DB12T 1012-2020 食用菌液體菌種生產技術規(guī)范

DB12Techniquestandardforliquidspawnproductionofediblemushroom天津市市場監(jiān)督管理委員會發(fā)布I本標準按照GB/T1.1-2009《標準化工作導則第1部分：標準的結構和編寫》給出的規(guī)本標準主要起草人：羅瑩、周永斌、錢磊、劉連強、王文治、李鳳美、訾惠君、李淑1食用菌液體菌種生產技術規(guī)范NY5099無公害食品食用菌栽培基質安全技術要求NY/T528食用菌菌種生產技術規(guī)程24.1生產場地4.1.1基本要求4.1.2環(huán)境衛(wèi)生要求4.2生產設備設施4.2.1廠房設置和布局應符合NY/T528食用菌菌種生產技術規(guī)程要求。消毒和干手設施；車間設封閉式廢物桶，安裝排4.2.4主要儀器設備應配備水處理設備、液體菌種培養(yǎng)器、空氣壓縮機、空氣過濾器、液體菌種接種4.2.5主要生產用具應配備玻璃三角瓶、接種器、試管、量杯量瓶、玻璃漏斗、定量定性濾紙、精密4.3培養(yǎng)基質原材料應符合NY5099無公害食品食用菌栽培基質4.4生產品種4.4.1選用高產、優(yōu)質、抗逆性強、商品性好的食用菌品種，使用經省級以上農作物品種審定委員會登記的品種，并且從具有相應技術資質的供種單位引4.4.2菌種生產過程應符合NY/T528食用菌菌5.1工藝流程3↓原料→培養(yǎng)基配制→空消→實消→冷卻→種子罐→發(fā)↑5.2制備母種5.2.1容器使用18mm×180mm或20mm×200mm玻璃試管,試管應保持清潔5.2.2培養(yǎng)基根據不同微生物的營養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基，常用的配方參見附5.2.3滅菌5.2.4接種在超凈工作臺上嚴格按無菌操作接種。接種完成后，在試管上注明菌種名稱、接種時間。5.2.5培養(yǎng)根據食用菌菌種的生長要求，給予其適宜的培養(yǎng)溫度22℃~28℃,保持空氣相對濕度在65%～75%，菌種應留樣備查，留樣的數量應以每個批次母種3支～5支。草菇在13℃~16℃貯存，其他種類于4℃~6℃下貯存，貯存至該批菌種出第一潮菇。5.3制備搖瓶液體種5.3.1容器5.3.3培養(yǎng)基5.3.4滅菌5.3.5接種45.3.6培養(yǎng)溫度22℃~28℃,保持空氣相對濕度在65%～75%，避光培養(yǎng)。頻率隨具體品種而定。5.4發(fā)酵罐檢查與清洗5.4.2清洗對罐體內、外和全部閥門用流水進行沖洗，達到無死角、內5.5煮罐和空消棒的培養(yǎng)器加水至容積的80%加熱至121℃,滅菌40min。用外源蒸汽滅菌的培養(yǎng)器，蒸汽壓力達到0.11Mpa～0.12Mpa、溫度121℃~124℃、滅菌40min。5.6液體菌種培養(yǎng)基配方泡劑。用水應符合GB5749生活飲用水衛(wèi)生標準。常用5.7投料與定容5.8培養(yǎng)器實消和培養(yǎng)基滅菌培養(yǎng)器內蒸汽壓力達到0.11Mpa～0.12Mpa，培養(yǎng)基溫度達到121℃~124℃、保持時間40min。5.9冷卻降溫滅菌結束通過冷卻系統(tǒng)，使培養(yǎng)基降溫至24℃~28℃。保持壓力平穩(wěn)，防止罐壓回零。5.10接種菌種罐接種處設置百級層流罩，用帶有手柄的內徑略大于接種口的鐵絲圈纏繞紗布，蘸上95%的酒5.11液體菌種培養(yǎng)條件5.11.1通風量通過進氣閥和排氣閥將通風量調節(jié)至1：0.5V／V～1：1.2V／V(料液體積／空5.11.2罐壓55.11.3溫度常見品種培養(yǎng)溫度調節(jié)在24℃~28℃,少數品種根據特殊需求具體設定。5.11.4培養(yǎng)時間5.12.2無菌檢測5.12.4菌絲濕重5.12.5鏡檢5.13液體菌種放罐指標5.13.1經鏡檢和其它理化指標等方法檢驗質量合格即可放罐接種。菌液稍粘稠，有大量片狀或球狀菌絲體懸浮、分布均勻、6>8可見食用菌菌種液體培養(yǎng)中特有的菌絲形態(tài)，球狀和叢狀菌絲體大量分布，菌絲粗壯，菌絲內原生質分布均勻、染有食用菌菌絲生長，劃痕處無霉菌、酵母菌、細菌菌落生注明菌種種類、級別、品種、生產單位、接15℃~20℃室溫可保存1天～2天。7馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(簡稱PDA培養(yǎng)基)馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂(凝固劑)20g，