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文檔簡介
標(biāo)本采集與處理尿液由腎臟生成,是具有重要意義的排泄物尿液檢驗(yàn)主要可以輔助診斷泌尿系統(tǒng)及腎周圍組織器官的病變概述因此尿液標(biāo)本采集對(duì)于檢驗(yàn)結(jié)果是非常重要的其中包括受試者準(zhǔn)備、容器的規(guī)格與質(zhì)量、標(biāo)本種類及采集方法等。概述01尿液的采集1、待檢者準(zhǔn)備
一般檢驗(yàn)留取清潔中段尿女性避免陰道分泌物或月經(jīng)血的污染男性避免精液的混入細(xì)菌培養(yǎng)用尿標(biāo)本,要求在使用抗生素前采集01尿液的采集2、尿液標(biāo)本的收集容器容器要求由透明、隋性、環(huán)保材料制成,容積50ml以上,圓形、廣口,直徑大于4cm,底部寬闊、穩(wěn)固;干燥、清潔、無污染收集細(xì)菌培養(yǎng)的尿標(biāo)本應(yīng)選用無菌容器容器周圍應(yīng)標(biāo)有患者姓名、檢驗(yàn)聯(lián)號(hào)(條形碼),并留有空白處填寫標(biāo)本留取時(shí)間01尿液的采集3、尿液標(biāo)本種類及采集方法根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康牟煌?,選擇不同種類的尿液標(biāo)本臨床上根據(jù)采集時(shí)間或檢測(cè)項(xiàng)目的不同分為晨尿、隨機(jī)尿、計(jì)時(shí)尿及特殊尿標(biāo)本01尿液的采集一、晨尿是指清晨起床后未進(jìn)食和做運(yùn)動(dòng)之前第一次所排出的尿液因?yàn)樵隗w內(nèi)停留時(shí)間長,較濃縮可用于檢測(cè)尿液中的有形成分以及判斷腎臟濃縮稀釋功能01尿液的采集二、隨機(jī)尿是指受試者無須任何準(zhǔn)備,隨時(shí)留取的尿液標(biāo)本。隨機(jī)尿標(biāo)本新鮮、方便,常用于門診、急診檢查。01尿液的采集三、計(jì)時(shí)尿是指采集規(guī)定時(shí)間段內(nèi)的尿液標(biāo)本,用于特定檢查。(1)餐后尿(2)3小時(shí)尿(3)12小時(shí)尿(4)24小時(shí)尿01尿液的采集三、計(jì)時(shí)尿(1)餐后尿通常收集午餐后2~4小時(shí)的尿液,有助于對(duì)肝膽疾病、腎臟疾病等的診斷。(2)3小時(shí)尿:是指收集上午6~9時(shí)的尿液,多用于檢查尿液有形成分,如l小時(shí)尿排泄率檢查等。(3)12小時(shí)尿:即晚上8時(shí)到次晨8時(shí)之內(nèi)的12小時(shí)全部尿液。適于尿液有形成分計(jì)數(shù)(4)24小時(shí)尿:指上午8時(shí)后至次日上午8時(shí)最后一次排出的全部尿液。常用于內(nèi)生肌酐清除率等的檢查01尿液的采集4、特殊尿標(biāo)本(1)尿三杯試驗(yàn):分別采集前段尿、中段尿、末段尿,分裝于3個(gè)尿杯中。常用于泌尿系統(tǒng)出血及尿路感染的初步定位。(2)培養(yǎng)用尿:留尿前清洗外陰、消毒尿道口后,以無菌容器留取中段尿送檢。(3)導(dǎo)管尿和恥骨上穿刺尿:常用于尿潴留或排尿困難時(shí)的尿液標(biāo)本采集,但需要征得家屬同意02尿液的運(yùn)送尿液標(biāo)本采集后要盡快送到門診實(shí)驗(yàn)室檢查,運(yùn)送過程中防止漏灑。03尿液的保存尿液中的化學(xué)物質(zhì)和有形成分不穩(wěn)定,長時(shí)間存放會(huì)影響檢查結(jié)果因此,尿標(biāo)本留取后應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完備。若不能及時(shí)檢查應(yīng)妥善保存。03尿液的保存尿液的保存一般分為1.低溫保存2.化學(xué)防腐03尿液的保存1、低溫保存(1)4℃冷藏:是保存尿液標(biāo)本最簡便的方法,一般可保存6h(2)冰凍:需先將新鮮尿離心除去有形成分,留取上清液冰凍保存。03尿液的保存2、化學(xué)防腐
尿液常規(guī)檢查一般不需要使用防腐劑。計(jì)時(shí)尿、標(biāo)本采集后2小時(shí)內(nèi)無法進(jìn)行檢查,或被檢查成分不穩(wěn)定時(shí)的標(biāo)本,可加入特定防腐劑,冷藏保存。常用的化學(xué)防腐劑有以下幾種03尿液的保存化學(xué)防腐劑(1)甲醛:常用于管型、細(xì)胞等有形成分檢查的防腐。甲醛具有還原性,不適于尿糖檢查的標(biāo)本防腐。(2)甲苯:能在尿液表面形成一薄層,阻止尿液與空氣接觸,起到防腐作用。常用于尿糖、尿蛋白等化學(xué)成分定量測(cè)定的防腐。(3)濃鹽酸:用于尿中的鈣、磷、兒茶酚胺等成分測(cè)定的防腐(4)麝香草酚:通常用于尿中化學(xué)成分、細(xì)胞等的防腐(5)硼酸:適用于尿蛋白尿酸等檢查的防腐04尿液的處理尿液標(biāo)本檢查完成后應(yīng)按規(guī)定處理任何尿液標(biāo)本,都應(yīng)視為感染物。檢驗(yàn)后的尿標(biāo)本,除特殊標(biāo)本須繼續(xù)保存外,其余均要按照《臨床實(shí)驗(yàn)室廢物處理原則》方法經(jīng)過嚴(yán)格消毒處理后才能棄去,以符合醫(yī)院感染管理辦法及環(huán)境保護(hù)法的要求,防止疾病傳播。04尿液的處理尿液標(biāo)本檢查完成后應(yīng)按規(guī)定處理尿液標(biāo)本檢驗(yàn)完畢后,漂白粉消毒處理后,再向下水道內(nèi)排放對(duì)需要重復(fù)使用容器應(yīng)在消毒劑處理后在備用一次性尿杯應(yīng)先消毒后燒毀尿液的一般的形狀學(xué)檢驗(yàn)01尿量是指24小時(shí)內(nèi)排出體外的尿液總量尿量檢測(cè)一般使用量筒或其他有刻度的容器,直接測(cè)量尿液體積健康成人尿量為1~2L/24小時(shí),小兒按每Kg體重計(jì)排尿量,約為成年人3~4倍。01尿量1、多尿
指24小時(shí)尿液總量超過2.5L者。生理性多尿常見于飲水過多、靜脈輸液過多、服用利尿劑等。病理性多尿可見于:代謝性疾病,如糖尿病內(nèi)分泌疾病,如尿崩癥、原發(fā)性醛固酮增多癥腎臟疾病,如慢性腎炎01尿量2、少尿或無尿少尿是指24小時(shí)尿量少于400ml,或每小時(shí)尿量持續(xù)少于17ml無尿是指尿量<l00ml/24小時(shí)或12小時(shí)內(nèi)完全無尿液排出者生理性少尿見于機(jī)體缺水或出汗過多。01尿量病理性少尿可見于:腎前疾?。耗I血流量不足,導(dǎo)致腎小球?yàn)V過率減低所致腎前性少尿。見于休克、腹瀉、大面積燒傷等腎臟疾?。阂蚰I實(shí)質(zhì)病變導(dǎo)致腎小球?yàn)V過率減低所致腎性少尿,常見于急性腎小球腎炎、腎功能衰竭腎后疾?。阂娪诟鞣N原因所致的尿路梗阻所致的腎后性少尿,常見于輸尿管結(jié)石、腫瘤、膀胱功能障礙01尿量2、少尿或無尿少尿是指24小時(shí)尿量少于400ml,或每小時(shí)尿量持續(xù)少于17ml無尿是指尿量<l00ml/24小時(shí)或12小時(shí)內(nèi)完全無尿液排出者生理性少尿見于機(jī)體缺水或出汗過多。02顏色尿液的顏色源于尿色素及尿膽原,受飲食、藥物、尿量及化學(xué)成分的影響。正常新鮮尿液為淡黃色。02顏色生理情況下,正常人尿液顏色深淺,與尿液被稀釋或濃縮的狀態(tài)有關(guān)大量飲水、尿量多則尿液顏色淡尿量少、飲水少或運(yùn)動(dòng)、出汗則尿液顏色深02顏色病理情況下,尿液中出現(xiàn)異常成分時(shí)則發(fā)生顏色變化。常見的有紅色(血尿、血紅蛋白尿、肌紅蛋白尿及卟啉尿)白色(膿尿及乳糜尿)黃色(膽紅素尿)02顏色尿液內(nèi)含有一定量的紅細(xì)胞時(shí),稱為血尿。每升尿內(nèi)含血量達(dá)到或超過1ml即可出現(xiàn)淡紅色,稱為肉眼血尿若尿液外觀變化不明顯,大于等于每3個(gè)/Hp,稱為鏡下血尿正常人離心尿沉渣鏡檢時(shí)低于3個(gè)/Hp血尿見于:①泌尿生殖系統(tǒng)疾病,如感染、結(jié)核、結(jié)石等。②血液病,如血友病等。③其他,如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、某些健康人劇烈運(yùn)動(dòng)后出現(xiàn)的一過性血尿等1、血尿02顏色是指尿液中含有游離血紅蛋白游離血紅蛋白增多,當(dāng)超過了腎閾值和腎小管重吸收能力時(shí),使尿液呈棕色、深棕紅色濃茶樣外觀。常見于:血型不合的輸血反應(yīng)、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿、溶血性疾病等。2、血紅蛋白尿02顏色尿液呈紅葡萄酒色,見于先天性卟啉代謝異常等。4、卟啉尿肌紅蛋白尿當(dāng)血漿中肌紅蛋白增多超過腎閾值時(shí),形成肌紅蛋白尿,使尿液呈粉紅色或暗紅色。常用于肌肉組織廣泛損傷等。3、肌紅蛋白尿02顏色經(jīng)腸道吸收的乳糜液不能經(jīng)正常的淋巴道引流入血,而逆流至泌尿系統(tǒng)的淋巴管中,引起淋巴管曲張、破裂,淋巴液進(jìn)入尿液所致乳糜尿主要見于絲蟲病、腫瘤、腎病綜合征或某些原因引起的腎臟周圍淋巴循環(huán)受阻。5、乳糜尿02顏色尿液中含有大量膿細(xì)胞,外觀呈不同程度的黃白色渾濁或含膿絲狀懸浮物,放置后可有絮狀沉淀。常見于泌尿系統(tǒng)化膿性感染6、膿尿02顏色尿液中含有大量的結(jié)合膽紅素,外觀呈深黃色,振蕩后泡沫亦呈黃色。主要見于阻塞性黃疸和肝細(xì)胞性黃疸。7、膽紅素尿03透明度主要見于阻塞性黃疸和肝細(xì)胞性黃疸。主要取決于尿液中細(xì)胞、細(xì)菌及析出的鹽類結(jié)晶等有形成分的含量,一般可分為清晰透明:清晰透明指沒有肉眼可見的顆粒物質(zhì)輕度渾濁(霧狀):出現(xiàn)少數(shù)可見的顆粒物質(zhì),但透過尿液能看清紙上的字跡渾濁(云霧狀):出現(xiàn)可見的顆粒物質(zhì),透過尿液所見紙上的字跡模糊不清明顯渾濁:透過尿液看不見紙上的字跡正常新鮮尿液為清晰透明03透明度清晰透明輕度渾濁渾濁明顯渾濁03透明度新鮮尿液發(fā)生渾濁,常見的原因是鹽類的影響加熱消失的為尿酸鹽加冰乙酸變清并產(chǎn)生氣泡的為磷酸鹽,不產(chǎn)生氣泡的為碳酸鹽,無變化為膿尿或菌尿加乙醚變清的為乳糜尿03透明度加熱渾濁消失渾濁加重加冰乙酸尿酸鹽變清并產(chǎn)生氣泡磷酸鹽變清不產(chǎn)生氣泡碳酸鹽渾濁尿無變化膿尿菌尿加乙醚變清乳糜尿04尿比重是指在4℃時(shí)尿液與同體積的純水重量之比,是腎小管濃縮和稀釋功能的一個(gè)指標(biāo)。成人晨尿>1.020,隨機(jī)尿?yàn)?.003~1.030;新生兒1.002~1.004。04尿比重1.比重增高心力衰竭、周圍循環(huán)衰竭、急性腎小球性腎炎、脫水及大量出汗2.比重降低尿液比重<1.015時(shí),稱為低比重尿或低滲尿。見于慢性腎炎、慢性腎盂腎炎等如尿液比重固定在1.010±0.003時(shí),稱為等滲尿,則提示腎臟濃縮稀釋功能嚴(yán)重受損化學(xué)檢驗(yàn)?zāi)夸汣ONTENTⅠ尿蛋白質(zhì)定性檢查Ⅱ尿葡萄糖定性檢查尿酮體Ⅲ尿血紅蛋白檢測(cè)Ⅵ尿膽紅素和尿膽原定性檢查Ⅳ尿亞硝酸鹽Ⅴ目錄CONTENTⅦ尿pHⅧ尿人促絨毛激素的測(cè)定尿本周蛋白定性測(cè)定Ⅸ尿肌紅蛋白Ⅻ乳糜尿定性檢查Ⅹ尿含鐵血黃素定性檢查Ⅺ尿蛋白定性檢查蛋白質(zhì)檢測(cè)是尿液化學(xué)成分檢驗(yàn)中的最重要的項(xiàng)目之一正常情況下,有腎小球?yàn)V過膜的存在,血液中的大分子量的蛋白質(zhì)不能濾出,小分子量蛋白質(zhì)雖可以濾出,但在腎小管處幾乎全被重吸收排出量極少,常規(guī)化學(xué)定性陰性。當(dāng)尿蛋白排出量>150mg/24小時(shí)、或尿中蛋白濃度>100mg/L時(shí),常規(guī)化學(xué)定性檢查呈陽性,稱為蛋白尿概述01尿液中的蛋白質(zhì)的定性檢測(cè)的方法1、加熱乙酸法1.原理加熱可使蛋白質(zhì)變性凝固,稀乙酸接近蛋白質(zhì)等電點(diǎn),促使蛋白質(zhì)沉淀,并溶解堿性鹽類結(jié)晶2.試劑5%乙酸溶液3.操作方法尿液5ml→加熱標(biāo)本上1/3處至沸騰→觀查結(jié)果→加乙酸→觀查結(jié)果→繼續(xù)加熱至沸騰→立即觀察結(jié)果臨檢實(shí)操有拍攝01尿液中的蛋白質(zhì)的定性檢測(cè)的方法2、磺基水楊酸法1.原理磺基水楊酸為生物堿試劑,在酸性環(huán)境下,磺酸根離子與蛋白質(zhì)的氮末端陽離子結(jié)合,生成不溶性蛋白鹽沉淀2.試劑200g/L磺基水楊酸溶液3.操作方法尿液1ml→磺基水楊酸試劑1~2滴→立即觀察結(jié)果臨檢實(shí)操有拍攝01尿液中的蛋白質(zhì)的定性檢測(cè)的方法3、干化學(xué)試帶法利用指示劑的蛋白質(zhì)誤差原理。在pH3.2時(shí),溴酚藍(lán)產(chǎn)生陰離子,蛋白質(zhì)(清蛋白)產(chǎn)生陽離子,二者結(jié)合后發(fā)生顏色變化,由淡黃色漸呈綠色乃至藍(lán)色。02那如何來保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性呢?(1)待檢者:檢查前應(yīng)清潔尿道口,采集中段尿。防治混入某些分泌
物或較多的細(xì)胞成分而引起假陽性(2)標(biāo)本:①標(biāo)本應(yīng)新鮮,渾濁尿應(yīng)離心后測(cè)定上清液(3)加熱:在試管尿液中上1/3段尿液加熱(4)藥物:藥物的使用可出現(xiàn)假陰性或假陽性結(jié)果但是各種方法的敏感度有所不同蛋白質(zhì)定性方法學(xué)評(píng)價(jià)陽性標(biāo)準(zhǔn)及敏感度蛋白質(zhì)含量(g/L)加熱乙酸法磺基水楊酸法干化學(xué)試帶法-<0.1<0.05<0.1±0.1~0.150.05~0.10.1~0.31+0.2~0.50.1~0.50.3~1.02+0.6~2.00.5~2.01.0~3.03+2.0~5.02.0~5.03.0~8.04+>5.0>5.0>8.0評(píng)價(jià)準(zhǔn)確,可與尿中所有蛋白質(zhì)反應(yīng),假陽性少。通常作為蛋白質(zhì)的確證實(shí)驗(yàn),但操作比較復(fù)雜操作簡便,敏感性高。清蛋白、球蛋白、本周蛋白均可檢出,簡便、快速,曾為CCCLS推薦位參考方法。干擾因素多,有些藥物及鹽類結(jié)晶可致假陽性簡便、快速,廣泛用于健康普查和腎病篩查,但結(jié)果受尿液pH影響。對(duì)清蛋白敏感度高,對(duì)球蛋白靈敏度僅為清蛋白的1∕100~1∕50,與血紅蛋白、肌紅蛋白、黏蛋白、Tamm-Horsfall蛋白(T-H蛋白)及本-周蛋白等基本不反應(yīng)*03那么尿液蛋白質(zhì)的檢測(cè)的臨床意義是什么呢?1、生理性蛋白尿功能性蛋白尿:指由于發(fā)熱、劇烈運(yùn)動(dòng)、精神緊張等應(yīng)激狀態(tài)導(dǎo)致的蛋白尿體位性蛋白尿:又稱直立性蛋白尿。多見于瘦長體型的青少年。受試者在臥床休息時(shí)蛋白定性陰性;而站立活動(dòng)時(shí),則出現(xiàn)蛋白尿,無自覺癥狀。03那么尿液蛋白質(zhì)的檢測(cè)的臨床意義是什么呢?2、病理性蛋白尿根據(jù)其發(fā)生機(jī)制可分為六類:腎小球性蛋白尿:某些因素導(dǎo)致腎小球?yàn)V過膜通透性增加,導(dǎo)致血漿蛋白濾出,超過腎小管重吸收能力,形成的蛋白尿。以清蛋白為主。見于急性腎小球腎炎,腎病綜合征、紫癜性腎病等腎小管性蛋白尿:炎癥或中毒引起腎小管對(duì)蛋白質(zhì)的重吸收能力降低而導(dǎo)致的蛋白尿,見于腎盂腎炎、間質(zhì)性腎炎和腎小管性酸中毒等混合性蛋白尿:腎臟病變相繼累及腎小球和腎小管產(chǎn)生的蛋白尿。常見于慢性腎炎、慢性腎盂腎炎等03那么尿液蛋白質(zhì)的檢測(cè)的臨床意義是什么呢?2、病理性蛋白尿根據(jù)其發(fā)生機(jī)制可分為六類:組織性蛋白尿:由于炎癥或藥物刺激,腎組織破壞、泌尿系統(tǒng)分泌蛋白質(zhì),進(jìn)入尿液而形成的蛋白尿。其中T-H糖蛋白為主。溢出性蛋白尿:循環(huán)血漿中某些低分子量蛋白質(zhì)增多,超過腎小管重吸收能力所致。如血紅蛋白尿、肌紅蛋白尿等偶然性蛋白尿:也稱假性蛋白尿。當(dāng)尿中混有多量血、膿、黏液等成分時(shí),可導(dǎo)致蛋白質(zhì)定性檢查陽性,稱假性蛋白尿??商崾鞠履蚵芳吧车姥装Y尿葡萄糖定性檢查血液中的葡萄糖經(jīng)腎小球全部濾過后,在腎小管幾乎全被重吸收,因此尿液中的葡萄糖含量極少,常規(guī)定性檢查為陰性當(dāng)血漿葡萄糖含量超過腎糖閾(>8.88mmol/L)或腎小管重吸收能力下降時(shí),尿糖定性為陽性,稱為糖尿。概述尿糖檢測(cè)的方法1、班氏法1.原理葡萄糖的還原性醛基在熱堿性條件下,將藍(lán)色硫酸銅還原為氧化亞銅,進(jìn)而生成紅色的氫氧化亞銅沉淀。2.試劑班氏試劑3.簡要操作班氏試劑2ml→加熱至沸騰→加尿液0.2ml→煮沸→冷卻→判讀結(jié)果。尿糖檢測(cè)的方法2、干化學(xué)試帶法1、原理采用葡糖糖氧化酶法,葡萄糖氧化酶特異與尿液中葡萄糖產(chǎn)生氧化還原反應(yīng),生成的H2O2可催化色原鄰甲苯胺(或碘化鉀)顯色。尿糖檢測(cè)的方法(1)患者:VitC會(huì)使萄糖定性出現(xiàn)假陽性。(2)容器:不含氧化性物質(zhì)(3)標(biāo)本留取與送檢:根據(jù)臨床需要留取清晨空腹尿或餐后2小時(shí)尿,
不宜長時(shí)間存放,以免細(xì)菌繁殖造成假陰性結(jié)果。(4)判斷結(jié)果:需待反應(yīng)物自然冷卻后觀察。班氏法和試帶法尿糖定性方法學(xué)比較敏感度及檢測(cè)范圍葡萄糖含量(mmol/L)班氏法葡萄糖氧化酶試帶法-<5.5<1.67±5.6~11.21.67~2.781+<285.0~142+28~5614~283+57~11228~564+>11256~112評(píng)價(jià)優(yōu)點(diǎn):穩(wěn)定性好缺點(diǎn):特異性差,假陽性率高(大劑量VitC、肌酐、尿酸、其他還原性糖)。逐漸被葡萄糖氧化酶試帶法取代優(yōu)點(diǎn):較班氏法敏感、簡便、快速、特異性高、可半定量??赡繙y(cè),也可上機(jī)檢測(cè)。極少出現(xiàn)假陽性缺點(diǎn):易出現(xiàn)假陰性,如;含VitC氧化劑的試帶可幫助排除這一干擾;高濃度酮體、高比重尿均可降低試帶的敏感性1、血糖增高性糖尿糖尿?。河捎诨颊咭葝u素水平降低或機(jī)體對(duì)胰島素敏感性下降所致,是篩查糖尿病的重要依據(jù)。糖尿病并發(fā)腎損害者腎閾升高,常導(dǎo)致血糖升高與尿糖陽性程度不平行,須依據(jù)血糖水平及糖耐量檢查等結(jié)果指導(dǎo)臨床合理用藥其他內(nèi)分泌性疾?。杭谞钕俟δ芸哼M(jìn)、庫欣綜合征等應(yīng)激狀態(tài):顱腦損傷、腦血管意外、突然情緒緊張或激動(dòng)可使血糖一過性升高飲食因素:健康人一次性攝入大量糖或含糖食物,也可使血糖暫時(shí)性增加2、血糖正常性糖尿
血糖正常,但腎小管對(duì)葡萄糖吸收功能減退、即腎糖閾降低所致的糖尿,也稱為腎性糖尿。見于慢性腎小球腎炎、腎病綜合征等。妊娠晚期,尿中也可出現(xiàn)葡萄糖,與糖尿病鑒別的要點(diǎn)是前者口服葡萄糖耐量正常。3、其他糖尿
尿中除葡萄糖外還可出現(xiàn)乳糖、半乳糖、果糖、戊糖等,哺乳期婦女、肝功能障礙可發(fā)生果糖尿、乳糖尿或半乳糖尿;某些遺傳代謝性疾病如半乳糖血癥、糖原貯積癥、粘多糖沉積病和果糖尿癥等也會(huì)在尿中出現(xiàn)相應(yīng)的還原性糖尿酮體酮體是脂肪代謝的中間產(chǎn)物,包括乙酰乙酸、β-羥丁酸和丙酮。在正常生理狀態(tài)下,肝臟合成的酮體大部分被其他組織利用,血漿中含量僅為2.0~4.0mg∕L,常規(guī)化學(xué)定性方法測(cè)不出。當(dāng)體內(nèi)脂肪代謝加速,生成的大量酮體便在血中蓄積稱為酮血癥,從尿中排出形成酮尿概述01改良Rothea法又稱酮體粉法酮體粉劑含亞硝基鐵氫化鈉、無水碳酸鈉和硫酸銨。亞硝基鐵氰化鈉在堿性條件下與乙酰乙酸或丙酮生成紫紅色化合物。檢測(cè)時(shí)只需將尿液滴入酮體粉試劑中即可觀察反應(yīng)。02干化學(xué)試帶法原理采用亞硝基鐵氰化鈉法,在堿性條件下,亞硝基鐵氰化鈉與乙酰乙酸或丙酮生成紫紅色化合物。03質(zhì)量保證標(biāo)本要新鮮大量細(xì)菌繁殖將使乙酰乙酸轉(zhuǎn)變?yōu)楸?,丙酮揮發(fā)會(huì)造成假陰性。假陽性分析高色素尿、尿中存在大量肌酐、肌酸、酚酞、苯丙酮、左旋多巴代謝物等,可導(dǎo)致尿酮體定性假陽性??偨Y(jié)1.糖尿病癥酸中毒酮尿是糖尿病性昏迷的前期指標(biāo),多伴有高血糖和糖尿。但若患者正在接受雙胍類降糖藥如降糖靈等藥物治療會(huì)出現(xiàn)血糖、尿糖正常,而尿酮體陽性的情況。2.饑餓、過分節(jié)食、長時(shí)間空腹運(yùn)動(dòng)等尿酮體陽性;妊娠婦女可因嚴(yán)重妊娠反應(yīng)、重癥子癇出現(xiàn)酮尿;酒精性肝炎、肝硬化也可出現(xiàn)酮尿。尿膽紅素和尿膽原定性檢查膽紅素主要有非結(jié)合膽紅素(UCB)和結(jié)合膽紅素(CB)。由于UCB不能透過腎小球?yàn)V過率,而正常人血中的CB含量很低,故尿中不能檢出膽紅素;當(dāng)血CB增高,超過腎閾值時(shí),CB即從尿中排出,稱為膽紅素尿。概述01尿膽紅素1、Harrison法原理:氯化鋇與尿中硫酸根形成硫酸鋇沉淀,在酸性環(huán)境中被三氯化鐵氧化為膽綠素、膽青素、膽黃素,前兩者顯綠色。
操作:(1)加尿液(2)加氯化鋇(3)離心,倒掉上清液,留取沉淀(4)加三氯化鐵和三氯乙酸(5)觀察結(jié)果01尿膽紅素2、干化學(xué)試帶法原理:采用偶氮法,在強(qiáng)酸介質(zhì)中,膽紅素與重氮鹽發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng),生成紅色化合物。01尿膽紅素3、質(zhì)量保證待檢者:服用大量牛黃、熊膽粉和水楊酸后,藥物與試劑產(chǎn)生
紫紅色反應(yīng),干擾Harrison法的結(jié)果觀察標(biāo)本:新鮮、避光:防止膽紅素被氧化造成假陰性VitC:含量>0.5g/L時(shí),能抑制偶氮反應(yīng)而使試帶法為假陰性尿路感染的某些細(xì)菌產(chǎn)生亞硝酸鹽,能抑制偶氮反應(yīng)而使試帶法為假陰性01尿膽紅素1.Harrison法敏感度高、準(zhǔn)確性高,可作為膽紅素的驗(yàn)證試驗(yàn),但操作較為復(fù)雜2.干化學(xué)試帶法本法敏感度不高、但操作簡便、快速,具有半定量作用,已在臨床廣泛應(yīng)用總結(jié)02尿膽原膽紅素膽管腸道生成尿膽原大部分經(jīng)腸肝循環(huán)由尿道排出一部分隨糞便排出一部分進(jìn)入血液膽紅素經(jīng)膽管排泄至腸道后,在腸道細(xì)菌作用下生成尿膽原,其中大部分又經(jīng)腸肝循環(huán)被肝細(xì)胞攝取轉(zhuǎn)化成膽紅素當(dāng)尿膽原生成增加,或肝細(xì)胞攝取、轉(zhuǎn)化尿膽原的能力下降時(shí),尿中尿膽原排出增加。當(dāng)膽管阻塞,膽紅素不能排出尿道,則尿中尿膽原減少甚至為陰性。02尿膽原原理尿膽原在酸性環(huán)境中與對(duì)二甲氨基苯甲醛反應(yīng)生成櫻紅色化合物。試劑Ehrlich試劑和無水氯化鈣。簡要操作加尿液→加氯化鈣→離心留取上清液→加Ehrlich試劑→觀察尿液顏色1、改良Ehrlich法02尿膽原1.醛反應(yīng)試帶法試帶成分、作用及測(cè)定原理同Ehrlich法。2.偶氮反應(yīng)試劑帶法原理:采用偶氮法,在強(qiáng)酸性條件下,對(duì)-四氧基苯重氮四氟化硼與尿膽原發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng),使試帶變?yōu)殡僦t色。2、干化學(xué)試帶法02尿膽原(1)待檢者:①尿膽原含量在午后2~4小時(shí)達(dá)到最高峰,留取午餐后2~4小時(shí)尿可提高檢出率。②服用磺胺、PAS者會(huì)影響檢查結(jié)果③VitC、可使尿膽原定性假陰性,需加做尿膽素定性試驗(yàn)給予驗(yàn)證。(2)標(biāo)本:
新鮮、避光保存,防止尿膽原氧化為尿膽素將出現(xiàn)假陰性。3、質(zhì)量保證02尿膽原不同黃疸類型的鑒別診斷標(biāo)本指標(biāo)正常人溶血性黃疸肝細(xì)胞性黃疸阻塞性黃疸尿液顏色淺黃深黃深黃深黃膽紅素陰性陰性陽性陽性尿膽原1:20陰性強(qiáng)陽性陽性陰性糞便顏色黃褐深色黃褐或變淺變淺或白陶土色糞膽素正常增高減低/正常減低/消失尿液亞硝酸鹽定性檢查亞硝酸鹽定性檢查尿中有病原微生物增殖,且尿液在膀胱中存留足夠長時(shí)間,某些含有亞硝酸鹽還原酶的細(xì)菌可將尿中的硝酸鹽還原為亞硝酸鹽(NIT)最常見的有:大腸埃希菌屬、克雷白桿菌屬、變形桿菌、葡萄球菌屬、假單孢菌屬等。因此,亞硝酸鹽定性試驗(yàn)可作為泌尿系感染的篩選指標(biāo)之一。亞硝酸鹽定性檢查干化學(xué)試帶法原理:采用Griess法,NIT先與對(duì)氨基苯磺酸或氨基苯磺酸酰胺反應(yīng)生成重氮鹽,再與α-萘胺結(jié)合形成紅色偶氮化合物NIT陽性取決于三個(gè)條件:①尿液中存在硝酸鹽②感染的病原微生物能產(chǎn)生亞硝酸鹽還原酶③尿液在膀胱內(nèi)停留4h以上亞硝酸鹽定性檢查健康人尿液亞硝酸鹽檢測(cè)為陰性。干化學(xué)法簡便、快速,可以自動(dòng)化,敏感度為0.3~0.6mg/L,有假陽性和假陰性。但確證試驗(yàn)為仍尿細(xì)菌培養(yǎng)。尿液中亞硝酸鹽主要來源于正常飲食、體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝或由氨內(nèi)源性合成,不能正常飲食的患者,體內(nèi)缺乏硝酸鹽,即使有細(xì)菌感染,也可出現(xiàn)陰性。大劑量VitC可使反應(yīng)而呈假陰性;液在膀胱需要停留足夠長的時(shí)間(4小時(shí)),因此宜使用晨尿標(biāo)本;該指標(biāo)可作為泌尿系統(tǒng)感染的過篩試驗(yàn)。血紅蛋白血紅蛋白血紅蛋白(Hb)為含血色素的色素蛋白。正常人血漿中含有微量血紅蛋白(20-40mg/L),與結(jié)合珠蛋白形成Hb-Hp復(fù)合物,不能從尿中排出,化學(xué)定性為陰性。尿中血紅蛋白來源有兩個(gè),其一為血管內(nèi)溶血時(shí),紅細(xì)胞破壞,血紅蛋白釋放入血漿,當(dāng)游離血紅蛋白超過了珠蛋白結(jié)合能力,則由腎小球?yàn)V過,隨尿液排出;即為血紅蛋白尿另一來源為上尿路出血,紅細(xì)胞在低滲、高滲或酸性環(huán)境中溶血。尿中血紅蛋白含量較少時(shí),肉眼看不出顏色變化,但隱血試驗(yàn)為陽性。血紅蛋白1濕化學(xué)法采用過氧化物酶法血紅素具有過氧化物酶活性,能催化過氧化氫作為電子受體使色原氧化呈色,借以識(shí)別微量血紅蛋白的存在,其呈色深淺與血紅蛋白含量成正比使用試劑為鄰聯(lián)甲苯胺和過氧化氫。該法操作簡單取小試管→加尿液→加鄰聯(lián)甲苯胺試劑→加過氧化氫→觀察顏色變化即可2干化學(xué)試帶法其原理同濕化學(xué)法,按說明書操作即可。現(xiàn)在我們分別來學(xué)習(xí)一下血紅蛋白3、免疫法利用膠體金標(biāo)記法的抗人Hb單克隆抗體檢測(cè),特制的乙酸纖維膜上均勻分布的膠體金標(biāo)記羊抗人Hb單克隆抗體和膠體金標(biāo)記鼠IgG,膜的上端由上至下依次包被羊抗鼠IgG抗體和羊抗人Hb多抗。檢測(cè)時(shí)把試紙條侵入尿液標(biāo)本中,尿液通過層析作用,沿著試紙條上升,如果尿液中含有Hb,在上行過程中與金標(biāo)記羊抗人Hb單克隆抗體結(jié)合,行至羊抗人Hb多抗體線時(shí),形成金標(biāo)記的抗人Hb單抗_尿Hb-羊抗人Hb多抗復(fù)合物,在紙條上顯現(xiàn)一條紫紅色線,即為隱靴實(shí)驗(yàn)陽性,試帶上金標(biāo)記鼠IgG隨尿液上行至羊抗鼠IgG處,與之形成另一條紫紅色的線,為試劑質(zhì)控線。即是,隱血實(shí)驗(yàn)陽性時(shí)試帶出現(xiàn)2條紫紅色線,如果只出現(xiàn)一條紫紅色線為陰性結(jié)果,無紫紅色線出現(xiàn)即說明試帶失效?,F(xiàn)在我們分別來學(xué)習(xí)一下血紅蛋白現(xiàn)在我們分別來學(xué)習(xí)一下血紅蛋白三種方法相比較1、干(濕)化學(xué)法簡便、快速,敏感度高。但尿液被細(xì)菌,氧化劑、
鐵劑污染或尿路感染時(shí),可致結(jié)果呈假陽性;大劑量VitC也可使反應(yīng)呈假陰性。2、抗人血紅蛋白單克隆抗體法簡便、快速、敏感度更高與干擾因素少,特異性強(qiáng)。既適用于檢查尿隱血,也適用于糞便隱血。缺點(diǎn)是如果尿液標(biāo)本中游離血紅蛋白過高,可因抗原過剩而出現(xiàn)假陰性。血紅蛋白因此在進(jìn)行檢測(cè)時(shí)我們要進(jìn)行質(zhì)量控制患者檢測(cè)前如大劑量輸注VitC,5小時(shí)內(nèi)最好不做隱血檢查。防止產(chǎn)生假陰性。標(biāo)本要求新鮮、及時(shí)測(cè)定,長時(shí)間放置可因細(xì)菌繁殖造成假陽器材清潔、干燥,防止被血、膿、鐵劑、硝等物質(zhì)污染,而產(chǎn)生陽性。綜合分析結(jié)果血尿、肌紅蛋白尿也呈陽性反應(yīng),尤其是泌尿系統(tǒng)疾病引起的血尿,可使試帶法出現(xiàn)陽性,但陽性程度與顯微鏡下紅細(xì)胞數(shù)量并不成正比,此時(shí)應(yīng)綜合判斷。血紅蛋白因此在進(jìn)行檢測(cè)時(shí)我們要進(jìn)行質(zhì)量控制正常人的尿液血紅蛋白定性試驗(yàn)結(jié)果為陰性因此尿液血紅蛋白定性通常用于通常用于:1.輔助診斷泌尿系統(tǒng)疾病血紅蛋白主要存在于紅細(xì)胞內(nèi),因而泌尿系統(tǒng)疾病引起出血都可導(dǎo)致隱血試驗(yàn)陽性,尤其是隱匿性腎炎,當(dāng)尿中僅有的少量紅細(xì)胞破壞時(shí),可能表現(xiàn)為查到的紅細(xì)胞數(shù)與隱血試驗(yàn)結(jié)果不一致,應(yīng)注意分析。2.輔助診斷血管內(nèi)溶血性疾病陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿、陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿、行軍性血紅蛋白尿、自身免疫性溶血性貧血、血型不合輸血者,均可能出現(xiàn)尿隱血試驗(yàn)陽性。尿PH檢測(cè)尿pH檢測(cè)腎是調(diào)節(jié)酸堿平衡的重要器官,尿液pH取決于尿中酸性磷酸鹽和堿性磷酸鹽的相對(duì)含量,受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物和疾病種類影響較大。測(cè)定尿液酸度可間接反映腎小管的功能。尿pH檢測(cè)干化學(xué)法試帶法采用雙指示劑法,溴麝香草酚藍(lán)檢測(cè)范圍為pH6.0~7.6;甲基紅檢測(cè)范圍為pH4.6~6.2。與待測(cè)標(biāo)本接觸后,試帶變色范圍為橙紅(pH4.5)-黃綠色(pH7.0)-藍(lán)色(pH9.0)。檢測(cè)結(jié)果多由儀器判讀,也可肉眼目測(cè),對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)色板進(jìn)行判斷。簡要操作試帶浸入尿中一定時(shí)間→取出讀取結(jié)果干化學(xué)法,操作簡便、快速,已成為常規(guī)檢查方法尿pH檢測(cè)隨機(jī)尿pH最大范圍為4.6~8.0,多數(shù)尿在5.5~6.5。尿pH降低:見于代謝性酸中毒、低鉀代謝性堿中毒、痛風(fēng)、糖尿病等尿pH增高:見于堿中毒、腎小管酸中毒等也可以用于泌尿系感染的輔助診斷和判斷泌尿系統(tǒng)結(jié)石種類及指導(dǎo)臨床用藥尿人促毛激素的鑒定概述早期妊娠診斷正常妊娠期間,尿液hCG定性檢查持續(xù)陽性,血清水平略高于尿液,產(chǎn)后5~6天陰性。滋養(yǎng)層細(xì)胞腫瘤診斷及預(yù)后判斷葡萄胎、惡性葡萄胎、絨毛膜上皮細(xì)胞癌及男性患睪丸畸胎瘤患者,尿中hCG水平明顯高于正常妊娠孕婦。概述HCGα多肽鏈β多肽鏈HCG所特有,無相似物與黃體生成素LH、促卵泡生成素FSH、促甲狀腺素TSH的α鏈相似臨床上通過檢測(cè)β-HCG來反應(yīng)HCG的變化01原理試帶浸入尿液一定時(shí)間后,通過層析作用,尿中hCG先與鼠抗人β-hCG單抗結(jié)合,移行至檢測(cè)區(qū),被羊抗人hCG抗體捕獲,形成金標(biāo)記鼠抗人β-hCG單抗-β-hCG-羊抗人hCG多抗復(fù)合物,局部出現(xiàn)紫紅色區(qū)帶。同時(shí)金標(biāo)記鼠IgG隨尿上行至質(zhì)控區(qū),被羊抗鼠IgG抗體捕獲,形成金標(biāo)記鼠IgG抗原-羊抗鼠IgG抗體復(fù)合物,出現(xiàn)紫紅色區(qū)帶。02試劑帶
試劑帶依次由膠體金顆粒標(biāo)記區(qū)、檢測(cè)區(qū)和質(zhì)控區(qū)組成。①膠體金顆粒標(biāo)記區(qū):位于試帶的標(biāo)本接觸端。均勻吸附了膠體金標(biāo)記的鼠抗人β-hCG單克隆抗體和膠體金標(biāo)記的鼠IgG,呈紫紅色。鼠抗人β-hCG單抗可與尿液中人hCG特異性結(jié)合,形成人hCG—鼠抗人β-hCG單抗復(fù)合物。②檢測(cè)區(qū):位于質(zhì)控區(qū)下方。包被有羊抗人hCG多克隆抗體,可捕獲人hCG—鼠抗人hCG單抗復(fù)合物。③質(zhì)控區(qū):位于試帶手柄端,并與檢測(cè)區(qū)平行排列。包被羊抗鼠IgG抗體,可捕獲鼠IgG。03簡要操作
將試帶的箭頭端浸入尿液一定時(shí)間→取出平放→觀察結(jié)果。判斷標(biāo)準(zhǔn):出現(xiàn)兩條紅色區(qū)帶為hCG陽性;僅質(zhì)控帶紅色為陰性;不出現(xiàn)紅色區(qū)帶表明試劑失效。04質(zhì)量保證1.宜采集晨尿標(biāo)本;留尿前不要大量飲水以免稀釋,標(biāo)本要新鮮。2.不能使用嚴(yán)重蛋白尿、血尿、菌尿標(biāo)本進(jìn)行hCG檢測(cè)。3.操作時(shí)注意試紙帶浸入尿液時(shí),液面要低于兩抗體檢測(cè)線。同時(shí)加做陰、陽性對(duì)照,并做原濃度和2倍稀釋的尿液測(cè)定,均為陽性才可做出判斷。04質(zhì)量保證方法靈敏度(IU/L)臨床應(yīng)用價(jià)值膠體金標(biāo)免疫法10~25操作簡便,靈敏度高、特異性強(qiáng),半定量。受精后7~10d即可作出診斷,廣泛應(yīng)用酶聯(lián)免疫法20~50繁瑣、需時(shí)長,靈敏度高、特異性強(qiáng),適合批量檢驗(yàn)電化學(xué)法<0.1簡便、快速、靈敏度高、特異性強(qiáng),定量。多用于血液hCG測(cè)定放免法<2靈敏度高、特異性強(qiáng),穩(wěn)定,準(zhǔn)確;環(huán)境污染,需時(shí)長;臨床應(yīng)用少,主要用于醫(yī)學(xué)研究膠乳凝集抑制試驗(yàn)100~500簡便,快速、經(jīng)濟(jì)。但靈敏度低,目前已少用04質(zhì)量保證1.早期妊娠診斷正常妊娠期間,尿液hCG定性檢查持續(xù)陽性,血清水平略高于尿液,產(chǎn)后5~6天陰性。2.滋養(yǎng)層細(xì)胞腫瘤診斷及預(yù)后判斷葡萄胎、惡性葡萄胎、絨毛膜上皮細(xì)胞癌及男性患睪丸畸胎瘤患者,尿中hCG水平明顯高于正常妊娠孕婦。3.協(xié)助診斷異位妊娠及流產(chǎn)①異位妊娠也稱“宮外孕”,在宮外孕流產(chǎn)或破裂前,hCG低于正常妊娠,臨床檢查時(shí)應(yīng)選擇特異性強(qiáng)、靈敏度高的方法,宮外孕流產(chǎn)或破裂后大部分轉(zhuǎn)陰,此方法有助于和其它急腹癥相鑒別②不完全流產(chǎn)患者妊娠試驗(yàn)仍可為陽性。完全流產(chǎn)或死胎,由陽性轉(zhuǎn)為陰性尿本周蛋白定性測(cè)定概述本周蛋白又稱凝溶蛋白,其特點(diǎn)為:在pH4.5~5.5時(shí),加熱至40~60℃時(shí)沉淀,繼續(xù)加熱至90~100℃時(shí)沉淀溶解,而溫度下降到56℃時(shí)恢復(fù)凝固,因此又稱凝-溶蛋白。血液中的本周蛋白能自由通過腎小球?yàn)V過膜,當(dāng)濃度增高超過腎小管重吸收閾值時(shí),可從尿中排出本周蛋白乙酸纖維膜電泳可出現(xiàn)“M”帶,多位于α2和γ區(qū)帶之間。01熱沉淀法→56℃水浴15分鐘→取沉淀沸水浴3分鐘→尿液變清為陽性→如沉淀加重→過濾原理BJP在pH4.5~5.5條件下,加熱至56℃時(shí)沉淀,繼續(xù)加熱至90~100℃時(shí)沉淀消失,當(dāng)溫度恢復(fù)為56℃左右時(shí)又變混濁。據(jù)此可初步驗(yàn)證其存在。試劑成分及作用①200g/L磺基水楊酸:用于蛋白質(zhì)定性。②2mol/L乙酸緩沖液和晶體氯化鈉:用于沉淀其他黏蛋白。簡要操作離心尿上清液→蛋白質(zhì)定性→除去黏蛋白→冷卻至56℃→濾液渾濁為陽性。
臨檢實(shí)操有拍攝02對(duì)-甲苯磺酸法1、原理對(duì)-甲苯磺酸能沉淀分子量較小的本周蛋白,而對(duì)分子量較大的清蛋白和球蛋白不起反應(yīng)。2、試劑成分及作用①120g/L對(duì)-甲苯磺酸溶液:使BJP沉淀。②冰乙酸:設(shè)置陰性對(duì)照用。3、簡要操作離心尿上清液→加對(duì)-甲苯磺酸→靜置→渾濁加重或沉淀→陽性。03蛋白電泳分離法1、原理尿液蛋白在載體上經(jīng)電泳,BJP可在α2至γ球蛋白區(qū)帶間出現(xiàn)“M”帶。04質(zhì)量保證(1)患者:部分患者在使用某些藥物如利福平類抗結(jié)核藥時(shí)可出現(xiàn)本周蛋白尿(2)標(biāo)本:①標(biāo)本要新鮮、足量,及時(shí)送檢②混濁尿應(yīng)離心取上清液③若為蛋白尿,應(yīng)先用加熱乙酸法沉淀普通蛋白質(zhì),趁熱過濾。(3)pH:最適pH為4.5~5.5方法評(píng)價(jià)熱沉淀-溶解法靈敏度低(0.3~2.0g/L),假陰性率高,所需標(biāo)本量大,已較少使用對(duì)-甲苯磺酸法操作簡便,為靈敏度較高(BJP3mg/L)的篩檢試驗(yàn)。不與尿液清蛋白反應(yīng)。尿液球蛋白>5g/L時(shí),可出現(xiàn)假陽性蛋白電泳分離法對(duì)BJP的陽性檢出率可高達(dá)97%免疫電泳簡單易行、標(biāo)本用量少,在抗原抗體最適比例時(shí),分辨率高、特異性強(qiáng)免疫固定電泳用特異抗體鑒別區(qū)帶電泳分離的蛋白,比區(qū)帶電泳和免疫電泳更靈敏免疫速率散射濁度法在抗原-抗體反應(yīng)的最高峰測(cè)定其復(fù)合物形成量,能定量檢測(cè)κ、λ輕鏈,檢測(cè)速度快、靈敏度和精確度高、穩(wěn)定性好04質(zhì)量保證尿本周蛋白陽性漿細(xì)胞病中約50%的多發(fā)性骨髓瘤及15%的巨球蛋白血癥出現(xiàn)本周蛋白尿,為重要診斷依據(jù)之一。另外,慢性淋巴細(xì)胞性白血病、淋巴肉瘤及腎淀粉樣變患者也可出現(xiàn)本周蛋白尿。M蛋白多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、淋巴瘤患者,血或尿中可出現(xiàn)M蛋白,因此M蛋白尤其對(duì)于多發(fā)性骨髓瘤診斷有重要的臨床意義。乳糜定性檢查乳糜定性檢查脂肪在腸道吸收后皂化形成乳糜液,正常情況下乳糜液進(jìn)入腸道淋巴管,參與淋巴循環(huán)。若乳糜液沒引流入血,而是逆行至泌尿系統(tǒng)淋巴管,引起該處淋巴管內(nèi)壓力增高、曲張破裂進(jìn)入尿液,形成乳糜尿。乳糜尿的程度與患者攝入脂肪量、淋巴管破裂程度和運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度等有關(guān)。內(nèi)含脂肪微粒、卵磷脂、膽固醇、少量纖維蛋白原和清蛋白乳糜定性檢查乳糜尿的程度與患者攝入脂肪量、淋巴管破裂程度和運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度等有關(guān)。根據(jù)脂肪的特性,實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)乳糜尿的檢測(cè)方法為有機(jī)溶劑萃取染色法有機(jī)溶劑萃取染色法糜尿中的乳糜微?;蛑拘〉稳芙庥谥苄杂袡C(jī)溶劑,乙醚提取物可被脂溶性染料(蘇丹Ⅲ)染成橘紅色乳糜定性檢查(二)質(zhì)量保證在進(jìn)行檢測(cè)時(shí)要注意區(qū)分,乳糜尿與過多的鹽類結(jié)晶尿及膿尿在外觀上容易混淆,定性檢查陽性,應(yīng)在顯微鏡下查找微絲蚴乳糜定性檢查正常人的尿液是不會(huì)出現(xiàn)乳糜尿的乳糜尿陽性常見于:1.累及淋巴循環(huán)的疾病如先天性淋巴管畸形、腫瘤壓迫、腹腔結(jié)核等導(dǎo)致腹腔淋巴管或胸導(dǎo)管阻塞。2.絲蟲病絲蟲在淋巴系統(tǒng)中引起炎癥反復(fù)發(fā)作,使腹腔淋巴管或胸導(dǎo)管廣泛阻塞,導(dǎo)致腎淋巴管破裂出現(xiàn)乳糜尿。尿含鐵血黃素定性檢查概述含鐵血黃素是一種顆粒狀、暗黃色、不穩(wěn)定的鐵蛋白聚合物。血管內(nèi)溶血時(shí),大部分游離血紅蛋白隨尿排出,形成血紅蛋白尿;小部分被腎小管上皮細(xì)胞攝取并分解為含鐵血黃素,當(dāng)細(xì)胞脫落時(shí)隨尿排出。01Rous試驗(yàn)原理含鐵血黃素中的高鐵離子,在酸性環(huán)境中與亞鐵氰化鉀作用,產(chǎn)生藍(lán)色的亞鐵氰化鐵沉淀,顯微鏡下可見藍(lán)色閃光顆粒。此即普魯士藍(lán)反應(yīng)檢查(Rous試驗(yàn))。試劑成分及主要作用①亞鐵氰化鉀水溶液:與含鐵血黃素的Fe3+結(jié)合生成亞鐵氰化鐵,將含鐵血黃素中的Fe2+氧化為Fe3+。后者與亞鐵氰化鉀結(jié)合生成亞鐵氰化鐵。②鹽酸:提供酸性環(huán)境。簡要操作尿液離心→留取沉渣→加亞鐵氰化鉀水溶液→加鹽酸→離心→顯微鏡下觀察沉淀物。02質(zhì)量保證1.留清晨第一次尿并將全部尿液自然沉淀,再取沉淀物離心,提高陽性率。2.所用容器,器材、試劑均應(yīng)潔凈,防止鐵劑污染導(dǎo)致假陽性。3.加做陰性對(duì)照。如亞鐵氰化鉀與鹽酸混合即顯深藍(lán)色,表示試劑已被污染。4.保證鹽酸濃度,以免出現(xiàn)假陰性。(四)參考區(qū)間陰性。(五)臨床意義慢性血管內(nèi)溶血,如陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥可引起含鐵血黃素尿,但在溶血初期,雖然有血紅蛋白尿,由于血紅蛋白尚未被腎上皮細(xì)胞所吸收,未形成含鐵血黃素排出,該試驗(yàn)可呈陰性,而隱血試驗(yàn)可呈陽性。但有時(shí)血紅蛋白含量少,隱血試驗(yàn)可能為陰性,而本試驗(yàn)可能陽性。肌紅蛋白01肌紅蛋白是橫紋肌合成的結(jié)構(gòu)及特性與血紅蛋白相似、含亞鐵血紅素的蛋白質(zhì)。當(dāng)橫紋肌受損時(shí),肌紅蛋白可大量釋放進(jìn)入血液循環(huán),并通過腎小球?yàn)V過膜隨尿液排出體外尿液肌紅蛋白檢查陽性稱為肌紅蛋白尿02化學(xué)法原理Mb能溶于80%硫酸銨溶液中,其血紅素也具有類過氧化氫酶樣活性,隱血試驗(yàn)陽性。試劑及作用①隱血試驗(yàn)試劑或干化學(xué)試帶②80%硫酸銨溶液簡要操作尿液隱血試驗(yàn)→陽性→加80%硫酸銨溶液→離心→上清液隱血試驗(yàn)→陽性者為肌紅蛋白尿。03干化學(xué)試帶法肌紅蛋白與血紅蛋白結(jié)構(gòu)相似,都具有類似過氧化物酶的活性,方法同尿液隱血試驗(yàn)。04臨床意義創(chuàng)傷擠壓綜合征、燒傷、手術(shù)創(chuàng)傷等缺氧、缺血局部組織缺血可使肌肉組織破壞,如心肌缺血所致心肌梗死,尿中可查到Mb,但一般不能僅以尿肌紅蛋白陽性作為心肌梗死的確診依據(jù),應(yīng)同時(shí)檢測(cè)其它心肌損傷標(biāo)志物進(jìn)行綜合分析。陣發(fā)性肌紅蛋白尿見于劇烈運(yùn)動(dòng),如馬拉松長跑后其它原發(fā)性肌紅蛋白尿癥和家族性肌病、肌炎綜合征、進(jìn)行性肌營養(yǎng)不良等也可出現(xiàn)肌紅蛋白尿顯微鏡檢驗(yàn)?zāi)夸汣ONTENTⅠ血細(xì)胞與吞噬細(xì)胞Ⅱ尿液上皮細(xì)胞尿液結(jié)晶Ⅲ血栓與止血一般檢查Ⅵ尿液管型Ⅳ血小板檢驗(yàn)Ⅴ血細(xì)胞與吞噬細(xì)胞01紅細(xì)胞正常形態(tài):淡黃色、雙凹圓盤形,有弱折光性異常形態(tài):滲透壓和酸堿度的影響正常RBC、皺縮RBC、影RBC01紅細(xì)胞均一紅細(xì)胞血尿:非腎小球性非均一紅細(xì)胞血尿:腎小球性混合性血尿:含有均一性和非均一性兩類紅細(xì)胞的血尿。01紅細(xì)胞紅細(xì)胞臨床意義血尿見于:①腎?。耗I小球腎炎、腎盂腎炎、腎腫瘤、腎結(jié)石、腎結(jié)核等。②下尿道疾病:感染、結(jié)石、腫瘤、膀胱出血等。③其他:白血病、凝血因子異常用于某些疾病的鑒別診斷02白細(xì)胞白細(xì)胞膿細(xì)胞02白細(xì)胞白細(xì)胞臨床意思尿中中性粒細(xì)胞大量增加:常見于泌尿系統(tǒng)炎癥,如腎盂腎炎、膀胱炎“閃光細(xì)胞”尿中單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞增加:見于腎移植后排斥反應(yīng)的患者:淋巴增多,還可見于病毒感染嗜酸性粒細(xì)胞增多:見于間質(zhì)性腎炎,變態(tài)反應(yīng)性疾病03吞噬細(xì)胞上皮細(xì)胞(1)鱗狀上皮細(xì)胞來自尿道前段,明顯增多并伴有白細(xì)胞增多,則提示該處有炎(2)柱狀上皮細(xì)胞來自尿道中段、前列腺、精囊、尿道腺等處03吞噬細(xì)胞上皮細(xì)胞(3)移行上皮細(xì)胞來自腎盂、輸尿管、膀胱及尿道近膀胱段等處的移行上皮組織。出現(xiàn)此類細(xì)胞提示炎癥03吞噬細(xì)胞上皮細(xì)胞(4)腎小管上皮細(xì)胞細(xì)胞來自腎小管來自腎小管,出現(xiàn)或增多提示腎小管有病變。腎小管上皮細(xì)胞可發(fā)生脂肪變性,胞質(zhì)內(nèi)充滿脂肪顆粒,甚至將胞核覆蓋,稱為復(fù)粒細(xì)胞或脂肪顆粒細(xì)胞尿液上皮細(xì)胞01未離心尿未染色涂片鏡檢簡要操作混勻尿液→涂片、蓋蓋玻片→低倍鏡觀察、計(jì)數(shù)→高倍鏡觀察、計(jì)數(shù)
↓
↓鑒定管型的種類、計(jì)數(shù)細(xì)胞及結(jié)晶,10個(gè)視野觀全貌、計(jì)數(shù)管型、20個(gè)視野報(bào)告方式:03標(biāo)準(zhǔn)化定量計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)簡要操作:離心(同離心沉淀涂片法)→充池→計(jì)數(shù)→報(bào)告結(jié)果(每微升尿液內(nèi)細(xì)胞、管型數(shù))。報(bào)告方式:細(xì)胞或管型/uL041小時(shí)尿液有形成分排泄率簡要操作:標(biāo)本采集:收集上午6:00~9:00尿標(biāo)本,患者先排尿棄去,再準(zhǔn)確收集此后3小時(shí)尿液于清潔干燥容器內(nèi)送檢。測(cè)定標(biāo)本量:用量筒準(zhǔn)確測(cè)定3小時(shí)尿量(ml數(shù)),并記錄;離心:取混勻尿液置刻度離心管內(nèi),離心1500r/min×5min;留取尿沉渣:尿沉渣并混勻。充池:分別吸取混勻尿沉渣一滴,充入血細(xì)胞計(jì)數(shù)池內(nèi)。計(jì)數(shù):計(jì)數(shù)10個(gè)大方格中的紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型數(shù)量。計(jì)算:1小時(shí)細(xì)胞(管型)數(shù)=10大方格細(xì)胞總數(shù)×1000÷10×3小時(shí)尿量÷3參考區(qū)間尿液結(jié)晶什么是管型:管型是由尿蛋白、細(xì)胞及碎片在腎小管、集合管中凝聚而成的圓柱形蛋白聚體。管型是尿沉渣中具有重要意義的成分,管型尿的出現(xiàn),主要提示腎臟發(fā)生實(shí)質(zhì)性損害。概述結(jié)晶生理性結(jié)晶結(jié)晶生理性結(jié)晶01管型的形成1、管型的形成三個(gè)條件原尿中含有一定量的蛋白質(zhì)或細(xì)胞,特別是T-H蛋白,它是形成管型的核心蛋白質(zhì)。腎小管具有濃縮和酸化尿液的能力,濃縮能提高蛋白質(zhì)含量又能增加鹽類濃度,酸化能促進(jìn)蛋白質(zhì)的沉淀。有可供交替使用的腎單位,能交替休息和工作。02管型的種類1、透明管型主要由T-H蛋白及少量的血漿蛋白質(zhì)組成,偶爾可附有少量細(xì)小顆粒或細(xì)胞。無色透明,表面光滑菲薄,折光性較弱,適合暗視野觀察。正常人清晨濃縮尿液中偶見透明管型。當(dāng)腎有輕度或暫時(shí)性功能改變時(shí),如劇烈運(yùn)動(dòng),長期發(fā)熱、心功能不全,麻醉或服用利尿劑后,可見少量透明管型。老年人尿中也可見增多。而明顯增多主要見于腎實(shí)質(zhì)病變,如急性或慢性腎小球腎炎、腎病綜合征、急性腎盂腎炎、腎淤血、充血性心力衰竭及惡性高血壓等。02管型的種類2、顆粒管型它是指管型中的顆粒含量占總面積的1/3以上,由發(fā)生變性的細(xì)胞分解產(chǎn)物或血漿蛋白質(zhì)直接聚集形成。外形比透明管型要短且寬大,易折裂而出現(xiàn)不規(guī)則的斷痕,呈無色、黃褐色或棕色,其顆粒輪廓清晰。按顆粒的粗細(xì)分為粗顆粒管型和細(xì)顆粒管型兩種,粗顆粒管型內(nèi)充滿粗大顆粒,呈暗褐色,細(xì)顆粒管型內(nèi)充滿細(xì)顆粒,不透明,呈灰色或微黃色。顆粒管型的出現(xiàn)提示腎單位有淤滯現(xiàn)象。表示腎有實(shí)質(zhì)性病變。多見于急性或慢性腎小球腎炎、腎盂腎炎、腎小管硬化癥、腎病、病毒性疾病、慢性鉛中毒及腎移植的急性排斥反應(yīng)等。02管型的種類3、細(xì)胞管型指管型基質(zhì)內(nèi)含有的細(xì)胞數(shù)量占管型體積的1/3以上。根據(jù)管型內(nèi)所含細(xì)胞種類的不同,分為以下3種:(1)紅細(xì)胞管型:管型基質(zhì)中含有不同數(shù)量的紅細(xì)胞,低倍鏡下呈棕黃色或紅色,管型內(nèi)的紅細(xì)胞通常已破損。常見于急性腎小球腎炎、慢性腎小球腎炎急性發(fā)作、腎出血及腎移植后的急性排斥反應(yīng)。亦見于狼瘡性腎炎、腎梗死、腎靜脈血栓形成等。若管型中紅細(xì)胞已全部溶解,則成為棕紅色均質(zhì)性的血紅蛋白管型。02管型的種類3、細(xì)胞管型(2)白細(xì)胞管型:指管型基質(zhì)內(nèi)含有較多數(shù)量的白細(xì)胞。白細(xì)胞雖呈球形,聚集成塊狀,在形態(tài)上與上皮細(xì)胞管型不易區(qū)分,但白細(xì)胞管型過氧化物酶染色(POX)呈陽性。白細(xì)胞管型的出現(xiàn)表示有化膿性炎癥,常見于急性腎盂腎炎、間質(zhì)性腎炎。亦可見于非感染性炎癥(如狼瘡性腎炎)、腎病綜合征及腎小球腎炎等。(3)腎上皮細(xì)胞管型(簡稱上皮細(xì)胞管型):指管型基質(zhì)中含有大量腎小管上皮細(xì)胞。比白細(xì)胞略大,常見疊瓦狀排列,根據(jù)細(xì)胞核的形狀可與白細(xì)胞相區(qū)別。細(xì)胞變性后,核形模糊,胞體大小不定,識(shí)別困難。可用加酸法使其核形清楚,其過氧化物酶染色陰性。正常人尿中不會(huì)出現(xiàn)上皮細(xì)胞管型,若出現(xiàn)則提示腎小管病變,腎小管上皮細(xì)胞變性脫落。常見于急性腎小管壞死、急性腎炎、腎淀粉樣變性、間質(zhì)性腎炎及重金屬或藥物中毒等。亦可見于阻塞性黃疸、腎移植后排斥反應(yīng)等。02管型的種類4、脂肪管型指管型中脂肪滴含量占體積的1/3以上。由于腎小管損傷后,上皮細(xì)胞發(fā)生脂肪變性、崩解,大量脂肪滴進(jìn)入管型內(nèi)而形成。脂肪管型呈灰色或灰藍(lán)色,脂肪滴大小不等,圓形,折光性強(qiáng)。正常人尿中無脂肪管型。若出現(xiàn)多見于腎病綜合征、亞急性腎小球腎炎、慢性腎小球腎炎、腎小管中毒及類脂性腎病等。5.蠟樣管型
其外形寬大,呈淺灰色或淡黃色,有蠟燭樣高度折光,質(zhì)地較厚,易折斷,邊緣常見裂紋,不含細(xì)胞及顆粒。02管型的種類5、蠟樣管型其外形寬大,呈淺灰色或淡黃色,有蠟燭樣高度折光,質(zhì)地較厚,易折斷,邊緣常見裂紋,不含細(xì)胞及顆粒。正常人尿中無蠟樣管型,若出現(xiàn)則提示局部腎單位有長期阻塞,有少尿或無尿現(xiàn)象存在,說明腎病變嚴(yán)重。見于慢性腎小球腎炎的晚期腎功能不全及腎淀粉樣變。02管型的種類6、寬幅管型又稱腎衰竭管型,多為顆粒管型和蠟樣管型演變而成,其寬度為一般管型的2~6倍,形狀寬而長、不規(guī)則、易折斷。常見于急性腎衰竭的多尿期,在慢性腎炎的晚期出現(xiàn)時(shí),提示預(yù)后不良。04其他1.脂肪球2.細(xì)菌3.真菌4.寄生蟲:陰道毛滴蟲,微絲蚴。5.精子尿液管型尿液管型管型形成必要條件
原尿含蛋白質(zhì)或細(xì)胞,特別是T-H糖蛋白腎小管有使尿液濃縮和酸化的能力有可供交替使用的腎單位尿液管型1.
透明管型
是各類管型的基本結(jié)構(gòu)單位,由T-H糖蛋白質(zhì)及少量的血漿蛋白質(zhì)組成。正常人偶見尿液管型2.
細(xì)胞管型
紅細(xì)胞管型
提示腎小球或腎小管出血尿液管型2.
細(xì)胞管型
白細(xì)胞管型
表示有化膿性炎癥尿液管型2.
細(xì)胞管型
腎小管上皮細(xì)胞管型
提示腎小管受累,腎小管上皮細(xì)胞剝離變性尿液管型2.
細(xì)胞管型
脂肪管型,提示腎小管損傷,見于腎病綜合征尿液管型2.
細(xì)胞管型
臘樣管型提示腎臟疾病的慢性化和嚴(yán)重化寬幅管型見于急性腎衰竭的多尿期尿干化學(xué)分析儀目錄CONTENTⅠ尿干化學(xué)分析儀的操作Ⅱ檢測(cè)結(jié)果和臨床意義結(jié)構(gòu)和原理Ⅲ血栓與止血一般檢查Ⅵ尿干化學(xué)試帶的結(jié)構(gòu)Ⅳ血小板檢驗(yàn)Ⅴ尿干化學(xué)分析儀的操作方法及注意事項(xiàng)概述尿干化學(xué)分析儀在使用尿干化學(xué)分析儀前,必須先掌握分析儀的檢測(cè)原理不同類型、型號(hào)的儀器操作程序并不完全相同操作前應(yīng)仔細(xì)參閱儀器的說明書認(rèn)真學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)操作程序掌握正確的操作方法掌握正確的操作步驟開始使用儀器獨(dú)立檢測(cè)標(biāo)本操作步驟如下:標(biāo)本準(zhǔn)備:留取合適的尿液標(biāo)本,即時(shí)送檢儀器準(zhǔn)備:開機(jī)前廢物盒是否已倒空、試帶與儀器是否配套、是否在效期內(nèi),開啟電源,待儀器完成自檢室內(nèi)質(zhì)控:質(zhì)控帶放入檢測(cè)槽內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),檢測(cè)完成后,將質(zhì)控帶取出,收存。開始檢測(cè):按開始檢測(cè)鍵,提示音后將試帶浸入尿液中,置于檢測(cè)槽內(nèi),儀器會(huì)自動(dòng)完成檢測(cè)結(jié)果審核與
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