《白肋煙煙堿轉(zhuǎn)化株鑒定規(guī)程》

ICS?FORMTEXT65.160FORMTEXTX87FORMTEXT?????FORMTEXTYCFORMTEXTYC/TFORMTEXTXXXXX—FORMTEXTXXXXFORMTEXT?????FORMTEXT白肋煙煙堿轉(zhuǎn)化株鑒定規(guī)程FORMTEXTRulesfortheearlyidentificationofnicotineconvertersinburleytobacco?FORMTEXT點(diǎn)擊此處添加與國際標(biāo)準(zhǔn)一致性程度的標(biāo)識FORMDROPDOWNFORMTEXT（本稿完成日期：2014-04）在提交反饋意見時，請將您知道的相關(guān)專利連同支持性文件一并附上。FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX發(fā)布FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX實(shí)施FORMTEXT國家煙草專賣局???發(fā)布XX/TXXXXX—XXXXI白肋煙煙堿轉(zhuǎn)化株鑒定規(guī)程范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了白肋煙煙堿轉(zhuǎn)化株的早期鑒定規(guī)程和確定轉(zhuǎn)化株的規(guī)程。本標(biāo)準(zhǔn)適用于白肋煙育種和制種過程中，在煙株開花前對煙堿轉(zhuǎn)化株進(jìn)行鑒別，以有效去除煙堿轉(zhuǎn)化株，保證留種煙株和用來雜交制種的煙株為正常的非轉(zhuǎn)化株，以降低白肋煙的降煙堿（去甲基煙堿）和煙草特有亞硝胺含量，提高煙葉香味品質(zhì)和風(fēng)格程度。規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T21138煙草種子GB/T25241.1煙草集約化育苗技術(shù)規(guī)程第1部分:漂浮育苗YC/T367-2010煙草種子雄性不育系種子生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程YC/T383-2010煙草及煙草制品煙堿、降煙堿、新煙堿、麥斯明和假木賊堿的測定氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法定義下列術(shù)語和定義適合于本文件。轉(zhuǎn)化株converter煙株群體中具有煙堿去甲基酶活性，進(jìn)而具有煙堿向降煙堿（去甲基煙堿）轉(zhuǎn)化能力的煙株。早期鑒定earlyidentification在煙株開花前對煙株是否為轉(zhuǎn)化株進(jìn)行定性判斷并對轉(zhuǎn)化株的轉(zhuǎn)化程度進(jìn)行定量描述。煙堿轉(zhuǎn)化率nicotineconversionrate煙葉降煙堿含量占煙堿和降煙堿含量之和的比例。轉(zhuǎn)化株早期鑒定技術(shù)規(guī)程種源獲取用于通過轉(zhuǎn)化株鑒別進(jìn)行雜交制種和自交繁育的親本或原種種子質(zhì)量應(yīng)符合GB/T21138對原種質(zhì)量的規(guī)定。繁種田選擇所用田塊三年內(nèi)沒有種植與煙草有同源病害的植物，地勢平坦，地力均勻，排灌方便，交通便利。對于采用雄性不育系進(jìn)行種子生產(chǎn)的煙田應(yīng)符合YC/T367-2010的規(guī)定。育苗和移栽育苗按GB/T25241.1規(guī)定執(zhí)行。對于采用雄性不育系進(jìn)行種子生產(chǎn)時應(yīng)符合YC/T367-2010規(guī)定。4.3.3根據(jù)品種或親本材料的種性、生育特點(diǎn)、氣候特點(diǎn)適時播種和移栽，并進(jìn)行肥水管理。鑒定時期轉(zhuǎn)化株鑒別宜在育種材料或制種田親本移栽后(20~28)d進(jìn)行，過早時煙苗尚小，煙苗較小，操作不便，樣品量少，過晚不利于在開花前完成鑒別，影響在當(dāng)季根據(jù)是否轉(zhuǎn)化株進(jìn)行單株選擇。煙株標(biāo)記選擇生長正常、健康無病煙株按單株編號掛牌標(biāo)記。單株取樣摘取掛牌標(biāo)記煙株下部發(fā)育程度較高的一片煙葉，在葉基部采用膠帶或栓牌標(biāo)記，編號與株號相同，每片葉代表一株煙株。所有葉片掛在木竿、鐵絲或繩索上，葉片間隔5cm，待處理。轉(zhuǎn)化性狀的誘導(dǎo)誘導(dǎo)劑及濃度要求。可選擇0.3%乙烯利水溶液或1%碳酸氫鈉水溶液。處理方法?？捎脟婌F裝置對葉片正面和反面進(jìn)行噴灑，使葉片充分濕潤。保濕晾制。對處理后的葉片覆蓋塑料薄膜或置于相對濕度為70%~90%的環(huán)境中晾制，溫度應(yīng)不低于20℃，處理時間為(3~4)d，待葉片充分變黃，即處理完畢。樣品生物堿測定和煙堿轉(zhuǎn)化率計算。樣品烘干磨碎后進(jìn)行煙堿、降煙堿含量測定，生物堿分離和定量宜采用氣相色譜儀進(jìn)行。具體按YC/T383-2010進(jìn)行。根據(jù)煙堿轉(zhuǎn)化率確定煙堿轉(zhuǎn)化能力大小。按公式（1）計算煙堿轉(zhuǎn)化率：………………（1）式中：C—煙堿轉(zhuǎn)化率，用百分?jǐn)?shù)（%）表示；A—煙葉降煙堿含量，用百分?jǐn)?shù)（%）表示；B—煙葉煙堿含量，用百分?jǐn)?shù)（%）表示。判定煙堿轉(zhuǎn)化株的指標(biāo)煙堿轉(zhuǎn)化率2.5%為穩(wěn)定而可靠的判定煙堿轉(zhuǎn)化株的下限指標(biāo)，即煙堿轉(zhuǎn)化率大于或等于2.5%的煙株為轉(zhuǎn)化株，煙堿轉(zhuǎn)化株低于2.5%的煙株為非轉(zhuǎn)化株。育種和制種中的應(yīng)用在對品種進(jìn)行改良和進(jìn)行雜交制種時，應(yīng)選擇煙堿轉(zhuǎn)化率低于2.5%的煙株在開花前套袋自交或用作親本進(jìn)行