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2014-02-28發(fā)布2014-04-30實(shí)施I本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由吉林省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位:吉林省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)院、國(guó)家農(nóng)業(yè)深加工產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心、中華人民共和國(guó)吉林出入境檢驗(yàn)檢疫局。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:史艷宇、劉金華、王偉、劉曉暉、趙立群、侯宇、柴竹林、張濤。11范圍件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T27403實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品分子生物學(xué)檢測(cè)3術(shù)語(yǔ)和定義25.3dNTP:dATP(deoxyadenosinetriphosphate,脫氧腺苷三磷酸)、dGTP(deoxycytidinetriphosphate,脫氧鳥苷三磷酸)、dCTP(deoxycytidinetriphosphate,脫氧胞苷三磷酸)、dTTP(deoxythymidinetriphosphate,脫氧胸苷三磷酸)。5.510×PCR緩沖液:含200mmol/LTris-HCl(pH8.4),200mmol/L氯化鉀(KC1),15mmol/L氯5.6緩沖蛋白胨水(BPW):按GB/T13096設(shè)備和材料6.1實(shí)時(shí)熒光PCR儀。6.8天平:感量0.1g。6.12實(shí)時(shí)熒光PCR反應(yīng)管。3c——DNA濃度,單位為納克每微升(ng/μL);94℃預(yù)變性2min,94℃變性20s,64℃退火延伸1min,同時(shí)收集FAM熒光,共進(jìn)行40個(gè)循環(huán)。——Ct值≥40.0,可判定樣品實(shí)時(shí)熒光PCR結(jié)果為陰性?!狢t值≤35.0,可判定該樣品實(shí)時(shí)熒光PCR結(jié)果為陽(yáng)性,按GB/T13091進(jìn)行確證?!?5.0<Ct值<40.0,此時(shí)應(yīng)適當(dāng)增加DNA模板量重做實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)。重做結(jié)果Ct值≥411.1檢驗(yàn)過程中的廢棄
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