2024北京重點(diǎn)校高二（下）期中生物匯編：基因工程章節(jié)綜合（單選題）

2024北京重點(diǎn)校高二（下）期中生物匯編

基因工程章節(jié)綜合（單選題）

一、單選題

1.（2024北京東城高二下期中）B基因存在于水稻基因組中，僅在體細(xì)胞和精子中正常表達(dá)，在卵細(xì)胞中

不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達(dá)對(duì)卵細(xì)胞的影響，設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)來獲取能夠在卵細(xì)胞中表達(dá)B基因的轉(zhuǎn)基因

植株。

水稻B基因

抗性基因

注：?jiǎn)?dòng)子*指可在水稻卵細(xì)胞中啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)子；Luc基因表達(dá)的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光

下列關(guān)于該實(shí)驗(yàn)的敘述，不正確的是（）

A.B基因在水稻卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄，可能是B基因的啟動(dòng)子在卵細(xì)胞中無法啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄

B.可從水稻體細(xì)胞和精子中提取RNA合成cDNA來獲得B基因中編碼蛋白的序列

C.在鑒定和篩選轉(zhuǎn)基因植株時(shí)，可以檢測(cè)加入熒光素的該植株卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光

D.過程②在培養(yǎng)基中應(yīng)加入卡那霉素以檢測(cè)T-DNA是否整合到水稻細(xì)胞染色體DNA上

2.（2024北京人大附中高二下期中）C基因編碼具有高度特異性殺蟲活性的C蛋白，V基因編碼的V蛋

白是結(jié)構(gòu)和作用機(jī)理不同于C蛋白的殺蟲蛋白。利用C-V融合基因和下圖中的載體，獲得具有高抗蟲性的

轉(zhuǎn)基因玉米。

潮霉素抗性基因

A.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞過程中用到了該載體

B.可采用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選成功轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞

C.可從分子水平、個(gè)體水平對(duì)轉(zhuǎn)基因玉米進(jìn)行檢測(cè)與鑒定

D.與轉(zhuǎn)一種抗蟲基因相比，此玉米可減緩害蟲抗性基因頻率增加

3.（2024北京豐臺(tái)高二下期中）利用新鮮菜花作為實(shí)驗(yàn)材料提取DNA時(shí)，錯(cuò)送的是（）

A.可將菜花置于清水中，細(xì)胞吸水破裂后將DNA釋放出來

B.離心后上清液中加入95%冷酒精，出現(xiàn)的白色絲狀物就是粗提的DNA

C.將白色絲狀物置于2moi/L的NaCl溶液中，會(huì)發(fā)生溶解現(xiàn)象

D.可利用DNA在沸水浴下遇到二苯胺試劑呈現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)的特性對(duì)其進(jìn)行鑒定

4.（2024北京豐臺(tái)高二下期中）PCR引物的5,端無嚴(yán)格限制，可用于添加限制酶切位點(diǎn)等序列，對(duì)該

PCR過程理解正確的是（）

A.圖示環(huán)節(jié)所需的溫度比上一個(gè)環(huán)節(jié)的高

B.設(shè)計(jì)引物時(shí)需已知DNA模板的全部堿基序列

C.TaqDNA聚合酶只能從引物的3,端延伸DNA鏈

D.延伸出的子鏈與DNA模板的堿基序列完全相同

5.（2024北京豐臺(tái)高二下期中）獲得抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米的技術(shù)流程如下圖。相關(guān)操作敘述正確的是

四報(bào)告基因幼胚

環(huán)

素

抗

性

基

因

轉(zhuǎn)基因玉米

A.在培養(yǎng)基中添加T-DNA片段侵染農(nóng)桿菌

B.用含四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)化成功的農(nóng)桿菌

C.用氯化鈣處理愈傷組織使其易于吸收DNA

D.用PCR技術(shù)檢測(cè)除草劑抗性基因是否翻譯

6.（2024北京人大附中高二下期中）為利用鏈霉菌生產(chǎn)藥物A,研究者構(gòu)建重組DNA并導(dǎo)入鏈霉菌。重

組DNA含啟動(dòng)子P、藥物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因）。培養(yǎng)和篩選過程如下圖所示。

重組

DNA

顏^除選得至j一）稀釋后

重組整

鏈霉菌DNA含不同濃度卡那霉素

合到基因組接種至培養(yǎng)

的培養(yǎng)基上各接種等

中的鏈霉菌基因培養(yǎng)并

誘變處理量同一稀釋度的培養(yǎng)液

下列敘述不正確的是（）

A.導(dǎo)入成功的鏈霉菌細(xì)胞內(nèi)可能發(fā)生基因重組

B.誘變處理可能獲得產(chǎn)藥物A能力更強(qiáng)的菌株

C.卡那霉素抗性強(qiáng)弱可反映藥物A基因的表達(dá)強(qiáng)度

D.應(yīng)選用b培養(yǎng)基上的菌株作為工程菌生產(chǎn)藥物A

7.（2024北京人大附中高二下期中）研究人員將PCR擴(kuò)增得到的毒物誘導(dǎo)型啟動(dòng)子S（箭頭表示轉(zhuǎn)錄方

向）插入圖中載體P區(qū)，構(gòu)建表達(dá)載體，轉(zhuǎn)入大腸桿菌，獲得能夠檢測(cè)水中毒物的大腸桿菌。

下列敘述不正確的是（）

A.引物I、II中應(yīng)分別含有BamHI、Xhol的識(shí)別序列

B.質(zhì)粒載體上除具有圖中所示的元件外還應(yīng)有復(fù)制原點(diǎn)

C.用含氨葦青霉素的培養(yǎng)基對(duì)轉(zhuǎn)入操作后的菌株進(jìn)行篩選

D.可通過轉(zhuǎn)基因大腸桿菌的熒光情況判斷水中毒物情況

8.（2024北京人大附中高二下期中）研究者通過下圖所示的操作過程，獲得導(dǎo)入S基因的基因編輯小鼠。

超數(shù)體外導(dǎo)入S基因

雌鼠a排卵:獲得卵受精「獲得的表達(dá)載體「收獲胚

雌鼠ap"母細(xì)胞③胎并檢測(cè)

①胚胎移植

學(xué)后PCR鑒定

雌鼠b子宮-子生-------1基因編

輯小鼠

下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.過程①獲得的卵母細(xì)胞需培養(yǎng)至MII期

B.過程②在雌鼠a的輸卵管內(nèi)完成受精

C.過程③需將表達(dá)載體注射到子宮中

D.過程④需抑制雌鼠b對(duì)植入胚胎的免疫排斥

9.（2024北京清華附中高二下期中）現(xiàn)代智人起源于非洲的觀點(diǎn)，得到更多證據(jù)的支持。人們認(rèn)為，約

100萬年前，非洲的古人類（人屬各成員）第一次走出非洲L在各地發(fā)展出自己的種群，例如1856年在德

國(guó)尼安德特河谷發(fā)現(xiàn)的尼安德特人。約10萬年前，人類（現(xiàn)代智人種）第二次走出非洲，與第一次走出

非洲的人類發(fā)生有限的基因交流。之后由于目前尚在爭(zhēng)議的原因，第一次走出非洲的人類包括尼安德特人

陸續(xù)滅絕，而我們的祖先生存下來并逐漸擴(kuò)散占據(jù)了全世界。2009年瑞典科學(xué)家斯萬特?帕博團(tuán)隊(duì)完成尼

安德特人細(xì)胞核DNA的全基因組測(cè)序工作，發(fā)現(xiàn)生活在非洲之外的現(xiàn)代人體內(nèi)都有1%-4%的尼安德特人

基因，現(xiàn)代人的線粒體和Y染色體基因中則沒有發(fā)現(xiàn)尼安德特人基因。帕博因在已滅絕古人類基因組和人

類進(jìn)化研究方面所做出的貢獻(xiàn)，獲得2022年諾貝爾生理學(xué)醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.帕博的研究說明尼安德特人和智人發(fā)生了雜交

B.非洲人不具有上述1%-4%的尼安德特人基因

C.現(xiàn)代人線粒體和Y染色體無尼安德特人基因的原因可能是在人類進(jìn)化過程中，與尼安德特人發(fā)生雜

交的祖先是現(xiàn)代人男性與尼安德特人女性

D.帕博的研究依賴于PCR、DNA測(cè)序以及防止除古人類化石DNA以外的外源DNA污染等技術(shù)

10.（2024北京清華附中高二下期中）從某海洋動(dòng)物中獲得一基因，其表達(dá)產(chǎn)物為一種抗菌性和溶血性均

較強(qiáng)的多肽P1。目前科研人員想在P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物，首先要做的是

（）

A.合成編碼P1的DNA片段

B.改造編碼多肽P1的基因

C.依據(jù)目標(biāo)蛋白的功能設(shè)計(jì)目標(biāo)蛋白的結(jié)構(gòu)

D.構(gòu)建含目的肽的基因表達(dá)載體

11.（2024北京中關(guān)村中學(xué)高二下期中）生物技術(shù)的發(fā)展速度很快，已滅絕生物的“復(fù)生”將不再是神話。

如果世界上最后一只野驢剛死亡，以下較易成功“復(fù)生”野驢的方法是（）

A.將野驢的體細(xì)胞取出，利用組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)脫分化、再分化，培育成新個(gè)體

B.將野驢的體細(xì)胞兩兩融合，再經(jīng)組織培養(yǎng)培育成新個(gè)體

C.取出野驢的體細(xì)胞核移植到母家驢的去核卵細(xì)胞中，經(jīng)孕育培育成新個(gè)體

D.將野驢的基因?qū)爰殷H的受精卵中，培育成新個(gè)體

12.（2024北京中關(guān)村中學(xué)高二下期中）圖為獲得抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米A的技術(shù)路線，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是

（）

除草劑抗性基因G

A.采用PCR擴(kuò)增目的基因時(shí)，設(shè)計(jì)的引物間要避免形成氫鍵

B.為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，構(gòu)建表達(dá)載體需用兩種不同的限制酶

C.檢測(cè)是否轉(zhuǎn)化成功，需要依次利用報(bào)告基因和抗生素抗性基因

D.利用T-DNA可以將目的基因插入到玉米的染色體DNA上

13.（2024北京豐臺(tái)高二下期中）DNA粗提取后，經(jīng)純化、擴(kuò)增，可通過瓊脂糖凝膠電泳鑒定分子量大

小。相關(guān)實(shí)驗(yàn)敘述母送的是（）

A.DNA不溶于95%的冷酒精，但可溶于2moi/L的NaCl溶液

B.將二苯胺試劑滴加在提取出的絲狀物上，若變藍(lán)可鑒定為DNA

C.將擴(kuò)增得到的DNA與含指示劑的緩沖液注入凝膠加樣孔中

D.DNA分子量越小，在凝膠中的遷移速率越快，離加樣孔越遠(yuǎn)

14.（2024北京豐臺(tái)高二下期中）擬南芥的A基因與植物的抗病性直接相關(guān)。我國(guó)科研人員嘗試將擬南芥

的A基因?qū)朦S瓜，以提高黃瓜對(duì)枯萎病和白粉病的抗性。下列分析母氓的是（）

A.可采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將A基因?qū)朦S瓜細(xì)胞

B.構(gòu)建A基因的表達(dá)載體是這項(xiàng)技術(shù)的核心

C.黃瓜細(xì)胞中檢測(cè)到A基因說明此項(xiàng)研究取得成功

D.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將轉(zhuǎn)基因黃瓜細(xì)胞培育成植株

15.（2024北京豐臺(tái)高二下期中）對(duì)圖中潮霉素抗性基因和psy基因轉(zhuǎn)錄的描述里誤的是（）

表示轉(zhuǎn)錄方向

啟動(dòng)子1啟動(dòng)子2

H?Tfepo

psy

終止子1潮霉素終止子2

抗性基因

A.潮霉素抗性基因和psy基因轉(zhuǎn)錄方向不同

B.轉(zhuǎn)錄時(shí)，均以基因的一條鏈為模板

C.轉(zhuǎn)錄時(shí)，RNA延伸方向均為5'—3'

D.DNA聚合酶催化轉(zhuǎn)錄過程

16.（2024北京豐臺(tái)高二下期中）利用PCR技術(shù)分析糞便已成為珍稀野生動(dòng)物種群調(diào)查的有效手段。同種

生物不同個(gè)體在同源染色體某些位置上DNA片段長(zhǎng)度存在差異，這些片段可作為辨別不同個(gè)體的依據(jù)。

下列敘述正確的是（）

A.需去除糞便中微生物的DNA以免干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果

B.設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)需要考慮物種特異性

C.反應(yīng)體系中需加入四種堿基作為原料

D.PCR體系需要加入限制性內(nèi)切核酸酶

17.（2024北京清華附中高二下期中）利用新鮮洋蔥作為實(shí)驗(yàn)材料提取DNA時(shí)，下列敘述正確的是

（）

A.可將洋蔥置于清水中，細(xì)胞吸水破裂后將DNA釋放出來

B.離心后上清液中加入95%冷酒精，出現(xiàn)的白色絲狀物就是純凈的DNA

C.將白色絲狀物置于2moi/L的NaCl溶液中，會(huì)發(fā)生溶解現(xiàn)象

D.向DNA溶液中加入適量二苯胺試劑混勻，溶液即呈現(xiàn)藍(lán)色

18.（2024北京中關(guān)村中學(xué)高二下期中）采用基因工程的方法培養(yǎng)抗蟲棉，下列導(dǎo)入目的基因的做法正確

的是（）

①將毒素蛋白注射到棉受精卵中

②將編碼毒素蛋白的DNA序列注射到棉受精卵中

③將編碼毒素蛋白的DNA序列與質(zhì)粒重組導(dǎo)入細(xì)菌，用該細(xì)菌感染棉花體細(xì)胞，再進(jìn)行組織培養(yǎng)

④將編碼毒素蛋白的DNA序列與質(zhì)粒重組，注射到棉花子房，并進(jìn)入受精卵

A.①②B.②③C.③④D.①④

19.（2024北京豐臺(tái)高二下期中）CRISPR/dCas9基因抑制系統(tǒng)來源于CRISPR/Cas9,Cas9酶能夠切割核

酸片段，當(dāng)其特定的結(jié)構(gòu)區(qū)域發(fā)生改變后，失去切割功能，稱為dCas9,但仍然能由gRNA引導(dǎo)后與DNA

結(jié)合，如下圖所示。對(duì)該系統(tǒng)理解簿誤的是（）

A.CRISPR/dCas9是由蛋白質(zhì)與RNA構(gòu)成的復(fù)合體

B.正常的Cas9酶不能催化磷酸二酯鍵的斷裂

C.gRNA能與DNA上特定的堿基序列互補(bǔ)配對(duì)

D.dCas9與靶位點(diǎn)結(jié)合可以直接干擾轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行

20.（2024北京豐臺(tái)高二下期中）酪醇具有抗癌、降血脂等眾多藥理作用?？蒲腥藛T通過蛋白質(zhì)工程改造

合成酪醇路徑中的限速酶CtPDC,以提高酪醇的產(chǎn)量。對(duì)此過程的理解第送的是（）

A.不能直接改造CtPDC酶的空間結(jié)構(gòu)

B.此項(xiàng)技術(shù)的操作思路與中心法則一致

C.可以生產(chǎn)自然界不存在的蛋白質(zhì)

D.最終還是要通過改造或合成基因來完成

21.（2024北京東城二中高二下期中）為了構(gòu)建可以直接利用纖維素發(fā)酵的釀酒酵母工程菌，研究人員構(gòu)

建基因表達(dá)載體（如圖所示），并導(dǎo)入不能合成尿嚏咤的酵母菌。

同源序列

PCR

正向引物

反向引物

目的基因

下列相關(guān)分析不正確的是（）

A.尿嚏咤合成基因可以作為表達(dá)載體上的標(biāo)記基因

B.該方法需利用限制酶和DNA連接酶實(shí)現(xiàn)目的基因與載體的連接

C.擴(kuò)增目的基因時(shí)應(yīng)在引物的5,端添加與線性化載體兩端相同的DNA序列

D.在以纖維素為唯一碳源的液體培養(yǎng)基中檢測(cè)酒精含量確定工程菌發(fā)酵效果

22.（2024北京東城二中高二下期中）圖為構(gòu)建茴麻抗除草劑基因A重組質(zhì)粒的技術(shù)流程，其中Nptll是

卡那霉素抗性基因，GUS基因僅在真核細(xì)胞中表達(dá)，表達(dá)產(chǎn)物可催化底物呈藍(lán)色。下列說法錯(cuò)誤的是

（）

匚=>啟動(dòng)子曰終止子

A.PCR擴(kuò)增A時(shí)可在引物中加入PstI和Xhol的酶切位點(diǎn)

B.在培養(yǎng)基中添加卡那霉素初步篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌

C.用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化植物愈傷組織選擇呈現(xiàn)藍(lán)色的組織進(jìn)行培養(yǎng)

D.啟動(dòng)子若為除草劑誘導(dǎo)啟動(dòng)子將減少細(xì)胞物質(zhì)和能量浪費(fèi)

23.（2024北京東城二中高二下期中）下列有關(guān)生物實(shí)驗(yàn)試劑以及現(xiàn)象的描述，正確的是（）

A.二苯胺試劑鑒定DNA結(jié)果呈紫色

B.蘇丹m染液可將蛋白質(zhì)染成橘黃色

c.甲紫染色可觀察根尖細(xì)胞染色體的狀態(tài)

D.用黑藻觀察細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)需對(duì)葉綠體染色

24.（2024北京清華附中高二下期中）噬菌體展示技術(shù)（如圖）可將某些蛋白質(zhì)呈遞至噬菌體表面，便于

對(duì)目標(biāo)蛋白進(jìn)行篩選、鑒定。以下對(duì)該技術(shù)的分析錯(cuò)誤的是（）

多

輪

篩

選

建立噬菌體展示庫(kù)

A.建立噬菌體展示庫(kù)需限制性內(nèi)切核酸酶和DNA連接酶

B.可利用抗原一抗體雜交技術(shù)篩選目標(biāo)蛋白

C.可用動(dòng)物細(xì)胞做宿主培養(yǎng)噬菌體

D.該技術(shù)可用于獲得與抗原親和力更強(qiáng)的抗體及其基因

25.（2024北京清華附中高二下期中）基因工程的核心是構(gòu)建表達(dá)載體，下列不屬于載體作用的是（）

A.防止目的基因被受體細(xì)胞限制酶“切割”B.能協(xié)助目的基因在受體細(xì)胞中復(fù)制

C.含有啟動(dòng)子和終止子協(xié)助目的基因表達(dá)D.具有標(biāo)記基因，便于篩選重組受體細(xì)胞

26.（2024北京中關(guān)村中學(xué)高二下期中）采用基因工程的方法培育抗蟲棉，下列導(dǎo)入目的基因的作法正確

的是（）

①將毒素蛋白注射到棉受精卵中

②將編碼毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中

③將編碼毒素蛋白的DNA序列，與質(zhì)粒重組，導(dǎo)入細(xì)菌，用該細(xì)菌感染棉的體細(xì)胞，再進(jìn)行組織培養(yǎng)

④將編碼毒素蛋白的DNA序列，與細(xì)菌質(zhì)粒重組，注射到棉的子房并進(jìn)入受精卵

A.①②B.②③C.③④D.④①

27.（2024北京十一學(xué)校高二下期中）利用PCR技術(shù)分析糞便已成為珍稀野生動(dòng)物種群調(diào)查的有效手段。

同種生物不同個(gè)體在同源染色體某些位置上DNA片段長(zhǎng)度存在差異，這些片段可作為辨別不同個(gè)體的依

據(jù)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.需去除糞便中微生物的DNA以免干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果

B.設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)需要考慮物種特異性

C.反應(yīng)體系中需加入四種脫氧核甘酸作為原料

D.PCR獲得的不同長(zhǎng)度片段可通過電泳檢測(cè)

28.（2024北京中關(guān)村中學(xué)高二下期中）快速、準(zhǔn)確地確定蛋白質(zhì)的三維空間結(jié)構(gòu)，一直是生命科學(xué)領(lǐng)域

的研究熱點(diǎn)和難點(diǎn)。人工智能程序AlphaFold2對(duì)大部分蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的預(yù)測(cè)極為精準(zhǔn)，接近真實(shí)的蛋白質(zhì)

結(jié)構(gòu)，達(dá)到了人類利用冷凍電鏡等復(fù)雜儀器觀察預(yù)測(cè)的水平。下列相關(guān)敘述不正確的是（）

A.蛋白質(zhì)的氨基酸序列是預(yù)測(cè)其空間結(jié)構(gòu)的重要基礎(chǔ)

B.預(yù)測(cè)、設(shè)計(jì)并制造新蛋白質(zhì)的技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程

C.結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)能幫助揭示蛋白質(zhì)分子間相互作用的機(jī)制

D.依據(jù)新蛋白質(zhì)的氨基酸序列能推出唯一的基因序列

29.（2024北京中關(guān)村中學(xué)高二下期中）新冠病毒（SARS-CoV-2）S蛋白的受體結(jié)合結(jié)構(gòu)域（RBD）是引

導(dǎo)病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)。我國(guó)科研人員將GP67基因（指導(dǎo)合成一段信號(hào)肽，引導(dǎo)新合成的蛋白

分泌到細(xì)胞外）與R8O基因融合，構(gòu)建融合基因，大量生產(chǎn)RBD蛋白，用于制備疫苗，流程見下圖。下

列相關(guān)敘述正確的是（）

尺8°基因、①RBD-GP67②導(dǎo)入③篩選并培養(yǎng)④分離

GP67基因融合基因^昆蟲細(xì)胞>昆蟲細(xì)胞*RBD

A.過程①的基礎(chǔ)是生物的密碼子是共用的

B.過程②是直接將融合基因注射到受精卵內(nèi)

C.過程③需用PCR技術(shù)檢測(cè)是否合成RBD

D.過程④從培養(yǎng)液獲得RBD無需裂解細(xì)胞

30.（2024北京豐臺(tái)高二下期中）蛋白質(zhì)工程是在深入了解蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的基礎(chǔ)上進(jìn)行

的，它最終要達(dá)到的目的是（）

A.分析蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)

B.研究蛋白質(zhì)的氨基酸組成

C.獲取編碼蛋白質(zhì)的基因序列信息

D.改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造新的蛋白質(zhì)，滿足人類的需求

31.（2024北京十一學(xué)校高二下期中）甲、乙是嚴(yán)重危害某二倍體觀賞植物的病害。研究者先分別獲得抗

甲、乙的轉(zhuǎn)基因植株，再將二者雜交后得到Fi,結(jié)合單倍體育種技術(shù)，培育出同時(shí)抗甲、乙的植物新品

種，以下對(duì)相關(guān)操作及結(jié)果的敘述，簿送的是

A.將含有目的基因和標(biāo)記基因的載體導(dǎo)入受體細(xì)胞

B.通過接種病原體對(duì)轉(zhuǎn)基因的植株進(jìn)行抗病性鑒定

C.調(diào)整培養(yǎng)基中植物激素比例獲得Fi花粉再生植株

D.經(jīng)花粉離體培養(yǎng)獲得的若干再生植株均為二倍體

32.（2024北京中關(guān)村中學(xué)高二下期中）下圖表示通過DNA過程獲得目的基因并利用PCR擴(kuò)增的示意

圖。據(jù)圖分析，下列有關(guān)敘述正確的是

RNA鏈DNA鏈

小\/

|①.||核酸「H|②||_______

■——

RNA單能雜交雙倍雙鏈DNA

"70-75T

90-95r

⑤

一④

55-60T

A.催化①過程的酶是RNA聚合酶

B.③過程不需要DNA解旋酶

C.④過程需要兩個(gè)相同的引物

D.催化②⑤過程的酶都是DNA聚合酶，均須耐高溫

參考答案

1.D

【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：(1)目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增

和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、

終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。(4)目

的基因的檢測(cè)與鑒定。

【詳解】A、啟動(dòng)子是與RNA聚合酶結(jié)合并能起始mRNA合成的序列，所以B基因在水稻卵細(xì)胞中不能

轉(zhuǎn)錄，可能是B基因的啟動(dòng)子在卵細(xì)胞中無法啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄，A正確；

B、目的基因獲取途徑之一就是從cDNA文庫(kù)中獲得，故可從水稻體細(xì)胞和精子中提取RNA合成cDNA

來獲得B基因中編碼蛋白的序列，B正確；

C、由于基因表達(dá)載體上有Luc基因，其表達(dá)的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光，所以在鑒定和篩選轉(zhuǎn)基

因植株時(shí)，可以檢測(cè)加入熒光素的該植株卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光，C正確；

D、檢測(cè)T-DNA是否整合到水稻細(xì)胞染色體DNA上，應(yīng)該用DNA分子雜交法，D錯(cuò)誤。

故選D。

2.B

【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：

(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基

因等。

(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法

有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法，將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法，將目

的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因-DNA

分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)-

-抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】A、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體

細(xì)胞染色體的DNA上，根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿

菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上，使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定

維持和表達(dá)，因此農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞過程中用到了該載體，A正確；

B、T-DNA上含有潮霉素抗性基因，T-DNA會(huì)整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上，因此培養(yǎng)基中應(yīng)加入

潮霉素以檢測(cè)玉米細(xì)胞中是否含有目的基因，B錯(cuò)誤；

C、轉(zhuǎn)基因玉米的檢測(cè)與鑒定可以從分子水平，如通過PCR等技術(shù)檢測(cè)受體細(xì)胞的染色體DNA上是否插

入了目的基因或檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA；個(gè)體水平上，如是否出現(xiàn)目的基因?qū)?yīng)的性狀，C正

確；

D、該玉米具有C-V融合基因具有高抗蟲性，與轉(zhuǎn)一種抗蟲基因相比，此玉米可延緩害蟲抗性基因頻率增

加，D正確。

故選B。

3.A

【分析】1、DNA的溶解性：（1）DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，利用

這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分離目的。（2）

DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一

步的分離。

2、DNA的鑒定：在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試

劑。

【詳解】A、菜花是植物細(xì)胞，其細(xì)胞壁有保護(hù)和支撐的作用，不會(huì)吸水漲破，需要用洗滌劑瓦解細(xì)胞

膜，A錯(cuò)誤；

B、DNA不溶于酒精溶液，在上清液中加入等體積的95%的冷酒精，白色絲狀物是粗提取的DNA,B正

確；

C、DNA在2mol/L的氯化鈉溶液中溶解度較大，所以將晾干的白色絲狀物置于2mol/L的NaCl溶液中，

會(huì)發(fā)生溶解現(xiàn)象，C正確；

D、DNA在沸水浴條件下遇到二苯胺試劑呈現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)，可利用該原理對(duì)DNA進(jìn)行鑒定，D正確。

故選A。

4.C

【分析】PCR技術(shù)的條件：模板DNA、四種脫氧核甘酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；PCR

的操作過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可

自動(dòng)解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】A、圖示環(huán)節(jié)為引物與模板堿基互補(bǔ)配對(duì)，表示的是復(fù)性（50℃）環(huán)節(jié)，復(fù)性的上一環(huán)節(jié)為變性

（90℃）,復(fù)性的溫度比變性的溫度低，A錯(cuò)誤；

B、引物的設(shè)計(jì)要有一段已知目的基因的核昔酸序列，保證其與已知模板能堿基配對(duì)，在后續(xù)擴(kuò)增的過程

中才能進(jìn)行子鏈的延伸，不需要知道DNA模板的全部堿基序列，B錯(cuò)誤；

C、子鏈?zhǔn)菑腟-3,端延伸的，耐高溫Taq酶只能從引物的3,端開始延伸DNA鏈，C正確；

D、由于兩個(gè)引物均不在該片段的端點(diǎn)，因此延伸出的子鏈與DNA模板的堿基序列不完全相同，D錯(cuò)誤。

故選Co

5.B

【分析】1、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的具體過程：（1）利用土壤的Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體，即將目的基因整合到

土壤農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上。（2）將整合了目的基因的Ti質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)。（3）利用土壤農(nóng)桿菌

感染植物細(xì)胞，該過程實(shí)際上是將含有目的基因的土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞內(nèi)。（4）含有目的基因

的土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒進(jìn)入植物細(xì)胞后，可以把自己的一段基因整合到細(xì)胞核中的染色體上，這段基因中包

含了目的基因。

2、原理：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。根

據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目

的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上。

3、農(nóng)桿菌特點(diǎn)：易感染雙子葉植物和裸子植物，對(duì)單子葉植物沒有感染力；Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受

體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞的染色體上。

4、轉(zhuǎn)化：目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上農(nóng)桿菌-導(dǎo)入植物細(xì)胞一目的基因整合到植物細(xì)胞染色體上

一目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。

【詳解】A、將整合了目的基因（除草劑抗性基因）的Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)，在培養(yǎng)基中添加農(nóng)桿菌

侵染愈傷組織，該過程實(shí)際上是將含有目的基因（除草劑抗性基因）的農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒導(dǎo)入愈傷組織內(nèi)，A

錯(cuò)誤；

B、四環(huán)素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因，需用含四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，B正確；

C、轉(zhuǎn)化愈傷組織時(shí)需用農(nóng)桿菌，先要使用Ca2+（氯化鈣）處理使農(nóng)桿菌使其易于吸收DNA,然后使用農(nóng)

桿菌處理愈傷組織，C錯(cuò)誤；

D、用PCR技術(shù)可以檢測(cè)除草劑抗性基因是否插入植物細(xì)胞中染色體的DNA上，或除草劑抗性基因是否

轉(zhuǎn)錄，不能檢測(cè)除草劑抗性基因是否翻譯，D錯(cuò)誤。

故選B。

6.D

【分析】基因工程的原理是基因重組，基因工程的基本操作程序?yàn)椋耗康幕虻暮Y選與獲取、基因表達(dá)載

體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，目的基因的檢測(cè)與鑒定。

【詳解】A、導(dǎo)入成功的鏈霉菌細(xì)胞內(nèi)可能發(fā)生基因重組，目的基因會(huì)插入到受體細(xì)胞的基因組中，發(fā)生

的可遺傳變異類型為基因重組，A正確；

B、基因突變可能大幅度提升生物的優(yōu)良性狀，因此誘變處理可能獲得產(chǎn)藥物A能力更強(qiáng)的菌株，B正

確；

C、藥物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因）共用一個(gè)啟動(dòng)子，二者共同表達(dá)，所以卡那霉素抗性強(qiáng)

弱可反映藥物A基因的表達(dá)量，C正確；

D、誘變處理后將菌液稀釋后涂布，在含不同濃度卡那霉素的培養(yǎng)基上各接種等量同一稀釋度的培養(yǎng)液，

應(yīng)該選擇含卡那霉素濃度最高的培養(yǎng)基（即d）上所長(zhǎng)出的菌落，其生產(chǎn)藥物A的能力也較強(qiáng)，D錯(cuò)誤。

故選D。

7.A

【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：目的基因的獲取；基因表達(dá)載體的構(gòu)建；將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；

目的基因的檢測(cè)與鑒定。

【詳解】A、根據(jù)啟動(dòng)子的方向，以及終止子的位置，圖中引物I、II分別加入Xhol、BamHI識(shí)別序列，

A錯(cuò)誤；

B、基因表達(dá)載體上應(yīng)具有啟動(dòng)子、終止子、目的基因、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)等元件，因此質(zhì)粒載體上除

具有圖中所示的元件外還應(yīng)有復(fù)制原點(diǎn)，B正確；

C、氨茉青霉素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因，可使用添加氨芳青霉素的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)入載體的菌株，C正確；

D、PCR擴(kuò)增得到的毒物誘導(dǎo)型啟動(dòng)子S（箭頭表示轉(zhuǎn)錄方向）插入圖中載體P區(qū)，若水中有毒物，綠色

熒光蛋白能表達(dá)，可通過轉(zhuǎn)基因大腸桿菌的熒光情況判斷水中是否含毒物，D正確。

故選Ao

8.A

【分析】胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)：

①動(dòng)物發(fā)情排卵后，同種動(dòng)物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的。這就為供體的胚胎移入受體提供

了相同的生理環(huán)境。

②早期胚胎在一定時(shí)間內(nèi)處于游離狀態(tài)。這就為胚胎的收集提供了可能。

③受體對(duì)移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。這為胚胎在受體的存活提供了可能。

④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。

【詳解】A、卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到MII期才具備與精子受精的能力，因此過程①獲得的卵母細(xì)胞需培養(yǎng)至

MH期，A正確；

B、過程②是體外受精，體外受精是將獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵子置于適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液中共同培養(yǎng)一段時(shí)

間，來促使它們完成受精，B錯(cuò)誤；

C、③是導(dǎo)入含S基因的表達(dá)載體，應(yīng)該將含S基因的表達(dá)載體通過顯微注射法注射至小鼠的受精卵中，

C錯(cuò)誤；

D、受體對(duì)移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，故過程④不需要抑制雌鼠b對(duì)植入胚胎的免疫排

斥，D錯(cuò)誤。

故選Ao

9.C

【分析】物種，簡(jiǎn)稱“種”，是生物分類學(xué)研究的基本單元與核心。它是一群可以交配并繁衍后代的個(gè)體，

但與其它生物卻不能交配，不能性交或交配后產(chǎn)生的雜種不能再繁衍。

【詳解】A、尼安德特人和智人發(fā)生發(fā)生有限的基因交流，這說明尼安德特人和智人發(fā)生了雜交，A正

確；

B、生活在非洲之外的現(xiàn)代人體內(nèi)都有1%-4%的尼安德特人基因，這說明非洲人不具有上述1%-4%的尼安

德特人基因，B正確；

C、非洲以外現(xiàn)代人類族群具有少量尼安德特人基因（1%到4%）,這少部分的尼安德特人基因都存在于人

類的常染色體，C錯(cuò)誤；

D、斯萬特?帕博團(tuán)隊(duì)完成尼安德特人細(xì)胞核DNA的全基因組測(cè)序工作，帕博的研究依賴于PCR技術(shù)（體

外DNA擴(kuò)增技術(shù)）、DNA測(cè)序技術(shù)、防止除古人類化石DNA以外的外源DNA污染技術(shù)，D正確。

故選C。

10.C

【分析】1、蛋白質(zhì)工程的目標(biāo)是根據(jù)人們對(duì)蛋白質(zhì)功能的特定需求，對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子設(shè)計(jì)。由

于基因決定蛋白質(zhì)，因此，要對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，最終還必須通過基因來完成；

2、蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)一設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)-推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序

列一找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核甘酸序列。

【詳解】A、由題意可知，該技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程，已經(jīng)獲得該目的基因片段，不需要合成編碼目的肽的

DNA片段，A錯(cuò)誤；

B、未改造前的基因表達(dá)產(chǎn)物為一種抗菌性和溶血性均較強(qiáng)的多肽P1,在P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血

性弱的多肽藥物，所以必須對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，保持其抗菌性強(qiáng)，抑制其溶血性，而不是改造編碼多肽P1

的基因，B錯(cuò)誤；

C、蛋白質(zhì)工程的第一步是根據(jù)蛋白質(zhì)的功能，設(shè)計(jì)氨基酸序列，即目的肽的結(jié)構(gòu)，從而推出其基因序

列，C正確；

D、是需要構(gòu)建含目的肽DNA片段的表達(dá)載體，但這不是第一步，D錯(cuò)誤。

故選C。

11.C

【分析】、動(dòng)物核移植的概念：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組

并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為克隆動(dòng)物。

2、植物細(xì)胞具有全能性，因此植物復(fù)生可以通過植物組織培養(yǎng)來實(shí)現(xiàn)，而動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到限制，

因此動(dòng)物復(fù)生不能通過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)現(xiàn)。

【詳解】A、動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到限制，因此動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不能形成新個(gè)體，A錯(cuò)誤；

B、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)還不能形成新的動(dòng)物個(gè)體，況且細(xì)胞融合后會(huì)導(dǎo)致遺傳物質(zhì)加倍，B錯(cuò)誤；

C、將野驢的體細(xì)胞核移植到雌性家驢的去核卵細(xì)胞中，可以克隆形成野驢，C正確；

D、將野驢的基因?qū)爰殷H的受精卵中，屬于基因工程，可培育成新性狀的家驢，D錯(cuò)誤。

故選Co

12.C

【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增

和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、

終止子和標(biāo)記基因等，標(biāo)記基因可便于目的基因的鑒定和篩選。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體

細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通

道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)

細(xì)胞法；（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目

的基因——PCR技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——PCR技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋

白質(zhì)——抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】A、采用PCR擴(kuò)增目的基因時(shí)，設(shè)計(jì)的引物間要避免形成氫鍵，以免兩個(gè)引物配對(duì)或自身環(huán)化，

影響子鏈的延伸，A正確；

B、為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，構(gòu)建表達(dá)載體需用兩種不同的限制酶，產(chǎn)生不同的黏性末端，B正確；

C、據(jù)圖分析可知，質(zhì)粒上含有氨葦青霉素抗性基因，可以作為標(biāo)記基因，因此篩選1需要用氨葦青霉素

培養(yǎng)基篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的農(nóng)桿菌，隨后再利用報(bào)告基因的相關(guān)特性進(jìn)行篩選2,所以需要依次利

用抗生素抗性基因和報(bào)告基因，C錯(cuò)誤；

D、利用T-DNA可以將目的基因插入到玉米的染色體DNA上，D正確。

故選C。

13.B

【分析】DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理是：

（1）DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點(diǎn)

可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達(dá)到分離的目的；

（2）DNA不容易酒精溶液，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA

進(jìn)一步分離。

【詳解】A、DNA不容易酒精溶液，能溶解在2moi/L的NaCl溶液中，A正確；

B、鑒定DNA時(shí)，應(yīng)將絲狀物溶解到一定濃度的氯化鈉溶液中之后再加入二苯胺試劑中進(jìn)行沸水浴加熱，

B錯(cuò)誤；

C、將擴(kuò)增得到的DNA與凝膠載樣緩沖液混合，再將混合液緩慢注入凝膠加樣孔內(nèi)，C正確；

D、電泳鑒定時(shí)，在帶電量相同的情況下相對(duì)分子質(zhì)量越小的DNA片段在凝膠中的遷移速率越快，距離加

樣孔越遠(yuǎn)，D正確。

故選B。

14.C

【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增

和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、

終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目

的基因的檢測(cè)與鑒定。

【詳解】A、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞最常用的方法，可采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將A基因?qū)?/p>

黃瓜細(xì)胞，A正確；

B、基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心，B正確；

C、黃瓜細(xì)胞中檢測(cè)到A基因意味著目的基因已經(jīng)成功導(dǎo)入并表達(dá)，但此項(xiàng)研究是否取得成功還需在個(gè)體

水平上進(jìn)行鑒定，C錯(cuò)誤；

D、將轉(zhuǎn)基因水稻細(xì)胞培育成植株需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該過程體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，D正

確。

故選Co

15.D

【分析】轉(zhuǎn)錄是以DNA的一條鏈為模板合成RNA的過程，該過程主要在細(xì)胞核中進(jìn)行，需要RNA聚合

酶參與。

【詳解】A、啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)，使轉(zhuǎn)錄開始，終止子是轉(zhuǎn)錄在需要的地方停止，識(shí)

圖分析可知，根據(jù)圖中潮霉素抗性基因和psy基因的啟動(dòng)子和終止子的位置可知，潮霉素抗性基因轉(zhuǎn)錄方

向向左，psy基因轉(zhuǎn)錄方向向右，二者的轉(zhuǎn)錄方向不同，A正確；

B、轉(zhuǎn)錄是以DNA的一條鏈為模板合成RNA的過程，B正確；

C、轉(zhuǎn)錄時(shí)，在RNA聚合酶的作用下，RNA子鏈延伸方向均為5'T3',C正確；

D、RNA聚合酶催化轉(zhuǎn)錄過程的進(jìn)行，D錯(cuò)誤。

故選D。

16.B

【分析】PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；過程：①高溫

變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈，PCR擴(kuò)增中雙

鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開。

【詳解】A、由于不同的生物DNA具有特異性，故利用PCR技術(shù)辨別不同個(gè)體時(shí)不需要去除糞便中微生

物的DNA,A錯(cuò)誤；

B、引物是一端目的基因的核昔酸序列，設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)需要考慮物種特異性，B正確；

C、PCR是對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增的技術(shù)，反應(yīng)體系中需加入四種脫氧核甘酸作為原料，C錯(cuò)誤；

D、PCR體系不需要加入限制性內(nèi)切核酸酶，需加入耐高溫的DNA聚合酶，D錯(cuò)誤。

故選B。

17.C

【分析】DNA粗提取和鑒定的原理：

1、DNA的溶解性：

（1）DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低），利用這

一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分離目的；

（2）DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白

質(zhì)進(jìn)一步的分離；

2、DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性：蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是對(duì)DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不

能忍受60-80℃的高溫，而DNA在80℃以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但對(duì)DNA沒有影響；

3、DNA的鑒定：在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試

劑。

【詳解】A、洋蔥是植物細(xì)胞，其細(xì)胞壁有保護(hù)和支撐的作用，不會(huì)吸水漲破，需要用洗滌劑瓦解細(xì)胞

膜，A錯(cuò)誤；

B、離心后在上清液中加入等體積的95%的冷酒精，白色絲狀物是粗提取的DNA,B錯(cuò)誤；

C、DNA在2moi/L的氯化鈉溶液中溶解度較大，所以將白色絲狀物置于2moi/L的NaCl溶液中，會(huì)發(fā)生

溶解現(xiàn)象，C正確；

D、DNA在沸水浴條件下遇二苯胺試劑呈現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)，D錯(cuò)誤。

故選C。

18.C

【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增

和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、

終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目

的基因的檢測(cè)與鑒定。

【詳解】①將毒素蛋白直接注射到棉受精卵中，沒有獲得目的基因，子代細(xì)胞不會(huì)有抗蟲性狀，①錯(cuò)誤；

②將編碼毒素蛋白的DNA序列，直接注射到棉受精卵中而沒有將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合，這樣目的基因

無法被保留下來的，很容易被水解掉，②錯(cuò)誤；

③基因工程中，在導(dǎo)入目的基因前，首先要獲得目的基因即編碼毒素蛋白的DNA序列，然后要將目的基

因與運(yùn)載體結(jié)合即與細(xì)菌質(zhì)粒重組，通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞，再通過植物組織培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)基因植

株，③正確；

④將編碼毒素蛋白的DNA序列與質(zhì)粒重組，注射到棉花子房，并進(jìn)入受精卵，進(jìn)而可實(shí)現(xiàn)目的基因的表

達(dá)，④正確。

故選C。

19.B

【分析】由題干和題圖可知，Cas9蛋白為限制酶，在gRNA引導(dǎo)下能特異性切割靶向基因；dCas9蛋白無

切割功能，是由Cas9基因突變后表達(dá)形成的蛋白質(zhì)，但可與靶向基因的啟動(dòng)子區(qū)域結(jié)合使靶向基因失去

功能。

【詳解】A、由題可知，CRISPR/Cas9系統(tǒng)主要由向?qū)NA（sgRNA）和Cas9蛋白兩部分組成，A正

確；

B、Cas9蛋白為限制酶，能夠切割核酸片段，能催化磷酸二酯鍵的斷裂，B錯(cuò)誤；

C、由題意可知，gRNA識(shí)別受體細(xì)胞中的靶向基因序列，gRNA為RNA分子，通過堿基互補(bǔ)配對(duì)識(shí)別靶

向基因DNA分子，C正確；

D、由圖可知，dCas9蛋白可與靶基因的啟動(dòng)子結(jié)合，阻止其轉(zhuǎn)錄過程，D正確。

故選B。

20.B

【分析】蛋白質(zhì)工程的過程為：預(yù)期蛋白質(zhì)功能一設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)一推測(cè)應(yīng)有氨基酸序列一找到對(duì)

應(yīng)的脫氧核昔酸序列（基因）。蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通

過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活

的需要。

【詳解】A、蛋白質(zhì)改造工程師通過改變基因的結(jié)構(gòu)進(jìn)而改變表達(dá)的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，因此不能直接改

造CtPDC酶的空間結(jié)構(gòu)，A正確；

B、中心法則沒有從蛋白質(zhì)到DNA的遺傳信息的傳遞規(guī)律，B錯(cuò)誤；

C、通過對(duì)基因的結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造生產(chǎn)自然界不存在的蛋白質(zhì)，C正確；

D、蛋白質(zhì)改造工程的過程是預(yù)期蛋白質(zhì)功能一設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)一推測(cè)應(yīng)有氨基酸序列一找到對(duì)應(yīng)

的脫氧核甘酸序列（基因），最終還是要通過改造或合成基因來完成，D正確。

故選B。

21.B

【分析】基因工程中常用限制酶切割目的基因和質(zhì)粒（載體），用DNA連接酶連接目的基因和載體。

【詳解】A、由題意可知，表達(dá)載體導(dǎo)入不能合成尿喀咤的酵母菌，所以可將尿嚎咤合成基因作為表達(dá)載

體上的標(biāo)記基因，若導(dǎo)入表達(dá)載體后酵母菌能產(chǎn)生尿嚏咤，說明導(dǎo)入成功，A正確；

B、該方法需利用DNA連接酶實(shí)現(xiàn)目的基因與載體的連接，不需要使用限制酶，B錯(cuò)誤；

C、擴(kuò)增目的基因時(shí)應(yīng)在引物的S端添加與線性化載體兩端相同的DNA序列，以便引物與目的基因配對(duì),

C正確；

D、在以纖維素為唯一碳源的液體培養(yǎng)基中檢測(cè)酒精含量確定工程菌發(fā)酵效果，若能利用纖維素發(fā)酵，則

證明轉(zhuǎn)基因成功，D正確。

故選B。

22.C

【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)

記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的

方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；

將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：

分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因-DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目

的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)-抗原-抗體雜交技術(shù)；

個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】A、PCR擴(kuò)增A后，為使A能與質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒，需要在A的兩側(cè)加入相應(yīng)的限制酶的

酶切位點(diǎn)，即在引物中加入PstI和Xhol的酶切位點(diǎn)，A正確；

B、由圖可知，卡那霉素抗性基因是標(biāo)記基因，因此在培養(yǎng)基中添加卡那霉素初步篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)

桿菌，B正確；

C、由題意可知，GUS基因僅在