DB41T 2391-2023 小麥抗赤霉病評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范

41I 2 2 2 2 3 4 4 4 5 6本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定1小麥抗赤霉病評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范GB5009.111食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的NY/T1443.4小麥抗病蟲(chóng)性評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范第4部分：小麥抗赤霉病評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范（DON）和玉米赤霉烯酮（ZEN）等多種綜合衡量發(fā)病率和嚴(yán)重度的病情評(píng)價(jià)指標(biāo)。計(jì)算2eDI=×100···············································(1)DI——病情指數(shù)；i——病級(jí)數(shù)（0～n4抗性鑒定圃設(shè)置4.1鑒定圃選址4.2鑒定對(duì)照品種4.3種植要求種植管理同大田生產(chǎn)。每畝播量為10kg5病原物接種體1m2噴霧50mL。選取30穗進(jìn)行保濕，10穗為1組，分別套上透明塑料袋保濕2d。接種宜選擇傍晚進(jìn)單花滴注接種：于小麥揚(yáng)花期剪去麥穗中部小穗的內(nèi)外穎殼頂部少許，滴入濃度為每毫升5×105個(gè)的禾谷鐮孢分生孢子懸浮液20μL，每個(gè)材料接種30穗，每穗接種1個(gè)小花，10穗為1組，分別套上透明塑料袋保濕2d。3乳熟期調(diào)查1次病情，一般為揚(yáng)花后21d～25d。012348.1噴霧接種條件下的抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)當(dāng)鑒定圃高感對(duì)照品種病穗率達(dá)到50%以上，該批次抗赤霉病鑒定視為有效。DI=0DI＞DICK-MS8.1.2噴霧接種條件下的抗毒素積收獲期將各個(gè)品種的麥穗分別裝入網(wǎng)袋10穗一組共3組，分別脫粒，進(jìn)行DON毒素含量測(cè)定素含量測(cè)定按照GB5009.111。按照表3進(jìn)DON≤148.2單花滴注接種條件下的抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)8.2.1單花滴注接種條件下的抗性當(dāng)高感對(duì)照品種平均嚴(yán)重度達(dá)到3級(jí)以上時(shí)，該批次材料抗赤霉病鑒定視為有病害發(fā)生平均嚴(yán)重度確定其對(duì)赤霉病的抗性水平，劃分標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表注：平均嚴(yán)重度CK-HR：高抗對(duì)照寧麥13平均嚴(yán)重度；平均嚴(yán)重度CK-MR：中抗對(duì)照鄭麥9023平均嚴(yán)重度；平均嚴(yán)重8.2.2單花滴注接種條件下的抗毒素積累收獲期將各個(gè)品種的麥穗分別裝入網(wǎng)袋10穗一組共3組，分別脫粒，進(jìn)行DON毒素含量測(cè)定素含量測(cè)定按照GB5009.111。依據(jù)表5進(jìn)DON≤19抗性評(píng)價(jià)5A.1接種菌株的分離、鑒定和選擇從發(fā)病麥穗上，切取病組織（穎、籽粒或穗軸等），用75%的乙醇表面消毒3min～5min后，于馬起呈粉紅色黏稠狀。小型孢子很少產(chǎn)生。有性態(tài)為玉蜀黍赤霉Gibberellazeae(Schi分子生物學(xué)鑒定：收集菌絲并提取DNA，然后用禾谷鐮孢特異性引物Fg16F/R（Fg16F:5'-CTCCGGATATGTTGCGTCAA-3'，F(xiàn)g16R:5'-GGTAGGTATCCGACATGGCAA-3'）進(jìn)行擴(kuò)增，條帶大小為400bp~5'-GGA(G/A)GTACCAGT(推薦使用保藏于中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中A.2接種體的制備分生孢子接種體制備：稱取一定量的綠豆，按綠豆：水=6:100比例加入水，加熱煮沸，換小火繼活化培養(yǎng)的病菌接種于經(jīng)高壓滅菌的綠豆培養(yǎng)液中，在25℃下振蕩培養(yǎng)（150r/min），4d～