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生化檢測過程中的異常值分析生化產(chǎn)品部:黎程2016年7月21日2021/6/271臨床生化檢測主要是利用物理學(xué)、生物化學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)和分子生物學(xué)的理論與技術(shù),探討疾病的發(fā)病機制,研究其病理過程中的特異性化學(xué)標志物或體內(nèi)特定成分的改變,進而對疾病的診斷、治療和預(yù)后形成參考依據(jù)。2021/6/272鑒于這種參考意義,結(jié)果的可靠性就尤為重要。而生化檢測過程中,異常值也是屢見不鮮的。為了分析這些異常值,我們把異常值的類型分為三類:2021/6/2731樣本本身的因素2測試本身的因素3表觀異常值這里的異常值指臨床判斷為健康人而生化某些指標卻超出正常值范圍。2021/6/274
樣本本身的因素12021/6/275樣本本身的因素性別:如CK:通常男子比女子肌肉發(fā)達,釋放至血清中的CK也就更多,參考:女24~170U/L,男0-190U/LGGT:雌激素可以抑制GGT的合成,因此女性GGT通常較低,參考:女≤32U/L,男≤47U/L我們的試劑參考范圍沒有對性別予以區(qū)分,但有些項目的結(jié)果是因性別而不同的,結(jié)果異常時需要考慮。2021/6/276樣本本身的因素年齡:如新生兒PA僅為成人的一半(150以內(nèi)),由于生理性黃疸,TBIL在100μmol/L以內(nèi),DBIL小于35μmol/L以內(nèi)應(yīng)視為正常。14歲以內(nèi)兒童CKMB常高于成人,45U/L以內(nèi)應(yīng)視為正常。TC、TG、LDL、ApoB通常較低。60以上老人則由于代謝廢物累積、組織器官老化等原因,ALT、AST、LDL、ApoB通常較高,5'NT常為青壯年的2倍。2021/6/277樣本本身的因素人種:我國人的ApoA1、HDL-C水平與歐美人相仿,而TC、LDL-C、ApoB則明顯低于歐美人。非洲黑人(文獻中的案例為利比里亞當?shù)厝耍㏕P、LDH顯著高于我國人,TBIL、UA、UREA、TC、TG顯著低于我國人。有關(guān)不同地域的生化檢測區(qū)別,文獻很少,但理論上各醫(yī)院都會形成針對科室服務(wù)人群的參考范圍,以后在調(diào)試中可以多加留意。2021/6/278樣本本身的因素飲食:飲酒特別是長期酗酒,可能引起一段時間的GGT、UREA、TBA、AST、ALT的顯著升高。高鹽飲食會加重肝、腎負擔(dān),引起ALT、AST活性升高,HDL下降,血液濃度上升,其余各項指標也可能有一定程度上升。藥物干擾則根據(jù)其機理不同而不同,如膽堿類藥物、利尿劑等可引起ALT、AST升高。2021/6/2792021/6/27102021/6/2711樣本本身的因素體型:主要影響TG項目,通常體型魁梧的人TG偏高,HDL、性激素偏低。體型瘦弱的,通常PA較低,但不能排除可能的肝病影響。其余因素,如運動、抽血時的臥位、立位等也會有一定影響。2021/6/27122021/6/2713樣本本身的因素脂血:TG≥3.0mmol/L時,血清出現(xiàn)肉眼可見的渾濁,我們稱之為脂血。 脂血對結(jié)果的影響主要由于乳糜微粒引起,使入射光發(fā)生反射和散射,嚴重影響結(jié)果的準確性。如UREA、ALT、AST吸光度超限無結(jié)果,RBP反應(yīng)曲線改變,出現(xiàn)負值,UA、TB、DB增高,CRE、TP、ALP、Ca偏低(pH>10時,TG皂化,使反應(yīng)液變清)2021/6/2714樣本本身的因素脂血:通常速率法和雙試劑終點法有助于削弱這種干擾,但乳糜嚴重時可能效果甚微,需要進行稀釋、高速離心、乙醚處理。2021/6/2715樣本本身的因素溶血:除在540-550nm處有光吸收,形成干擾外,由于胞內(nèi)物質(zhì)的釋放還可以引起一些物質(zhì)的濃度變化或副反應(yīng)。如紅細胞內(nèi)AST活性約為血清活性的40倍,ALT約7倍,LDH約180倍,因此溶血樣本測定ALT、LDH、AST結(jié)果均上升,同類原理的項目還有CK、CKMB、HBDH。2021/6/2716另外,血紅素中Fe2+、胞內(nèi)VC、谷胱甘肽等能競爭反應(yīng)體系中的氧化劑如H2O2,而Trinder反應(yīng)的終產(chǎn)物也是546波長有最大吸收的紅色醌亞胺物質(zhì),因此這類試劑干擾情況視溶血程度及方法學(xué)而定,如GLU-OX、TC(↑)、TG(↑)、UA(↓)。樣本本身的因素2021/6/2717樣本本身的因素黃疸:膽紅素在400-540nm處有吸收,遇到氧化劑可被氧化為膽綠素、膽褐素。如GLU-OX、TG、UA、TC等,由于膽紅素競爭H2O2,結(jié)果常偏低。處理方式可以考慮加膽紅素氧化酶、稀釋。2021/6/27182
測試本身的因素2021/6/2719測試本身的因素重復(fù)性:部分項目,由于本身的靈敏度、儀器吸樣、光源穩(wěn)定性方面的原因,引起測試重復(fù)性不好,比如ALT、AST、UREA、LAP、DD等,我們通??紤]重測。2021/6/2720測試本身的因素曲線異常:原因可能較復(fù)雜,如吸樣(異物、氣泡)、攪拌(氣泡,攜帶物)、光源不穩(wěn)定、水質(zhì)、清洗系統(tǒng)、試劑等。。個別異常我們通常采取重測的方式,但大片出現(xiàn)時,則應(yīng)檢查儀器各部位,把清洗、杯空白、光增益處理一次,再觀察結(jié)果,同時也考慮更換試劑進行測定。2021/6/2721測試本身的因素定標、質(zhì)控:每個項目,通過校準品定標,定標因子一般都穩(wěn)定在一段區(qū)間內(nèi),質(zhì)控也應(yīng)在控,這是測定臨床的基礎(chǔ)。質(zhì)控若有失控,應(yīng)先重測質(zhì)控,仍然失控時進行定標,比對前后空白和因子看是否有改善。2021/6/2722原始曲線為黑色線,方程式為:a:在校準品濃度和吸光度不變的情況下,空白反應(yīng)度上升。b:空白反應(yīng)度度和校準品反應(yīng)度均下降或校準品濃度上升。ab2021/6/2723c:在校準品濃度和吸光度不變的情況下,空白反應(yīng)度下降。d:空白反應(yīng)度度不變,校準品反應(yīng)度上升或濃度下降。cd2021/6/2724a:QC1下降,QC2上升。b:QC1、QC2等差值上升。c:QC1上升,QC2下降。d:QC1、QC2等比值下降。2021/6/2725
表觀異常值32021/6/2726表觀異常值臨界值:大部分項目,在臨界值上,一般都會判斷為正常,主要是考慮到機體本身的差異性和不確定性,且并未超過危機值。即使是血糖這種國家規(guī)定了參考范圍的項目,也不能在一次體檢超過6.1時既判斷糖尿病。
2021/6/2727表觀異常值不明臨床判
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