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DB41河南省質量技術監(jiān)督局發(fā)布I1小麥品種冬春季抗寒性鑒定與評價本標準規(guī)定了冬小麥品種冬春季抗寒性鑒定的術語和定義、鑒定方法本標準適用于小麥種質資源和品種的抗寒性凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)NY/T496-2010肥料合理使用準則通則小麥在越冬期經歷0℃以下連續(xù)低溫或劇烈降溫天氣而導致的小麥生長停滯、葉片枯死或死苗的又稱倒春寒,春季氣溫回暖后溫度驟降到0℃(冰點溫度)以上低溫對小麥造4抗寒性鑒定4.1鑒定前準備4.1.1種子選擇待測試小麥種質資源和品種的種子質量應符合GB4404.1-4.1.2播種大田2盆栽4.1.3人工氣候室設置冬季凍害鑒定,溫度為白天-10℃,夜間-13℃。春季寒害鑒定,溫度為白天0℃,夜間-3℃。4.1.4取樣基本要求冬季凍害春季寒害4.1.5儀器與試劑4.2鑒定方法4.2.1抗寒性指標測定可溶性糖含量采用蒽酮比色法。實驗步驟和結果計算見附錄A中A.2和采用氮藍四唑(NBT)光化還原法。實驗步驟和結果計算見附錄B中B.采用硫代巴比妥酸(TBA)反應法。實驗步驟和結果計算見附錄C中C.235.1性狀相對值計算Xj=(xj/CKj)×100%…………(1)Xj—第j個指標的性狀相對值,作為評價材料抗寒性的指標;CKj—第j個指標的對照處理測定值。5.2隸屬函數(shù)值計算各參試小麥材料相對性狀的隸屬函數(shù)值計算見公式(u(XijXij-Xmin)/(Xmax-Xmin與抗寒性呈正相關的指標) ( u(Xij)—第i個樣品,第j個指標的隸屬函數(shù)值;Xij—第i個樣品,第j個指標的性狀相對值;Xmax和Xmin—某指標性狀相對值的最大值和最小值。5.3抗寒性評價值計算5.4抗寒性分級抗寒性評價值(D)1強23弱4A.1試驗準備A.1.1材料A.1.2儀器設備分光光度計;電子分析天平;水浴鍋;100mL容量A.1.3試劑及配制-1蔗糖標準母液:準確稱取蔗糖100mg于燒杯加少量水溶解后,洗入100mL容量瓶中定A.2.1蔗糖標準曲線制作012345010A.2.2樣品提取取低溫脅迫后的新鮮小麥葉片約1g,剪碎混勻后放入試管5),管壁迅速加入蒽酮試劑6.5mL,立刻搖動混合均勻,置于試管架上顯色,冷卻至室溫后,以空白管作對A.3結果計算6),分光光度計;高速冷凍離心機;熒光燈(反應試管處照度為4000Lx)、微量磷酸緩沖液配制:A液:0.2M的KH2PO4溶液稱取分析純KH2PO427.216g,用蒸餾水定容至1000mL。B液:0.2M的K2HPO4溶液稱取分析純K2HPO4?3H2O45.644g,用蒸餾水定容至1000mL。0.05M磷酸緩沖液(pH=7.8):A液21.25mL+B液228.25130mMMet(甲硫氨酸):取1):2:取0.0372gEDTA-Na在冰浴上研磨成漿,加緩沖液使最終體積為5mL,在4℃冷凍離心4000r/min為SOD酶粗提液,置于0℃~4℃下保存待用。取透明度較好的5mL離心管4支,2支為測定管,2支為對照管,1支做光反應對照,1支做空白(對照、空白不加酶液,以緩沖液代替)。按表B.1–27––式中:AE—樣品管的吸光度;8稱取低溫脅迫后的小麥葉片1g,加入少量石英砂和10%三氯乙酸2mL,研磨至勻三氯乙酸進一步研磨,勻漿以4000r/m取4支干凈試管,編號,3支為樣品管(三個重復各加入提Cm=6.45×(A532-A6000.56×A4509
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