高中生物復(fù)習(xí)之單克隆抗體

二輪復(fù)習(xí)微專題單克隆抗體漿細(xì)胞抗體：能夠與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白。必3P37抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法抗原反復(fù)注射動(dòng)物從動(dòng)物的血清中分離抗體該法制備抗體的缺點(diǎn)：產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低。一種抗原表面有多種抗原決定簇，可以與多種抗體特異結(jié)合提示1：對(duì)B細(xì)胞或漿細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)可行嗎？提示2：我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無限增殖的？問題：如何獲得大量純度高的抗體？請(qǐng)嘗試設(shè)計(jì)一個(gè)方案。在體外培養(yǎng)條件下，B淋巴細(xì)胞不能無限增殖產(chǎn)生大量漿細(xì)胞，不能獲得單克隆抗體。瘤細(xì)胞抗體無限增殖調(diào)控基因

分離導(dǎo)入漿細(xì)胞合成方案一方案二漿細(xì)胞瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)抗體既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量增殖的細(xì)胞1970年，有兩位科學(xué)家做了一個(gè)人—鼠細(xì)胞融合的實(shí)驗(yàn)，以證明細(xì)胞膜的流動(dòng)性。那么,動(dòng)、植物細(xì)胞融合有什么區(qū)別?比較項(xiàng)目細(xì)胞融合的原理細(xì)胞融合前的處理誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法應(yīng)用植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞膜的流動(dòng)性纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合離心、電激、振動(dòng)、聚乙二醇克服遠(yuǎn)源雜交不親和，獲得雜種植株動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動(dòng)性用胰蛋白酶使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合除上述誘導(dǎo)方法外，還可以用滅活病毒獲得雜種細(xì)胞制備單克隆抗體單克隆抗體:由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。漿細(xì)胞瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)抗體①如何獲得漿細(xì)胞？②會(huì)有幾種融合方式？（只考慮兩兩融合）③是否所有的雜交瘤細(xì)胞都能產(chǎn)生專一性抗體？④如何大規(guī)模進(jìn)行培養(yǎng)得到大量的單克隆抗體？注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體①該過程中應(yīng)用到的技術(shù):②原理：細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖③給小鼠注射特定抗原目的:④誘導(dǎo)融合的方法:獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞物理方法：離心、電激、振動(dòng)化學(xué)方法：聚乙二醇生物方法：滅活的病毒⑤為了獲得足夠數(shù)量的能夠分泌所需抗體的細(xì)胞，對(duì)得到的雜交瘤細(xì)胞處理方式：⑥第一次篩選的目的：動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)篩選、克隆化培養(yǎng)、抗體檢測(cè)第一次如何篩選：從多種雜交細(xì)胞中篩選出雜交瘤細(xì)胞；用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選；第一次篩選的原理：在選擇培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長【拓展】HAT選擇性培養(yǎng)基H：次黃嘌呤；A：氨基喋呤；T：胸腺嘧啶核苷；（1）淋巴細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能夠被氨基蝶呤阻斷。但是一般不分裂增殖。（2）骨髓瘤細(xì)胞是特殊選擇的代謝缺陷型細(xì)胞，其DNA合成過程只具有D途徑，能被氨基蝶呤阻斷。（3）雜交瘤細(xì)胞則既可無限增殖，又具備兩條DNA合成途徑。B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞D途徑S途徑D途徑雜交瘤細(xì)胞S途徑D途徑DNA合成檢測(cè)方法依據(jù)的原理：抗原抗體特異性結(jié)合【拓展】專一抗體檢驗(yàn)陽性獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞⑦選擇抗體檢測(cè)呈

性的雜交瘤細(xì)胞，抗體檢測(cè)的原理：抗原和抗體能夠特異性結(jié)合陽⑨如何獲取單克隆抗體：⑧如何獲取大量所需雜交瘤細(xì)胞：在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)（接種于培養(yǎng)液中）或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖（1）體外培養(yǎng)___________________________（2）小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)_________________________從細(xì)胞培養(yǎng)液中獲取從小鼠腹水中獲?、怆s交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：?單克隆抗體的特點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體第二次篩選的目的：科學(xué)家將鼠源雜交瘤抗體進(jìn)行改造，生產(chǎn)出效果更好的人-鼠嵌合抗體、人源化抗體、全人源抗體（如下圖所示），生產(chǎn)這些抗體屬于

（生物工程）的范疇，根據(jù)預(yù)期的

，設(shè)計(jì)

，最終必須對(duì)

進(jìn)行操作。與鼠源雜交瘤抗體相比較，突出優(yōu)點(diǎn)是

。減少對(duì)人體的不良反應(yīng)（或過敏反應(yīng)等副作用）抗體功能蛋白質(zhì)工程抗體結(jié)構(gòu)基因人絨毛膜促性腺激素(

HCG)是由受孕婦女體內(nèi)胎盤產(chǎn)生的一種糖蛋白類激素，在孕婦的尿液中大量存在，而非妊娠孕婦尿液中幾乎不含有該激素。膠體金法早早孕檢測(cè)試紙采用雙抗體夾心法原理，以膠體金為指示標(biāo)記制作而成。①作為診斷試劑：識(shí)別作用，具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點(diǎn)。單克隆抗體的應(yīng)用單克隆抗體的應(yīng)用②治療疾病和運(yùn)載藥物生物導(dǎo)彈：單克隆抗體＋藥物優(yōu)點(diǎn)：位置準(zhǔn)確、療效高、副作用小

1、基因型為Aa與基因型為Bb的動(dòng)物體細(xì)胞混合，用滅活的仙臺(tái)病毒處理后，不可能獲得下列哪種基因型的細(xì)胞（不考慮基因突變）()A、AAaaB、AaBbC、AabbD、BBbbC2、下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述，錯(cuò)誤的是()A、電激可誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合或動(dòng)物細(xì)胞融合B、去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞均需酶處理C、小鼠骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)抗原免疫的小鼠的T淋巴細(xì)胞融合可制備單克隆抗體D、單克隆抗體是通過克隆雜交瘤細(xì)胞獲得的

C3、利用細(xì)胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是()A、用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體B、將等量漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞C、體外培養(yǎng)單個(gè)漿細(xì)胞可以獲得大量針對(duì)SARS病毒的單克隆抗體D、利用該單克隆抗體可與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者D4、單克隆抗體制備過程中使用的骨髓瘤細(xì)胞是一種缺陷型細(xì)胞，在含有次黃嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培養(yǎng)基（HAT）中無法生長；而小鼠脾細(xì)胞是正常細(xì)胞，在HAT培養(yǎng)基上可正常存活。用聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合后，經(jīng)過數(shù)代培養(yǎng)，最終可在HAT培養(yǎng)基上存活的是()A、骨髓瘤細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞B、脾細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞C、骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞D、脾細(xì)胞C5、右圖為細(xì)胞融合的簡略過程，請(qǐng)據(jù)圖回答：（1）若A、B是植物細(xì)胞，在細(xì)胞融合之前已用纖維素酶、果膠酶處理，除去了細(xì)胞壁；由A、B到細(xì)胞C的過程中，常用的化學(xué)方法是聚乙二醇。融合完成的標(biāo)志是再生出細(xì)胞壁。形成的D細(xì)胞還要應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)把D培養(yǎng)成植株。（2）若A、B是動(dòng)物細(xì)胞，一般取自幼齡動(dòng)物的組織或器官，然后用胰蛋白酶使其分散開來；由A、B到C的過程中，常用的不同于植物細(xì)胞融合的手段是滅活病毒，A、B融合為C的過程說明了細(xì)胞膜具有流動(dòng)性。（3）若該過程是制備單克隆抗體，在獲得A細(xì)胞之前，小鼠已經(jīng)被注射了抗原，注射后小鼠身體發(fā)生了相應(yīng)的免疫反應(yīng)。在A、B到C的過程中，所形成的C有3種（只考慮兩兩融合），用來培養(yǎng)的D細(xì)胞應(yīng)該是雜交瘤細(xì)胞，其特點(diǎn)是既能無限增殖又能產(chǎn)生單一抗體，獲得D細(xì)胞后，常用的培養(yǎng)