中科院研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)新的不可逆EZH2抑制劑靶向CDK4轉(zhuǎn)錄惡性腫瘤

STTT（IF>38）：中科院研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)新的不可逆EZH2抑制劑，靶向CDK4轉(zhuǎn)錄惡性腫瘤研究背景EZH2（Enhancerofzestehomolog2）是PRC2復(fù)合物的一個(gè)酶亞單位，通過(guò)其催化和非催化功能在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中起著重要作用。PRC2（Polycombrepressivecomplex2）通過(guò)染色質(zhì)重塑對(duì)基因進(jìn)行表觀遺傳沉默。PRC2復(fù)合物及EZH2的結(jié)構(gòu)（源自參考文獻(xiàn)）EZH2依賴于甲基供體S-腺苷-L-蛋氨酸（SAM），發(fā)揮甲基轉(zhuǎn)移酶活性，包括組蛋白H3（H3K27）的二甲基化和三甲基化。H3K27me3是一種與細(xì)胞分化和增殖有關(guān)的表觀遺傳抑制標(biāo)志物。EZH2功能增益突變和過(guò)量表達(dá)導(dǎo)致H3K27me3水平異常，導(dǎo)致腫瘤發(fā)生或轉(zhuǎn)移。除了PRC2依賴性作用外，許多研究還發(fā)現(xiàn)EZH2作為轉(zhuǎn)錄因子或共同激活劑發(fā)揮作用。研究發(fā)現(xiàn)超過(guò)20%的彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL）和27%的濾泡性淋巴瘤（FL）患者存在EZH2的功能增益突變。這些突變被認(rèn)為是淋巴瘤發(fā)病的早期克隆事件，維持疾病發(fā)展。除突變外，EZH2的過(guò)表達(dá)也在各種實(shí)體瘤中被觀察到，如膀胱癌、胃癌、前列腺癌、黑色素瘤和乳腺癌等。EZH2的異常表達(dá)與乳腺癌的疾病進(jìn)展有關(guān)，導(dǎo)致前列腺癌及乳腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)更高。ZEH2相關(guān)癌癥（源自參考文獻(xiàn)）EZH2的過(guò)表達(dá)或功能增益突變與三陰性乳腺癌（TNBC）和彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL）的腫瘤細(xì)胞增殖顯著相關(guān)，是一個(gè)潛在的治療靶點(diǎn)。目前開(kāi)發(fā)的大多數(shù)EZH2抑制劑主要針對(duì)EZH2的酶活性，并表現(xiàn)出抗腫瘤活性。但是有些癌癥對(duì)酶抑制劑有抗藥性，因?yàn)镋ZH2還通過(guò)調(diào)節(jié)非組蛋白發(fā)揮非催化或轉(zhuǎn)錄活性，因此，除了酶抑制劑，協(xié)同降解EZH2可能更有效。研究結(jié)果01：IHMT-337是一種高選擇性的EZH2抑制劑為了獲得高選擇性不可逆的EZH2抑制劑，研究團(tuán)隊(duì)合理地設(shè)計(jì)和合成了200多個(gè)不可逆的化合物，包括針對(duì)EZH2催化區(qū)并與蛋白質(zhì)形成共價(jià)鍵的IHMT-337。結(jié)果顯示IHMT-337抑制EZH2介導(dǎo)的E-cadherin轉(zhuǎn)錄，抑制EZH2激活相關(guān)細(xì)胞的增殖，并且通過(guò)劑量依賴的方式影響細(xì)胞的H3K27me3水平。結(jié)果發(fā)現(xiàn)IHMT-337對(duì)EZH2具有高選擇性，特異性地抑制H3K27的甲基化，并通過(guò)Cys663殘基共價(jià)結(jié)合。02：IHMT-337通過(guò)CHIP介導(dǎo)的泛素化途徑降解EZH2

研究團(tuán)隊(duì)分析了IHMT-337對(duì)EZH2蛋白穩(wěn)定性的影響。在不同細(xì)胞系中IHMT-337誘導(dǎo)EZH2降解，在轉(zhuǎn)錄水平上無(wú)影響。并證實(shí)IHMT-337導(dǎo)致EZH2蛋白錯(cuò)誤折疊或聚集，通過(guò)招募Hsp70相互作用蛋白CHIPE3介導(dǎo)的泛素化途徑觸發(fā)EZH2降解。03：TNBC中EZH2介導(dǎo)的CDK4轉(zhuǎn)錄活性

在小鼠腫瘤模型中，敲除BATF的CAR-T耗竭細(xì)胞具有更好的腫瘤浸潤(rùn)和消除效果。在注射35天后，5個(gè)腫瘤中有4個(gè)完全消除，而注射未敲除BATF的CAEZH2在三陰性乳腺癌（TNBC）中高表達(dá)。為了研究EZH2在TNBC中的作用機(jī)制，研究團(tuán)隊(duì)通過(guò)基因敲除、蛋白質(zhì)組學(xué)、免疫生化等一系列實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)EZH2介導(dǎo)的CDK4的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)是獨(dú)立于PRC2復(fù)合物的，是一種新的轉(zhuǎn)錄活性。IHMT-337通過(guò)抑制EZH2阻斷TNBC細(xì)胞的細(xì)胞周期。04：IHMT-337在臨床前模型中抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)為了評(píng)估IHMT-337的體內(nèi)抗腫瘤活性，研究團(tuán)隊(duì)用不同劑量的IHMT-337和瘤內(nèi)注射處理接種小鼠模型22天。IHMT-337對(duì)腫瘤抑制具有劑量依賴性，腫瘤生長(zhǎng)抑制（TGI）率為73.4%，并且沒(méi)有觀察到明顯的體重下降。同樣的IHMT-337抑制原發(fā)性TNBC患者衍生類器官的生長(zhǎng)。研究結(jié)論綜上所述，研究團(tuán)隊(duì)通過(guò)原理設(shè)計(jì)、化學(xué)篩選和基因研究，發(fā)現(xiàn)了一種新型的EZH2共價(jià)抑制劑，可選擇性阻斷EZH2下游功能，并通過(guò)CHIP介導(dǎo)的泛素化途徑降解EZH2蛋白。進(jìn)一步功能研究顯示，EZH2在CDK4的轉(zhuǎn)錄調(diào)控中具有非催化活性的新作用。總之，研究團(tuán)隊(duì)的發(fā)現(xiàn)為T(mén)NBC和其他EZH2轉(zhuǎn)錄活性依賴性癌癥提供了一種新的治療策略。義翹神州實(shí)體瘤相關(guān)靶點(diǎn)蛋白義翹神州已開(kāi)發(fā)出多種實(shí)體瘤研究靶點(diǎn)蛋白，具有高純度、高活性、高批間穩(wěn)定性、低內(nèi)毒素等特點(diǎn)，助力支持腫瘤研究和藥物靶點(diǎn)開(kāi)發(fā)。HumanEGFRProtein,

Cat:10001-H27H-B結(jié)合活性ImmobilizedHumanEGF(Cat#:

10605-H01H)canbindHumanEGFRHumanBCMAProtein,

Cat:10620-H08H結(jié)合活性ImmobilizedHumanBAFF(Cat#:

10056-H01H)canbindHumanBCMA【參考文獻(xiàn)】EZH2:biology,disease,andstructure-baseddrugdiscoveryEZH2asapotentialtargetincancertherapy