第六章典型藥物分析

第六章

典型藥物(yàowù)分析技術共七十一頁學習(xuéxí)目標1.掌握典型藥物的鑒別和含量測定的方法原理2.熟悉典型藥物中主要特殊雜質(zhì)的來源及檢查方法3.了解典型藥物的結(jié)構(gòu)特征和主要理化性質(zhì)(xìngzhì)4.學會根據(jù)藥品質(zhì)量標準，對典型藥物進行鑒別、檢查和含量測定操作，學會正確計算和判斷檢查結(jié)果。共七十一頁導學情景(qíngjǐng)情景描述：小王協(xié)助檢查鹽酸普魯卡因的質(zhì)量。老師要求他查閱該藥物的藥典相關內(nèi)容，他清楚了如何分析鹽酸普魯卡因的質(zhì)量。學前導語：分析依據(jù)是藥典。通過(tōngguò)本章學習，同學們學會如何進行檢驗藥物的結(jié)構(gòu)性質(zhì)等基礎知識。共七十一頁第一節(jié)水楊酸類藥物的分析(fēnxī)一、典型藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)藥典2015年版收載的水楊酸類藥物有消毒防腐藥水楊酸；解熱(jiěrè)鎮(zhèn)痛非甾體抗炎藥阿司匹林；抗結(jié)核藥對氨基水楊酸鈉。阿司匹林酯鍵水解性羧基酸性共七十一頁貝諾酯1.酯鍵水解性2.酰胺鍵水解后重氮化偶合反應(fǎnyìng)3.苯環(huán)紫外特征吸收共七十一頁對氨基水楊酸鈉1.芳香第一胺重氮化偶合反應2.酚羥基(qiǎngjī)三氯化鐵反應3.鈉鹽的鑒別反應共七十一頁二、阿司匹林制劑的分析（一）性狀

1.外觀與臭味白色結(jié)晶(jiéjīng)粉末，酸味2.溶解度水中微融，在氫氧化鈉中溶解，分解。（二）鑒別1.三氯化鐵反應加三氯化鐵，顯示紫色阿司匹林，貝諾酯分子中無酚羥基，與三氯化鐵試液不發(fā)生顯色反應。但加熱，加堿，產(chǎn)生酚羥基，發(fā)生反應。2.水解反應阿司匹林有酯鍵，發(fā)生水解反應。3.紅外分光光度法4.高效液相色譜法共七十一頁（三）雜質(zhì)檢查1.溶液的澄清度反應的過程中出現(xiàn)各種雜質(zhì)，雜質(zhì)的特點是不含羧基，利用藥物與雜質(zhì)在碳酸鈉中溶解度的差異，來檢查雜質(zhì)。2.游離水楊酸生產(chǎn)過程中乙?；煌耆犬a(chǎn)生(chǎnshēng)水楊酸，藥典2015年版采用高效液相色譜法檢查游離水楊酸。3.有關物質(zhì)共七十一頁（四）含量測定1.（阿司匹林）的含量測定（1）原理：阿司匹林羧基和氫氧化鈉發(fā)生中和反應（2）方法：直接酸堿滴定法，阿司匹林加中性乙醇，加酚酞，用氫氧化鈉滴定。（3）注意：阿司匹林用中性乙醇溶解，選用酚酞作為指示劑，中性乙醇的配制。2.阿司匹林制劑的含量測定采用(cǎiyòng)高效液相色譜法共七十一頁一、結(jié)構(gòu)(jiégòu)與性質(zhì)第二節(jié)芳胺類藥物(yàowù)的分析(一)對氨基苯甲酸酯類藥物

鹽酸普魯卡因鹽酸丁卡因

苯佐卡因

③芳伯氨基:重氮化－偶合反應②叔胺氮原子：弱堿性④酯鍵共七十一頁一、結(jié)構(gòu)(jiégòu)與性質(zhì)(二)芳酰胺類藥物

對乙酰氨基酚(撲熱息痛)醋氨苯砜鹽酸利多卡因鹽酸布比卡因⑤叔胺②酚羥基③酰胺基××共七十一頁二、鹽酸普魯卡因及其制劑的分析（一）性狀1.外觀和臭味(chòuwèi)2.溶解度水中易溶解（二）鑒別1.芳香第一胺反應又名重氮化偶合反應，鹽酸普魯卡因，加鹽酸，加亞硝酸鈉生成重氮鹽，再加堿性β萘酚，出現(xiàn)顏色。2.水解反應加氫氧化鈉，出現(xiàn)沉淀；加熱變成油狀物，出現(xiàn)的蒸汽使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變?yōu)樗{色；待油狀物消失后，放冷，加鹽酸，出現(xiàn)白色沉淀。共七十一頁3.紅外分光光度法4.氯化物反應5.高效液相色譜法注射液采用(cǎiyòng)此法進行鑒別。共七十一頁（三）雜質(zhì)檢查1.雜質(zhì)來源酯鍵水解產(chǎn)生。最后可能出現(xiàn)苯胺，苯胺被氧化為有色物質(zhì)，變黃，療效下降，毒性(dúxìnɡ)增加。2.檢查方法藥典2015年版規(guī)定，采用高效液相色譜法檢查鹽酸普魯卡因中對氨基苯甲酸。共七十一頁四、含量(hánliàng)測定

亞硝酸鈉滴定法適用范圍：具有(jùyǒu)芳香第一胺或水解后具有(jùyǒu)芳香第一胺的藥物

原理：共七十一頁亞硝酸鈉滴定法

2、測定(cèdìng)條件：1）反應速度：加入適量溴化鉀加快反應；

2）溫度：溫度升高，反應加快溫度太高：亞硝酸逸失分解，重氮鹽分解室溫10℃～30℃；共七十一頁2、測定條件：3）酸度：作用：參與反應(fǎnyìng)，加速反應(fǎnyìng)，重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定，抑制偶氮化合物的形成過量：妨礙芳香第一胺的游離，亞硝酸分解比例：1:2.5~6；共七十一頁2、測定條件：4）滴定速度：先快后慢避免亞硝酸的揮發(fā)和分解，滴定管尖端插入(chārù)液面下2/3滴定一次將大部分亞硝酸鈉滴定液在攪拌下迅速加入近終點，滴定管尖端提出液面，用水沖洗每滴入1滴，攪拌1-5分鐘共七十一頁3、指示終點(zhōngdiǎn)的方法電位法、永停滴定法、外指示劑法、內(nèi)指示劑法共七十一頁永停滴定法共七十一頁鹽酸(yánsuān)普魯卡因的含量測定鹽酸普魯卡因含量=VTF×10-3/m×100%V:滴定液消耗的體積T：每毫升滴定液相當于待測物的質(zhì)量F：矯正因子，溶液(róngyè)的真實濃度/溶液的理論濃度共七十一頁三、對乙酰氨基酚及其制劑的分析（一）性狀1.外觀與臭味白色結(jié)晶粉末，無臭味2.溶解度熱水中易溶解，水中略溶解（二）鑒別1.三氯化鐵反應(fǎnyìng)對乙酰氨基酚有酚羥基，發(fā)生三氯化鐵反應(fǎnyìng)。2.水解產(chǎn)物出現(xiàn)芳香第一胺反應對乙酰氨基酚水解出現(xiàn)對氨基酚，因此與亞硝酸鈉，堿性β萘酚發(fā)生重氮化偶合反應。3.紅外分光光度法進行鑒別4.高效液相色譜法對乙酰氨基酚注射液、泡騰片等。5.紫外-可見分光光度法共七十一頁（三）雜質(zhì)檢查1.乙醇溶液的澄清度與顏色2.對氨基酚及有關(yǒuguān)物質(zhì)（1）雜質(zhì)來源：對乙酰氨基酚中間產(chǎn)物，有毒變色，有害人體。（2）檢查方法：高效液相色譜法3.對氯苯乙酰胺高效液相色譜法檢查雜質(zhì)共七十一頁（四）含量測定(cèdìng)1.對乙酰氨基酚的含量測定（1）原理利用紫外吸收-分光光度法（2）方法（3)計算A/E/100VD/m2.對乙酰氨基酚制劑的含量測定均采用高效液相色譜法共七十一頁第三節(jié)巴比妥類藥物分析(fēnxī)一、典型(diǎnxíng)藥物結(jié)構(gòu)與性質(zhì)R1R2共七十一頁苯巴比妥：二酰亞胺基團弱酸性酰亞胺水解性丙二酰脲與重金屬離子反應苯環(huán)與苯環(huán)作用(zuòyòng)司可巴比妥雙鍵還原性，被氧化硫噴妥鈉硫元素與醋酸鉛試液反應補充知識：1.PH=2的酸性溶液不含硫的巴比妥藥物無明顯紫外吸收，而含硫的有。2.PH=10硫噴妥鈉有大峰和小峰。巴比妥藥物最大吸收峰一般在240波長處3.PH=13硫噴妥鈉只有304大峰。巴比妥藥物最大峰變?yōu)?55nm處。共七十一頁（二）鑒別1.丙二酰脲類的鑒別反應（1）銀鹽反應苯巴比妥在碳酸鈉溶液中，加硝酸銀，一銀鹽，可以溶解，再過量加硝酸銀，最后不溶解。（2）銅鹽反應供試品加吡啶-硫酸銅，出現(xiàn)紫色或者(huòzhě)綠色。2.苯環(huán)的鑒別反應（1）硫酸-亞硝酸鈉反應：顯色（2）甲醛-硫酸：顯色無苯環(huán)的無此反應，用來區(qū)別共七十一頁（三）雜質(zhì)檢查1.酸度控制副產(chǎn)物苯基丙二酰脲2.乙醇溶液的澄清度3.有關物質(zhì)高效液相色譜法4.中性(zhōngxìng)或堿性物質(zhì)控制副產(chǎn)物比如酰胺類雜質(zhì)，原理利用這類雜質(zhì)不溶于氫氧化鈉而溶于乙醚，而苯巴比妥溶于氫氧化鈉，用乙醚提取雜質(zhì)后稱重，判斷雜質(zhì)是否超過限量。共七十一頁（四）含量測定1.苯巴比妥的含量測定銀量法（1）原理：苯巴比妥與硝酸銀反應生成銀鹽（2）方法（3）計算VTF\/m(4)注意：碳酸鈉溶液必須新鮮配制，用電位(diànwèi)法指示終點。2.苯巴比妥片的含量測定采用高效液相色譜法共七十一頁第四節(jié)雜環(huán)類藥物的分析(fēnxī)雜環(huán)化合物：指環(huán)狀有機化合物的碳環(huán)中夾雜有非碳素原子（如O、S、N等）的化合物，主要包括以下兩類1、天然(tiānrán)有活性的，例如生物堿、抗生素和維生素類2、化學合成的，含O（呋喃），含N（吡啶、嘧啶），含S（吩噻嗪）本章主要介紹含氮和含硫的雜環(huán)類藥物共七十一頁共性:(1)雜環(huán)類藥物是合成藥物中所占比例最多的一大類藥物。(2)多為五元(wǔyuán)環(huán)或六元環(huán)，單環(huán)或并合環(huán)。(?)(3)雜環(huán)結(jié)構(gòu)一般穩(wěn)定，不易開環(huán)，其性質(zhì)受雜原子種類、數(shù)目、位置影響。(4)雜環(huán)上取代基性質(zhì)較活潑，常用于分析。(?)(5)含氮雜環(huán)，其堿性的強弱往往用于分析。共七十一頁結(jié)構(gòu)與化學性質(zhì) 含有(hányǒu)N原子的六元單環(huán)，例如：異煙肼、尼克剎米和硝苯地平共七十一頁

氯氮卓

地西泮

共七十一頁二、異煙肼制劑(zhìjì)分析（一）性狀本品為無色結(jié)晶(jiéjīng)，白色或類白色的結(jié)晶(jiéjīng)性粉末；無臭，味微甜后苦；遇光漸變質(zhì)。本品在水中易溶，在乙醇中微溶，在乙醚中極微溶解。共七十一頁鑒別（1）取本品約10mg，置試管中，加水2ml溶解后，加氨制硝酸銀試液1ml，即發(fā)生氣泡與黑色渾濁，并在試管壁上生成銀鏡。（2）在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致(yīzhì)。（3）本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜（《藥品紅外光譜集》166圖）一致。共七十一頁（三）雜質(zhì)(zázhì)檢查1.離肼取本品，加丙酮－水（1：1）溶解并稀釋制成每1ml中約含100mg的溶液，作為供試品溶液；另取硫酸肼對照品，加丙酮－水（1：1）溶解并稀釋制成每1ml中約含0.08mg（相當于游離肼20μg）的溶液，作為對照品溶液；取異煙肼與硫酸肼各適量，加丙酮－水（1：1）溶解并稀釋制成每1ml中分別含異煙肼100mg及硫酸肼0.08mg的混合溶液，作為系統(tǒng)適用性試驗溶液。照薄層色譜法（2010年版藥典二部附錄ⅤB）試驗，吸取上述(shàngshù)三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以異丙醇－丙酮（3：2）為展開劑，展開，晾干，噴以乙醇制對二甲氨基苯甲醛試液，15分鐘后檢視。系統(tǒng)適用性試驗溶液所顯游離肼與異煙肼的斑點應完全分離，游離肼的Rf值約為0.75，異煙肼的Rf值約為0.56。在供試品溶液主斑點前方與對照品溶液主斑點相應的位置上，不得顯黃色斑點。2.有關物質(zhì)取本品，加水溶解并稀釋制成每1ml中約含0.5mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。照含量測定項下的色譜條件，取對照溶液10μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20%;再精密量取供試品溶液與對照溶液各10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的3.5倍。供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，單個雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液主峰面積的0.35倍（0.35%），各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積（1.0%）。共七十一頁（四）含量測定(cèdìng)（高效液相色譜法）用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.02mol/L磷酸(línsuān)氫二鈉溶液（用磷酸(línsuān)調(diào)pH值至6.0）－甲醇（85：15）為流動相；檢測波長為262nm。理論板數(shù)按異煙肼峰計算不低于4000。測定法取本品，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液，精密量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取異煙肼對照品，同法測定。按外標法以峰面積計算，即得。共七十一頁地西泮及其制劑(zhìjì)的分析（一）性狀1.外觀本品為白色(báisè)或類白色(báisè)的結(jié)晶性粉末；無臭2.溶解度本品在丙酮或三氯甲烷中易溶，在乙醇中溶解，在水中幾乎不溶。（二）鑒別1.硫酸-熒光反應取本品約10mg,加硫酸3ml，振搖使溶解，在紫外光燈（365nm)下檢視，顯黃綠色熒光。共七十一頁

2.紫外線分光光度法取本品，加0.5％硫酸的甲醇溶液制成每1ml中含5μg的溶液，照紫外線-可見分光光度法（通則0401）測定，在242nm、284nm與366nm波長處有最大吸收；在242nm波長處的吸光度約為0.51，在284nm波長處的吸光度約為0.23。3.紅外分外分光光度法本品的紅外吸收圖譜應與《藥品紅外光譜集》中相應的對照圖譜（光譜集138圖）一致。4.氯化物的鑒別取本品20mg，用氧瓶燃燒法（通則0703）進行有機破壞，以5％氫氧化鈉5ml為吸收液，燃燒完全后，用稀硝酸酸化，并緩緩煮沸2分鐘，溶液顯氯化物鑒別（1）的反應（通則0301）地西泮結(jié)構(gòu)中的氯原子以共價鍵與苯環(huán)相連，結(jié)合牢固(láogù)，不能直接鑒別，須先用氧瓶燃燒法破壞，使有機結(jié)合的氯轉(zhuǎn)化為游離的CLˉ，再行鑒別共七十一頁（三）雜質(zhì)檢查地西泮除需要檢查“乙醇溶液的澄清度與顏色”、“氯化物”、“干燥失重”及‘’熾灼殘渣”等一般雜質(zhì)外，還應作‘’有關物質(zhì)‘'的檢查《中國藥典》2015年版用高效液相色譜法，采用不加校正因子的主要成分(chéngfèn)自身對照法檢查地西泮原料藥，片劑及注射中的有關物質(zhì)。(四）含量測定1地西泮原料藥的含量測定（1）原理：利用地西泮結(jié)構(gòu)中二痰雜卓上的氮原子呈弱堿性，在非水介質(zhì)中堿性增強，可被被高氯酸滴定液直接滴定，故藥典2015年版采用非水溶液滴定法測定地西泮原料藥的含量。（2）方法（3）含量計算：VTF/m2.地西泮制劑的含量測定采用高效液相色譜法共七十一頁第五節(jié)生物堿類藥物分析(fēnxī)一、典型藥物的結(jié)構(gòu)(jiégòu)與性質(zhì)鹽酸麻黃堿鹽酸偽麻黃堿共七十一頁硫酸(liúsuān)阿托品共七十一頁氫溴酸山莨菪堿共七十一頁硫酸(liúsuān)奎寧共七十一頁鹽酸(yánsuān)嗎啡共七十一頁鹽酸(yánsuān)小檗堿共七十一頁二、鹽酸麻黃堿及其制劑的分析（一）性狀1.白色結(jié)晶或粉末2.溶解度水中易溶3.比旋度左旋（二）鑒別1.雙縮脲反應(fǎnyìng)芳環(huán)側(cè)鏈具有氨基醇結(jié)構(gòu)的生物堿類藥物的特征鑒別反應(fǎnyìng)。2.紅外分光光度法3.氯化物反應4.高效液相色譜法共七十一頁（三）雜質(zhì)(zázhì)檢查1.雜質(zhì)來源從藥用植物提取比如鹽酸偽麻黃堿、其他麻黃堿類物質(zhì)。2.檢查方法高效液相色譜法（四）含量測定1.鹽酸麻黃堿的含量測定（1）原理：非水溶液滴定法（2）方法本法實際為置換反應（3）含量計算鹽酸麻黃堿=（V-V0）TF/m2.鹽酸麻黃堿注射液的含量測定采用高效液相色譜法。共七十一頁三、硫酸(liúsuān)阿托品及其制劑的分析（一）性狀1.外觀與臭味白色結(jié)晶粉末，無臭味。2.溶解度水中極易溶解，乙醇中易溶(二）鑒別1.托烷生物堿類反應vitali反應2.硫酸鹽反應3.紅外分光光度法共七十一頁（三）雜質(zhì)檢查1.莨菪堿（1）雜質(zhì)來源莨菪堿（2）檢查方法：旋光度法2.有關物質(zhì)（1）雜質(zhì)來源生產(chǎn)過程中引入莨菪堿，顛茄堿等生物堿雜質(zhì)，中間體，副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物等有關雜質(zhì)。（2）檢查方法：藥典2015年版采用高效(ɡāoxiào)液相色譜法進行檢查。共七十一頁（四）含量測定1.硫酸阿托品的含量測定（1）原理：非水溶液滴定法一個高氯酸分子與一個硫酸阿托品發(fā)生反應，被滴定到硫酸氫鹽階段。（2）方法（3）含量計算：=（V-V0）TF/m2.硫酸阿托品片的含量測定（1）硫酸鹽阿托品在某pH下形成(xíngchéng)陽離子，而酸性染料為陰離子，結(jié)合生成有色的離子對。通過測定離子對的吸光度，來計算含量。（2）供試品溶液的制備（3）對照品溶液的制備（4）方法（5）含量計算：Ax/Ar*CRV*1.027*平均片重/(m*標示量）共七十一頁第六節(jié)糖類(tánɡlèi)藥物分析一、典型(diǎnxíng)藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)蔗糖結(jié)構(gòu)共七十一頁二、葡萄糖及其制劑的分析（一）性狀1.外觀與臭味本品為無色結(jié)晶或白色結(jié)晶粉末，無臭味，微甜2.溶解度水中易溶3.比旋度比旋度為右旋（二）鑒別(jiànbié)1.堿性酒石酸銅的試液反應（1）原理葡萄糖主要呈半縮醛的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，可以開環(huán)形成具有醛基的鏈狀結(jié)構(gòu)，具有還原性。（2）鑒別方法：本品水溶液，加堿性酒石酸銅，出現(xiàn)氧化亞銅磚紅色沉淀。2.紅外分光光度法共七十一頁（三）雜質(zhì)檢查1.乙醇溶液的澄清度主要控制糊精，葡萄糖溶于熱乙醇，而糊精溶解度小。2.亞硫酸鹽與可溶性淀粉3.蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)遇到酸變性，容易出現(xiàn)沉淀。4.5-羥甲基糠醛（1）雜質(zhì)來源：葡萄糖縮水等出現(xiàn)，進一步聚合出現(xiàn)沉淀，或進一步分解，導致注射液變黃，產(chǎn)生沉淀，PH下降。（2）檢查方法：供試品進行規(guī)定紫外分光光度(guāngdù)法測定，吸光度(guāngdù)不得大于0.32.共七十一頁（四）含量測定1.測定方法葡萄糖加氨水，測定旋光度計算公式C=α*2.08522.注意事項（1）測定前溶劑作空白試驗校正（2）溫度為20℃（3）均應充分溶解(róngjiě)，供試液應該澄清（4）測定旋光度應該按照藥典規(guī)定條件共七十一頁第七節(jié)維生素類藥物分析(fēnxī)一、水溶性維生素類藥物分析（一）典型(diǎnxíng)藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)維生素B1共七十一頁維生素C共七十一頁（二）維生素B1及其制劑的分析1.性狀（1）外觀與臭味：本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶粉末；有微弱的特臭，味苦。（2）溶解度：水中易溶（3）吸收系數(shù)：具有(jùyǒu)氨基嘧啶環(huán)和噻唑環(huán)等，具有(jùyǒu)紫外吸收。2.鑒別（1）硫色素反應：維生素B1在堿性溶液中，被鐵氰化鉀氧化成硫色素。硫色素能溶解于正丁醇中，使溶液顯示藍色熒光。(2)紅外分光光度法（3）氯化物反應共七十一頁3.雜質(zhì)檢查（1）總氯量2015年藥典采用銀量法進行鑒別。（2）有關物質(zhì)維生素B1合成復雜，中間產(chǎn)物、副產(chǎn)物種類多，且結(jié)構(gòu)性質(zhì)(xìngzhì)均與主要成分維生素B接近。采用高效液相色譜法檢查有關物質(zhì)。（4）含量測定對原料藥采用非水溶液滴定法，對片劑和注射劑采用紫外分光光度法測定。共七十一頁（三）維生素C及其制劑的分析1.性狀（1）外觀與臭味白色(báisè)結(jié)晶粉末，無臭，味酸；久放顏色變黃；水溶液顯酸性反應。（2）溶解度：水中易溶（3）熔點：190-192℃（4）比旋度：比旋度為右旋。共七十一頁2.鑒別（1）硝酸銀試液反應：維生素C具有還原性，能被硝酸銀氧化為去氫維生素C，產(chǎn)生黑色沉淀(chéndiàn)。（2）2,6-二氯靛酚反應：2,6-二氯靛酚，酸性中為玫瑰紅色，堿性介質(zhì)中為藍色。當發(fā)生氧化還原反應后，變?yōu)闊o色。（3）紅外分光光度法（4）薄層色譜法鑒別：維生素C片，維生素C注射液，維生素C顆粒等。共七十一頁3.雜質(zhì)檢查（1）溶液澄清度與顏色的檢查1）雜質(zhì)來源：維生素C易被氧化，變色。藥典2015年