IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞制備及質(zhì)量鑒定規(guī)范

ICS07.080

CCSC04

團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)

T/XXXXXXX—XXXX

IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞制備及質(zhì)量鑒定規(guī)范

SpecificationforpreparationandqualityidentificationofIPSCderivedmesenchymal

stemcells

XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實(shí)施

中國國際經(jīng)濟(jì)技術(shù)合作促進(jìn)會發(fā)布

T/XXXXXXX—XXXX

IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞制備及質(zhì)量鑒定規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞的術(shù)語和定義、基本要求、制備過程、質(zhì)量鑒定。

本文件適用于IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞的制備與質(zhì)量鑒定。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB3095環(huán)境空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求

GB50073潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范

GB50346生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范

GB50591潔凈室施工及驗(yàn)收規(guī)范

3術(shù)語和定義、縮略語

術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1.1

誘導(dǎo)多能干細(xì)胞inducedpluripotentstemcell；IPSC

由人體細(xì)胞經(jīng)重編程而獲得的具有自我更新能力和向三胚層細(xì)胞分化潛能的一種干細(xì)胞。

3.1.2

凍存cryopreservation

經(jīng)過程序降溫冷凍，并利用深低溫冷凍儲存技術(shù)，以減少細(xì)胞代謝活動，保存細(xì)胞生物學(xué)活性。

3.1.3

復(fù)蘇thawing

細(xì)胞從脫離生長狀態(tài)重新獲得生長活力的過程。

3.1.4

細(xì)胞活率cellviability

能夠增值、保持正常代謝活性的細(xì)胞占全部細(xì)胞的百分比。

縮略語

下列縮略語適用于本文件。

HAV：甲型肝炎病毒（HepatitisAVirus）

HBV：乙型肝炎病毒（HepatitisBVirus）

HCV：丙型肝炎病毒（HepatitisCVirus）

HIV：人類免疫缺陷病毒（HumanImmunodeficiencyVirus）

IPSC：誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（InducedPluripotentStemCell）

4基本要求

場地與設(shè)施

1

T/XXXXXXX—XXXX

4.1.1IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞制備機(jī)構(gòu)選址應(yīng)符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》要求，空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)

符合GB3095標(biāo)準(zhǔn)分級二級標(biāo)準(zhǔn)。

4.1.2IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞制備機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室或廠房應(yīng)由具有潔凈實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建設(shè)資質(zhì)的工程公司

設(shè)計(jì)與建造，并應(yīng)符合GB19489、GB50073、GB50346和GB50591的規(guī)定。建設(shè)完成后，各功能區(qū)域

的潔凈級別應(yīng)由專業(yè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測并出具合格證明。

4.1.3干細(xì)胞制備功能區(qū)應(yīng)按IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞制備工藝進(jìn)行各區(qū)域設(shè)計(jì)，符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量

管理規(guī)范》和《干細(xì)胞制劑質(zhì)量控制及臨床前研究指導(dǎo)原則》要求。干細(xì)胞制備機(jī)構(gòu)應(yīng)配備獨(dú)立質(zhì)量檢

測實(shí)驗(yàn)室，并符合GB19489和GB50346的規(guī)定。

設(shè)備和耗材

4.2.1IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞的制備機(jī)構(gòu)應(yīng)優(yōu)先選用符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》和《干細(xì)胞制劑

質(zhì)量控制及臨床前研究指導(dǎo)原則》要求，獲得國家資質(zhì)認(rèn)證的設(shè)備、儀器、耗材和試劑。

4.2.2IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞的制備機(jī)構(gòu)應(yīng)對設(shè)備、儀器、耗材和試劑供應(yīng)商進(jìn)行資質(zhì)審核認(rèn)證，要

求供應(yīng)商提供產(chǎn)品質(zhì)量報(bào)告和批次檢驗(yàn)報(bào)告，并對耗材及試劑進(jìn)行質(zhì)量抽檢，避免采購質(zhì)量不合格的產(chǎn)

品。

4.2.3IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞的制備機(jī)構(gòu)設(shè)備和儀器正式使用前應(yīng)做安裝確認(rèn)(IQ)、運(yùn)行確認(rèn)（OQ）

和性能確認(rèn)(PQ)，并定期進(jìn)行第三方校準(zhǔn)，不得使用有安全隱患的儀器操作樣本及細(xì)胞制品。

4.2.4IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞的制備機(jī)構(gòu)應(yīng)對設(shè)備與儀器進(jìn)行編號建檔，并建立標(biāo)準(zhǔn)操作流程(SOP)，

確保使用、運(yùn)行、保養(yǎng)、維修記錄完整可追溯，對于關(guān)鍵工藝相關(guān)設(shè)備參數(shù)應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測，及時(shí)對狀

態(tài)異常的設(shè)備進(jìn)行校對和維修。

人員管理

4.3.1IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞制備機(jī)構(gòu)應(yīng)分別設(shè)立干細(xì)胞制備負(fù)責(zé)人、質(zhì)量管理負(fù)責(zé)人和質(zhì)量授權(quán)人

崗位。由法人授權(quán)任命，任職資質(zhì)應(yīng)符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》和《干細(xì)胞制劑質(zhì)量控制及臨床前

研究指導(dǎo)原則》要求，定期接受崗位專業(yè)培訓(xùn)，制備技術(shù)負(fù)責(zé)人與質(zhì)量管理負(fù)責(zé)人、質(zhì)量授權(quán)人不得相

互兼任。

4.3.2IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞制備和質(zhì)控技術(shù)人員應(yīng)具備的健康要求：HAV、HBV、HCV、HIV及梅毒的

抗體檢測應(yīng)為陰性，并且(矯正)視力正常，無色盲、色弱。

4.3.3IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞制備和質(zhì)控技術(shù)人員應(yīng)半年接受體檢一次，有呼吸道感染或發(fā)熱等疾病

狀態(tài)下不得進(jìn)入潔凈操作區(qū)，需完全康復(fù)后方可恢復(fù)崗位操作。

4.3.4IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞制備和質(zhì)控技術(shù)人員上崗前應(yīng)經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)，內(nèi)容包括但不限于干細(xì)胞

理論與實(shí)踐、生命倫理、干細(xì)胞法律法規(guī)、GMP管理、GCP資質(zhì)、制劑基本知識、細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)、生物

安全、儀器設(shè)備使用與維護(hù)方法、物料管理與清潔衛(wèi)生、崗位職責(zé)、操作規(guī)范等內(nèi)容。

5制備過程

樣本采集

5.1.1基本原則

5.1.1.1樣本采集與處理應(yīng)符合GB/T37864的要求。

5.1.1.2采集和處理程序可供樣本采集人員使用。

5.1.1.3應(yīng)具備相關(guān)的資質(zhì)和設(shè)施環(huán)境。

5.1.1.4應(yīng)通過倫理審查批準(zhǔn)并履行知情同意程序。

5.1.1.5應(yīng)建立適當(dāng)?shù)馁|(zhì)量管理體系確保符合用戶需求并持續(xù)改進(jìn)。

5.1.2供者健康

5.1.2.1間充質(zhì)干細(xì)胞采集制備方應(yīng)對干細(xì)胞供者的基本信息與健康信息進(jìn)行詳細(xì)采集與記錄，同時(shí)

做好對供者的隱私保護(hù)，相關(guān)記錄入檔保留至少30年。

5.1.2.2干細(xì)胞供者應(yīng)無血液系統(tǒng)疾病、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤史、性傳播疾病及高危人群史、

吸毒史，不應(yīng)具有包括但不限于以下疾病或健康狀況：

2

T/XXXXXXX—XXXX

a)一般傳染性疾病或其他遺傳疾病：HIV、HBV、HCV、梅毒、HTLV、EBV與CMV抗體與核酸檢測

應(yīng)為陰性；

b)傳染性皮膚病(未治愈的)；

c)大面積皮膚損傷(未治愈的)；

d)鼻/咽喉傳染病(未治愈的)。

e)采集前12個(gè)小時(shí)內(nèi)用過酒精，鎮(zhèn)靜藥等。

5.1.3采集場所

采集場所應(yīng)達(dá)到Ⅲ級潔凈手術(shù)室要求。

5.1.4采集人員

采集人員應(yīng)具有醫(yī)師職業(yè)證，且經(jīng)過相應(yīng)的技術(shù)培訓(xùn)。

5.1.5采集流程

5.1.5.1采集人員應(yīng)按照要求填寫個(gè)人信息，個(gè)人信息表應(yīng)包括但不限于：姓名、性別、有效身份證

件、聯(lián)系方式、緊急聯(lián)絡(luò)人、住址等。

5.1.5.2采集人員在采集前填寫健康調(diào)查表。

5.1.5.3樣本采集過程應(yīng)采取措施保護(hù)供者的健康和安全，并通過無菌技術(shù)最大限度降低污染、感染

和病原傳播的風(fēng)險(xiǎn)。采集用的接觸采集物的試劑和物料應(yīng)無菌、符合臨床安全標(biāo)準(zhǔn)，且在有效期內(nèi)使用。

分離與培養(yǎng)

5.2.1選取的成年細(xì)胞在細(xì)胞培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，以確保它們的生長和健康狀態(tài)

5.2.2取組織細(xì)胞進(jìn)行STR檢測。

5.2.3可采用組織貼塊法或酶消化法等方法分離間充質(zhì)干細(xì)胞，分離方法應(yīng)經(jīng)過驗(yàn)證。

5.2.4培養(yǎng)需符合無菌操作要求，保證無外源微生物污染。

病毒載體傳遞和細(xì)胞轉(zhuǎn)化

使用病毒載體來引導(dǎo)誘導(dǎo)因子進(jìn)入成年細(xì)胞中。這些誘導(dǎo)因子通常包括Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc

等。成年細(xì)胞在誘導(dǎo)因子的作用下開始重編程。

細(xì)胞傳代

5.4.1IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞傳代操作應(yīng)嚴(yán)格遵照《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》和《干細(xì)胞制劑質(zhì)量控

制及臨床前研究指導(dǎo)原則》要求，保證無外源微生物污染，相關(guān)操作均進(jìn)行記錄并入檔保存至少30年。

5.4.2IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞一般情況在達(dá)到80%～90%融合度可進(jìn)行傳代操作，傳代操作應(yīng)密度適

宜、及時(shí)，迅速。

5.4.3傳代所使用消化酶應(yīng)符合IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞分離與培養(yǎng)的基本要求，盡量采用國家已批

準(zhǔn)的臨床級產(chǎn)品。如必須使用動物源性消化酶，應(yīng)確保其無特定動物源性病毒污染。

細(xì)胞凍存

5.5.1IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞凍存操作應(yīng)嚴(yán)格遵照《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》和《干細(xì)胞制劑質(zhì)量控

制及臨床前研究指導(dǎo)原則》要求，保證無外源微生物污染，相關(guān)操作均進(jìn)行記錄并入檔保存至少30年。

5.5.2經(jīng)制備數(shù)量達(dá)到凍存要求的IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞系可進(jìn)行凍存操作，凍存細(xì)胞應(yīng)加入適當(dāng)

的凍存保護(hù)液，遵循程序降溫原則，并在液氮中進(jìn)行保存。

5.5.3凍存液成分應(yīng)符合IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞分離與培養(yǎng)的基本要求，盡量采用國家已批準(zhǔn)的臨

床級產(chǎn)品或藥品輔料，二甲基亞砜含量不得超過10%，如必須使用動物源性血清，應(yīng)確保其無特定動物

源性病毒污染，嚴(yán)禁使用海綿狀腦病流行區(qū)來源的牛血清。

5.5.4凍存細(xì)胞應(yīng)標(biāo)明干細(xì)胞名稱、培養(yǎng)條件、代次、批次、操作人員、凍存日期等信息，并具有唯

一標(biāo)識。

5.5.5液氮凍存應(yīng)使用符合要求的液氮容器，氣相凍存，由專人負(fù)責(zé)，保證液氮充足，溫度恒定。

細(xì)胞復(fù)蘇

3

T/XXXXXXX—XXXX

5.6.1將凍存管從冷凍罐中取出后，盡快放入37℃～42℃水浴鍋中，輕搖凍存管使其內(nèi)容物在3min

內(nèi)融化。用75%酒精擦拭凍存管外部后，將其移入無菌操作臺內(nèi)。

5.6.2將干細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至含有培養(yǎng)基的離心管中進(jìn)行離心，去除冷凍保護(hù)劑。離心后用完全培養(yǎng)基

重懸干細(xì)胞，并將細(xì)胞按密度接種于培養(yǎng)瓶中，放入CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

5.6.3復(fù)蘇后細(xì)胞的活率應(yīng)不低于75%。復(fù)蘇后細(xì)胞的接種密度應(yīng)適宜。

制劑制備

5.7.1復(fù)蘇檢測合格的工作庫細(xì)胞，按規(guī)定的接種密度進(jìn)行接種、培養(yǎng)；融合度達(dá)到70%～90%時(shí)，按

規(guī)定的制劑類型制備成IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞制劑。

5.7.2按制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗(yàn)，檢驗(yàn)合格后進(jìn)行制劑放行。

6質(zhì)量鑒定

鑒定內(nèi)容

6.1.1間充質(zhì)干細(xì)胞安全性

6.1.1.1微生物檢測

參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則1101無菌檢測法執(zhí)行，對間充質(zhì)干細(xì)胞樣本采集、

運(yùn)輸、分離、培養(yǎng)、凍存、復(fù)蘇等生產(chǎn)制備環(huán)節(jié)進(jìn)行留樣（保存液、清洗液、培養(yǎng)基上清、凍存液等）

檢測。細(xì)菌和真菌檢測結(jié)果都應(yīng)為陰性。

6.1.1.2支原體檢測

參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則3301支原體檢測法執(zhí)行，對間充質(zhì)干細(xì)胞樣本采集、

運(yùn)輸、分離、培養(yǎng)、凍存、復(fù)蘇等生產(chǎn)制備環(huán)節(jié)進(jìn)行留樣（保存液、清洗液、培養(yǎng)基上清、凍存液等）

檢測。支原體檢測結(jié)果都應(yīng)為陰性。

6.1.1.3細(xì)胞內(nèi)外源致病因子檢測

采用血清ELISA檢測法或核酸檢測法，對間充質(zhì)干細(xì)胞樣本采集、運(yùn)輸、分離、培養(yǎng)、凍存、復(fù)蘇

等生產(chǎn)制備環(huán)節(jié)進(jìn)行留樣（保存液、清洗液、培養(yǎng)基上清、凍存液、細(xì)胞等）檢測。HIV抗體、HBsAg、

HCV抗體、TP抗體、CMV-IgM、HTLV抗體、HPV抗體、HHV抗體、EBV抗體檢測應(yīng)為陰性；HCV、HBV、HIV病

毒核酸檢測應(yīng)為陰性。

6.1.1.4內(nèi)毒素檢測

參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則1143細(xì)菌內(nèi)毒素檢測法執(zhí)行，對間充質(zhì)干細(xì)胞樣本

采集、運(yùn)輸、分離、培養(yǎng)、凍存、復(fù)蘇等生產(chǎn)制備環(huán)節(jié)進(jìn)行留樣（保存液、清洗液、培養(yǎng)基上清、凍存

液等）檢測。各類樣本中的內(nèi)毒素檢測值應(yīng)≤0.5EU/mL。

6.1.1.5異常免疫學(xué)反應(yīng)檢測

采用流式細(xì)胞術(shù)以及ELISA技術(shù)測定間充質(zhì)干細(xì)胞對于活化的人總淋巴細(xì)胞的增殖和對不同淋巴

細(xì)胞亞群增殖能力的影響，以及對淋巴細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子分泌的影響。淋巴細(xì)胞亞群應(yīng)無異常增殖，細(xì)

胞因子表達(dá)水平應(yīng)無異常增加。

6.1.1.6致瘤性檢測

采用免疫缺陷動物（裸鼠或SCID鼠），通過局部或靜脈方式接種間充質(zhì)干細(xì)胞，評價(jià)間充質(zhì)干細(xì)胞

致瘤性。體內(nèi)致瘤試驗(yàn)嚴(yán)格遵照動物倫理要求執(zhí)行，單只小鼠接種間充質(zhì)干細(xì)胞數(shù)量≥106細(xì)胞/kg，觀

察期≥12周。間充質(zhì)干細(xì)胞應(yīng)無致瘤性。

6.1.2間充質(zhì)干細(xì)胞穩(wěn)定性

6.1.2.1細(xì)胞數(shù)量和活率檢測

選用血球細(xì)胞計(jì)數(shù)板或細(xì)胞計(jì)數(shù)儀進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，將待檢測細(xì)胞使用臺盼藍(lán)或A0/PI熒光染料染

4

T/XXXXXXX—XXXX

色，讀取細(xì)胞數(shù)并計(jì)算活率。各代數(shù)及批次間充質(zhì)干細(xì)胞活細(xì)胞比例≥90%。

6.1.2.2生長活性檢測

通過檢測細(xì)胞倍增時(shí)間、細(xì)胞周期、克隆形成率以及端粒酶活性對間充質(zhì)干細(xì)胞生長活性進(jìn)行測定，

各代數(shù)及批次間充質(zhì)干細(xì)胞應(yīng)處于指數(shù)生長期，GO期細(xì)胞數(shù)≤10%，具有端粒酶活性。

6.1.2.3細(xì)胞純度和均一性檢測

采用間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志物流式檢測以及人基因組DNA短片段重復(fù)序列(STR)測序進(jìn)行檢定。各

代數(shù)及批次間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志物表達(dá)應(yīng)符合流式檢測比例要求，單一細(xì)胞系的間充質(zhì)干細(xì)胞各代

次及批次細(xì)胞STR檢測結(jié)果應(yīng)保持一致。

6.1.3間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特征

6.1.3.1細(xì)胞形態(tài)檢測

顯微鏡下觀察，間充質(zhì)干細(xì)胞貼壁生長，呈梭形或星狀外觀，形態(tài)均一。

6.1.3.2細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測

采用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行測定，間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志物CD73、CD90、CD105陽性率不低于95%；CD14、

CD31、CD34、CD45、HLA-DR陽性率不高于5%。

6.1.3.3染色體核型檢測

采用G帶分析法進(jìn)行測定，間充質(zhì)干細(xì)胞染色體數(shù)量為46(含XX/XY)，無染色體缺失、異位和重排現(xiàn)

象。

6.1.3.4免疫調(diào)節(jié)功能檢測

采用ELISA技術(shù)和流式細(xì)胞術(shù)測定經(jīng)炎癥因子(IFN-γ與TNF-α)誘導(dǎo)后間充質(zhì)干細(xì)胞中吲哚胺2，

3-雙加氧酶(IDO)的表達(dá)和功能，以及對于活化的人總淋巴細(xì)胞的增殖和對不同淋巴細(xì)胞亞群增殖能力

的影響。間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)應(yīng)表達(dá)IDO，并可抑制人淋巴細(xì)胞增殖。

檢驗(yàn)分類

6.2.1批次質(zhì)量檢驗(yàn)

IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞制備機(jī)構(gòu)應(yīng)對同一生產(chǎn)周期、同一生產(chǎn)線、同一來源、同一代次、同一方法

制備出來的產(chǎn)品為一批，在同一批產(chǎn)品中隨機(jī)抽取3個(gè)最小包裝單元。制備機(jī)構(gòu)應(yīng)對每批次產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)

量檢驗(yàn)，確保工藝和質(zhì)量穩(wěn)定合格。

6.2.2復(fù)核質(zhì)量檢驗(yàn)

IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞制備機(jī)構(gòu)應(yīng)對每一批次干細(xì)胞制劑單獨(dú)留樣保存，詳細(xì)記錄批號、代次、生

產(chǎn)日期、來源等信息。定期由國家或地方相關(guān)部門授權(quán)的專業(yè)細(xì)胞檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)或?qū)嶒?yàn)室進(jìn)行IPSC來源間充

質(zhì)干細(xì)胞制劑的質(zhì)量復(fù)核檢驗(yàn)，并出具檢驗(yàn)報(bào)告。復(fù)核質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告出具時(shí)間應(yīng)在該批次IPSC來源間充

質(zhì)干細(xì)胞制劑提出放行申請之前，并作為放行檢驗(yàn)參考。

評價(jià)結(jié)論

6.3.1批次檢驗(yàn)結(jié)果全部符合6.1的規(guī)定，判定為合格品；有1項(xiàng)及以上不符合本文件規(guī)定，則判為

不合格品。

6.3.2復(fù)核檢驗(yàn)結(jié)果全部符合6.1的規(guī)定，判定為合格品；有1項(xiàng)及以上不符合本文件規(guī)定，則判為

不合格品。

5

T/XXXXXXX—XXXX

參考文獻(xiàn)

[1]干細(xì)胞制劑質(zhì)量控制及臨床前研究指導(dǎo)原則（試行）（國衛(wèi)辦科教發(fā)〔2015〕46號）

[2]WHO實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(第三版)

[3]藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（衛(wèi)生部令第79號）

[4]中華人民共和國藥典（2020年版）

6

T/XXXXXXX—XXXX

目次

前言.................................................................................II

1范圍...............................................................................1

2規(guī)范性引用文件.....................................................................1

3術(shù)語和定義、縮略語.................................................................1

4基本要求...........................................................................1

5制備過程...........................................................................2

6質(zhì)量鑒定...........................................................................4

參考文獻(xiàn)..............................................................................6

I

T/XXXXXXX—XXXX

IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞制備及質(zhì)量鑒定規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞的術(shù)語和定義、基本要求、制備過程、質(zhì)量鑒定。

本文件適用于IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞的制備與質(zhì)量鑒定。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB3095環(huán)境空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求

GB50073潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范

GB50346生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范

GB50591潔凈室施工及驗(yàn)收規(guī)范

3術(shù)語和定義、縮略語

術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1.1

誘導(dǎo)多能干細(xì)胞inducedpluripotentstemcell；IPSC

由人體細(xì)胞經(jīng)重編程而獲得的具有自我更新能力和向三胚層細(xì)胞分化潛能的一種干細(xì)胞。

3.1.2

凍存cryopreservation

經(jīng)過程序降溫冷凍，并利用深低溫冷凍儲存技術(shù)，以減少細(xì)胞代謝活動，保存細(xì)胞生物學(xué)活性。

3.1.3

復(fù)蘇thawing

細(xì)胞從脫離生長狀態(tài)重新獲得生長活力的過程。

3.1.4

細(xì)胞活率cellviability

能夠增值、保持正常代謝活性的細(xì)胞占全部細(xì)胞的百分比。

縮略語

下列縮略語適用于本文件。

HAV：甲型肝炎病毒（HepatitisAVirus）

HBV：乙型肝炎病毒（HepatitisBVirus）

HCV：丙型肝炎病毒（HepatitisCVirus）

HIV：人類免疫缺陷病毒（HumanImmunodeficiencyVirus）

IPSC：誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（InducedPluripotentStemCell）

4基本要求

場地與設(shè)施

1

T/XXXXXXX—XXXX

4.1.1IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞制備機(jī)構(gòu)選址應(yīng)符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》要求，空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)

符合GB3095標(biāo)準(zhǔn)分級二級標(biāo)準(zhǔn)。

4.1.2IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞制備機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室或廠房應(yīng)由具有潔凈實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建設(shè)資質(zhì)的工程公司

設(shè)計(jì)與建造，并應(yīng)符合GB19489、GB50073、GB50346和GB50591的規(guī)定。建設(shè)完成后，各功能區(qū)域

的潔凈級別應(yīng)由專業(yè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測并出具合格證明。

4.1.3干細(xì)胞制備功能區(qū)應(yīng)按IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞制備工藝進(jìn)行各區(qū)域設(shè)計(jì)，符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量

管理規(guī)范》和《干細(xì)胞制劑質(zhì)量控制及臨床前研究指導(dǎo)原則》要求。干細(xì)胞制備機(jī)構(gòu)應(yīng)配備獨(dú)立質(zhì)量檢

測實(shí)驗(yàn)室，并符合GB19489和GB50346的規(guī)定。

設(shè)備和耗材

4.2.1IPSC來源間充質(zhì)干細(xì)胞的制備機(jī)構(gòu)應(yīng)優(yōu)先選用符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》和《干細(xì)胞制劑

質(zhì)量控制及臨床前研究指導(dǎo)原則》要求，獲得國家資質(zhì)認(rèn)證的設(shè)備、儀器、耗材和試劑。