DB45T 2829-2023 地中海貧血篩查與診斷技術(shù)規(guī)范

45TechnicalspecificationsforscrI 2 2 2 2 2 5 5 5 本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定1地中海貧血篩查與診斷技術(shù)規(guī)范本文件適用于廣西壯族自治區(qū)行政區(qū)域內(nèi)醫(yī)療機(jī)構(gòu)非輸血依賴型地貧non-transfusiondependentt輸血依賴型地貧transfusiondependenttha產(chǎn)前診斷prenataldiag對可疑出生缺陷的胎兒在出生前應(yīng)用各種檢測手段，產(chǎn)24縮略語HbA2：血紅蛋白A2（HemoglobinDNA：脫氧核糖核酸（DeoxyribonucleicAciMCV：紅細(xì)胞平均體積（MeanCorMCH：紅細(xì)胞平均血紅蛋白量（MeanCorpusculSOP：標(biāo)準(zhǔn)操作程序（StandardOperationNMPA：國家藥品監(jiān)督管理局(NationalMedicalMedicalProductsAdministration)EDTA：乙二胺四乙酸（EthyleneDiamin5.1篩查人群全人群均可篩查，重點(diǎn)篩查人群包括：婚前、孕前、產(chǎn)前的夫婦及新生兒、疾病查因人群等。5.2篩查流程5.3篩查技術(shù)用含EDTA抗凝劑的真空采血管，靜脈采血2ml，輕輕混勻，避免標(biāo)本溶血，采樣后及時送檢，4h5.3.1.2試劑和儀器5.3.1.3檢測方法MCV——紅細(xì)胞平均體積，單位為分升（fL3A——每升血液中血細(xì)胞比容，單位為百分比（%）；B——每升血液中紅細(xì)胞數(shù)，單位為1012每升（1012/MCH——紅細(xì)胞平均血紅蛋白量，單位為匹克（pg)；B——每升血液中紅細(xì)胞數(shù)，單位為1012每升（1012/5.3.1.4質(zhì)控物5.3.1.5參考區(qū)間28天～18歲兒童參考區(qū)間按WS/T779執(zhí)行，成年人參考區(qū)間按WS/T45.3.2.1標(biāo)本處理5.3.2.1.1檢測樣本不受飲食和采血時間的影響。5.3.2.1.2按照適用于臨床實(shí)驗(yàn)室檢測的5.3.2.2檢測方法學(xué)5.3.2.3檢測系統(tǒng)5.3.2.3.1應(yīng)選用有NMPA認(rèn)證的分5.3.2.3.3實(shí)驗(yàn)室啟用/更換一個新的分析系統(tǒng)檢測臨床樣5.3.2.3.4試劑的性能驗(yàn)證方法宜參考CNAS-GL037進(jìn)行，5.3.2.4質(zhì)控物5.3.2.4.1質(zhì)控物應(yīng)有良好的長期穩(wěn)定性，宜選擇商品制品，或自制。5.3.2.4.3實(shí)驗(yàn)室自制新鮮冰凍全血質(zhì)控物，原料為足量的混合新鮮全血，采用凍存管分裝，并對均45.3.2.5測定5.3.2.5.1所用試劑、耗材應(yīng)按說明書要5.3.2.5.2實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定標(biāo)準(zhǔn)操作程序，包含但不限于以下內(nèi)容：項(xiàng)目名稱、檢測原理、樣本采集及5.3.2.6報告（％）5.3.2.6.4異常血紅蛋白，宜以血紅蛋白組別歸屬進(jìn)行報告（如H5.3.2.6.5存在圖譜異?；驒z測結(jié)果異常，應(yīng)提供結(jié)果描述和檢測建議，以利于臨床醫(yī)生判斷結(jié)果。5.3.2.7參考區(qū)間5.3.2.7.2產(chǎn)前樣本臍帶血，尚無參考區(qū)間。5.3.2.7.4血紅蛋白組分在小于2歲以內(nèi)的年5.3.2.7.5宜根據(jù)檢測方法學(xué)設(shè)定不同年齡參考區(qū)間。12%≤HbA≤40%60%≤HbF≤90%0%≤HbA2≤1.0%83%≤HbA≤95%0%≤HbF≤13%0.8%≤HbA2≤3.0%91.5%≤HbA≤97.9%0%≤HbF≤5%2.4%≤HbA2≤——MCV＜82fl；——MCH＜27pg；——HbA2＜2.4%；——HbF＞5%；——MCV、MCH低于其年齡段參考范圍56.1.1.2地中海貧血基因診斷（產(chǎn)前標(biāo)本）臨床基因檢測實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備產(chǎn)前診斷資質(zhì)。6.1.1.3地中海貧血基因（罕見型）診斷6.1.2.1實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員應(yīng)具有檢驗(yàn)資格證，且應(yīng)經(jīng)過國家級或省級臨床檢驗(yàn)中心培訓(xùn)并取得《臨床6.1.2.2實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員應(yīng)具有檢驗(yàn)資格證，且應(yīng)經(jīng)過國家級或省級臨床檢驗(yàn)中心培訓(xùn)并取得《臨床6.1.2.3地中海貧血基因診斷（靜脈血）結(jié)果6.1.2.4地中海貧血基因診斷（產(chǎn)前標(biāo)本）結(jié)果報告審核人員應(yīng)具備副高職稱及以上的職稱。6.1.2.5地中海貧血篩查、基因診斷人員應(yīng)每——地中海貧血篩查陽性；——育齡夫婦雙方，陽性一方為缺失型α0-地中海貧血（--/，如：--SEA/、--THAI/、--FIL/等）——育齡夫婦雙方，陽性一方為α+-缺失型及α-非缺失型時，當(dāng)配偶一方篩查為陰性結(jié)果（包括），——育齡夫婦雙方，其中一方為β-地中海貧血基因攜帶者，配偶一方進(jìn)行血紅蛋白組分分析，當(dāng)檢測結(jié)果陽性時，進(jìn)行地中海貧血基因檢測；當(dāng)配偶一方血紅蛋白電泳篩查提示存在異常血——臍血血紅蛋白篩查陽性時；6——臨床適應(yīng)癥。檢測應(yīng)填寫申請單，申請單參見附錄E，宜包括但不限于以下內(nèi)容：申請單抬頭、受檢者姓名、年6.2.1.4.1按照適用于臨床實(shí)驗(yàn)室檢測的常規(guī)方法采集6.2.1.4.2檢測樣本不受飲食和采血時間6.2.1.4.5樣本如未能及時檢測，可——樣本在常溫條件下短期保存7天——凝膠成像分析儀；——雜交儀；——核酸濃度測定儀；應(yīng)選擇NMPA批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室的地貧基因檢測試a)樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室唯一編號；7b)手工方法提取核酸的，按照試劑盒提取說明書進(jìn)行；c)使用核酸提取儀的，按照儀器操作說明書進(jìn)行；d)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，按照實(shí)驗(yàn)室SOP文件進(jìn)行清理b)按照試劑盒說明書分裝、配制反應(yīng)液（如有需要）；b)可疑結(jié)果，宜使用另一種檢測方法a)檢驗(yàn)報告單應(yīng)體現(xiàn)檢測方法、檢測范圍及標(biāo)本類型。b)檢驗(yàn)報告單應(yīng)體現(xiàn)檢測結(jié)果并書寫基因型，不應(yīng)下臨床診斷性報告。c)實(shí)驗(yàn)室結(jié)果有異常發(fā)現(xiàn)，應(yīng)進(jìn)行備注描d)可疑結(jié)果，應(yīng)進(jìn)行罕見型地中海貧血基因檢測的，應(yīng)由行業(yè)主管部門批準(zhǔn)的罕見型地中海貧e)報告單簽發(fā)應(yīng)雙人簽字，其中一名為中級及以上——有生育非輸血依賴型地中海貧血患兒風(fēng)險的夫婦，進(jìn)行遺傳咨詢，宜知情選擇地中海貧血基8——基本信息：申請單抬頭、受檢者姓名、年齡、民族、檢測項(xiàng)目、聯(lián)系電話、申請科室、申請——檢測孕婦血細(xì)胞分析、凝血功能檢測、RH血型、乙肝、艾滋病、丙肝、梅毒結(jié)果6.2.2.7.1侵入性產(chǎn)前診斷操作采集的絨毛、羊水、臍血，樣本采集后及時送檢。如未能及時檢測宜6.2.2.7.2肉眼可見明顯血色的羊水樣本，應(yīng)9b)按照說明書進(jìn)行檢測和結(jié)果判斷；見6.2.1.8.3，并增加產(chǎn)前樣本檢測先判斷是否存在母源污染，當(dāng)母源污染影響結(jié)果判斷時，應(yīng)重——多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)（MLPA——二代測序技術(shù)（NGSa)按所用試劑盒說明書在儀器上設(shè)置擴(kuò)增參數(shù)，并保存，供長期使用；b)按照試劑盒說明書分裝、配制反應(yīng)液；6.2.3.5.1參照所使用檢測方法的判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)6.2.3.5.2基因檢測結(jié)果應(yīng)結(jié)合家系、篩查結(jié)果、臨床信息進(jìn)行綜合6.2.3.6.2檢驗(yàn)報告單應(yīng)體現(xiàn)檢測結(jié)果并書寫基因型，不應(yīng)下臨床診斷性6.2.3.6.4本檢測為實(shí)驗(yàn)室自配試劑，僅供臨床醫(yī)生參考，不應(yīng)作為排除性檢測結(jié)果，宜結(jié)合臨床癥7.1.1.2.1在每批進(jìn)行樣本測試前，應(yīng)先進(jìn)行質(zhì)控物分析，以確定分析系統(tǒng)狀態(tài)良好，測定結(jié)果可靠7.1.1.2.2當(dāng)出現(xiàn)失控現(xiàn)象，應(yīng)進(jìn)行失控分析，并采取相應(yīng)的措施。質(zhì)量控制限的設(shè)定及失控判斷規(guī)7.1.2.1.2質(zhì)控品應(yīng)包括提取、擴(kuò)增、產(chǎn)物分析的全過程，實(shí)驗(yàn)結(jié)果陰性質(zhì)控品應(yīng)為陰性，陽性質(zhì)控7.1.2.1.3整個實(shí)驗(yàn)流程應(yīng)兩名實(shí)驗(yàn)7.1.2.2.1宜通過實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性、不同7.2.1項(xiàng)目每年應(yīng)至少參加省級臨床檢驗(yàn)中心或國家級臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)量地貧篩查人群地貧篩查人群地貧初篩陰性地貧初篩陽性常規(guī)地貧基因分析未見異?？梢山Y(jié)果陽性結(jié)果罕見地貧基因分析未見異常陽性結(jié)果家系驗(yàn)證(未知突變)遺傳咨詢、診治DB45/T2829—2023A.2地中海貧血新生兒篩查流程篩查陰性篩查陽性未見異?？梢山Y(jié)果陽性結(jié)果圖A.2新生兒篩查流程圖育齡夫婦育齡夫婦雙方地貧初篩陰性雙方地貧初篩陽性一方地貧初篩陽性夫婦常規(guī)地貧基因分析未見異常可疑結(jié)果罕見地貧基因分析陽性結(jié)果夫婦地貧基因雙陽(生育高風(fēng)險地貧患兒)產(chǎn)前診斷家系驗(yàn)證(未知突變)血細(xì)胞分析和血紅蛋白組分分析自制質(zhì)控品123456789XX醫(yī)院XX科檢驗(yàn)報告單%%%%%%%%%%%%%采樣時間：XX接收時間：XX您因，擬定進(jìn)行地中海貧血（簡稱地貧）基因診斷，需采集靜床表型多不貧血，但如雙親為同型地貧攜帶者，有生育重型或中間型地貧后代的風(fēng)險。(后不良。(3)重型α-地中海貧血胎兒主要表現(xiàn)為胎兒水腫、巨大胎盤、胎死宮內(nèi)及出生后無法存活，且母體易出現(xiàn)高血壓、子癇前期等并發(fā)癥。(4)重型和中間型β-地中海貧血孕期胎兒無明顯異常表現(xiàn)，出生到一定年紀(jì)后發(fā)病。目前公認(rèn)唯一治愈的方法是造血干細(xì)胞移植，但面臨無合適供體、排異反應(yīng)、移植失敗等風(fēng)險，且治療費(fèi)用昂貴。大部分患者只能依賴性輸血和去鐵治療，長期的治療費(fèi)用昂貴。【拒絕擬定醫(yī)療方案的風(fēng)險】可能不會發(fā)生以下介紹的檢查風(fēng)險，但可能生育4)其他無法預(yù)測的外部因素可能導(dǎo)致檢測無法正常進(jìn)行，將終止該項(xiàng)檢5)受檢者為兒童時，需要父母雙方提供篩查和基因診斷結(jié)果，否則不能保6)檢測結(jié)果為新發(fā)突變時，需要父母雙方采樣進(jìn)行家系驗(yàn)證，否則無法解釋新我的醫(yī)生已經(jīng)告知我將要進(jìn)行的檢測項(xiàng)目的內(nèi)涵、此次檢查可能存在的局限性和風(fēng)險、以及相關(guān)檢查我授權(quán)醫(yī)生對檢測涉及的樣本進(jìn)行處置，包括進(jìn)一步的送檢多種檢測方法、科學(xué)研究等，以幫助醫(yī)師我已經(jīng)告知受檢者（授權(quán)親屬或法定監(jiān)護(hù)人）將要進(jìn)行的檢查方式、此次檢查中及檢查后可能發(fā)生的并發(fā)癥和風(fēng)險、可能存在的其他檢查方法并且解答了受檢方關(guān)于此次檢查的三聯(lián)單編號NO檢驗(yàn)費(fèi)用：元補(bǔ)助金額：元填表說明：如果是男性，就在男方信息欄填寫；若為女性，在女方信息欄填寫；若為夫妻，則分別填寫；若為小孩，則在其他說明行填寫其父母的基因診斷結(jié)果，若為補(bǔ)助對象，按照指示地中海貧血基因產(chǎn)前診斷知情同意書異常臨床指征，出生發(fā)病后，則需要終身依賴輸血和1)樣本如果存在母源污染，可能對檢測結(jié)果判斷造成影響。因此，標(biāo)本3)如果雙盲平行試驗(yàn)結(jié)果不一致，應(yīng)重新采樣，否則將終止該項(xiàng)檢5)其他無法預(yù)測的外部因素可能導(dǎo)致檢測無法正常進(jìn)行，將終止該項(xiàng)檢醫(yī)療技術(shù)規(guī)范進(jìn)行操作，盡最大努力減少上述風(fēng)險我理解根據(jù)我個人的妊娠情況，除上述風(fēng)險以外，還可能出現(xiàn)其他特殊并發(fā)癥檢查方法并且解答了孕婦關(guān)于此次檢查的相聯(lián)系電話：聯(lián)系地址：