位的消毒操作器皿表面、手部與皮膚、注射部位皮膚、黏膜或創(chuàng)面部位皮膚、無創(chuàng)面皮膚、實驗室物品、實驗室環(huán)境的消毒。三、滅菌的技術(shù)方法（一）滅菌的方法種類滅菌是指將物體、空間或液體中所有的微生物都殺死的處理過程。1.化學(xué)滅菌法化學(xué)滅菌法是用一些能殺滅包括細菌芽孢、真菌孢子在內(nèi)的各種微生物的高效消毒法，如甲醛、戊二醛、環(huán)氧乙烷、過氧乙酸、過氧化氫、乙烷等。如果僅用于消毒，則這些物質(zhì)的濃度可小一些，處理時間可短一些。如果用這些物質(zhì)達到滅菌效果，則這些物質(zhì)的濃度可大一些，處理時間可長一些。2.物理滅菌法（1）濕熱滅菌：利用熱蒸氣滅菌。在相同溫度和相同作用時間下，濕熱滅菌比干熱滅菌更有效。（2）干熱滅菌：在干燥環(huán)境（火焰或干熱空氣）中利用高溫進行滅菌的技術(shù)。干熱滅菌使微生物細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固變性而達到滅菌目的。（3）過濾除菌：通過機械作用濾去液體或氣體中微生物的方法。常采用細菌過濾器進行。細菌過濾器種類很多，如布氏濾器、曼德爾濾器、蔡氏濾器、玻璃濾器和微孔濾膜濾器等。（4）輻射滅菌：較為常用的是紫外線滅菌。紫外線滅菌是用紫外線燈進行的。（二）滅菌方法操作1.濕熱滅菌指以沸水和飽和水蒸氣來進行滅菌，實驗室所用的巴氏滅菌法就是指濕熱滅菌。2.干熱滅菌干熱滅菌可以直接利用火焰將微生物燒死（如燒接種環(huán)、載玻片和試管口等）。此法適用于玻璃、金屬和木質(zhì)器皿的滅菌。3.過濾除菌此法除菌的優(yōu)點有孔徑小、價格低、可高壓滅菌、不破壞溶液中各種物質(zhì)的化學(xué)成分等，但濾量有限，一般只適用于實驗室中小量溶液的過濾除菌。4.輻射滅菌實驗室常用的輻射滅菌一般為紫外線滅菌。紫外線穿透力不大，只適用于無菌室、接種箱、手術(shù)室等室內(nèi)空氣