飼料中免疫球蛋白IgG的測定 高效液相色譜法 編制說明

《飼料中免疫球蛋白IgG的測定—高效液相色譜法》（公開征求意見稿）1 2 2 5 7 7 9 9 12 錯誤！未定義書簽。8 18 12 2一、工作簡況疫球蛋白IgG的測定——高效液相色譜法》標(biāo)準(zhǔn)修為國糧武漢科學(xué)研究設(shè)計院有限公司和山東新希望六和集團有限公司。本免疫球蛋白（immunoglobulin，IgG）是一種7S、分子質(zhì)量160000u的蛋白質(zhì)，是一類具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白，它普遍存在于哺乳動物的血液、組織液及外分泌液中，在動物體的營養(yǎng)代謝和生疫反應(yīng)，從而發(fā)揮保護作用。當(dāng)動物再次遇到相同的病原微生物侵襲時，免疫球蛋白能夠快速產(chǎn)生，加速病原微生物的清除，從而提供更有效的免這使得免疫球蛋白能夠有效地抵抗病原微生物的入侵和侵襲，保護動物免免疫球蛋白的應(yīng)用范圍特別廣泛，可以提高畜產(chǎn)品的質(zhì)量，增加其蛋白質(zhì)含量和營養(yǎng)價值；可用于預(yù)防和治療多種動物疾病，增強動物對疾病的免疫力，提高動物的抵抗能力；還可以減少動物對抗生素的依賴，有助于減少抗生素在畜牧業(yè)生產(chǎn)中的使用，降低抗生素殘留對人體健康和環(huán)境3的影響，促進畜牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展；同時可以利用免疫球蛋白的特異性識飼料中，最主要的生物學(xué)特征就是與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合，還有激活補體，促吞噬作用等功能和特征。免疫球蛋白在動物體內(nèi)具有重要的免疫和生理調(diào)節(jié)作用，是動物體內(nèi)免疫系統(tǒng)最為關(guān)鍵的組成物質(zhì)之一。對于增強燥血漿蛋白粉免疫球蛋白（IgG）變化較大，從10～23%不等；雞蛋粉免團有限公司接到國家標(biāo)準(zhǔn)修訂任務(wù)后，為確保項目的順利實施，成立標(biāo)準(zhǔn)起草小組，同時對標(biāo)準(zhǔn)起草工作進行分工，明確各自任務(wù)和職責(zé)，制定工4和文獻資料，確立了標(biāo)準(zhǔn)修訂的指導(dǎo)思想，形成了報告和標(biāo)準(zhǔn)草案，并修會，會上標(biāo)準(zhǔn)編制組介紹了對國內(nèi)外相關(guān)分析方法的研究，標(biāo)準(zhǔn)修訂的技術(shù)路線和技術(shù)難點，以及擬開展的主要工作等內(nèi)容。與會專家認(rèn)為標(biāo)準(zhǔn)安排合理并對具體技術(shù)路線提出建議，標(biāo)準(zhǔn)編制組經(jīng)過充分交流，完善了標(biāo)術(shù)資料的基礎(chǔ)上，在參照國際和國外先進標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，結(jié)合目前的實際5準(zhǔn)工作組進行了認(rèn)真研究分析，并得以解決，完善了方法的準(zhǔn)確性和可靠并有建議或意見的單位（專家）數(shù)份，沒有回函的單位（專家）。納條。根據(jù)專家意見對征求意見稿進行進一步修訂。標(biāo)準(zhǔn)編制小組開展二、標(biāo)準(zhǔn)編制原則和主要技術(shù)內(nèi)容確定的依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)》的規(guī)定和要求編寫標(biāo)準(zhǔn)全文。查閱了國內(nèi)外相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合現(xiàn)行標(biāo)6樣品檢測情況進行。主要修訂包括，適用范圍增加寵物飼料；明確流）；）；1No.1“本標(biāo)準(zhǔn)……”——GB/T21033－2007”23料4料5要求重新整理樣品制67無238無94Pi――標(biāo)準(zhǔn)工作液峰面積值；Pst——試樣峰面積值；w=A×Ps5無1血漿蛋白粉等）中免疫球蛋白IgG含量的測定。mm孔徑的分析篩充分混勻,裝入密閉容器中2血漿蛋白粉稱取試樣0.1g（精確至0.0001g）、濃縮乳清蛋白粉稱取試樣），正己烷的目的在于除去飼料樣品中的油脂。本文選取豬濃縮飼料和貓糧料分別加入1mL正己烷和不加正己烷，進行對比實驗測量免疫球蛋白IgG的含量，實驗發(fā)現(xiàn)加入正己烷的待測液較不加入正己烷的待測液更為澄清，123己烷，能使待測液更為澄清，有效的去除飼料中的油脂，且對免疫球蛋白），4為得到最高的檢測靈敏度，我們使用二極管陣列檢測處進行紫外波段掃描采集三維光譜圖（圖4），從圖4中可看出，IgG在280nm處有較大吸收，因此將紫外檢測a）色譜柱：PharmaciaHI-TrapPrmol/L甘氨酸鹽酸緩沖液，梯度洗脫條件50000000在上述確定的液相色譜條件下，分別取標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液和試樣溶液上機測定。以保留時間定性，以IgG標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，色譜峰面積（響應(yīng)值）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。IgG標(biāo)準(zhǔn)溶液的液相色譜圖參見濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（如圖6求回歸方程和相關(guān)系數(shù)（如表6678選取空白蝦飼料、乳豬配合飼料、觀賞魚飼料、貓糧、貓用風(fēng)味劑和123456料9將12種飼料平行測定6次，完成重復(fù)性試驗和不同方法測定結(jié)果的比較，結(jié)果見表8。由表8可知，12種飼料的相對標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）為1.53%~4.50%，處于較低的水平，表明方法的重復(fù)性較好?？紤]到實際檢測中兩樣品名稱IgG值（%或mg/kg）RSD(%)絕對偏差(%)123456平均值干燥血漿粉（%）29.3228.9829.5630.3628.3529.8729.412.386.83干燥血漿壓片（%）25.8425.1226.4526.3525.4225.1925.732.255.17濃縮乳清蛋白（%）4.564.965.014.674.985.134.894.5011.66加州鱸配合飼料（mg/kg）35.3535.6736.6834.3436.4834.6535.532.665.71觀賞魚飼料（mg/kg）64.3762.9763.7565.6563.2462.9463.824.25蝦料（mg/kg）43.1142.5444.6143.2442.4544.3743.392.104.98貓糧料（mg/kg）48.6746.6549.5647.8648.5649.5548.482.286.00貓用風(fēng)味劑（mg/kg）102.33101.1399.54100.34101.55100.64100.930.972.76狗糧料（mg/kg）57.2355.0256.3557.6358.3256.4456.832.035.81狗用風(fēng)味劑（mg/kg）83.6784.5682.6583.7885.5784.9684.203.47乳豬配合飼料（%）0.8210.8190.8020.8240.8140.8060.8142.70豬濃縮飼料（%）3.563.543.673.463.653.853.623.7410.77三、試驗驗證分析報告，技術(shù)經(jīng)濟論證，預(yù)期的經(jīng)濟效果1．試驗驗證分析報告2025年1月，標(biāo)準(zhǔn)編制小組委托xx三家單位完成本標(biāo)準(zhǔn)的復(fù)核驗證法》規(guī)定的方法測定飼料中免疫球蛋白IgG準(zhǔn)要求，能滿足配合飼料、濃縮飼料、寵物飼料和含IgG飼料原料（包括畜牧動物免疫球蛋白具有免疫功能、結(jié)構(gòu)多樣性、免疫記憶和選擇性吸收等獨特特點，并且具有廣泛的應(yīng)用價值。通過應(yīng)用畜牧動物免疫球蛋白，可以預(yù)防和治療畜牧動物疾病、提高畜產(chǎn)品質(zhì)量，促進畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展。在未來，隨著科技的進步和研究的深入，畜牧動物免疫球蛋白的應(yīng)四、與國際、國外同類標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)內(nèi)容的對比情況，或者與測試的國外樣品、樣機的有關(guān)數(shù)據(jù)對比情況比較項目本文件GB/T5009.194-2003(現(xiàn)行有效）HiTrap?ProteinGHPColumns（美國GE）Agilent凝膠過濾色譜法適用范圍配合飼料、濃縮飼料、寵物飼料和含IgG飼料原料（包括血漿蛋白粉保健食品血液制品血液制品方法二元梯度洗脫二元梯度洗脫二元梯度洗脫二元梯度洗脫色譜柱免疫親和柱IgG柱免疫親和柱IgG柱免疫親和柱IgG柱ZORBAXGF-250和GF-450凝膠過濾色譜柱特異性IgG二聚體和聚合物五、采標(biāo)情況，以及是否合規(guī)引用或采