學(xué)校細(xì)胞實驗室管理規(guī)則

學(xué)校細(xì)胞實驗室管理規(guī)則1、細(xì)胞生物學(xué)實驗室是進(jìn)行各種細(xì)胞培養(yǎng)的凈化級實驗室，由實驗人員提出申請，填寫細(xì)胞培養(yǎng)室使用申請表，經(jīng)培訓(xùn)后方可進(jìn)行實驗，進(jìn)出細(xì)胞室實驗需要嚴(yán)格預(yù)約與登記。如有不符合實驗室工作和生物安全要求的，實驗室負(fù)責(zé)人和細(xì)胞室工作人員有權(quán)責(zé)令整改。嚴(yán)禁未經(jīng)許可擅自進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)室或使用相關(guān)設(shè)備。2、凡進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)室的人員要有嚴(yán)格的無菌操作概念，任何人員初次使用細(xì)胞室必須有本實驗室人員陪同指導(dǎo)，待完全掌握操作規(guī)定之后方可獨立操作。3、細(xì)胞培養(yǎng)室正常使用過程中，實驗用品應(yīng)盡量一次帶入，進(jìn)出細(xì)胞室請隨手關(guān)門。嚴(yán)禁將與實驗無關(guān)的易燃、易爆及其他有毒有害物品帶入細(xì)胞室；在本室內(nèi)不得進(jìn)行病原性微生物等其它易污染物的操作，嚴(yán)禁從事任何高危生化實驗（如攻毒攻菌實驗）。4、實驗人員應(yīng)愛護(hù)實驗室各類儀器，按照規(guī)則使用并保持設(shè)備清潔。實驗中的昂貴設(shè)備，未經(jīng)許可不得擅自開關(guān)。精密儀器需經(jīng)專門培訓(xùn)后方能操作未經(jīng)許可不得改變設(shè)備儀器的預(yù)設(shè)參數(shù)。設(shè)備儀器出現(xiàn)故障或發(fā)生事故，應(yīng)及時向?qū)嶒炇邑?fù)責(zé)人報告，安排專業(yè)人員進(jìn)行檢修。5、使用儀器前認(rèn)真閱讀“操作規(guī)則”，并嚴(yán)格按“操作規(guī)則”進(jìn)行操作，未經(jīng)管理者同意不得擅自更改儀器程序。使用后儀器恢復(fù)原位，并填寫“使用情況記錄”。如儀器出現(xiàn)故障，請及時通知實驗室老師。因操作不當(dāng)導(dǎo)至儀器、設(shè)備、實驗器材的損壞，追究實驗者責(zé)任，并按學(xué)校有關(guān)規(guī)定賠償。6、愛護(hù)實驗室公共財物，實驗耗材由實驗者自行提供。節(jié)約用電，注意防火防盜，杜絕一切可能導(dǎo)致火災(zāi)的行為。7、禁止在培養(yǎng)室吸煙、進(jìn)餐，實驗過程中嚴(yán)禁喧嘩、閑聊，嚴(yán)禁隨意反復(fù)進(jìn)出培養(yǎng)室。進(jìn)入細(xì)胞室的實驗人員必須遵守清潔衛(wèi)生值日安排。每月做全面清潔消毒一次，每周掃除兩次，超凈臺上濾網(wǎng)需每月清洗一次。在確認(rèn)無菌室無人后方可開紫外燈殺菌。8、具體操作規(guī)則詳見附錄《細(xì)胞生物學(xué)實驗室操作規(guī)則》。附錄：細(xì)胞生物學(xué)實驗室操作規(guī)則第一條常規(guī)操作1.穿著專用實驗服。實驗人員必須在細(xì)胞室準(zhǔn)備間內(nèi)更換細(xì)胞室專用實驗服，嚴(yán)禁不穿實驗服進(jìn)入細(xì)胞室，嚴(yán)禁穿細(xì)胞室實驗服外出。2.穿著專用拖鞋。在準(zhǔn)備間換下自己的鞋子，盡量避免在緩沖間走動、停留。3．按培養(yǎng)室的要求洗手、將衣服及與實驗無關(guān)的物品存放在指定地點。4．細(xì)胞室中培養(yǎng)基、胰酶、血清等均分裝后專人專用，并做好記錄，每個項目組或每位操作者可以攜帶專用的移動箱，并對自己實驗物品需做好標(biāo)記，未經(jīng)同意不得擅自使用他人物品，避免交叉污染。不得擅自查看或取出他人培養(yǎng)的細(xì)胞或?qū)嶒炗涗?。本室所有物品用完之后按原樣放回，不得擅自借出或帶出到其他實驗室?、進(jìn)入核心室要戴手套并用75%酒精或含氯消毒水消毒。必要時需穿戴帽子、口罩、防護(hù)服等。6、實驗暫停，操作人離開時，及時熄滅酒精燈。7、每次實驗結(jié)束后，應(yīng)及時用75%酒精或含氯消毒液清理桌面、臺面、地面。整理好用過的實驗器材。細(xì)胞培養(yǎng)過程中自帶廢液缸，清理廢棄物，廢棄物品帶出操作間。實驗區(qū)用紫外線照射30分鐘，并做好記錄。觀察培養(yǎng)箱中CO2的濃度、溫度、供氣壓力等參數(shù)，待正常后方可離開。8、嚴(yán)禁涉及腺病毒慢病毒載體等感染實驗的廢棄物直接倒入醫(yī)療垃圾桶。9、水浴鍋內(nèi)需加無菌水，每兩周進(jìn)行更換并消毒，注意使用完要注意關(guān)閉。10、做好細(xì)胞培養(yǎng)記錄，以了解細(xì)胞生長情況，用于資料的分析和整理。第二條培養(yǎng)箱使用規(guī)則1、從培養(yǎng)箱取放物品前，用酒精清潔雙手（或手套），盡量縮短開門時間和減少開門次數(shù)。注：培養(yǎng)箱中的空氣是經(jīng)過過濾的潔凈空氣。長時間敞開或頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱，容易造成污染。2、從培養(yǎng)箱拿取細(xì)胞時輕拿輕放，動作迅速，隨手關(guān)緊培養(yǎng)箱門。未經(jīng)允許，禁止翻看、移動他人細(xì)胞或樣品，如有特殊需要的，請聯(lián)系實驗室負(fù)責(zé)人協(xié)調(diào)。不按規(guī)則進(jìn)行操作造成他人細(xì)胞損失，需酌情賠償。3、培養(yǎng)瓶皿放入培養(yǎng)箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精揮發(fā)后再放入，以免培養(yǎng)箱內(nèi)滯留過多乙醇蒸氣。4、培養(yǎng)箱內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)的放置需整潔有序，方便查找，同時應(yīng)盡量提高培養(yǎng)箱的使用效率，負(fù)責(zé)老師可視實驗情況啟用或停止空培養(yǎng)箱的使用，節(jié)約資源。5、普通培養(yǎng)中的細(xì)胞，若非實驗特殊需要，每瓶/板細(xì)胞每天只需要觀察生長狀態(tài)一次，2人以上共用的細(xì)胞，可約好時間一起觀察。注：頻繁將細(xì)胞拿出觀察，容易給培養(yǎng)箱造成污染，同時也會影響細(xì)胞生長條件的恒定。6、原代細(xì)胞需放置在原代培養(yǎng)專用培養(yǎng)箱培養(yǎng)，不得放置于其他培養(yǎng)箱，如一段時間內(nèi)無原代細(xì)胞實驗，負(fù)責(zé)人可協(xié)調(diào)安排培養(yǎng)箱供其他細(xì)胞培養(yǎng)使用。7、觀察培養(yǎng)箱實際溫度與濕度與設(shè)定值是否相符。定期檢查CO2氣體量是否充足，不足時及時通知細(xì)胞室管理員更換CO2鋼瓶。CO2氣體量密切注意培養(yǎng)箱內(nèi)的增濕盤，定期更換無菌水并進(jìn)行消毒。密切注意培養(yǎng)箱內(nèi)情況，如出現(xiàn)霉變、菌斑、支原體和衣原體感染或其他明顯染菌跡象，應(yīng)立即通知管理員及其它使用者。第三條顯微鏡使用規(guī)則1、倒置相差顯微鏡使用前，用酒精棉從中間至周圍擦拭載物臺。2、使用顯微鏡后應(yīng)隨手降低光源亮度，使用完畢注意關(guān)閉。離開細(xì)胞室時或較長時間不需使用時，及時關(guān)上電源，延長燈泡壽命。盡量避免頻繁開關(guān)顯微鏡電源。3、一次細(xì)胞實驗使用完畢后，在顯微鏡使用情況記錄本上登記。4、熒光顯微鏡屬于貴重儀器需遵循貴重儀器預(yù)約使用規(guī)程。5、熒光顯微鏡熒光關(guān)閉后半小時內(nèi)不允許再次開啟。第四條超凈臺相關(guān)操作規(guī)則1、超凈臺使用遵循預(yù)約原則。在細(xì)胞室入口處預(yù)約，細(xì)胞室內(nèi)填寫使用登記。a：無預(yù)約者若有必要在他人預(yù)約時段內(nèi)使用，需先征得預(yù)約者的同意，否則應(yīng)無條件讓出工作臺，以免耽誤他人實驗。b：使用記號筆在預(yù)約記錄本上提前預(yù)約下一周的使用時間，請注意周六周日是指上周的周末。c：預(yù)約內(nèi)容請包括：時間范圍，姓名，如特殊實驗請寫明。2、超凈臺使用前用紫外燈照射15分鐘滅菌，實驗用品從左至右依次擺放，酒精燈居中（生物安全柜禁用酒精燈等帶明火的物品）。使用前、后需用酒精棉球擦拭工作區(qū)消毒，所有物品放入超凈臺內(nèi)使用前均應(yīng)消毒，超凈臺內(nèi)嚴(yán)禁堆放過多物品影響風(fēng)路平衡，不同超凈臺內(nèi)物品嚴(yán)禁頻繁交換使用。3、點燃酒精燈前需檢查瓶中酒精是否足夠，液面應(yīng)占瓶高1/3-2/3。注：消毒用75%的酒精，酒精燈用95%以上的酒精，向噴壺或燈內(nèi)添加酒精時請留意。4、超凈臺中應(yīng)擺放廢液杯，用于暫時存放廢棄物，實驗結(jié)束后將杯內(nèi)加入NaOH溶液處理片刻，廢液垃圾倒入水池并同時用水沖釋，固體垃圾倒入生物樣品專用垃圾桶中。注：廢液缸應(yīng)及時處理，嚴(yán)禁長時間放置，以免留有大量培養(yǎng)液滋生細(xì)菌。5、細(xì)胞實驗后任何含有細(xì)胞培養(yǎng)污物的培養(yǎng)瓶，離心管，移液管等必須及時帶出細(xì)胞房。第五條冰箱、試劑等相關(guān)操作規(guī)則1、從冰箱取放物品動作要迅速，關(guān)門時要檢查門是否關(guān)好。按類別存放試劑。嚴(yán)禁長時間敞開冰箱門。2、各人存放于冰箱內(nèi)的培養(yǎng)液、生化試劑、樣品要注明姓名、配制日期、樣品名稱，特殊試劑需獲得細(xì)胞室管理人員同意后方能放置。不得使用他人的培養(yǎng)液或其他生化試劑。3、分裝好的血清長時間保存于-80℃，使用前放于4℃預(yù)解凍。原則上解凍好的血清應(yīng)全部配成含血清的培養(yǎng)基備用，若有剩余，則暫存于4℃并盡快使用。盡量不要使用他人開過的血清，以免交叉污染。4、細(xì)胞室內(nèi)的冰箱空間有限，盡量僅放置使用頻率較高的試劑。請勿將一些閑置試劑，污染試劑長期放置在細(xì)胞室。5、工作人員會定期對冰箱進(jìn)行清理，發(fā)現(xiàn)無標(biāo)記，過期試劑等違規(guī)物品將全部清除出去，并且查找試劑配置人給予警告。第六條進(jìn)入細(xì)胞室物品控制1、所有進(jìn)入細(xì)胞室的物品需盡量經(jīng)過紫外照射，酒精表面消毒。2、嚴(yán)禁將可能含有污染物或病原菌的實驗物品帶入細(xì)胞室。3、細(xì)胞室內(nèi)僅放置少量實驗必須耗材即可，不得整箱搬入，出現(xiàn)潔凈室內(nèi)物品堆積狀況。4、細(xì)胞室內(nèi)儲物柜的物品放置由相關(guān)管理人員安排，并做標(biāo)記。第七條細(xì)胞室清潔守則1、每周值日生時間從周六開始，至下周五結(jié)束。2、日常維護(hù)：注意培養(yǎng)箱顯示正常，顯微鏡，冰箱，超凈臺的正常使用與維護(hù)。細(xì)胞室內(nèi)以及門口生物樣品專用垃圾桶的及時清理。3、每周值日（安排實驗時兩次，未安排時一次，周三或周五下午兩點）：擦拭超凈臺（用酒精棉球），用酒精滅擦桌面及桌上儀器、拖地，紫外消毒細(xì)胞室30分鐘。3、每月大清潔：每月30日下午兩點用紫外線消毒細(xì)胞室，酒精和消毒水清潔。清潔順序：擦超凈臺（用酒精棉球）；用消毒水滅擦桌面，培養(yǎng)箱，超凈臺以及冰箱外壁，及桌上的儀器，細(xì)胞室墻面；給水浴鍋加水或換水，細(xì)胞室衣柜和拖鞋擺放整齊，拖地，紫外消毒細(xì)胞室30分鐘。注：若上周值日生及時