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DB41河南省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I1小麥品種冬春季抗寒性鑒定與評價(jià)本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了冬小麥品種冬春季抗寒性鑒定的術(shù)語和定義、鑒定方法本標(biāo)準(zhǔn)適用于小麥種質(zhì)資源和品種的抗寒性凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)NY/T496-2010肥料合理使用準(zhǔn)則通則小麥在越冬期經(jīng)歷0℃以下連續(xù)低溫或劇烈降溫天氣而導(dǎo)致的小麥生長停滯、葉片枯死或死苗的又稱倒春寒,春季氣溫回暖后溫度驟降到0℃(冰點(diǎn)溫度)以上低溫對小麥造4抗寒性鑒定4.1鑒定前準(zhǔn)備4.1.1種子選擇待測試小麥種質(zhì)資源和品種的種子質(zhì)量應(yīng)符合GB4404.1-4.1.2播種大田2盆栽4.1.3人工氣候室設(shè)置冬季凍害鑒定,溫度為白天-10℃,夜間-13℃。春季寒害鑒定,溫度為白天0℃,夜間-3℃。4.1.4取樣基本要求冬季凍害春季寒害4.1.5儀器與試劑4.2鑒定方法4.2.1抗寒性指標(biāo)測定可溶性糖含量采用蒽酮比色法。實(shí)驗(yàn)步驟和結(jié)果計(jì)算見附錄A中A.2和采用氮藍(lán)四唑(NBT)光化還原法。實(shí)驗(yàn)步驟和結(jié)果計(jì)算見附錄B中B.采用硫代巴比妥酸(TBA)反應(yīng)法。實(shí)驗(yàn)步驟和結(jié)果計(jì)算見附錄C中C.235.1性狀相對值計(jì)算Xj=(xj/CKj)×100%…………(1)Xj—第j個(gè)指標(biāo)的性狀相對值,作為評價(jià)材料抗寒性的指標(biāo);CKj—第j個(gè)指標(biāo)的對照處理測定值。5.2隸屬函數(shù)值計(jì)算各參試小麥材料相對性狀的隸屬函數(shù)值計(jì)算見公式(u(XijXij-Xmin)/(Xmax-Xmin與抗寒性呈正相關(guān)的指標(biāo)) ( u(Xij)—第i個(gè)樣品,第j個(gè)指標(biāo)的隸屬函數(shù)值;Xij—第i個(gè)樣品,第j個(gè)指標(biāo)的性狀相對值;Xmax和Xmin—某指標(biāo)性狀相對值的最大值和最小值。5.3抗寒性評價(jià)值計(jì)算5.4抗寒性分級(jí)抗寒性評價(jià)值(D)1強(qiáng)23弱4A.1試驗(yàn)準(zhǔn)備A.1.1材料A.1.2儀器設(shè)備分光光度計(jì);電子分析天平;水浴鍋;100mL容量A.1.3試劑及配制-1蔗糖標(biāo)準(zhǔn)母液:準(zhǔn)確稱取蔗糖100mg于燒杯加少量水溶解后,洗入100mL容量瓶中定A.2.1蔗糖標(biāo)準(zhǔn)曲線制作012345010A.2.2樣品提取取低溫脅迫后的新鮮小麥葉片約1g,剪碎混勻后放入試管5),管壁迅速加入蒽酮試劑6.5mL,立刻搖動(dòng)混合均勻,置于試管架上顯色,冷卻至室溫后,以空白管作對A.3結(jié)果計(jì)算6),分光光度計(jì);高速冷凍離心機(jī);熒光燈(反應(yīng)試管處照度為4000Lx)、微量磷酸緩沖液配制:A液:0.2M的KH2PO4溶液稱取分析純KH2PO427.216g,用蒸餾水定容至1000mL。B液:0.2M的K2HPO4溶液稱取分析純K2HPO4?3H2O45.644g,用蒸餾水定容至1000mL。0.05M磷酸緩沖液(pH=7.8):A液21.25mL+B液228.25130mMMet(甲硫氨酸):取1):2:取0.0372gEDTA-Na在冰浴上研磨成漿,加緩沖液使最終體積為5mL,在4℃冷凍離心4000r/min為SOD酶粗提液,置于0℃~4℃下保存待用。取透明度較好的5mL離心管4支,2支為測定管,2支為對照管,1支做光反應(yīng)對照,1支做空白(對照、空白不加酶液,以緩沖液代替)。按表B.1–27––式中:AE—樣品管的吸光度;8稱取低溫脅迫后的小麥葉片1g,加入少量石英砂和10%三氯乙酸2mL,研磨至勻三氯乙酸進(jìn)一步研磨,勻漿以4000r/m取4支干凈試管,編號(hào),3支為樣品管(三個(gè)重復(fù)各加入提Cm=6.45×(A532-A6000.56×A4509
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